| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 2g |
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| 5g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Calcium chelator
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| 体外研究 (In Vitro) |
BAPTA(0.3-30 μM;1 小时)可抑制单分化 NH15-CA2 神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞中的钙信号传导,尽管它可用于阻止 [Ca2+] 诱导的细胞损伤 [3]。 BAPTA (0–10 mM) 以剂量依赖性且不依赖 Ca2+ 的方式抑制磷脂酶 C (PLC) 活性 [2]。
合理设计并合成了一个新的高亲和力Ca2+缓冲液和光学指示剂家族。母体化合物是1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(BAPTA),是众所周知的螯合剂EGTA[乙二醇双(β-氨基乙基醚)-N,N、N',N'-四醋酸]的近亲,其中氧和氮之间的亚甲基键被苯环取代。BAPTA及其衍生物对Ca2+的选择性高于EGTA对Mg2+的选择性(大于10(5)),但受pH变化的影响要小得多,吸收和释放Ca2+的速度更快。母体化合物对Ca2+的亲和力(在0.1 M KCl中的离解常数为1.1 x 10(-7)M)可能会因芳香环上的电子释放或撤回取代基而增强或减弱。通过用杂环氮原子取代醚氧,可以进一步改变Ca2+和Mg2+的亲和力。所述化合物是吸收紫外线区域的荧光Ca2+指示剂;在结合Ca2+时观察到的非常大的光谱偏移符合络合作用应阻碍氮孤对电子与芳香环共轭的预测。具有喹啉核的衍生物以其对Ca2+结合的荧光量子产率的高灵敏度而闻名,但对Mg2+的结合不敏感。到目前为止,初步的生物学测试表明,细胞内微量注射后很少或根本没有与膜结合或毒性作用。[1] 在通过贴片移液管装载的细胞中,用4 mM游离BAPTA缓冲不同浓度的Ca2+,光诱导的PLC活性对游离Ca2+表现出明显的钟形依赖性(最大值为“100 nM”,在<10nM或约1微M时抑制约10倍)。然而,当游离[Ca2+]保持恒定时,总BAPTA浓度变化的实验表明,在更高(>100 nM)的标称Ca2+浓度下对PLC的抑制与Ca2+无关,并且是由于BAPTA本身的抑制(IC50约为8 mM)。二溴BAPTA(DBB)在抑制PLC活性方面更有效(IC50约为1mM)。BAPTA和DBB似乎也能诱导对基础PLC活性的适度但不太严重的抑制。相比之下,EGTA在预加载Ca2+时未能抑制PLC活性,但与BAPTA一样,在没有Ca2+的情况下引入EGTA会抑制基础PLC活性和光诱导PLC活性。结果表明,BAPTA和DBB均抑制PLC活性,与它们作为Ca2+螯合剂的作用无关,而非生理低水平(<100 nM)的Ca2+抑制基础和光诱导的PLC活性。[2] 在单分化的NH15-CA2神经母细胞瘤x胶质瘤杂交细胞中研究了膜渗透性钙螯合剂1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四(乙酰氧基甲基)酯(BAPTA/AM)对离子霉素诱导的细胞钙超载的影响。为了监测[Ca2+]i,我们使用了荧光指示剂Fura-2。在离子霉素诱导的钙内流过程中,用3微摩尔的BAPTA/AM预孵育细胞可以减少[Ca2+]i失调的细胞数量。应用KCl引发的钙瞬变也受到螯合剂的严重影响。这些瞬态虽然在形状、振幅和持续时间上因细胞而异,但在单个细胞中具有良好的可重复性。用0.3-30microM BAPTA/AM孵育细胞1小时后,这些细胞瞬变的时间过程明显减慢。在1微M BAPTA/AM时,[Ca2+]i下降的时间常数增加了4.1+/-2.4倍(n=14),振幅降低到约50%。使用30μM BAPTA/AM,K(+)诱导的钙瞬变几乎完全被抑制。我们得出结论,细胞内负载的钙螯合剂可用于预防[Ca2+]i诱导的细胞损伤,但以钙信号传导紊乱为代价[3]。 |
| 细胞实验 |
全细胞记录。从最近羽化(<2小时)的成年果蝇中制备解离的小眼,并将其转移到倒置尼康Diaphot显微镜上的记录室底部。如前所述,为了避免串联电阻误差,Kir2.1电流被4 mM Cs+部分阻断,这会导致电压依赖性阻断,从而在-84 mV的电压下产生最大内向电流。通过调整保持电位以找到最大电流,将细胞精确地箝位在该电压下,并在整个记录过程中定期检查。对照浴由(以mM计):110 NaCl、10 KCl、4 CsCl、10 N-三-(羟甲基)-甲基-2-氨基-乙磺酸(TES)、4 MgCl2、1.5 CaCl2、25脯氨酸和5丙氨酸组成。对照细胞内溶液为(以mM计):140 K葡萄糖酸盐、10 TES、4 Mg ATP、2 MgCl2、1 NAD和0.4 Na GTP。各种缓冲液(K4BAPTA、K4DBB和K4EGTA)被制成20或40 mM的储备液,使用相同的碱性细胞内溶液,但葡萄糖酸钾被降低以保持渗透压。制备每种缓冲液的两种储备,一种还含有等摩尔(20或40 mM)CaCl2,另一种不含Ca2+。将这些与适当体积的对照细胞内溶液混合在一起,以产生本研究中使用的各种溶液。使用WinMaxC程序计算游离二价离子浓度,并将所有溶液的pH值调节至7.15。为了激活反向Na+/Ca2+交换,如前所述,使用宽尖(约10μm)吸管用LiCl等摩尔替代,迅速降低细胞外NaCl浓度,而细胞内溶液含有20 mM葡萄糖酸钠和120 mM葡萄糖酸钾(与上述对照相同)。使用电阻约为10-15MΩ的电极进行全电池电压钳记录,串联电阻值通常低于30MΩ,通常补偿至>80%。在进行测量之前,让细胞与贴片移液管溶液平衡至少3分钟。使用Axopatch 1-D或200放大器和pCLAMP 8或9软件在20±1°C下收集和分析数据。细胞被绿色发光二极管(LED)刺激,每个感光器的最大有效强度约为4×105光子s-1。使用线性光电二极管校准相对强度,并通过在WT苍蝇的低强度下计数量子凸块,将其转换为有效吸收光子的绝对强度。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
BAPTA 是一种多氨基羧酸,其中双(羧甲基)亚硝基与 1,1'-[乙烷-1,2-二基双(氧)]二苯的 C-2 和 C-2' 位相连。它是一种螯合剂。它既是多氨基羧酸,也是四羧酸。
螯合剂:能与溶液中的离子结合并将其移除的化学物质。许多螯合剂通过与金属形成配位络合物发挥作用。 总之,这些结果提供了令人信服的证据,表明 BAPTA 和 DBB 能抑制果蝇感光细胞中的 PLC 活性。虽然 BAPTA 的这种非特异性作用很少被考虑,但并非没有先例。例如,据报道,BAPTA 能抑制 InsP3 受体,IC50 值为 340 μM。据报道,BAPTA 还能与多种不同的钙结合蛋白相互作用,包括β-胰蛋白酶、小白蛋白和钙调蛋白,从而使蛋白激酶C失活,并作为电压门控和钙激活钾通道的阻断剂。在已测试的案例中,只有游离的 BAPTA(而非 BAPTA:Ca)在这些情况下似乎有效;本研究的特殊之处在于,PLC 活性的抑制与总 BAPTA 浓度明显相关。尽管 BAPTA 的 IC50 值(约为 8 mM)相当高,但使用浓度为 10 mM 或更高的 BAPTA 并不罕见,而 DBB 在 1 mM 时就已经具有显著的效力。显然,在解释此类实验结果时需要谨慎,尤其是在涉及 PLC 活性时。[2] |
| 分子式 |
C22H20N2NA4O10
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|---|---|
| 分子量 |
564.37
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| 精确质量 |
564.07
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| 元素分析 |
C, 46.82; H, 3.57; N, 4.96; Na, 16.29; O, 28.35
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| CAS号 |
126824-24-6
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| 相关CAS号 |
BAPTA;85233-19-8;BAPTA tetrapotassium;73630-08-7; BAPTA tetrasodium;126824-24-6; 480436-84-8 (cesium)
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| PubChem CID |
2734965
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
766.6ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
417.4ºC
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| tPSA |
185.46
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
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| 可旋转键数目(RBC) |
11
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
591
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
ZWSMLJACYSGFKD-UHFFFAOYSA-J
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H24N2O10.4Na/c25-19(26)11-23(12-20(27)28)15-5-1-3-7-17(15)33-9-10-34-18-8-4-2-6-16(18)24(13-21(29)30)14-22(31)32/h1-8H,9-14H2,(H,25,26)(H,27,28)(H,29,30)(H,31,32)/q4*+1/p-4
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| 化学名 |
sodium 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetate
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| 别名 |
BAPTA-Na4; BAPTA Na4; 126824-24-6; BAPTA, Tetrasodium Salt; BAPTA Tetrasodium Salt; Sodium 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetate; BAPTA tetrasodium; BAPTA-Na4; 1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid tetrasodium salt; tetrasodium;2-[2-[2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]phenoxy]ethoxy]-N-(carboxylatomethyl)anilino]acetate; BAPTANa4; BAPTA Tetrasodium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~177.19 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7719 mL | 8.8594 mL | 17.7189 mL | |
| 5 mM | 0.3544 mL | 1.7719 mL | 3.5438 mL | |
| 10 mM | 0.1772 mL | 0.8859 mL | 1.7719 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。