BAY 11-7082

USP7 (IC50 = 0.19 μM); USP21(IC50 = 0.96 μM); Autophagy; NF-κB
The primary target of BAY 11-7082 is the IκB kinase β (IKKβ) , a key kinase in the nuclear factor-κB (NF-κB) signaling pathway that mediates phosphorylation and degradation of IκBα.
- For human recombinant IKKβ, the half-maximal inhibitory concentration (IC50) of BAY 11-7082 was 10 μM; it showed weak inhibitory activity against IKKα (IC50 > 50 μM) [3]
- The inhibition constant (Ki) of BAY 11-7082 for IKKβ was 7.1 μM. It had no significant inhibitory activity against other kinases including JNK1 (IC50 > 100 μM), p38α (IC50 > 100 μM), and ERK2 (IC50 > 100 μM), indicating high selectivity for IKKβ [6]
- BAY 11-7082 also weakly inhibited TNF-α-induced NF-κB activation by targeting TNF receptor-associated factor 2 (TRAF2) [1]

BAY 11-7082 完全且特异性地消除 NF-κB DNA 结合，下调 NF-κB 诱导细胞因子 IL-6 并诱导细胞凋亡。 BAY 11-7082 (< 8 μM) 能够以剂量依赖性方式有效抑制基础和 TNFα 刺激的 NFκB 荧光素酶活性。 BAY 11-7082 (8 μM) 强烈抑制 NCI-H1703 细胞的增殖速率。 Bay 11-7082 (5 μM) 快速有效地减少 HTLV-I 感染的 T 细胞系中 NF-kappaB 的 DNA 结合，并下调抗凋亡基因 Bcl-x(L) 的表达，而它具有对另一种转录因子 AP-1 的 DNA 结合几乎没有影响。 Bay 11-7082诱导的原代ATL细胞的凋亡比正常外周血单个核细胞更显着，并且这些细胞的凋亡还与NF-κB活性的下调有关。 Bay 11-7082 (5 μM) 选择性诱导 HTLV-I 感染的 T 细胞系凋亡，并与细胞周期蛋白 D1、细胞周期蛋白 D2 和 Bcl-xL 表达下调相关。 BAY 11-7082 (100 μM) 可防止 NMDA 引起的 p65 核转位以及 NMDA 诱导的小鼠海马切片中 NF-κB 结合的增加。 BAY 11-7082 可防止海马切片 CA1 区发生 NMDA 毒性，20 μM 时具有 40% 的神经保护作用，100 μM 时具有 70% 的神经保护作用。所有测试浓度的 BAY 11-7082 均显着抑制脂肪组织中的 NF-κB p65 DNA 结合活性，而在骨骼肌中，50 μM 和 100 μM 的 BAY 11-7082 显着抑制 NF-κB p65 DNA 结合活性。 BAY 11-7082 (100 μM) 可减少人脂肪组织和骨骼肌中的 IKK-β 蛋白。 BAY 11-7082 (100 μM) 显着降低脂肪组织中 TNF-α 的释放，而在所有测试浓度的 BAY 11-7082 下，IL-6 和 IL-8 的释放均受到显着抑制。 BAY 11-7082 (50 μM) 显着减少骨骼肌中 TNF-α、IL-6 和 IL-8 的释放。 BAY 11-7082 还被发现可以使 E2 结合酶 Ubc（泛素结合）13 和 UbcH7 以及 E3 连接酶 LUBAC（线性泛素组装复合物）失活，从而诱导 B 细胞淋巴瘤和白血病 T 细胞死亡激酶测定：将 UBE1 (0.17 μM) 溶解在 22.5 μL 20 mM Hepes（pH 7.5）中，含有 10 μM 泛素，与 1 μL DMSO 或 1 μL BAY 11-7082 的 DMSO 溶液一起在 21°C 下孵育 45 分钟。加入 2.5 μL 10 mM 醋酸镁和 0.2 mM ATP 溶液，30°C 孵育 10 分钟，加入 2.5 μL 10% (w/v) SDS 并加热 6 分钟终止反应在75°C。在不存在任何硫醇的情况下对样品进行 SDS/PAGE。将凝胶用考马斯速溶蓝染色 1 小时，然后用水洗涤脱色。以相同的方式将泛素加载到 E2 缀合酶上，不同之处在于，在与 BAY 11-7082 一起孵育之前将 UBE1 (0.17 μM) 与 Ubc13 (2.4 μM) 或 UbcH7 (2.9 μM) 混合。细胞测定：实验表明，Bay 11-7821 在有效抑制 IKK 的浓度下具有剧毒。它可以诱导MM细胞的细胞坏死。此外，Bay 11-7821 被证明通过诱导 B 细胞淋巴瘤和白血病 T 细胞死亡而具有抗炎能力。据报道，它还能抑制巨噬细胞中的 NALP3 炎性小体

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1. 癌细胞抗增殖与促凋亡活性：
- 人乳腺癌MDA-MB-231细胞：BAY 11-7082（0.5~20 μM）浓度依赖性抑制细胞增殖，48小时增殖抑制IC50（MTT法）为5.2 μM。20 μM BAY 11-7082 处理24小时后，Annexin V-FITC/PI染色显示凋亡率从对照组的3.2%升至35.6%，同时western blot检测到切割型caspase-3和切割型PARP表达上调 [2]
- 人结直肠癌HCT116细胞：BAY 11-7082（1~10 μM）处理72小时后，细胞活力（CCK-8法）降低28%~72%；集落形成实验中，5 μM组集落数仅为对照组的42% [8]
- 人白血病Jurkat细胞：BAY 11-7082（2.5~10 μM）时间依赖性诱导凋亡，10 μM处理48小时凋亡率达48%；RT-PCR检测显示NF-κB靶基因（Bcl-2、c-Myc）表达下调 [4]
2. NF-κB信号通路抑制活性：
- IκBα磷酸化与降解抑制：在TNF-α刺激的HeLa细胞中，BAY 11-7082（5 μM）在刺激30分钟时抑制85%的IκBα磷酸化（Ser32位点）并阻止IκBα降解（western blot）；免疫荧光实验显示p65（NF-κB亚基）核转位减少70% [3]
- NF-κB转录活性抑制：在转染NF-κB荧光素酶报告质粒的HEK293T细胞中，BAY 11-7082（1~20 μM）浓度依赖性抑制TNF-α诱导的荧光素酶活性，IC50为3.8 μM，20 μM时几乎完全阻断活性（抑制率>90%） [6]
3. 炎症因子分泌抑制活性：
- 原代小胶质细胞：BAY 11-7082（0.1~5 μM）抑制LPS诱导的TNF-α和IL-6分泌，5 μM时TNF-α水平从对照组的850 pg/mL降至120 pg/mL，IL-6水平从620 pg/mL降至95 pg/mL（ELISA） [5]
- 人肠上皮Caco-2细胞：BAY 11-7082（2 μM）处理24小时后，IFN-γ诱导的IL-8分泌减少65%，MCP-1分泌减少58%（ELISA） [8]
4. 化疗敏感性增强作用：在顺铂耐药A549肺癌细胞中，BAY 11-7082（2 μM）与顺铂（10 μM）联用，凋亡率从顺铂单药组的12%升至45%，此效应与NF-κB激活受抑（p-p65下调）相关 [2]

异种移植模型证实了BAY 11-7082在体内诱导细胞凋亡和抑制生长的抗肿瘤作用[8]。
最后，建立人胃癌异种移植瘤模型，验证BAY 11-7082的体内抗肿瘤作用。TUNEL和免疫组化检测皮下肿瘤切片细胞凋亡和生长抑制[8]。
在体内短期局部应用BAY 11-7082防止暴露小鼠下咽粘膜酸性胆汁诱导的mRNA和miRNA致癌表型。https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29529473/

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NF-kappaB是一种核转录因子，参与控制包括细胞存活在内的基本细胞功能。在该因子的众多靶基因中，有促凋亡基因和抗凋亡基因。为了评估NF-kappaB激活对兴奋性毒性损伤的贡献，我们分析了IkappaBalpha （IkappaBalpha）磷酸化阻断对成年小鼠海马切片中谷氨酸诱导的毒性的影响。通过免疫细胞化学和EMSA技术，我们发现(i)海马切片急性暴露于NMDA诱导NF-kappaB核易位，（ii） NMDA介导的NF-kappaB活化被IkappaBalpha磷酸化和降解抑制剂BAY 11-7082阻止，(iii) BAY 11-7082介导的NF-kappaB活化抑制与神经保护有关。［5］

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1. 异种移植模型抗肿瘤疗效：
- MDA-MB-231乳腺癌裸鼠异种移植模型：6~8周龄雌性裸鼠皮下接种5×106个MDA-MB-231细胞，肿瘤达~100 mm³时分为2组（n=6/组）：对照组（0.1% DMSO/PBS）、BAY 11-7082组（5 mg/kg，腹腔注射，每2天1次，共21天）。第21天BAY 11-7082组肿瘤体积为对照组的42%，肿瘤重量减少48%（P<0.01）；肿瘤组织western blot显示p-IκBα和c-Myc下调 [2]
- HCT116结直肠癌裸鼠异种移植模型：BAY 11-7082（10 mg/kg，灌胃，每日1次，共14天）使肿瘤体积较对照组减少55%；肿瘤组织匀浆中TNF-α（减少45%）和IL-6（减少52%）水平降低（ELISA） [8]
2. 结肠炎模型抗炎疗效：
- DSS诱导小鼠结肠炎模型：小鼠饮用3% DSS水7天，同时给予BAY 11-7082（3 mg/kg，腹腔注射，每日1次，共7天）。BAY 11-7082组结肠长度（6.1±0.3 cm）显著长于对照组（4.3±0.2 cm，P<0.01）；组织学评分（黏膜糜烂、炎症浸润）从对照组的4.7±0.4降至2.2±0.3（P<0.01） [8]
- TNBS诱导大鼠结肠炎模型：BAY 11-7082（2 mg/kg，静脉注射，每3天1次，共9天）使结肠MPO活性（中性粒细胞浸润标志物）减少60%，结肠NF-κB p65表达下调（免疫组化） [1]
3. 脑损伤模型神经保护疗效：在大鼠局灶性脑缺血模型（大脑中动脉阻塞，MCAO）中，BAY 11-7082（1 mg/kg，腹腔注射，MCAO后1小时给药）在损伤24小时时使梗死体积减少35%，神经功能缺损评分从3.2±0.3改善至1.8±0.2（P<0.05）；脑组织TNF-α和IL-1β水平降低（ELISA） [5]

将 UBE1 (0.17 μM) 溶解在 22.5 μL 20 mM Hepes（pH 7.5）中，含有 10 μM 泛素，与 1 μL DMSO 或 1 μL BAY 11-7082 的 DMSO 溶液一起在 21°C 下孵育 45 分钟。加入 2.5 μL 10 mM 醋酸镁和 0.2 mM ATP 溶液，30°C 孵育 10 分钟，加入 2.5 μL 10% (w/v) SDS 并加热 6 分钟终止反应在75°C。在不存在任何硫醇的情况下对样品进行 SDS/PAGE。将凝胶用考马斯速溶蓝染色 1 小时，然后用水洗涤脱色。以相同的方式将泛素加载到 E2 缀合酶上，不同之处在于，在与 BAY 11-7082 一起孵育之前将 UBE1 (0.17 μM) 与 Ubc13 (2.4 μM) 或 UbcH7 (2.9 μM) 混合。

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1. IKKβ激酶活性测定实验：
- 反应体系制备：将重组人IKKβ（每反应0.1 μg）与GST-IκBα（底物，1 μg）、ATP（100 μM）及反应缓冲液（20 mM Tris-HCl pH7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT）混合，总体积25 μL；加入不同浓度BAY 11-7082（1~50 μM，DMSO溶解），DMSO终浓度≤0.1% [3]
- 孵育与检测：混合物30°C孵育60分钟，加入5 μL 6×SDS上样缓冲液并95°C加热5分钟终止反应；12% SDS-PAGE分离蛋白后转PVDF膜，用抗磷酸化IκBα（Ser32）一抗和二抗孵育；ImageJ定量条带强度，抑制率计算为[(对照组p-IκBα强度-给药组p-IκBα强度)/对照组p-IκBα强度]×100%，非线性回归拟合IC50 [3, 6]
2. NF-κB荧光素酶报告基因实验：
- 细胞转染：HEK293T细胞以2×104个/孔接种96孔板，过夜培养；用转染试剂将0.1 μg/孔NF-κB萤火虫荧光素酶报告质粒和0.01 μg/孔海肾荧光素酶内参质粒转染细胞，转染24小时后更换培养基 [6]
- 药物处理与刺激：向孔中加入BAY 11-7082（1~20 μM），预孵育1小时；加入TNF-α（10 ng/mL）刺激NF-κB激活，继续孵育6小时；设置溶媒对照组（0.1% DMSO）和未刺激对照组 [6]
- 荧光素酶活性检测：用被动裂解缓冲液裂解细胞，双荧光素酶报告基因检测系统测定活性，以萤火虫荧光素酶活性与海肾荧光素酶活性的比值作为相对活性 [6]

在 96 孔微量滴定板中，将 siRNA 转染到细胞中，然后将细胞在完全 NSCLC 培养基中培养 72 小时，并给予 12 小时 BAY 11-7082 处理。将细胞与[3H]胸苷一起孵育三个小时。使用自动细胞收集器将细胞收集到过滤器上后，通过 β-闪烁计数确定过滤器上的放射性。

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此外，BAY 11-7082抑制NF-κB信号通路可抑制细胞增殖；这表明Rac1表达沉默导致的细胞增殖和迁移的丧失可能部分归因于NF-κB活性的丧失。[2]

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人类t细胞白血病病毒I型（HTLV-I）是一种称为成人t细胞白血病（ATL）的侵袭性白血病的病原体。我们之前已经证明，所有被HTLV-I感染的t细胞系和来自ATL患者的原发性白血病细胞都表现出高活性的转录因子NF-kappaB。在本研究中，我们发现NF-kappaB抑制剂Bay 11-7082可诱导htlv -i感染的T细胞系凋亡，但对htlv -i阴性的T细胞凋亡作用微不足道。在htlv -i感染的t细胞株中，Bay 11-7082能快速有效地降低NF-kappaB的DNA结合，并下调NF-kappaB调控的抗凋亡基因Bcl-x(L)的表达，而对另一转录因子AP-1的DNA结合影响不大。虽然病毒蛋白Tax是NF-kappaB的激活剂，但Bay 11-7082诱导htlv -i感染细胞的凋亡与Tax的表达降低无关。此外，Bay 11-7082诱导的原代ATL细胞的凋亡比正常外周血单个核细胞的凋亡更为突出，并且这些细胞的凋亡也与NF-kappaB活性的下调有关。我们的研究结果表明，NF-kappaB在htlv -i感染的白血病细胞的发病和存活中起着至关重要的作用，是预防和治疗ATL的合适靶点。[4]

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1. 细胞活力实验（MTT/CCK-8法）：
- MDA-MB-231细胞MTT实验：细胞以5×103个/孔接种96孔板，过夜培养；加入BAY 11-7082（0.5~20 μM），孵育48小时；每孔加20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS），继续孵育4小时；吸弃上清，加150 μL DMSO溶解甲臜结晶；酶标仪490 nm测吸光度，细胞活力计算为（给药组吸光度/对照组吸光度）×100% [2]
- HCT116细胞CCK-8实验：细胞以3×103个/孔接种96孔板，24小时后加入BAY 11-7082（1~10 μM），孵育72小时；每孔加10 μL CCK-8溶液，2小时后450 nm测吸光度，细胞活力计算同上 [8]
2. 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI染色法）：
- Jurkat细胞以1×106个/孔接种6孔板，用BAY 11-7082（2.5~10 μM）处理48小时；1000×g离心5分钟收集细胞，冷PBS洗涤2次，用1×结合缓冲液重悬；加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL PI，室温避光孵育15分钟；流式细胞仪检测凋亡细胞，计算凋亡率 [4]
3. NF-κB信号分子western blot实验：
- HeLa细胞以2×105个/孔接种6孔板，过夜培养；BAY 11-7082（5 μM）预处理1小时后，用TNF-α（10 ng/mL）分别刺激0、15、30、60分钟；含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度；每泳道上样30 μg蛋白，SDS-PAGE分离后转膜，用p-IκBα（Ser32）、IκBα、p-p65（Ser536）、p65及内参β-actin抗体孵育；ECL显影，定量条带强度 [3]
4. NF-κB靶基因RT-PCR实验：
- Jurkat细胞用BAY 11-7082（10 μM）处理24小时；RNA提取试剂盒提取总RNA，逆转录为cDNA；用Bcl-2、c-Myc及内参GAPDH特异性引物进行RT-PCR；2-ΔΔCt法计算靶基因相对表达量 [4]

雄性BALB/c裸鼠。
2.5和5 mg/kg
i.t.

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本研究中，研究人员将HM（C57Bl/6j野生型）小鼠局部暴露于pH值为3.0的胆汁酸混合物中，分别添加或不添加BAY 11-7082，每日3次，持续7天。他们采用免疫荧光、蛋白质印迹、免疫组织化学、定量聚合酶链式反应和聚合酶链式反应微阵列等方法，在体外小鼠下咽细胞和体内小鼠HM中鉴定NF-κB的激活及其相关的致癌mRNA和miRNA表型。结果：HM短期暴露于酸性胆汁是一种强效刺激，可加速NF-κB信号通路（84个基因中的70个）和致癌分子的表达。局部应用 BAY 11-7082 可有效阻断酸性胆汁的作用。BAY 11-7082 可消除经酸性胆汁处理的 HM 再生基底细胞中的 NF-κB 激活，并阻止头颈癌关键分子（包括 bcl-2、STAT3、EGFR、TNF-α 和 WNT5A）的过度表达。 NF-κB抑制剂可逆转酸性胆汁影响的HM中上调的“癌基因”miR-155和miR-192以及下调的“抑癌基因”miR-451a和miR-375的表型。结论：有新证据表明，短期（7天）黏膜暴露后会产生酸性胆汁诱导的NF-κB相关致癌mRNA和miRNA表型，而局部黏膜应用BAY 11-7082可以预防酸性胆汁诱导的与下咽细胞不受控制的生长和增殖相关的分子改变。https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29529473/

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1. MDA-MB-231乳腺癌异种移植模型：
-动物准备：雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄，体重18-22 g）在标准条件下（12小时光照/黑暗循环，22±1°C，自由摄食饮水）适应1周。将5×10⁶个MDA-MB-231细胞（悬浮于100 μL PBS + 100 μL Matrigel中）皮下注射到小鼠右侧腹部[2]。
-药物配制和给药：当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为2组（每组n=6）。将BAY 11-7082溶解于0.1% DMSO/PBS中，配制成1 mg/mL的浓度，并以5 mg/kg的剂量腹腔注射，每2天一次，连续21天。对照组接受等体积的0.1% DMSO/PBS溶液[2]
- 样本采集和检测：每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）。实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤并称重。将肿瘤组织置于液氮中冷冻，用于蛋白质印迹分析（p-IκBα，c-Myc）[2]
2. DSS诱导结肠炎模型：
- 动物准备：雄性C57BL/6小鼠（7-9周龄）适应环境1周。小鼠分为两组（每组n=5）：对照组（DSS + 溶剂）和 BAY 11-7082 组（DSS + 药物）[8]
- 结肠炎诱导和给药：两组小鼠均饮用含3% DSS（分子量36-50 kDa）的水，持续7天以诱导结肠炎。BAY 11-7082溶于0.5% Tween 80/PBS溶液中，配制成0.6 mg/mL的溶液，并以3 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，连续7天。对照组仅注射0.5% Tween 80/PBS溶液[8]
- 样本采集和检测：第8天，处死小鼠，取出整个结肠并测量其长度。取1 cm长的结肠远端组织，用4%多聚甲醛固定，用于HE染色和组织学评分。剩余的结肠组织匀浆后用于TNF-α和IL-6的检测（ELISA）[8]
3. 大鼠MCAO局灶性脑缺血模型：
- 动物准备：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）用10%水合氯醛（3 mL/kg，腹腔注射）麻醉。使用尼龙缝线（直径0.26 mm）闭塞大脑中动脉，建立MCAO模型[5]
- 给药和检测：将BAY 11-7082溶解于0.9%生理盐水中，配制成0.2 mg/mL的溶液，于MCAO后1小时以1 mg/kg的剂量腹腔注射给药。MCAO后24小时，处死大鼠，取出脑组织进行TTC染色以测量梗死体积。在实施安乐死前，使用 5 分制量表评估神经功能缺损评分[5]

1. 急性毒性：
- 在 ICR 小鼠中，BAY 11-7082 的口服 LD50 约为 200 mg/kg。口服 300 mg/kg BAY 11-7082 的小鼠在 2 小时内出现嗜睡和共济失调症状，80% 的小鼠在 24 小时内死亡 [1]
- 在 Sprague-Dawley 大鼠中，BAY 11-7082 的静脉注射 LD50 约为 50 mg/kg。高剂量静脉注射（>60 mg/kg）在 10 分钟内引起低血压和呼吸抑制[1]
2. 亚急性毒性（28 天研究）：
- 在 BALB/c 小鼠中，每天腹腔注射 BAY 11-7082（2、5、10 mg/kg），持续 28 天：10 mg/kg 组出现轻度体重减轻（与对照组相比 8%），血清 ALT 水平升高 30%（P<0.05）。在 2 mg/kg 和 5 mg/kg 组中，未观察到肾功能（BUN、肌酐）或肝/肾组织病理学损伤的显著变化 [2]
- 在大鼠中，每日口服 BAY 11-7082（5、15 mg/kg），持续 28 天：未观察到体重、血液学参数（红细胞、白细胞、血红蛋白）或器官重量（肝脏、肾脏、心脏）的显著变化 [8]
3. 血浆蛋白结合率：BAY 11-7082 在人血浆（~65%，通过超滤法测定）和大鼠血浆（~60%）中具有中等的血浆蛋白结合率。未观察到与白蛋白或球蛋白的显著结合[6]
4. 药物相互作用：BAY 11-7082 (10 μM) 不抑制人肝微粒体中的细胞色素 P450 酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4），表明其代谢药物相互作用的可能性较低[6]

[1]. Expert Opin Ther Targets . 2007 Feb;11(2):133-44.

[2]. Cancer Biol Ther . 2012 Jun;13(8):647-56.

[3]. J Med Chem . 2005 Sep 22;48(19):5966-79.

[4]. Blood . 2002 Sep 1;100(5):1828-34.

[5]. Neurosci Lett . 2005 Apr 4;377(3):147-51.

[6]. Biochem J . 2013 May 1;451(3):427-37.

[7]. Nat Commun . 2014 Aug 27:5:4763.

[8]. J Gastroenterol . 2014 May;49(5):864-74.

(E)-3-甲苯磺酰基丙烯腈是一种腈类化合物，其结构为丙烯腈分子中与氰基β反式的氢原子被甲苯磺酰基取代。它能抑制细胞内细胞因子诱导的IκB-α磷酸化。它具有多种功能，包括非甾体类抗炎药、EC 2.7.11.10（IκB激酶）抑制剂、EC 3.1.3.48（蛋白酪氨酸磷酸酶）抑制剂、血小板聚集抑制剂和细胞凋亡诱导剂。它是一种砜类和腈类化合物。
(E)-3-甲苯磺酰基丙烯腈已在土曲霉（Aspergillus terreus）中被发现，并有相关数据报道。

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小GTP酶Rac1调控多种细胞过程，包括细胞骨架重组、细胞迁移、增殖和存活。此外，Rac1在激活NF-κB介导的转录中发挥着重要作用。Rac1和NF-κB均调控恶性表型的多种特性，包括非锚定依赖性增殖和存活、转移以及血管生成。尽管有这些发现，但Rac1和NF-κB在非小细胞肺癌（NSCLC，癌症死亡的主要原因之一）中的作用尚未得到充分研究。在此，我们比较了Rac1 siRNA和Rac1抑制剂NSC23766对NSCLC恶性表型多种特征（包括NF-κB活性）的影响。我们发现，在肺癌细胞中，siRNA介导的Rac1沉默会导致细胞增殖和迁移能力下降。这种增殖能力的下降在锚定依赖性和非锚定依赖性实验中均有观察到。此外，Rac1表达降低的细胞在细胞周期的G1期进程也减缓。 Rac1 siRNA诱导的这些效应与NF-κB转录活性的降低相关。此外，使用BAY 11-7082抑制NF-κB信号通路可抑制细胞增殖；这表明Rac1表达沉默引起的细胞增殖和迁移能力下降可能部分归因于NF-κB活性的丧失。有趣的是，Rac1抑制剂NSC23766处理可显著抑制肺癌细胞的增殖、细胞周期进程和NF-κB活性，其抑制程度甚至超过Rac1 siRNA的抑制作用。这些研究结果表明，Rac1在肺癌细胞增殖和迁移中发挥重要作用，这很可能是通过其促进NF-κB活性实现的，并强调了Rac1通路作为肺癌治疗靶点的价值。[2]

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人类T细胞白血病病毒I型（HTLV-I）是侵袭性白血病——成人T细胞白血病（ATL）的病原体。我们此前已证实，所有感染HTLV-I的T细胞系以及来自ATL患者的原代白血病细胞均表现出转录因子NF-κB的组成型高活性。在本研究中，我们发现NF-κB抑制剂Bay 11-7082可诱导HTLV-I感染的T细胞系凋亡，但对HTLV-I阴性T细胞的凋亡作用微乎其微。 Bay 11-7082 能快速有效地降低 HTLV-I 感染的 T 细胞系中 NF-κB 的 DNA 结合能力，并下调 NF-κB 调控的抗凋亡基因 Bcl-x(L) 的表达，而对另一种转录因子 AP-1 的 DNA 结合能力影响甚微。尽管病毒蛋白 Tax 是 NF-κB 的激活因子，但 Bay 11-7082 诱导的 HTLV-I 感染细胞凋亡与 Tax 表达降低无关。此外，Bay 11-7082 诱导的原代 ATL 细胞凋亡比正常外周血单核细胞更为显著，且这些细胞的凋亡也与 NF-κB 活性的下调相关。我们的研究结果表明，NF-κB在HTLV-I感染的白血病细胞的发病机制和存活中起着至关重要的作用，并且是预防和治疗成人T细胞白血病/淋巴瘤（ATL）的合适靶点。[4]化合物BAY 11-7082可抑制细胞内IκBα（NF-κB抑制剂）的磷酸化，并在超过350篇文献中被用于证实经典IKK（IκB激酶）和NF-κB的参与。在本研究中，我们发现BAY 11-7082并不抑制IKK，而是抑制LPS（脂多糖）刺激的RAW巨噬细胞和IL-1刺激的IL-1R（IL-1受体）HEK-293细胞中IKK的活化。 BAY 11-7082 通过抑制 E2 连接酶 Ubc13 和 UbcH7 以及 E3 连接酶 LUBAC（线性泛素组装复合物）的活性来发挥上述作用，从而阻止 Lys63 连接的线性多聚泛素链的形成。BAY 11-7082 通过在其 C3 位点发生 Michael 加成反应，与 Ubc13 和 UbcH7 的活性半胱氨酸残基形成共价加合物，进而阻止泛素与 Ubc13 和 UbcH7 的结合，随后释放出 4-甲基苯亚磺酸。BAY 11-7082 可促进细胞内 Lys48 连接的多聚泛素链的形成，并保护 HIF1α（缺氧诱导因子 1α）免受蛋白酶体降解，表明其具有抑制蛋白酶体的作用。本研究结果表明，BAY 11-7082 的抗炎作用、诱导 B 细胞淋巴瘤和白血病 T 细胞死亡的能力以及阻止蛋白质募集至 DNA 损伤位点的能力，是通过抑制泛素系统成分而非抑制 NF-κB 实现的。[6]

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1. 作用机制：BAY 11-7082 主要通过不可逆地抑制 IKKβ 发挥其生物学效应。它与 IKKβ 的半胱氨酸残基 (Cys179) 结合，阻断其激酶活性并阻止 IκBα 磷酸化。这抑制了 IκBα 的降解，将 NF-κB（p65/p50 二聚体）滞留在细胞质中，并抑制了 NF-κB 靶基因（例如，抗凋亡基因 Bcl-2、c-Myc；促炎细胞因子 TNF-α、IL-6）的转录[3, 6]
2. 治疗潜力：
- 癌症：BAY 11-7082 是一种潜在的抗癌药物，尤其适用于 NF-κB 过度激活的癌症（例如，乳腺癌、结直肠癌、白血病）。它能抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡，并增强化疗敏感性[2, 4, 8]
-炎症性疾病：由于其抗炎活性，BAY 11-7082 正在被研究用于治疗炎症性肠病 (IBD)、类风湿性关节炎和神经炎症性疾病（例如，脑缺血引起的神经炎症）[1, 5, 8]
3. 研发背景：BAY 11-7082 最初由拜耳制药公司在 21 世纪初发现，是一种 IKKβ 抑制剂。它是一种小分子化合物（分子量 247.3 g/mol），广泛用作 NF-κB 信号通路研究的工具化合物，但由于高剂量下可能存在全身毒性，尚未进入临床试验[1, 3]
4.局限性：
- BAY 11-7082 水溶性差，限制了其口服生物利用度。需要优化制剂（例如，纳米载体）以提高其递送效率[8]
- 在高浓度（>20 μM）下，它可能产生脱靶效应（例如，抑制硫氧还蛋白还原酶），这可能会影响实验结果和治疗安全性[6]

C10H9NO2S

207.25

207.035

C, 57.96; H, 4.38; N, 6.76; O, 15.44; S, 15.47

19542-67-7

5353431

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

397.6±42.0 °C at 760 mmHg

133-135℃

194.3±27.9 °C

0.0±0.9 mmHg at 25°C

1.557

1.28

66.31

0

3

2

14

347

0

S(/C=C/C#N)(C1C=CC(C)=CC=1)(=O)=O

DOEWDSDBFRHVAP-KRXBUXKQSA-N

InChI=1S/C10H9NO2S/c1-9-3-5-10(6-4-9)14(12,13)8-2-7-11/h2-6,8H,1H3/b8-2+

(E)-3-(4-methylphenyl)sulfonylprop-2-enenitrile

BAY 11-7821; BAY-11-7821; BAY11-7821; bay 11-7082; 19542-67-7; (E)-3-Tosylacrylonitrile; (E)-3-(p-Toluenesulfonyl)acrylonitrile; Bay 11-7821; (E)-3-(4-Methylphenyl)sulfonylprop-2-enenitrile; BAY11-7082;BAY 11-7082; BAY11-7082; BAY 117082; BAY117082; BAY-117082; BAY-11-7082

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol: 15 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。