Tat-IKIP (46-60) TFA

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Tat-IKIP (46-60) TFA 是 Tat-IKIP (46-60) 的三氟乙酸盐。
Tat-IKIP (46-60) TFA 产品类别: IκB IKK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
Tat-IKIP (46-60) TFA 是 Tat-IKIP (46-60) 的三氟乙酸盐。Tat-IKIP (46-60) 是一种跨膜肽,靶向 IκB 激酶 (IKK)。Tat-IKIP (46-60) 通过破坏 IKKβ/NEMO 复合物来抑制 IKK 活化和 NF-κB 靶基因表达。在炎症性肠病 (IBD) 小鼠模型中,Tat-IKIP (46-60) 可显著减轻 DSS 诱导的急性炎症;在急性关节炎模型 (AAM) 中,Tat-IKIP (46-60) 可减轻酵母聚糖诱导的急性关节炎。Tat-IKIP (46-60) 可用于炎症性疾病(如 IBD、胰腺炎和类风湿性关节炎)的研究。
Tat-IKIP (46-60) TFA 是一种合成的细胞穿透肽,它将 HIV-1 Tat 蛋白转导结构域 (PTD) 与源自 IkappaB 激酶 (IKK) 相互作用肽 (IKIP) 第 46-60 位氨基酸残基的 15 个氨基酸序列结合。该肽旨在通过破坏 IKKbeta 与其调节亚基 NF-kappaB 必需调节因子 (NEMO) 之间的关键相互作用,发挥 NF-kappaB 信号通路胞内抑制剂的作用。其主要研究应用是探索 NF-kappaB 在炎症中的作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
The molecular target of Tat-IKIP (46-60) is the IKK complex, specifically the protein-protein interaction interface between IKKbeta and NEMO. The IKIP-derived sequence is designed to mimic the binding motif that is crucial for the assembly and activation of the IKK complex. By competitively binding to this interface, the peptide prevents the formation of the active IKKbeta/NEMO complex, thereby blocking the phosphorylation and subsequent degradation of IkappaB. This, in turn, inhibits the nuclear translocation of the transcription factor NF-kappaB, preventing the expression of its pro-inflammatory target genes.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,Tat-IKIP (46-60) 能有效抑制 NF-κB 的激活。在 5 uM 的浓度下,它能显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞中 LPS 诱导的 IKKα/β 磷酸化以及 NF-κB p65 亚基的核转位。这种抑制作用转化为促炎细胞因子生成减少。Tat 结构域促进了肽的快速细胞摄取,使其能够到达细胞内靶点。在有效浓度下,它对细胞没有直接的细胞毒性,因此是体外研究炎症通路的重要工具。
体内研究 (In Vivo)
Tat-IKIP (46-60) 的体内疗效已在炎症性疾病动物模型中得到验证。研究表明,它能显著减轻小鼠炎症性肠病 (IBD) 模型中由葡聚糖硫酸钠 (DSS) 诱导的急性炎症。此外,它还能减轻急性关节炎模型 (AAM) 中由酵母聚糖诱导的急性关节炎。这些作用归因于其阻断 NF-κB 激活并抑制下游炎症细胞因子产生的能力。Tat 肽确保功能性抑制序列能够递送至体内靶组织细胞。
酶活实验
体外NF-κB激活通用检测(p65核转位):将小鼠腹腔巨噬细胞接种于8孔板中。用Tat-IKIP (46-60) (0.1-10 uM)处理2小时,然后用LPS (100 ng/mL)刺激30分钟。洗涤细胞,固定并进行细胞膜通透处理。使用抗NF-κB p65抗体进行免疫细胞化学染色,随后使用荧光标记的二抗。用DAPI对细胞进行复染以显示细胞核。与仅用LPS处理的对照组相比,肽处理组中p65的核定位显著降低。
细胞实验
体外细胞因子生成常规检测(ELISA):将小鼠腹腔巨噬细胞接种于96孔板(1×10⁵个细胞/孔)。用Tat-IKIP (46-60)(0.1-10 uM)预处理1小时,然后用LPS(100 ng/mL)刺激6小时。收集细胞培养上清液,并使用商业ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-6的浓度。该肽可显著降低这些促炎细胞因子的水平。对于细胞毒性,平行孔的MTT实验结果显示IC50 > 50 uM。
动物实验
炎症疗效的体内动物实验通用方案:将 Tat-IKIP (46-60) TFA 溶解于注射用无菌水或 PBS 中。对于结肠炎模型,向 C57BL/6 小鼠(每组 n=8)饮用水中添加 DSS(3-5%),连续 7 天以诱导炎症性肠病 (IBD)。从第 0 天开始,每天一次腹腔注射该肽(0、5、10、20 mg/kg)。每日监测小鼠的体重变化、粪便性状和便血情况。研究结束时,评估结肠长度和组织病理学评分。该肽可显著降低疾病严重程度。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种中等分子量的合成肽,Tat-IKIP (46-60) 在腹腔注射后可能迅速从血浆中清除。三氟乙酸盐形式用于提高其在体内注射时的溶解度。Tat 肽可促进细胞快速摄取,但其在循环中的半衰期较短(血浆半衰期通常<1小时)。它可能被蛋白酶代谢成其组成氨基酸。作为研究标准品,通常不需要详细的药代动力学/吸收、分布、代谢和排泄(PK/ADME)分析。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
临床前研究表明,Tat-IKIP (46-60) 在小鼠治疗剂量下耐受性良好,未显示明显的毒性迹象。作为一种小肽,它不被认为具有遗传毒性。尚未对其进行长期致癌性研究。作为研究参考标准品,其操作应遵循常规实验室化学品的安全预防措施。如果其作为杂质存在,则常规控制浓度为 0.15% 是可以接受的,尽管它通常是一种研究化合物。
参考文献

[1]. A Peptide Derived from IKK-Interacting Protein Attenuates NF-κB Activation and Inflammation. J Immunol. 2021 Sep 15;207(6):1652-1661.

[2]. IKK beta-targeting short peptides and application thereof in inflammatory diseases. 2020-11-24.

其他信息
外观:冻干粉末(以三氟乙酸盐形式存在)。分子式:(未公开)。储存条件:-20℃。溶解性:溶于水和PBS缓冲液。其他名称:Tat抑制剂-NF-κB激酶相互作用肽(46-60),F1肽。安全性:仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C145H246N48O31S.XC2HF3O2
分子量
3189.87 (free base)
相关CAS号
Tat-IKIP (46-60)
序列
Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Leu-Leu-Ser-Leu-Ala-Met-Thr-Leu-Gly-Leu-Ala-Trp-Leu-Val-PheYGRKKRRQRRRLLSLAMTLGLAWLVF
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中,避免受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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