| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Phosphodiesterase 9A (PDE9A) - no specific IC50/Ki provided in this paper; the compound is described as a selective PDE9A inhibitor. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在SH-SY5Y细胞中，BAY 73-6691（50、100、150、200 μg/ml）呈剂量依赖性地减轻了Aβ25-35（20 μM）诱导的细胞活力下降，该结果通过MTT法测定。[1]
在SH-SY5Y细胞中，BAY 73-6691呈剂量依赖性地减弱了Aβ25-35诱导的细胞凋亡，该结果通过Annexin V-FITC/PI双染和流式细胞术评估。 [1] 在SH-SY5Y细胞中，BAY 73-6691呈剂量依赖性地降低了Aβ25-35诱导的丙二醛（MDA）水平升高，并提高了总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和过氧化氢酶（CAT）的活性，表明其能减轻氧化应激。在200 μg/ml浓度下，BAY 73-6691几乎完全中和了Aβ25-35诱导的氧化损伤。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在脑室内注射Aβ25-35（第0天，9 nmol/只）的ICR小鼠中，腹腔注射BAY 73-6691（第1-10天，每日一次，剂量分别为0.3、1或3 mg/kg）可剂量依赖性地改善Morris水迷宫任务中的空间记忆缺陷，表现为逃避潜伏期缩短和目标象限停留时间延长，且不影响游泳速度。在第9-10天，3 mg/kg剂量的BAY 73-6691几乎完全消除了逃避潜伏期延长的现象。[1] 在注射Aβ25-35的小鼠海马中，3 mg/kg剂量的BAY 73-6691显著降低了升高的MDA水平，并提高了降低的T-AOC、GSH-PX和CAT活性，表明海马氧化应激得到缓解。 [1]
BAY 73-6691 (3 mg/kg) 可减少注射 Aβ25-35 的小鼠海马中凋亡细胞的数量（TUNEL 染色），并分别通过 ELISA 和 Western blotting 检测，提高海马中脑源性神经营养因子 (BDNF) 和生长相关蛋白-43 (GAP-43) 的水平。[1] |
| 细胞实验 |
SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞在含 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺和抗生素的 DMEM/Ham's F12 培养基中，于 37°C、5% CO2 条件下培养。将细胞以 1×10⁵ 个/孔的密度接种于 96 孔板中，并用新鲜配制的 Aβ25-35 (20 μM) 处理，同时加入或不加入 BAY 73-6691 (50、100、150、200 μg/ml)，分别处理 24、48 和 72 小时。采用 MTT 法检测细胞活力：每孔加入 20 μl MTT 溶液 (5 mg/ml)，孵育 4 小时后加入 DMSO，于 550 nm 波长处读取吸光度值。[1]
采用 Annexin V-FITC/PI 双染法评估细胞凋亡。收集细胞（1.0×10^6/ml），在结合缓冲液中与 Annexin V-FITC 于黑暗中孵育 15 分钟，然后加入 PI 孵育 5 分钟，并在 1 小时内通过流式细胞术进行分析。[1] SH-SY5Y 细胞的氧化应激：采用硫代巴比妥酸反应 (TBAR) 法测定 MDA 水平；采用铁离子还原抗氧化能力 (FRAP) 法测定总抗氧化能力 (T-AOC)；通过 340 nm 波长下 NADPH 氧化测定谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX) 活性；通过 520 nm 波长下 H2O2 分解测定过氧化氢酶 (CAT) 活性。所有试剂盒均按照制造商的说明书使用。[1] |
| 动物实验 |
本研究使用雄性ICR小鼠（25-30 g）。在氯醛水合物麻醉（400 mg/kg，腹腔注射）下，于第0天通过脑室内（icv）注射Aβ25-35（每只小鼠9 nmol，3 μl）诱导阿尔茨海默病模型。假手术组小鼠注射溶剂。BAY 73-6691溶解后，于第1-10天每天上午7:30腹腔注射，剂量分别为0.3、1和3 mg/kg。对照组注射溶剂。[1]
莫里斯水迷宫（MWM）实验：水池直径90 cm，水温20°C，平台位于水下。小鼠在Aβ注射后第1-4天进行训练（每天4次，每次90秒）。MWM实验于第5-10天进行。游泳速度的评估是在不使用平台的情况下进行的。记录小鼠找到平台所需的潜伏期和在目标象限的停留时间。[1] 对于生化分析，小鼠于第10天处死，取出海马，在冰冷的PBS（10:1 体积/重量比）中匀浆，并按照细胞分析方法测定MDA、T-AOC、GSH-PX和CAT的含量。[1] 对于TUNEL染色，小鼠先用PBS灌注，再用4%多聚甲醛灌注，处理海马，并在颗粒下区计数凋亡细胞（细胞/mm²）。[1] 对于Western blotting，将海马蛋白（20 μg）通过10% SDS-PAGE分离，转移至硝酸纤维素膜，并用抗GAP-43抗体（1:300）进行检测。β-肌动蛋白作为内参。[1] 对于BDNF ELISA，使用商业试剂盒，在450 nm处读取吸光度。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BAY 73-6691是一种选择性磷酸二酯酶9 (PDE9) 抑制剂，对cGMP具有高亲和力。该化合物已被证明能够增强并延长大鼠海马的长时程增强作用 (LTP)，并改善啮齿动物模型的记忆力。本研究表明，BAY 73-6691可能通过调节cGMP/NO信号通路以及上调BDNF和GAP-43，发挥神经保护作用，对抗Aβ25-35诱导的氧化应激、空间记忆缺陷和海马神经元损伤。该化合物有望成为阿尔茨海默病治疗的候选药物。[1]
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| 分子式 |
C15H12CLF3N4O
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|---|---|
| 分子量 |
356.730192184448
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| 精确质量 |
356.065
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| CAS号 |
794568-90-4
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| 相关CAS号 |
BAY 73-6691;794568-92-6;(S)-BAY 73-6691;794568-91-5
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| PubChem CID |
135495130
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.5
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| tPSA |
59.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
527
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1(N2N=CC3C(=O)N=C(NC2=3)CC(C)C(F)(F)F)=C(C=CC=C1)Cl
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| InChi Key |
FFPXPXOAFQCNBS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H12ClF3N4O/c1-8(15(17,18)19)6-12-21-13-9(14(24)22-12)7-20-23(13)11-5-3-2-4-10(11)16/h2-5,7-8H,6H2,1H3,(H,21,22,24)
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| 化学名 |
1-(2-chlorophenyl)-6-(3,3,3-trifluoro-2-methylpropyl)-5H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~280.32 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (14.02 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 5 mg/mL (14.02 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 5 mg/mL (14.02 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8032 mL | 14.0162 mL | 28.0324 mL | |
| 5 mM | 0.5606 mL | 2.8032 mL | 5.6065 mL | |
| 10 mM | 0.2803 mL | 1.4016 mL | 2.8032 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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