| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
JNK (IC50 = 280 nM)
JNK1-JIP interaction (Ki = 0.5 μM); JNK2-JIP interaction (Ki = 0.7 μM); JNK3-JIP interaction (Ki = 0.9 μM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
BI-78D3 在体外和细胞内以剂量依赖性抑制 JNK 底物的磷酸化。对于 JNK1 结合，BI-78D3 可以胜过 JIP1 的 D 结构域（氨基酸 153-163；pepJIP1）（IC50=500 nM）。使用以下方法发现 BI-78D3 的活性比 p38α 低 100 倍，p38α 是 MAPK 家族的成员，与 JNK 具有高度结构相似性，并且对 mTOR 和 PI3 激酶（同种型）完全无活性，这两种蛋白激酶都是不相关的蛋白激酶。相同的体外 LanthaScreen 激酶测定和相同的 ATF2 底物。此外，Lineweaver-Burk 分析清楚地表明，BI-78D3 的表观 Ki 值为 200 nM，与 ATF2 竞争与 JNK1 的结合。基于细胞的 LanthaScreen 激酶测定用于分析复杂细胞环境中 BI-78D3 的特征。在此测试中，BI-78D3 可以阻止 TNF-α 诱导的 c-Jun 细胞磷酸化（EC50=12.4 μM）[1]。
BI-78D3特异性抑制JNK亚型（JNK1、JNK2、JNK3）与JIP1/2/3的相互作用，Ki值分别为0.5 μM、0.7 μM和0.9 μM [1] 在浓度高达50 μM时，它不抑制JNK激酶的催化活性（IC50 > 100 μM）或其他MAP激酶（p38α、ERK2）[1] 在茴香霉素刺激的HeLa细胞中，BI-78D3（10 μM）阻断JNK介导的c-Jun磷酸化（Ser63/73），Western blot检测显示磷酸化水平降低75% [1] 该化合物在转染AP-1荧光素酶报告基因的HeLa细胞中，抑制茴香霉素诱导的c-Jun转录活性，IC50为3.2 μM [1] 它抑制TNFα诱导的A549细胞中IL-8的产生，IC50为4.8 μM [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
使用 JNK1-/- 和 JNK2-/- 小鼠的研究证明了 ConA 诱导的肝衰竭、TNF 受体信号传导和 JNK 功能之间的关系。为了进行这项研究，在注射胰岛素前 30 分钟，对胰岛素不敏感小鼠注射 25 mg/kg BI-78D3 一次。然后评估胰岛素对血糖水平的影响。与媒介物对照相比，BI-78D3导致血糖水平统计上显着下降。因此，BI-78D3 逆转 ConA 诱导的肝损伤和提高胰岛素敏感性的能力与其作为强大的 JNK 抑制剂的作用是一致的。液相色谱/质谱生物利用度分析表明BI-78D3具有良好的微粒体和血浆稳定性（T1/2=54 min）[1]。
小鼠腹腔注射BI-78D3，剂量为50 mg/kg，每日两次，在LPS攻击后2小时，血清中LPS诱导的TNFα水平降低62% [1] 在小鼠接触性超敏反应（CHS）模型中，BI-78D3（30、60 mg/kg，腹腔注射，每日两次）与溶媒对照组相比，分别抑制45%和70%的耳肿胀 [1] 耳组织免疫组化分析显示，BI-78D3（60 mg/kg）降低c-Jun磷酸化水平和炎症细胞浸润 [1] |
| 酶活实验 |
LanthaScreen c-Jun (1-79) HeLa 和 LanthaScreen ATF2 (19-106) A549 细胞系分别稳定表达 GFP-c-Jun 1-79 和 GFP-ATF2 19-106，用于细胞-基于激酶测定的 c-Jun 和 ATF2 磷酸化。通过测量铽标记的磷酸化特异性抗体和 GFP 融合蛋白之间的时间分辨 FRET (TR-FRET)，可以鉴定磷酸化。每孔 10,000 个细胞，含 32 μl 测定培养基（补充有 1% 木炭/葡聚糖处理的 FBS、100 U/mL 青霉素、100 μg/mL 链霉素、0.1 mM 非必需氨基酸、1 mM 丙酮酸钠、25 mM Hepes、pH 7.3，并且不含酚红）铺板在经过组织培养处理的白色 384 孔板上。过夜孵育后，用 BI-78D3（0.001、0.01、0.1、1、10 和 100 μM）预处理细胞 60 分钟，然后用 TNF-α 刺激 30 分钟，从而激活 JNK 和 p38。将培养基从细胞中吸出后，加入 20 μL 裂解缓冲液（20 mM Tris•HCl，pH 7.6，5 mM EDTA，1% Nonidet P-40 替代品，5 mM NaF，150 mM NaCl 和 1:100 蛋白酶，添加磷酸酶抑制剂混合物（分别为 SIGMA P8340 和 P2850）。裂解缓冲液中存在铽标记的抗 pc-Jun (pSer73) 或抗 pATF2 (pThr71) 检测抗体，浓度为 2 nM。 TR-FRET 发射比在 BMG Pherastar 荧光板读数器上计算（在 340 nm 处激发，在 520 和 490 nm 处发射；100 s 滞后时间，200 s 积分时间，发射比 = Em520/Em 490）[1] 允许后测定在室温下平衡1小时。
采用荧光偏振（FP） assay检测JNK-JIP相互作用抑制活性。将荧光标记的JIP衍生肽与重组JNK1/2/3在 assay缓冲液中孵育，加入系列稀释的BI-78D3，室温孵育1小时。检测FP信号以评估化合物置换肽的能力，通过结合等温线模型计算Ki值 [1] JNK激酶活性 assay：重组JNK1与ATP、MgCl2和GST-c-Jun底物在BI-78D3（0-100 μM）存在下孵育，37°C孵育30分钟后终止反应，通过Western blot检测磷酸化GST-c-Jun，评估催化抑制效果 [1] |
| 细胞实验 |
小鼠 6至8周龄的雄性BL/6小鼠静脉注射10mg/kg ConA和BI-78D3。在进行中腹剖腹手术并切除肝脏的左侧叶和中叶之前，对小鼠进行异氟烷麻醉。动物被处死，通过手术切除肝脏，并通过刺穿心脏获得血液。测定血清中丙氨酸转氨酶的浓度[1]。雄性，11周龄OlaHsd db/db BKS.Cg-+Leprdb/+Leprdb 基于给药前三天调整的血糖水平，对小鼠进行随机分配。便携式血糖仪用于测量血糖水平。小鼠禁食 6 小时，然后静脉内 (ip) 接受 25 mg/kg BI-78D3。以0.75mg/kg的剂量施用测试物质后，静脉注射牛胰岛素(I-0516)30分钟。按照预定的时间间隔，抽取血样，并按照规定测量血糖水平。给予测试物品三小时后，返回食物[1]。
HeLa细胞JNK信号 assay：HeLa细胞接种到6孔板中，过夜贴壁。用BI-78D3（0.1-50 μM）预处理细胞1小时，再用茴香霉素（1 μM）刺激30分钟。制备细胞裂解液，通过Western blot检测磷酸化c-Jun（Ser63/73）和总c-Jun [1] AP-1荧光素酶报告基因 assay：HeLa细胞共转染AP-1荧光素酶报告质粒和海肾荧光素酶对照质粒，24小时后用BI-78D3预处理1小时，再用茴香霉素刺激6小时。采用双荧光素酶 assay系统检测荧光素酶活性，计算IC50 [1] A549细胞IL-8产生 assay：A549细胞接种到96孔板中，饥饿12小时，加入BI-78D3（0.5-50 μM），再用TNFα（10 ng/mL）刺激24小时，收集上清液，通过ELISA检测IL-8水平 [1] |
| 动物实验 |
25 mg/kg; I.V. injection
Mouse models of type 2 diabetes LPS-induced TNFα production model: Male C57BL/6 mice were randomized into vehicle and treatment groups. BI-78D3 was formulated in 10% DMSO + 90% corn oil and administered intraperitoneally at 50 mg/kg twice daily (12 hours apart). One hour after the second dose, mice were injected intraperitoneally with LPS (10 μg/mouse). Serum was collected 2 hours after LPS injection, and TNFα levels were measured by ELISA [1] Mouse CHS model: Female BALB/c mice were sensitized with 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB) on the abdomen on day 0. On day 5, mice were challenged with DNFB on the ears. BI-78D3 (30, 60 mg/kg) or vehicle was administered intraperitoneally twice daily from day 4 to day 6. Ear thickness was measured 24 hours after challenge, and ear tissues were collected for immunohistochemistry [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在为期 7 天的体内研究中，BI-78D3 剂量高达 60 mg/kg（腹腔注射，每日两次）时，未引起小鼠体重或毒性临床症状的显著变化[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4-(2,3-二氢-1,4-苯并二恶英-6-基)-3-[(5-硝基-2-噻唑基)硫代]-1H-1,2,4-三唑-5-酮是一种芳基硫醚。
BI-78D3 是一种新型变构抑制剂，靶向 JNK-JIP 相互作用位点，不同于 ATP 竞争性 JNK 抑制剂 [1] 其作用机制涉及阻断 JNK 的支架功能，从而抑制 JNK 介导的下游信号传导，而不影响 JNK 的催化活性 [1] 该化合物通过抑制促炎细胞因子的产生和炎症细胞的浸润，显示出治疗炎症性疾病的潜力 [1] |
| 分子式 |
C13H9N5O5S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
379.37
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| 精确质量 |
379.005
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| 元素分析 |
C, 41.16; H, 2.39; N, 18.46; O, 21.09; S, 16.90
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| CAS号 |
883065-90-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
2747117
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.922g/cm3
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| 沸点 |
705.721ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
380.606ºC
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| 折射率 |
1.879
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| LogP |
2.37
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| tPSA |
181.39
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
588
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1N(C2C=C3C(OCCO3)=CC=2)C(SC2SC([N+](=O)[O-])=CN=2)=NN1
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| InChi Key |
QFRLDZGQEZCCJZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H9N5O5S2/c19-11-15-16-12(25-13-14-6-10(24-13)18(20)21)17(11)7-1-2-8-9(5-7)23-4-3-22-8/h1-2,5-6H,3-4H2,(H,15,19)
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| 化学名 |
4-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-6-yl)-3-[(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)sulfanyl]-1H-1,2,4-triazol-5-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6359 mL | 13.1797 mL | 26.3595 mL | |
| 5 mM | 0.5272 mL | 2.6359 mL | 5.2719 mL | |
| 10 mM | 0.2636 mL | 1.3180 mL | 2.6359 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 In vitrocharacterization of pepJIP1 and BI-78D3.
Binding affinity data.Proc Natl Acad Sci U S A.2008 Oct 28;105(43):16809-13. |
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 Bioevaluation studies with BI-78D3.Proc Natl Acad Sci U S A.2008 Oct 28;105(43):16809-13. |
 Docking studies and NMR analysis.Proc Natl Acad Sci U S A.2008 Oct 28;105(43):16809-1 |
JNK-9L
JNK3 Recombinant Human Active Protein Kinase
JNK2 Recombinant Human Active Protein Kinase
JNK-IN-25
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463611831
