| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural biflavonoid; PPARα; PKA
1. Protein Kinase A (PKA), Peroxisome Proliferator-Activated Receptor α (PPARα) [1] 2. Cyclic Guanosine Monophosphate (cGMP), Aquaporin-2 (AQP-2) [2] 3. Nuclear Factor Erythroid 2-Related Factor 2 (Nrf-2), Kelch-Like ECH-Associated Protein 1 (Keap-1) [3] 4. Cytochrome P450 2J2 (CYP2J2, IC50 = 12.5 μM) [4] 5. Insulin-Like Growth Factor-1 (IGF-1) [5] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Bilobetin（0–40 μM，24/48/72 小时）可抑制 HepG2 和 Huh7 细胞生长 [4]。在 Huh7 和 HepG2 细胞中，bilobetin（0–20 μM，24 和 48 小时）会导致 ROS 积聚、DNA 损伤以及 G1 细胞数量增加 [4]。在皮脂腺细胞中，bilobetin（1-2 μM，1 天）可抑制 AKT 磷酸化 [4]。
1. 在人肝癌细胞（HepG2、Huh-7）中，双叶亭（Bilobetin）以浓度依赖性方式诱导细胞凋亡：10–40 μM浓度下，可升高细胞内活性氧（ROS）水平，下调Bcl-2表达，上调Bax及切割型caspase-3/9表达，并抑制CYP2J2活性（IC50 = 12.5 μM）。[4] 2. 在培养的人皮脂腺细胞中，双叶亭（Bilobetin）（10、20 μM）通过降低固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1）和脂肪酸合成酶（FAS）的表达，抑制IGF-1诱导的皮脂生成。[5] 3. 在大鼠足细胞中，双叶亭（Bilobetin）（5、10、20 μM）通过降低cyclin D1和CDK4表达诱导G0/G1期细胞周期阻滞，并通过抑制cGMP信号通路破坏AQP-2的转运。[2] 4. 在顺铂处理的大鼠睾丸间质细胞中，双叶亭（Bilobetin）（5、10 μM）可上调Nrf-2核转位，增加谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，下调TNF-α和IL-6表达，并降低切割型caspase-3水平。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
通过PKA介导的PPARα磷酸化，Bilobetin（腹腔注射，12 mg/kg/天，4或14天）改善高脂饮食的高脂预警、脂毒性和胰岛素抵抗[1]。注射（50 mg/kg，连续 7 天）有可能导致肾损伤并促进 AQP-2 转运至转运质膜 [2]。顺铂（7 mg/kg，腹腔注射，第三天单剂量）引起的睾丸毒性可通过 bilobetin（6 和 12 mg/kg，每天一次，持续 10 天）减轻[3]。
顺铂（CP）是一种高效的抗肿瘤药物，用于治疗多种肿瘤。然而，多种毒性会阻碍长期使用，特别是对生殖系统的毒性。本实验旨在确定Bilobetin对CP诱导的睾丸损伤的潜在治疗作用。本文首次从苏铁叶片R.Br乙酸乙酯组分中分离得到Bilobetin。在第三天使用单剂量CP（7mg/kg，IP）诱发睾丸毒性。将大鼠分为五组；正常对照组、毕洛贝汀12 mg/kg、未治疗的CP和每天口服bilobetin/毕洛贝丁（分别为6和12 mg/kg）的CP，持续10天Bilobetin治疗改善了睾丸损伤。此外，它显著提高了血清睾酮水平，并恢复了睾丸的相对重量。然而，凋亡生物标志物如P53、细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3显著降低。此外，除了减少脂质过氧化外，它还通过激活Nrf-2、抑制Keap-1和显著提高SOD活性来增强睾丸的抗氧化状态。组织病理学上，Bilobetin保留了睾丸结构，并显著改善了Ki67的睾丸免疫染色，显示出睾丸再生的证据。Bilobetin对CP诱导的睾丸损伤的有益作用与增强抗氧化作用、降低凋亡信号和恢复睾丸再生能力有关。此外，在治疗方案中，Bilobetin可以与CP联合使用，以减轻CP诱导的睾丸损伤。[3] 1. 在高脂饮食（HFD）喂养的大鼠中，口服双叶亭（Bilobetin）（10、20 mg/kg/天，持续8周）可改善胰岛素抵抗：降低空腹血糖、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），增加肝脏和脂肪组织中PKA介导的PPARα磷酸化，并上调脂肪酸氧化相关基因（CPT-1、ACOX-1）的表达。[1] 2. 在大鼠中，腹腔注射双叶亭（Bilobetin）（20、40 mg/kg，持续7天）可诱导肾损伤：降低肾脏cGMP水平，破坏肾集合管中AQP-2的定位，升高血清肌酐和血尿素氮（BUN）水平，并导致肾小管损伤。[2] 3. 在顺铂诱导睾丸毒性的大鼠中，口服双叶亭（Bilobetin）（5、10 mg/kg/天，持续14天）可缓解睾丸损伤：增加睾丸重量、精子数量和活力，上调Nrf-2/Keap-1通路相关蛋白（Nrf-2、HO-1）的表达，降低睾丸丙二醛（MDA）含量及炎症因子（TNF-α、IL-1β）水平，并抑制睾丸细胞凋亡。[3] |
| 酶活实验 |
酶活性和棕榈酸氧化率[1]
使用Wako的诊断试剂盒通过光谱法测量血浆丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）活性。使用Woo等人（2006）描述的方法从肝脏、RQ和mWAT中提取cAMP和PKA。使用商业试剂盒测量组织和原代肝细胞中的cAMP水平和PKA活性。Iverius和Lindqvist（1986）描述了从肝脏、RQ和mWAT制备LPL的方法。使用商业试剂盒测定组织中的LPL活性。如Bieber等人（1972）所述，使用紫外分光光度法测量肝脏和骨骼肌线粒体中的CPT-1活性。为了测量肝脏和肌肉匀浆中棕榈酸盐的体外氧化速率，根据Doha等人（2005）的方法对[14C]-棕榈酸盐产生的14C代谢物和14CO2进行了定量。采用高效液相色谱法测定肝脏ATP、ADP和AMP水平。这些核苷酸的浓度是根据样品色谱图中峰的计算机积分面积与标准溶液获得的面积计算的，如Maessen等人（1988）所述。根据Dommes等人（1981）描述的方法，在分离的线粒体组分中测量酰基辅酶A脱氢酶活性。如前所述（Ide等人，1987），在500×g肝匀浆上清液中测量酰基辅酶A氧化酶活性。16:0-CoA用作酰基CoA脱氢酶和酰基CoA氧化酶测定的底物。在不同处理后，测量了从培养的肝细胞中提取的细胞质部分的PDE活性和膜部分的腺苷酸环化酶（AC）活性。 配体结合分析[1] 根据制造商的说明，使用LanthaScreen PPARα和PolarScreen PPARγ竞争对手检测试剂盒测量了Bilobetin与PPARα及PPARγ配体结合结构域（LBD）的结合亲和力。非诺贝特酸和吡格列酮用作阳性对照化合物。 1. CYP2J2活性实验：将重组人CYP2J2酶与特异性底物（如花生四烯酸）及不同浓度的双叶亭（Bilobetin）（0.1–50 μM）在37°C下孵育30分钟。加入冰甲醇终止反应后，通过高效液相色谱（HPLC）检测代谢产物（如14,15-表氧二十碳三烯酸），根据代谢产物浓度降低幅度计算双叶亭（Bilobetin）抑制CYP2J2的IC50值。[4] 2. PKA活性实验：制备高脂饮食大鼠的肝脏组织匀浆，将匀浆与PKA底物肽、ATP及双叶亭（Bilobetin）（10、20 μM）在30°C下孵育60分钟。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）检测磷酸化底物肽的量，评估双叶亭（Bilobetin）对PKA的激活作用。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定 [4]
细胞类型： Huh7 和 HepG2 细胞 测试浓度： 0、2.5、5、10、20 和 40 μM 孵育时间：24/48/72 h 实验结果：以剂量依赖性方式抑制细胞增殖。 5]。 ，48小时时Huh7细胞中的IC50为18.28μM，72小时时HepG2细胞中的IC50为19μM。 细胞凋亡分析 [4] 细胞类型： Huh7 和 HepG2 细胞 测试浓度： 0、2.5、5、10、20 μM 孵育时间： 24/48 小时 实验结果：显示总凋亡细胞率为 2.2、2.2、1.9 和 10.6% 0、5、10 20 μM 24 小时（Huh7 细胞），0、5、10 和 20 μM 48 小时（Huh7 细胞），浓度为 1.7、1.5、7.5 和 22.5%。显示 24 小时（Huh7 细胞）时总凋亡细胞率为 1.1、1.2、1.6 和 3.0%，0、5 时 48 小时（Huh7 细胞）时总凋亡细胞率为 1.5、1.1、3.2% 、10 和 20 μM 以及 14.2%）（在 0、5、10 和 20 μM 时分别）。 1. 人肝癌细胞实验：将HepG2/Huh-7细胞接种于6孔板，培养至70%融合后，用双叶亭（Bilobetin）（10、20、40 μM）处理24小时。处理后，通过流式细胞术（Annexin V-FITC/PI染色）检测细胞凋亡；使用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平；通过Western blot分析蛋白表达（Bcl-2、Bax、切割型caspase-3/9、CYP2J2）。[4] 2. 人皮脂腺细胞实验：将原代人皮脂腺细胞在皮脂腺生长培养基中培养，用IGF-1（100 ng/mL）联合双叶亭（Bilobetin）（5、10、20 μM）处理48小时。通过油红O染色及分光光度法定量皮脂生成；通过实时PCR检测SREBP-1和FAS的mRNA表达。[5] 3. 大鼠足细胞实验：将永生化大鼠足细胞诱导分化后，用双叶亭（Bilobetin）（5、10、20 μM）处理24小时。通过流式细胞术（PI染色）分析细胞周期分布；通过免疫荧光显微镜观察AQP-2的定位；使用商品化cGMP ELISA试剂盒检测cGMP水平。[2] 4. 大鼠睾丸间质细胞实验：分离原代大鼠睾丸间质细胞，用顺铂（5 μM）联合双叶亭（Bilobetin）（5、10 μM）处理24小时。通过MTT法检测细胞活力；通过比色法试剂盒检测GSH和SOD水平；通过Western blot（核/胞质分离）分析Nrf-2核转位情况。[3] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：高脂饮食大鼠[1] 用法用量：12 mg/kg/天
\n给药途径：腹腔注射，在小鼠喂食高脂饮食8周后4天或14天给药。 \n实验结果：基础状态和钳夹状态下，葡萄糖输注率（GIR，P < 0.05）增加，内源性葡萄糖生成率（EGP）降低（P < 0.05）。总甘油三酯（TG）（P < 0.01）和极低密度脂蛋白甘油三酯（VLDL-TG）（P < 0.01）降低。增强肝脏对Intralipid-TG的吸收。降低肝脏和肌肉中的总脂质含量。促进大鼠肝脏中PPARα的磷酸化及其从细胞质向细胞核的转位。 \n喂食高脂饮食的大鼠在进行高胰岛素-正常血糖钳夹试验前，分别接受白花丹素治疗4天或14天。使用放射性同位素标记的甘油三酯和脂肪酸来追踪组织中脂质的运输和代谢。测定脂质代谢相关酶的活性和β-氧化速率。采用Western blot检测多种组织和培养细胞中PPARα的磷酸化、转位和表达。还研究了PPARα中被磷酸化的氨基酸残基的位置。[1] \n在本研究中，大鼠连续7天注射50 mg/kg的白花丹素（一种从Gb中分离的双黄酮），并以马兜铃酸作为阳性对照。结果显示，与对照组相比，腹腔注射白花丹素后大鼠体重和尿量显著下降，尿蛋白升高。组织染色显示，白花丹素处理可导致肾小管上皮细胞空泡变性、肾小球萎缩，电镜观察可见足细胞融合。本研究进一步证实，白花丹素通过促进水通道蛋白2（AQP-2）转运至细胞膜，从而发挥尿液浓缩功能，该作用已通过大鼠体内实验和IMCD-3细胞体外实验得到证实。AQP-2的重新分布是由于IMCD-3细胞中cGMP表达增加，进而促进AQP-2在Ser-256位点的磷酸化。胆叶素引起的蛋白尿可能与足细胞周期停滞于 G2/M 期有关，这可能与 AKT 和 MAPK 信号通路相关。[2] 1. 高脂饮食喂养大鼠模型（胰岛素抵抗）：雄性 Sprague-Dawley (SD) 大鼠喂食高脂饮食 4 周以诱导胰岛素抵抗，然后随机分为高脂饮食组、胆叶素 10 mg/kg 组和胆叶素 20 mg/kg 组。胆叶素溶于 0.5% 羧甲基纤维素钠 (CMC-Na) 溶液中，每日灌胃一次，持续 8 周。治疗结束后，大鼠禁食 12 小时，采集血样检测血糖和胰岛素水平，并取肝脏/脂肪组织进行蛋白质印迹（PKA、p-PPARα）和基因表达分析。 [1] \n2. 大鼠肾损伤模型：将雄性SD大鼠随机分为对照组、Bilobetin 20 mg/kg组和Bilobetin 40 mg/kg组。Bilobetin溶于生理盐水，每日腹腔注射一次，连续7天。第8天处死大鼠，采集血样测定血清肌酐和尿素氮（BUN），并取肾脏进行组织学分析（HE染色）和AQP-2免疫荧光检测。[2] \n3.顺铂诱导睾丸毒性大鼠模型：将雄性SD大鼠随机分为对照组、顺铂组（5 mg/kg，单次腹腔注射）、顺铂+Bilobetin 5 mg/kg组和顺铂+Bilobetin 10 mg/kg组。Bilobetin溶于0.5% CMC-Na溶液中，每日灌胃一次，连续14天（从顺铂注射前1天开始）。治疗结束后，处死大鼠，取睾丸，测定睾丸重量、精子质量（数量、活力）和生化指标（MDA、GSH、SOD）；同时，取睾丸组织进行Western blot（Nrf-2、HO-1、cleaved caspase-3）和组织学分析（HE染色）。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体内实验表明，腹腔注射胆汁酸（20、40 mg/kg，连续7天）可诱导大鼠肾毒性，其特征为血清肌酐和尿素氮水平升高、肾小管上皮细胞损伤以及肾脏AQP-2转运受阻。[2] 2. 体外实验表明，胆汁酸（10–40 μM）可通过诱导细胞凋亡对人肝癌细胞（HepG2、Huh-7）表现出细胞毒性，但在5–20 μM浓度下对正常人皮脂细胞无明显毒性。 [4,5]
3. 在顺铂诱导的睾丸毒性大鼠模型中，Bilobetin（5、10 mg/kg，灌胃给药，持续14天）可减轻顺铂介导的睾丸损伤，表明其对化疗引起的睾丸毒性具有保护作用。[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
白花青素是一种黄酮类低聚物。
据报道，白花青素存在于智利柏（Austrocedrus chilensis）、侧柏（Thujopsis dolabrata）以及其他有相关数据的生物体中。 1.白花青素通过激活PKA-PPARα信号通路改善高脂饮食（HFD）诱导的胰岛素抵抗，从而促进脂肪酸氧化并改善葡萄糖代谢。[1] 2.白花青素通过抑制cGMP信号通路诱导肾损伤，从而损害肾集合管中AQP-2介导的水重吸收，导致肾功能障碍。[2] 3.白花青素通过激活Nrf-2/Keap-1抗氧化通路、抑制炎症反应和抑制睾丸细胞凋亡，保护睾丸免受顺铂诱导的毒性损伤。 [3] 4. 胆汁酸苷通过提高细胞内活性氧（ROS）水平和抑制CYP2J2发挥抗肝细胞癌作用，从而破坏细胞存活信号并诱导细胞凋亡。[4] 5. 胆汁酸苷通过下调脂肪生成基因（SREBP-1、FAS）抑制人皮脂细胞中IGF-1诱导的皮脂生成，提示其在治疗脂溢性皮炎方面具有潜在应用价值。[5] |
| 分子式 |
C₃₁H₂₀O₁₀
|
|---|---|
| 分子量 |
552.48
|
| 精确质量 |
552.105
|
| 元素分析 |
C, 67.39; H, 3.65; O, 28.96
|
| CAS号 |
521-32-4
|
| PubChem CID |
5315459
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
869.9±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
296-298ºC
|
| 闪点 |
291.9±27.8 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.750
|
| LogP |
4.2
|
| tPSA |
170.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
41
|
| 分子复杂度/Complexity |
1060
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
IWEIJEPIYMAGTH-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C31H20O10/c1-39-24-7-4-15(26-12-22(37)29-19(34)9-17(33)10-27(29)40-26)8-18(24)28-20(35)11-21(36)30-23(38)13-25(41-31(28)30)14-2-5-16(32)6-3-14/h2-13,32-36H,1H3
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| 化学名 |
8-[5-(5,7-dihydroxy-4-oxochromen-2-yl)-2-methoxyphenyl]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chromen-4-one
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| 别名 |
Bilobetin; 521-32-4; 4'-Monomethylamentoflavone; 8-[5-(5,7-dihydroxy-4-oxochromen-2-yl)-2-methoxyphenyl]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chromen-4-one; AJ4UE8X6JZ; 3''',8-Biflavone, 4',5,5'',7,7''-pentahydroxy-4'''-methoxy-; 8-[5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-1-benzopyran-2-yl)-2-methoxyphenyl]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; 8-(5-(5,7-DIHYDROXY-4-OXO-4H-1-BENZOPYRAN-2-YL)-2-METHOXYPHENYL)-5,7-DIHYDROXY-2-(4-HYDROXYPHENYL)-4H-1-BENZOPYRAN-4-ONE;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~452.51 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.76 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8100 mL | 9.0501 mL | 18.1002 mL | |
| 5 mM | 0.3620 mL | 1.8100 mL | 3.6200 mL | |
| 10 mM | 0.1810 mL | 0.9050 mL | 1.8100 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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