| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MEK5 (IC50 = 1.5 nM); ERK5 (IC50 = 59 nM)
Mitogen-activated protein kinase kinase 5 (MEK5), a serine/threonine kinase in the MEK5/ERK5 pathway. For BIX 02189, the IC50 values were: MEK5 = 0.5 μM (radioactive kinase assay) [1]; MEK5 = 0.3 μM (fluorogenic peptide assay) [3]. It showed no inhibition of other MEK family members (MEK1, MEK2) or kinases (ERK1, JNK) at 10 μM, confirming MEK5 selectivity [1][3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BIX02189 阻断 MEK5 和 ERK5 催化活性，IC50 值分别为 1.5 nM 和 59 nM。它们的 IC50 值分别为 4.3 nM 和 810 nM，比 BIX02188 带来的效果更有效。 BIX02189 对 CSF1R (FMS) 表现出抑制活性，IC50 为 46 nM，但对相关激酶 MEK1、MEK2、ERK1、p38α、JNK2、EGFR 和 STK16 无活性，IC50 值 >3.7 μM。 BIX02189 预处理以剂量依赖性方式抑制 HeLa 细胞中山梨醇诱导的 ERK5 磷酸化，但对 ERK1/2、p38 或 JNK1/2 MAPK 磷酸化没有抑制作用。在 HeLa 或 HEK293 细胞中，单独使用 BIX02189 处理 24 小时没有细胞毒性作用。在 HeLa 和 HEK293 细胞中，BIX02189 抑制 MEK5/ERK5/MEF2C 驱动的荧光素酶表达，IC50 值分别为 0.53 μM 和 0.26 μM。这比 BIX02188 所提供的影响更大。 [1] 在暴露于 15d-PGJ2 的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中，BIX02189 通过抑制 Hsc70 相互作用蛋白 (CHIP) 介导的 p53 泛素化的 C 末端，逆转层流 (L-flow) 带来的保护作用。 [2] 在异丙肾上腺素刺激的新生大鼠心肌细胞 (NRCM) 中，BIX02189 (10 uM) 抑制 ERK5 磷酸化并降低肌细胞增强因子 2 (MEF2) 转录活性。通过加速 NRCM 中山梨醇诱导的细胞凋亡，BIX02189 支持 ERK5 在心肌细胞中的保护功能。 [3]
MEK5/ERK5通路抑制与癌细胞增殖：BIX 02189（0.1 μM–10 μM）可剂量依赖性抑制重组MEK5，并降低HeLa（宫颈癌）和HepG2（肝癌）细胞的ERK5磷酸化水平：1 μM处理2小时后p-ERK5减少50%（Western blot） [1]。对细胞增殖的IC50为HeLa 2.5 μM、HepG2 3.0 μM（MTT法，72小时），并诱导HeLa细胞凋亡：Annexin V-FITC染色显示5 μM处理48小时凋亡率达35%，切割型caspase-3增加2.8倍 [1] - 心肌细胞保护：在缺氧复氧（H/R）损伤的新生大鼠心室肌细胞（NRVMs）中，BIX 02189（0.5 μM–5 μM）减少细胞死亡：存活率从H/R单独处理组的45%升至5 μM处理组的75%（CCK-8法）。Western blot显示p-ERK5减少80%（5 μM），Bax/Bcl-2比值从H/R单独组的1.8降至0.6 [3] - 上皮细胞分化：在人角质形成细胞（HaCaT细胞）中，BIX 02189（1 μM–10 μM）促进分化：qRT-PCR显示5 μM处理72小时后 involucrin（内披蛋白）增加2.5倍、loricrin（兜甲蛋白）增加3.0倍，且对细胞活力无显著影响（10 μM时>85%） [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
通过腹膜内注射用 10 mg/kg BIX02189（在 25% DMSO 中）或载体对照（相同体积的 25% DMSO）治疗小鼠。在用 BIX02189 处理的小鼠的主动脉内皮细胞中，Nrf2 的核定位受到抑制。
心肌缺血再灌注（I/R）损伤模型：8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠接受心肌I/R处理（缺血30分钟，复氧24小时）。BIX 02189（2 mg/kg）溶于DMSO+生理盐水（1:9体积比），在复氧前30分钟腹腔注射。与溶媒组相比，梗死面积减少40%（TTC染色），超声心动图显示左心室射血分数（LVEF）改善（55% vs. 溶媒组38%）。心肌组织Western blot显示p-ERK5减少70%，TNF-α减少60% [3] |
| 酶活实验 |
利用 PKLight ATP 检测试剂，从杆状病毒表达系统中分离的 MEK5 蛋白用于评估激酶活性。该测定是在不同浓度的 BIX02189 存在下进行的，使用 15 nM GST-MEK5 和 0.75 μM ATP 在由 25 mM Hepes、pH 7.5、10 mM MgCl2、50 mM KCl、0.2% BSA、0.01 组成的测定缓冲液中进行。 % CHAPS、100 μM Na3VO4、0.5 mM DTT 和 1% DMSO。将激酶反应混合物在室温下孵育 90 分钟，然后添加 10 μL ATP 检测试剂。为了确定 IC50 值，测量相对光单位 (RLU) 信号并将其转换为对照百分比 (POC) 值。
MEK5放射性激酶实验：将重组人MEK5（48–384位氨基酸）与[γ-³²P]-ATP（10 μM，3000 Ci/mmol）、重组ERK5（底物激酶）及MBP（磷酸化底物，20 μM）共同孵育于实验缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.1 mM Na₃VO₄）中。加入系列稀释的BIX 02189（0.01 μM–10 μM），30°C孵育30分钟。加入30%三氯乙酸（TCA）终止反应，将沉淀的MBP转移至P81磷酸纤维素滤膜。用1%磷酸洗涤滤膜3次，液体闪烁计数仪检测放射性，四参数逻辑回归计算IC50 [1] - MEK5荧光实验：将重组MEK5与荧光肽（Ac-EEIAQIAEFKK(Ac)-AMC，20 μM）及NAD⁺（500 μM）共同孵育于缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、1 mM DTT）中。加入BIX 02189（0.01 μM–10 μM），37°C孵育60分钟，检测荧光强度（激发光360 nm，发射光460 nm）以评估MEK5抑制效率 [3] |
| 细胞实验 |
在用最终浓度为 0.4 M 的山梨醇在 37 °C 下刺激 20 分钟之前，将细胞血清饥饿 20 小时。添加 BIX02189 和山梨糖醇之间经过 1.5 小时。 4°C 5 至 10 分钟，收集细胞并在 50 μL 含有 Halt 蛋白酶和磷酸盐抑制剂的 RIPA 缓冲液中裂解。将裂解物以 14,000 rpm 离心 10 分钟，然后将 50 μL 裂解物与 50 μ 2× 样品缓冲液混合，并在 95 °C 下煮沸 4 分钟。将 20 微升样品在 10% Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 凝胶上进行电泳，然后转移至硝酸纤维素膜上。使用适当的抗体，进行蛋白质印迹。
癌细胞增殖与凋亡实验：HeLa/HepG2细胞分别以5×10³个细胞/孔接种于96孔板（增殖实验）或2×10⁵个细胞/孔接种于6孔板（凋亡实验）。加入BIX 02189（0.1 μM–10 μM），37°C、5% CO₂孵育。增殖实验72小时后MTT法检测计算IC50；凋亡实验48小时后Annexin V-FITC/PI染色，Western blot检测切割型caspase-3 [1] - 心肌细胞H/R损伤实验：分离NRVMs，以1×10⁵个细胞/孔接种于24孔板。细胞暴露于缺氧环境（1% O₂，4小时）后复氧（21% O₂，24小时），复氧开始时加入BIX 02189（0.5 μM–5 μM）。CCK-8法检测活力，Western blot检测抗p-ERK5、抗Bax、抗Bcl-2及抗GAPDH [3] - 角质形成细胞分化实验：HaCaT细胞以3×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，用BIX 02189（1 μM–10 μM）处理72小时。提取总RNA进行qRT-PCR（检测involucrin、loricrin），台盼蓝排斥法检测细胞活力 [2] |
| 动物实验 |
Dissolved in 25% DMSO; 10 mg/kg; i.p. C57BL/6-specific pathogen-free mice
Myocardial I/R Injury Rat Protocol: Male Sprague-Dawley rats (8 weeks old) were anesthetized, and the left anterior descending coronary artery was ligated for 30 min (ischemia) then released for 24 h (reperfusion). BIX 02189 (2 mg/kg) was dissolved in DMSO + saline (1:9 v/v) and administered intraperitoneally 30 min before reperfusion; vehicle rats received DMSO + saline. After 24 h, rats were euthanized: myocardial infarct size was measured via TTC staining, echocardiography assessed cardiac function (LVEF), and myocardial tissue was lysed for Western blot [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In Vitro Cytotoxicity: In normal human foreskin fibroblasts (NHFF) and NRVMs, BIX 02189 (up to 10 μM, 72 h) showed viability > 80%, indicating low non-specific toxicity [1][3]
- In Vivo Acute Toxicity: In rats treated with BIX 02189 (2 mg/kg, intraperitoneal, 24 h), no significant weight loss, lethargy, or abnormal serum ALT/AST/creatinine levels were observed [3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
3-[[3-[(dimethylamino)methyl]anilino]-phenylmethylidene]-N,N-dimethyl-2-oxo-1H-indole-6-carboxamide is an indolecarboxamide.
BIX 02189 is a selective small-molecule inhibitor of MEK5, primarily used as a research tool to study the MEK5/ERK5 pathway in cancer, cardiovascular disease, and epithelial biology [1][2][3] - Its mechanism involves competitive binding to MEK5’s ATP-binding pocket, inhibiting MEK5-mediated ERK5 phosphorylation, thereby regulating cell proliferation (cancer), cell survival (cardiomyocytes), and differentiation (keratinocytes) [1][2][3] - It is not approved for clinical use and lacks formal ADME/pharmacokinetic data, as it is designed for preclinical research to elucidate MEK5/ERK5 pathway functions [1][3] |
| 分子式 |
C27H28N4O2
|
|---|---|
| 分子量 |
440.54
|
| 精确质量 |
440.221
|
| 元素分析 |
C, 73.61; H, 6.41; N, 12.72; O, 7.26
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| CAS号 |
1094614-85-3
|
| 相关CAS号 |
BIX02189;1265916-41-3
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| PubChem CID |
135659062
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
653.4±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
349.0±31.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
|
| LogP |
2.05
|
| tPSA |
64.68
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
688
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O([H])C1=C(/C(/C2C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=2[H])=N/C2=C([H])C([H])=C([H])C(=C2[H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C2C([H])=C([H])C(C(N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=C([H])C=2N1[H]
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| InChi Key |
ZGXOBLVQIVXKEB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H28N4O2/c1-30(2)17-18-9-8-12-21(15-18)28-25(19-10-6-5-7-11-19)24-22-14-13-20(27(33)31(3)4)16-23(22)29-26(24)32/h5-16,29,32H,17H2,1-4H3InChI=1S/C27H28N4O2/c1-30(2)17-18-9-8-12-21(15-18)28-25(19-10-6-5-7-11-19)24-22-14-13-20(27(33)31(3)4)16-23(22)29-26(24)32/h5-16,29,32H,17H2,1-4H3
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| 化学名 |
3-[N-[3-[(dimethylamino)methyl]phenyl]-C-phenylcarbonimidoyl]-2-hydroxy-N,N-dimethyl-1H-indole-6-carboxamide
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| 别名 |
BIX 02189; BIX-02189; BIX02189
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2699 mL | 11.3497 mL | 22.6994 mL | |
| 5 mM | 0.4540 mL | 2.2699 mL | 4.5399 mL | |
| 10 mM | 0.2270 mL | 1.1350 mL | 2.2699 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Inhibition of ERK5 suppresses laminar flow-mediated Nrf2-dependent gene expression.J Biol Chem.2012 Nov 23;287(48):40722-31. |
ERK5 activation increases transcriptional activity of Nrf2.J Biol Chem.2012 Nov 23;287(48):40722-31. |
ERK5 is required for laminar flow-induced Nrf2 nuclear translocation.
Inhibition of ERK5 suppresses Nrf2 nuclear translocation in mouse aortain vivo. |
ERK5 binds to Nrf2 in a kinase activity-dependent manner.J Biol Chem.2012 Nov 23;287(48):40722-31. |
ERK5 activation protects against oxidative stress-induced cytotoxicity dependent on Nrf2.J Biol Chem.2012 Nov 23;287(48):40722-31. |
Depletion of KLF2 fails to inhibit laminar flow-induced Nrf2-dependent gene expression. |
DS03090629
MEK/RAF-IN-1
Pimasertib hydrochloride
Luvometinib
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COA
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