Bleomycin Sulfate   中文名称: 硫酸博莱霉素

DNA/RNA Synthesis

体外活性：UT-SCC-12A 和 UT-SCC-12B 对硫酸博莱霉素的耐药性更强，IC50 分别为 14.2 nM 和 13 nM。肺泡巨噬细胞与 0.01 μg/mL 至 1μg/mL 硫酸博莱霉素一起孵育 18 小时，比未与硫酸博来霉素孵育的巨噬细胞分泌显着更多的成纤维细胞生长因子。即使在去除硫酸博莱霉素并更换为新鲜（不含硫酸博莱霉素）培养基后，用硫酸博莱霉素刺激的巨噬细胞仍会继续产生大量的成纤维细胞生长因子。硫酸博来霉素刺激的肺泡巨噬细胞分泌的成纤维细胞生长因子被放线菌酮、5-脂氧合酶抑制剂 NDGA（去甲二氢愈创木酸）和 BW755c 抑制，表明不仅需要蛋白质合成，还需要花生四烯酸 5-脂氧合酶途径的代谢物酸代谢以充分表达活性。博莱霉素硫酸盐 (400 µg/mL) 孵育 24 小时会降低 NTera-2 细胞的活力，并增加 caspase-3、-8 和 -9 活性、Bax 和细胞质细胞色素 c 水平，并降低 Bcl-2 水平。就不稳定畸变而言，硫酸博莱霉素对 ADIPO-P2 细胞的致畸作用在暴露后持续至少 10 天。硫酸博莱霉素引起的哺乳动物细胞端粒不稳定在暴露后持续数代。此外，治疗10天后暴露于硫酸博莱霉素的细胞中端粒融合的出现表明硫酸博莱霉素可以诱导延迟性端粒不稳定性。细胞测定：ADIPO-P2 细胞在补充有 20% 胎牛血清、青霉素 (100 U/mL) 和链霉素 (100 μg/mL) 的 D-MEM 高葡萄糖培养基中在 37 °C 和 5% CO2 气氛下生长。细胞在含有 1.5 × 105 个细胞/mL 的 TC25 Corning 烧瓶中作为单层培养。对于每个实验，设置两个烧瓶，一个用于对照，一个用于处理的培养物。在对数生长期，ADIPO-P2 细胞用 2.5 μg/mL 硫酸博莱霉素脉冲处理 30 分钟。平行建立对照培养物，但不暴露于硫酸博莱霉素。硫酸博来霉素的暴露时间和浓度是根据我们实验室之前对暴露于硫酸博来霉素的哺乳动物细胞进行的研究来选择的。在用硫酸博莱霉素脉冲处理结束时，用Hanks平衡盐溶液洗涤细胞两次，并用新鲜培养基保持培养直至收获。处理后细胞在5次传代或传代培养期间持续维持在培养物中。每当培养物汇合时就进行传代培养（大约 4 × 105 个细胞/mL 培养基）。为了估计细胞生长，在传代培养时通过胰蛋白酶消化收集细胞，用0.4％台盼蓝染色的约200μL的等分试样，并测定活细胞的数量。然后将细胞悬浮在新鲜的培养基中，并分配到含有 1 × 105 个细胞/mL 的新培养瓶中继续生长。其余细胞被丢弃或分配到另一个烧瓶中进行细胞遗传学分析，该分析在处理结束后18小时和10天进行。为了分析染色体畸变，在培养的最后 3 小时将秋水仙碱 (0.1 μg/mL) 添加到细胞培养物中。染色体制剂按照标准程序进行。收获后，对细胞进行低渗休克，固定在甲醇:乙酸 (3:1) 中，铺在载玻片上并进行 PNA-FISH 处理。进行了两个独立的实验。

使用硫酸博来霉素后第 7 天，NOX-/- 中 BALf 中的 CD45+ 细胞是 WT 的 1.7 倍，其中 57% 是 Mf，到第 21 天，WT 中减少 67%，NOX-/- 中减少 83%。

ADIPO-P2细胞在37°C、5% CO₂气氛下在D-MEM高葡萄糖培养基中培养，补充有20%胎牛血清、青霉素(100 U/mL)和链霉素( 100 微克/毫升）。 1.5 × 10⁵ 细胞/mL 在 TC25 Corning 烧瓶中作为单层培养。每个实验设置两个烧瓶：一个用于处理的培养物，另一个用于对照。 ADIPO-P2 细胞在对数生长期暴露于 2.5 μg/mL 硫酸博来霉素脉冲 30 分钟。作为对照的平行培养物不接受硫酸博莱霉素。硫酸博莱霉素暴露的持续时间和浓度是根据我们实验室在哺乳动物细胞中进行的使用硫酸博莱霉素暴露的早期研究来选择的。硫酸博莱霉素脉冲处理完成后，用汉克平衡盐溶液洗涤两次，然后用新鲜培养基维持细胞培养直至收获。处理后，细胞连续培养五次或传代。当培养物达到汇合（大约 4 × 10⁵ 细胞/mL 培养基）时，进行传代培养。继代培养时，通过胰蛋白酶消化收集细胞，并通过用 0.4% 台盼蓝染色约 200 μL 的等分试样来确定活细胞的数量。该过程可以估计细胞生长。随后，将细胞悬浮在新的培养基中，并以1×10⁵5细胞/mL的密度添加到新鲜的培养瓶中继续生长。处理结束后，剩余的细胞要么被扔掉，要么转移到另一个烧瓶中进行细胞遗传学分析，该分析在 18 小时零 10 天后进行。在培养的最后三个小时将秋水仙碱 (0.1 μg/mL) 添加到细胞培养物中以分析染色体畸变。制备染色体时遵循标准方案。收获后，细胞经历低渗休克，固定在 3:1 甲醇:乙酸溶液中，铺在载玻片上，然后进行 PNA-FISH 处理。进行了两个单独的实验。

Male Fischer 344 rats, 8-10 week old, weighing 150-250 g
3.5-4 mg/kg
Intra-tracheal

[1]. Acta Otolaryngol Suppl . 1997:529:241-4.

[2]. Am J Pathol . 1989 Feb;134(2):355-63.

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[8]. Mol Cytogenet . 2016 Jun 21:9:49.

C55H85N17O25S4

1512.62

1511.48

C, 43.67; H, 5.66; N, 15.74; O, 26.44; S, 8.48

9041-93-4

Solid powder

CC1=C(N=C(N=C1N)C(CC(=O)N)NCC(C(=O)N)N)C(=O)NC(C(C2=CN=CN2)O[C@H]3[C@H]([C@H]([C@@H]([C@@H](O3)CO)O)O)O[C@@H]4[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O4)CO)O)OC(=O)N)O)C(=O)NC(C)C(C(C)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NCCC5=NC(=CS5)C6=NC(=CS6)C(=O)NCCC[S+](C)C)O.OS(=O)(=O)[O-]

WUIABRMSWOKTOF-OCBSMOPSSA-N

InChI=1S/C55H83N17O21S3.H2O4S/c1-20-33(69-46(72-44(20)58)25(12-31(57)76)64-13-24(56)45(59)82)50(86)71-35(41(26-14-61-19-65-26)91-54-43(39(80)37(78)29(15-73)90-54)92-53-40(81)42(93-55(60)88)38(79)30(16-74)89-53)51(87)66-22(3)36(77)21(2)47(83)70-34(23(4)75)49(85)63-10-8-32-67-28(18-94-32)52-68-27(17-95-52)48(84)62-9-7-11-96(5)6;1-5(2,3)4/h14,17-19,21-25,29-30,34-43,53-54,64,73-75,77-81H,7-13,15-16,56H2,1-6H3,(H13-,57,58,59,60,61,62,63,65,66,69,70,71,72,76,82,83,84,85,86,87,88);(H2,1,2,3,4)/t21?,22?,23?,24?,25?,29-,30+,34?,35?,36?,37+,38+,39-,40-,41?,42-,43-,53+,54-;/m0./s1

3-[[2-[2-[2-[[2-[[4-[[2-[[6-amino-2-[3-amino-1-[(2,3-diamino-3-oxopropyl)amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[(2R,3S,4S,5S,6S)-3-[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-carbamoyloxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxy-2-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]ethyl]-1,3-thiazol-4-yl]-1,3-thiazole-4-carbonyl]amino]propyl-dimethylsulfanium;hydrogen sulfate

NSC-125066; BLEO; BLM; NSC 125066; BLEO cell; BLEO-cell; NSC125066; BLEOcell; Bleolem; Bleomycin sulfate; Trade name: Blenoxane. Blanoxan

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Solubility in Formulation 1: ≥ 2.08 mg/mL (Infinity mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 20.8 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL.
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution.

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Solubility in Formulation 2: ≥ 2.08 mg/mL (Infinity mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 20.8 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly.
Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution.

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Solubility in Formulation 3: ≥ 2.08 mg/mL (Infinity mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 20.8 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly.

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Solubility in Formulation 4: Saline: 30 mg/mL

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Solubility in Formulation 5: 100 mg/mL (Infinity mM) in PBS (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution; with ultrasonication (<60°C).

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Solubility in Formulation 6: 100 mg/mL (Infinity mM) in Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution; with ultrasonication.
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution.

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。