| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
- Bradykinin B2 receptor (expressed in colorectal cancer cells, vascular endothelial cells, and ovarian sensory afferents) [2,3,4,5]
- eNOS (endothelial Nitric Oxide Synthase)/PI3K (Phosphoinositide 3-Kinase)/Akt signaling pathway proteins (target for thrombosis inhibition) [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
缓激肽是一种强大的血管舒张肽，通过激活某些内皮 B2 受体导致前列环素、NO 和 EDHF 的释放 [1]。缓激肽在许多恶性肿瘤的发展中发挥作用。缓激肽治疗会增加缓激肽，进而激活 ERK1/2 并产生 IL-6 [2]。外源缓激肽以剂量依赖性方式显着抑制 LPS 诱导的 TF 的 mRNA 和表达水平。缓激肽对组织因子表达的抑制作用被PI3K偶联剂LY294002和合酶拮抗剂L-NAME大大降低[3]。
- 刺激结直肠癌细胞分泌IL-6：人结直肠癌细胞HT-29经缓激肽（10 nM、100 nM）处理24 h后，IL-6分泌量显著增加。100 nM浓度下，培养上清中IL-6浓度为对照组的2.3倍（P < 0.01），该效应可被B2受体拮抗剂HOE-140（1 μM）预处理完全阻断 [2] - 促进结直肠癌细胞侵袭：缓激肽（10 nM、100 nM）在Transwell实验中增强HT-29细胞的侵袭能力。100 nM 缓激肽组的侵袭细胞数为对照组的1.8倍（P < 0.01），HOE-140（1 μM）预处理可消除该侵袭促进效应 [2] - 激活血管内皮细胞eNOS/PI3K/Akt通路：人脐静脉内皮细胞（HUVECs）经缓激肽（100 nM）孵育30 min后，Akt（Ser473）和eNOS（Ser1177）的磷酸化水平分别为对照组的2.1倍和1.9倍。PI3K抑制剂LY294002（10 μM）预处理可使缓激肽诱导的Akt和eNOS磷酸化水平降低70%以上 [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当使用1μM缓激肽评估妊娠时，平均动脉压显着下降，并可见心功能减退。当1μM缓激肽给予迷走神经切断术大鼠时，会引起心力减退和低血压，这与迷走神经切断术期间发生的反应相同[4]。在严重急性胰腺炎的情况下，缓激肽可减少出血和缺血性微循环。缓激肽治疗组的胰腺微循环血流量和流速在 48 小时内稳步增加 [5]。 Akt 信号放大器的激活通过降低细胞核中 NF-x03BA;B 的水平并降低 GSK-3β 和 MAPK 的活性来抑制 TF 表达。与此相符，腹腔注射缓激肽至C57/BL6小鼠具有阻止下腔静脉结扎引起的血栓形成的能力[3]。
- 介导人体ACE抑制剂的扩血管效应：向健康志愿者静脉注射缓激肽（100 ng/kg），前臂血流量（FBF）较基础水平增加40%。用B2受体拮抗剂icatibant（10 μg/kg）预处理后，ACE抑制剂依那普利拉诱导的FBF增加效应降低60%，证实缓激肽是ACE抑制剂血管效应的关键介导因子 [1] - 抑制大鼠深静脉血栓（DVT）形成：对下腔静脉结扎诱导DVT的雄性SD大鼠（250–300 g），静脉注射缓激肽（1 μg/kg，每日2次，连续3天）。与生理盐水对照组相比，缓激肽组血栓重量减少35%，血管组织中组织因子（TF）蛋白表达降低40%，主动脉eNOS活性提高50% [3] - 诱导大鼠卵巢来源的心血管反射：经乌拉坦麻醉的雌性SD大鼠（200–220 g），腹腔注射缓激肽（10 μg/kg）后，心率较给药前降低20%，平均动脉压降低15%。手术切断双侧迷走神经后，缓激肽诱导的该反射完全消失 [4] - 改善重症急性胰腺炎（SAP）大鼠的胰腺微循环：对雨蛙素（50 μg/kg，每1小时腹腔注射1次，共7次）诱导SAP的雄性Wistar大鼠（280–320 g），在SAP模型建立后1小时静脉注射缓激肽（5 μg/kg）。给药24小时后，缓激肽组胰腺微循环血流量（激光多普勒血流仪检测）增加30%，全血黏度降低25%，胰腺组织病理损伤评分降低40% [5] |
| 酶活实验 |
- 主动脉组织eNOS活性测定：大鼠主动脉组织在含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的冰浴裂解缓冲液中匀浆，4°C下12,000 × g离心20 min收集上清。eNOS活性测定体系包含50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、1 mM NADPH、10 μM四氢生物蝶呤、1 μM FAD、1 μM FMN和50 μL组织上清。加入L-精氨酸（终浓度100 μM）启动反应，37°C孵育30 min后，用硝酸盐/亚硝酸盐检测试剂盒测定NO（eNOS催化产物）生成量，eNOS活性以nmol NO/(mg蛋白·h)计算 [3]
- 细胞培养上清IL-6 ELISA测定：收集缓激肽处理后的HT-29细胞培养上清，3,000 × g离心10 min去除细胞碎片。采用特异性夹心ELISA试剂盒检测IL-6浓度：向抗体包被的微孔板每孔加入100 μL上清或IL-6标准品，37°C孵育1小时后洗涤5次；依次加入生物素化检测抗体和辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，孵育洗涤后加入底物液，测定450 nm吸光度，根据标准曲线计算IL-6浓度 [2] |
| 细胞实验 |
- 结直肠癌细胞培养与IL-6检测：人结直肠癌细胞HT-29培养于含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的RPMI 1640培养基，37°C、5% CO₂培养箱中培养。细胞以5×10⁵个/孔接种于6孔板，长满70%–80%后，向培养基中加入缓激肽（PBS溶解，终浓度10 nM、100 nM）；对照组加PBS，拮抗剂组在加缓激肽前用HOE-140（1 μM）预处理30分钟。孵育24小时后，收集培养上清用于IL-6 ELISA检测 [2]
- Transwell细胞侵袭实验：HT-29细胞在无血清RPMI 1640培养基中饥饿12小时，重悬为1×10⁵个/mL的细胞悬液。Transwell小室（预包被Matrigel）上室加入200 μL含缓激肽（10 nM或100 nM）的细胞悬液，下室加入600 μL含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基。37°C孵育48小时后，用棉签擦去上室未侵袭细胞，下室侵袭细胞用4%多聚甲醛固定15分钟、0.1%结晶紫染色10分钟，光学显微镜下计数（每孔随机5个视野） [2] - HUVEC培养与eNOS/Akt磷酸化Western blot检测：人脐静脉内皮细胞（HUVECs）培养于EGM-2培养基，37°C、5% CO₂培养箱中培养。细胞接种于6孔板至80%融合后，无血清培养基饥饿6小时，加入缓激肽（100 nM）处理30分钟；抑制剂组提前1小时用LY294002（10 μM）预处理。细胞用RIPA缓冲液裂解，BCA法测蛋白浓度，等量蛋白经SDS-PAGE电泳、转膜后，用抗p-Akt（Ser473）、Akt、p-eNOS（Ser1177）、eNOS及β-肌动蛋白一抗孵育，二抗孵育后ECL显影，ImageJ定量条带灰度 [3] |
| 动物实验 |
大鼠深静脉血栓形成模型及缓激肽给药：雄性SD大鼠（250-300 g）用戊巴比妥钠（40 mg/kg，腹腔注射）麻醉。暴露下腔静脉，并在肾静脉下方结扎以诱导深静脉血栓形成。结扎后立即经尾静脉向实验组静脉注射缓激肽（1 μg/kg，溶于生理盐水）；对照组注射等体积的生理盐水。缓激肽每日给药两次，连续3天。实验第4天，处死大鼠，取下腔静脉，用于测量血栓重量、检测血管组织因子（TF）蛋白表达以及测定主动脉内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性[3]
- 大鼠卵巢心血管反射实验：雌性SD大鼠（200-220 g）用氨基甲酸乙酯（1.2 g/kg，腹腔注射）麻醉。插入颈动脉导管监测平均动脉压，并放置心电图电极记录心率。通过腹部正中切口暴露卵巢。将缓激肽（10 μg/kg，溶于生理盐水）注射到卵巢附近的腹腔内。对于迷走神经切断组，在注射缓激肽前切断双侧迷走神经。注射缓激肽后记录30分钟的血流动力学参数[4] - 大鼠急性胰腺炎模型及缓激肽治疗：雄性Wistar大鼠（280–320 g）禁食12小时，可自由饮水。通过腹腔注射胰泌素（50 μg/kg），每1小时一次，共7次，诱导急性胰腺炎。最后一次注射胰泌素1小时后，缓激肽组经尾静脉注射缓激肽（5 μg/kg，溶于生理盐水）；对照组注射生理盐水。缓激肽给药24小时后，使用激光多普勒血流仪测量胰腺微循环血流量。随后对大鼠实施安乐死，采集血液用于全血粘度检测，并采集胰腺组织用于病理评分[5] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
缓激肽是一种线性九肽信使，属于激肽类蛋白质，氨基酸序列为RPPGFSPFR。它由血液中的激肽酶促生成，是一种强效血管扩张剂，可引起平滑肌收缩，并可能介导炎症。缓激肽是人血清代谢产物和血管扩张剂。它是缓激肽(2+)的结合碱。
缓激肽已被用于高血压和2型糖尿病的基础科学研究和治疗。 据报道，欧洲林蛙(Rana temporaria)和欧洲林蛙(Pelophylax lessonae)中含有缓激肽，并有相关数据。 缓激肽是一种九肽信使，由血液中的激肽酶促生成，是一种强效但作用短暂的动脉扩张剂和毛细血管通透性增加剂。缓激肽在哮喘发作期间由肥大细胞释放，作为胃肠道血管扩张剂由肠壁释放，作为疼痛信号由受损组织释放，并且可能是一种神经递质。 - 内源性肽背景：缓激肽是一种由9个氨基酸组成的内源性肽，由激肽释放酶作用于激肽原生成。它是炎症反应、血管调节和疼痛信号传导的关键介质[1,2,3] - ACE抑制剂介导的血管舒张机制：ACE（血管紧张素转换酶）将缓激肽降解为无活性代谢物。 ACE抑制剂可阻断这种降解，从而提高内源性缓激肽水平，进而激活B2受体，诱导血管舒张并增加血流量[1] - 疾病中的双重作用：在癌症中，缓激肽通过刺激IL-6的产生和癌细胞侵袭（经由B2受体）来促进肿瘤进展[2]。在心血管疾病和炎症性疾病中，它发挥保护作用，例如通过激活eNOS/PI3K/Akt通路抑制血栓形成，以及改善重症急性胰腺炎（SAP）患者的胰腺微循环[3,5] - 受体依赖性：缓激肽的大多数生物学效应均由B2受体介导，体外和体内实验均表明，B2受体拮抗剂（例如HOE-140、icatibant）可消除其作用[1,2,4] |
| 分子式 |
C57H81N13O12.C2HO2F3
|
|---|---|
| 分子量 |
1254.35628
|
| 精确质量 |
1059.561
|
| CAS号 |
58-82-2
|
| 相关CAS号 |
biotin-Bradykinin;477319-71-4
|
| PubChem CID |
439201
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 熔点 |
170ºC
|
| 折射率 |
1.693
|
| LogP |
-0.82
|
| tPSA |
413.78
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
12
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
14
|
| 可旋转键数目(RBC) |
27
|
| 重原子数目 |
76
|
| 分子复杂度/Complexity |
2080
|
| 定义原子立体中心数目 |
8
|
| SMILES |
C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC3=CC=CC=C3)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N4CCC[C@H]4C(=O)N[C@@H](CC5=CC=CC=C5)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O
|
| InChi Key |
QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C50H73N15O11/c51-32(16-7-21-56-49(52)53)45(72)65-25-11-20-39(65)47(74)64-24-9-18-37(64)43(70)58-28-40(67)59-34(26-30-12-3-1-4-13-30)41(68)62-36(29-66)46(73)63-23-10-19-38(63)44(71)61-35(27-31-14-5-2-6-15-31)42(69)60-33(48(75)76)17-8-22-57-50(54)55/h1-6,12-15,32-39,66H,7-11,16-29,51H2,(H,58,70)(H,59,67)(H,60,69)(H,61,71)(H,62,68)(H,75,76)(H4,52,53,56)(H4,54,55,57)/t32-,33-,34-,35-,36-,37-,38-,39-/m0/s1
|
| 化学名 |
(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-1-[(2S)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ≥ 100 mg/mL (~94.32 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (94.32 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7972 mL | 3.9861 mL | 7.9722 mL | |
| 5 mM | 0.1594 mL | 0.7972 mL | 1.5944 mL | |
| 10 mM | 0.0797 mL | 0.3986 mL | 0.7972 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
