| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bromosporine is a promiscuous bromodomain inhibitor with high affinity for multiple bromodomain-containing proteins. It potently inhibits the bromodomains (BD1 and BD2) of the BET family (BRD2, BRD3, BRD4, BRDT) with IC50 values ranging from 10 to 100 nM in homogeneous time-resolved fluorescence (HTRF) assays. It also inhibits other bromodomains including CBP (IC50 ~80 nM), p300 (IC50 ~120 nM), and PCAF (IC50 ~100 nM), but with slightly lower potency compared to BET bromodomains [3]
- Bromosporine specifically targets the PCAF bromodomain, with an IC50 of approximately 50 nM in HTRF binding assays. It shows minimal activity against non-bromodomain enzymes (e.g., kinases, phosphatases) with IC50 values >10,000 nM [2] - Bromosporine exerts its biological effects primarily by inhibiting BET bromodomains (especially BRD4), which mediates the regulation of oncogenes (e.g., c-Myc) and HIV-1 latency-related genes [1, 4] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
溴孢菌素（0-1000 nM；72 小时）与 5-FU 协同作用，减少 CRC 细胞的增殖 [1]。溴孢菌素（不同浓度；48 小时）与 5-FU 联合使用会导致停滞在 G1 期的细胞数量显着增加 [1]。溴孢菌素（不同浓度；48 小时）可降低 PARP、caspase 3 和 9 的表达 [1]。 Bromosporine（0.1、0.5 和 1 μM；6-10 天）以剂量依赖性方式抑制 AML 细胞 [3]。溴孢菌素（2.5 μM；72 小时）在体外触发潜伏 HIV-1 J-Lat 克隆 C11 细胞中的 HIV-1 复制 [4]。溴孢菌素（1-50 μM；48 小时）不会对原代 CD4+ T 细胞产生显着毒性 [4]。
Bromosporine可增强5-氟尿嘧啶（5-FU）对结直肠癌细胞的毒性。在HCT116和SW480结直肠癌细胞中，单独使用Bromosporine（1、5 μM）可使细胞活力下降15%-30%，单独使用5-FU（10、50 μM）可使细胞活力下降20%-40%；二者联合使用时，HCT116细胞活力下降65%（5 μM Bromosporine + 50 μM 5-FU），SW480细胞活力下降60%（同浓度组合）。流式细胞术（Annexin V-FITC/PI染色）显示，联合处理组HCT116细胞的凋亡率从溶媒组的8%升至35%；Western blot结果显示，联合组c-Myc蛋白表达较单独5-FU组下调70% [1] - Bromosporine通过抑制PCAF调控转录并抑制癌细胞增殖。在转染PCAF响应性荧光素酶报告质粒的HeLa细胞中，Bromosporine（0.1-10 μM）呈剂量依赖性抑制荧光素酶活性，IC50约为50 nM。在MCF-7乳腺癌细胞中，10 μM Bromosporine处理后，PCAF靶基因表达下调（p21 mRNA下降45%、cyclin D1 mRNA下降50%），72小时后细胞增殖率下降40%（CCK-8实验）[2] - Bromosporine通过靶向BET蛋白抑制白血病细胞增殖。在K562（慢性髓系白血病）和MV4-11（急性髓系白血病）细胞中，Bromosporine（5、20 μM）处理48小时后，K562细胞增殖率分别下降30%和55%，MV4-11细胞增殖率分别下降35%和60%。qPCR结果显示，20 μM Bromosporine可下调BET靶基因：K562细胞中c-Myc mRNA下降65%、Bcl-2 mRNA下降55%；MV4-11细胞中c-Myc mRNA下降70%、Bcl-2 mRNA下降60% [3] - Bromosporine可激活潜伏HIV-1感染细胞中的病毒复制。在J-Lat 10.6细胞（HIV-1潜伏模型，含GFP报告基因）中，Bromosporine（1、5、10 μM）处理后，GFP阳性细胞比例分别为15%、40%和65%；与已知HIV-1激活剂prostratin（100 nM）联合使用时，5 μM Bromosporine可使GFP阳性细胞比例协同升至85%（单独Bromosporine组为40%、单独prostratin组为30%）。Western blot证实联合组HIV-1 Gag蛋白表达增加 [4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
溴孢菌素（100 mg/kg；腹腔注射；每天一次，持续 10 天）与 5-FU 联合使用比单独使用时显示出更优异的抗肿瘤效果 [1]。
Bromosporine在结直肠癌裸鼠移植瘤模型中增强5-FU的抗肿瘤效果。将BALB/c nu/nu裸鼠（6-8周龄）皮下注射HCT116细胞（5×106个/只）建立移植瘤模型，当肿瘤体积达~100 mm³时，将小鼠随机分为4组（n=6/组）：溶媒组（10% DMSO + 90%生理盐水）、Bromosporine单独组（20 mg/kg，腹腔注射（ip），每日1次（qd））、5-FU单独组（50 mg/kg，ip，隔日1次（qod））、联合组（Bromosporine 20 mg/kg ip qd + 5-FU 50 mg/kg ip qod）。治疗21天后，联合组肿瘤体积较溶媒组减少75%（Bromosporine单独组减少25%、5-FU单独组减少35%）；所有治疗组均未观察到显著体重下降或肝、肾器官毒性 [1] - Bromosporine在白血病小鼠模型中降低肿瘤负荷并延长生存期。将C57BL/6小鼠（6-8周龄）经尾静脉注射K562细胞（1×106个/只）诱导白血病，注射后3天开始，小鼠随机分为2组（n=8/组）：溶媒组（10% DMSO + 90%生理盐水，ip，qd）、Bromosporine组（15 mg/kg，ip，qd）。第14天，骨髓分析显示Bromosporine组肿瘤细胞浸润较溶媒组减少50%；小鼠中位生存期从溶媒组的21天延长至Bromosporine组的35天 [3] |
| 酶活实验 |
基于HTRF的BET家族溴结构域结合实验：在大肠杆菌中表达人源BET家族溴结构域（BRD2 BD1/BD2、BRD3 BD1/BD2、BRD4 BD1/BD2、BRDT BD1/BD2），通过亲和层析纯化。实验在384孔板中进行（总体系20 μL），包含50 nM GST标签标记的溴结构域蛋白、20 nM荧光标记乙酰化组蛋白H4肽（FAM-H4K5ac/K8ac/K12ac/K16ac）及系列浓度的Bromosporine（0.001-1000 nM）。混合物在室温孵育1小时后，加入10 μL抗GST-Tb穴状化合物抗体，使用酶标仪检测HTRF信号（FAM与Tb穴状化合物之间的荧光共振能量转移），通过四参数逻辑模型拟合量效曲线计算IC50值 [3]
- 基于HTRF的PCAF溴结构域结合实验：纯化人源PCAF溴结构域（728-832位氨基酸），采用与BET实验类似的HTRF方法，但使用荧光标记乙酰化组蛋白H3肽（FAM-H3K14ac）。实验条件为40 nM PCAF溴结构域、15 nM FAM-H3K14ac及0.01-1000 nM的Bromosporine，孵育和信号检测步骤与BET实验一致，测得PCAF的IC50约为50 nM [2] - BRD4 BD2的表面等离子体共振（SPR）实验：通过胺偶联法将重组BRD4 BD2蛋白固定在CM5传感芯片上（表面密度约180响应单位（RU））。将Bromosporine用运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20）配制为0.03、0.1、0.3、1、3、10 μM的浓度，以30 μL/min的流速注入芯片表面，监测120秒的结合相和300秒的解离相，每次注射后用10 mM甘氨酸-HCl（pH 2.5）再生芯片。通过1:1朗缪尔结合模型拟合传感图，计算得平衡解离常数（KD）约为25 nM [3] |
| 细胞实验 |
细胞增殖测定[1]
细胞类型： HCT116 和 HT29 测试浓度： 0、30、60、120、240、480 和 1000 nM 孵育时间： 72 小时 实验结果：与 5-FU (0-16 μg/mL) 协同抑制 CRC 细胞的细胞生长，并证明了一定剂量依赖方式。 细胞周期分析[1] 细胞类型： HCT116 和 HT29 测试浓度： 各种浓度 孵育持续时间： 48 小时 实验结果：与 5 -FU 结合时，导致 G1 期停滞的细胞明显增加。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： HCT116 和 HT29 测试浓度： 各种浓度 孵育持续时间： 48 小时 实验结果： 通过 PARP、caspase 3 和 9 的裂解提高了两种细胞系的凋亡水平。 细胞增殖测定[3] 细胞类型： MV4;11、KASUMI-1、OCI-AML3 和 K562 测试浓度： 0.1、0.5 和 1 μM 孵育时间：6-10天 实验结果：以剂量依赖性方式抑制这些AML细胞。 细胞毒性测定[4] 细胞类型： PBMC 测试浓度： 1 μM、2.5 μM、5 μM、10 μM 、25 μM 和 50 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 是否 结直肠癌细胞活力与凋亡实验：将HCT116和SW480细胞以5×103个/孔接种于96孔板，过夜培养后，用Bromosporine（0.1-20 μM）、5-FU（1-100 μM）或二者组合处理72小时，通过MTT实验（570 nm吸光度）检测细胞活力。凋亡检测时，将HCT116细胞以2×105个/孔接种于6孔板，用组合药物（5 μM Bromosporine + 50 μM 5-FU）处理48小时，收集细胞并进行Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞术分析凋亡率；提取细胞裂解液进行Western blot，使用特异性一抗/二抗和化学发光法检测c-Myc蛋白 [1] - PCAF依赖性转录报告基因实验：将HeLa细胞以2×105个/孔接种于12孔板，采用脂质类转染试剂转染PCAF响应性荧光素酶报告质粒（如pGL4.32[luc2P/CRE/Hygro]）和海肾荧光素酶质粒（内参对照）。转染24小时后，用Bromosporine（0.1-10 μM）处理细胞16小时，通过双荧光素酶报告基因检测系统测定荧光素酶活性，将萤火虫荧光素酶活性归一化至海肾荧光素酶活性。MCF-7细胞以5×103个/孔接种于96孔板，用Bromosporine（0.1-20 μM）处理72小时，通过CCK-8实验检测细胞增殖 [2] - 白血病细胞增殖与基因表达实验：将K562和MV4-11细胞以1×104个/孔接种于96孔板，用Bromosporine（1-40 μM）处理48小时，通过CCK-8实验检测细胞增殖。qPCR实验中，细胞以5×105个/孔接种于6孔板，用20 μM Bromosporine处理24小时，提取总RNA并逆转录为cDNA，使用c-Myc、Bcl-2和内参基因GAPDH的特异性引物进行qPCR [3] - 潜伏HIV-1激活实验：将J-Lat 10.6细胞（HIV-1潜伏模型，含GFP报告基因）以1×104个/孔接种于96孔板，用Bromosporine（0.1-20 μM）单独或与prostratin（100 nM）联合处理48小时，通过流式细胞术计数GFP阳性细胞。Western blot实验中，细胞用组合药物处理72小时，裂解后使用特异性抗体检测HIV-1 Gag蛋白 [4] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性BALB/c裸鼠（5-6周龄；注射1×10⁶个细胞/100 μL HT116细胞）[1]
剂量：100 mg/kg 给药途径：腹腔注射；每日一次，连续10天 实验结果：与溴孢素或5-氟尿嘧啶联合用药时，显示出比单独使用溴孢素或5-氟尿嘧啶更好的抗肿瘤活性。 结直肠癌异种移植模型：雌性BALB/c nu/nu裸鼠（6-8周龄）适应环境1周。将HCT116细胞（5×10⁶个细胞/只小鼠）重悬于100 μL PBS与Matrigel（1:1）混合液中，皮下注射至每只小鼠的右侧腹部。当肿瘤平均体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=6）：（1）溶剂组：腹腔注射10% DMSO + 90%无菌生理盐水，每日一次；（2）溴孢素组：腹腔注射20 mg/kg溴孢素（溶于10% DMSO + 90%生理盐水），每日一次；（3）5-氟尿嘧啶组：腹腔注射50 mg/kg 5-氟尿嘧啶（溶于生理盐水），隔日一次；（4）联合用药组：腹腔注射20 mg/kg溴孢素，每日一次，同时腹腔注射5-氟尿嘧啶，隔日一次。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积=长×宽²/2）。 21天后，处死小鼠，切除肿瘤并称重，收集主要器官（肝脏、肾脏）进行组织学分析（H&E染色）[1] - 白血病小鼠模型：将K562细胞（1×10⁶个细胞/只小鼠）经尾静脉注射到6-8周龄的雄性C57BL/6小鼠体内。注射后3天，将小鼠随机分为2组（n=8/组）：（1）溶剂组：腹腔注射10% DMSO + 90%生理盐水，每日一次；（2）溴孢素组：腹腔注射15 mg/kg溴孢素（溶于10% DMSO + 90%生理盐水），每日一次。第14天，每组处死3只小鼠，从股骨中采集骨髓，并通过流式细胞术（使用K562特异性标记物）分析肿瘤细胞浸润情况。其余小鼠的存活情况监测至第40天[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
溴孢素在小鼠体内毒性较低。在结直肠癌异种移植模型（文献[1]）中，连续21天腹腔注射20 mg/kg溴孢素（每日一次）未引起显著的体重下降（对照组与溴孢素组：22 ± 2 g vs. 21 ± 1 g），也未观察到肝肾组织学异常（HE染色）。在白血病模型（文献[3]）中，连续14天腹腔注射15 mg/kg溴孢素（每日一次）也未引起体重下降或器官毒性[1, 3]。溴孢素具有较高的血浆蛋白结合率。体外人血浆蛋白结合试验（超滤法）显示，约90%的溴孢素与血浆蛋白结合[3]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
溴孢素是一种特性明确的广谱溴结构域抑制剂，广泛用作研究含溴结构域蛋白（尤其是BET家族蛋白）生物学功能的工具化合物。其广谱性使其能够用于研究多个溴结构域在疾病通路（例如癌症、HIV潜伏感染）中的协同作用[3]。
- 溴孢素与化疗药物（例如5-氟尿嘧啶）在结直肠癌中表现出协同作用，这可能归因于其下调介导化疗耐药性的癌基因（例如c-Myc）的能力。这提示其在实体瘤联合化疗中具有潜在的应用价值[1]。 - 溴孢素通过抑制BET蛋白激活潜伏的HIV-1，而BET蛋白抑制HIV-1 LTR转录。溴孢素与其他潜伏期逆转剂（例如前列腺素）的协同作用凸显了其在HIV治愈的“冲击和清除”策略中的潜力[4] - 溴孢素对PCAF的抑制作用为研究PCAF介导的癌症转录调控提供了一种工具。PCAF参与细胞周期进程和细胞凋亡，溴孢素介导的PCAF抑制作用可能有助于其在乳腺癌细胞中的抗增殖作用[2] |
| 分子式 |
C17H20N6O4S
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|---|---|---|
| 分子量 |
404.44
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| 精确质量 |
404.126
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| CAS号 |
1619994-69-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
72943187
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.677
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| LogP |
1.21
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| tPSA |
135.96
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
657
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UYBRROMMFMPJAN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H20N6O4S/c1-5-27-17(24)18-15-9-14(21-23-11(3)19-20-16(15)23)12-7-6-10(2)13(8-12)22-28(4,25)26/h6-9,22H,5H2,1-4H3,(H,18,24)
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| 化学名 |
Ethyl (3-methyl-6-(4-methyl-3-(methylsulfonamido)phenyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl)carbamate
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| 别名 |
Bromosporine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.18 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4726 mL | 12.3628 mL | 24.7255 mL | |
| 5 mM | 0.4945 mL | 2.4726 mL | 4.9451 mL | |
| 10 mM | 0.2473 mL | 1.2363 mL | 2.4726 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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https://www.thesgc.org/chemical-probes/bromosporine |
Penipanoid C
(Rac)-EBET-1055
SGC-BRDVIII-NC
Ad-JQ1
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