| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PD-1/ PD-L1; VISTA
CA-170 targets the immune checkpoint proteins VISTA (V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation) and PD-L1 (programmed death-ligand 1). By inhibiting these immune checkpoints, it rescues T-cell proliferation and effector functions that are suppressed by PD-L1/L2 and VISTA signaling. It shows selectivity over other immune checkpoint proteins. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
CA-170 除了对其他免疫检查点蛋白以及多种受体和酶具有选择性外，还具有强大的功能活性，能够恢复 T 细胞的增殖和效应功能[1]。
根据核磁共振结合实验，CA-170 不与 hPD-L1 结合。[2] CA-170 无法恢复 hPD-1/hPD-L1 阻断的 Jurkat 效应 T 细胞的活化。[2] 体外实验表明，CA-170 能有效挽救 PD-L1/L2 和 VISTA 抑制的 T 细胞的增殖和效应功能。它对其他免疫检查点蛋白以及多种受体和酶具有选择性。CA-170 是一种小分子，具有口服生物利用度。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，利用同源小鼠肿瘤模型（例如结直肠癌和黑色素瘤），口服CA-170可抑制肿瘤生长。这表明其具有作为癌症免疫治疗药物的潜力。但未提供详细的剂量和疗效数据。
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| 酶活实验 |
核磁共振结合实验[2]
进行核磁共振测量时，通过凝胶过滤将缓冲液置换为pH 7.4的PBS缓冲液。向样品中加入10% (v/v)的D2O以提供锁定信号。所有谱图均在300 K下使用Bruker Avance III 600 MHz核磁共振波谱仪记录。通过滴定15N标记的hPD-L1/hPD-1，并在加入化合物前后记录1H和1H-15N HMQC谱图，分析化合物的结合情况。 均相时间分辨荧光共振能量转移(HTRF)实验[2] 使用经认证的Cis-Bio试剂盒，按照其标准方案（最终配方中h-L1浓度为5 nM，hPD-1浓度为50 nM），在20 µL最终体积下进行HTRF实验。为了确定受试化合物的半数抑制浓度(IC50)，对各个稀释系列进行测量。根据Cis-Bio方案混合所有组分后，将反应板在室温下孵育2小时，然后在Tecan Spark 20M上进行TR-FRET测量。收集的数据经阴性对照背景扣除、阳性对照归一化、平均后，使用Mathematica 12软件拟合归一化Hill方程，以确定IC50值。参考文献：Molecules. 2019 Aug 1;24(15):2804. VISTA和PD-L1的结合抑制作用可通过无细胞结合分析（例如表面等离子共振或ELISA）进行评估，所用试剂为重组VISTA或PD-L1蛋白。通过测量标记配体或受体的竞争性置换来确定结合亲和力和抑制效力。 |
| 细胞实验 |
hPD-1/hPD-L1免疫检查点阻断试验[2]
根据制造商的说明，使用hPD-1/hPD-L1阻断生物测定法检测hPD-1/hPD-L1免疫检查点抑制剂的活性。在实验前17小时，将hPD-L1 aAPC以10,000个细胞/孔的密度接种于96孔（白色）板中。首先用DMSO配制小分子或肽-57的2.5倍稀释液。在测定当天，将化合物用测定缓冲液（99% RPMI 1640，1% FBS）稀释1000倍，以保持DMSO浓度恒定（占总体积的0.1%）。在检测当天，将阳性对照抗hPD-1单克隆抗体nivolumab进行2.5倍稀释，并用检测缓冲液配制。弃去孔中的培养基，加入系列稀释的小分子或抗体。随后，将Jurkat hPD-1细胞以每孔20,000个细胞的密度接种于检测板中。在标准培养条件下孵育6小时后，将检测板在室温下平衡10分钟，然后加入Bio-Glo™检测试剂孵育20分钟。使用Infinite M200读板仪检测发光值。根据Hill曲线拟合实验数据计算半数有效浓度（EC50值）。 蛋白质印迹分析[2] 使用含有蛋白酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液制备总细胞裂解液。电泳后，将蛋白转移至PVDF膜上，用4% BSA的TBS-N缓冲液封闭膜，并在4℃下与一抗溶液孵育过夜。之后，用TBS-N缓冲液洗涤4次，室温下与二抗孵育1小时，再洗涤4次。 使用的抗体及其稀释度如下：兔单克隆抗hPD-L1抗体（克隆E1L3N，1:1000），兔单克隆抗α-微管蛋白抗体（1:2000，CST，货号2125），辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体（1:3000）。 流式细胞术分析[2] 为了分析aAPC细胞表面人PD-L1的表达，进行了流式细胞术分析。将细胞接种于6孔板中，培养至亚融合状态。用TrypLe Select酶将细胞从培养板上消化下来，置于冰上，用流式细胞术染色缓冲液洗涤两次，然后用小鼠抗人PD-L1抗体（克隆MIH1，APC偶联，货号17-5983）染色。使用17-4714抗体作为同型对照。用FACSCanto II流式细胞仪分析细胞。 基于细胞的检测采用T细胞功能检测，其中T细胞与表达PD-L1或VISTA的细胞共培养。加入CA-170，并测量T细胞增殖（例如，通过CFSE稀释）和效应功能（细胞因子产生）以评估T细胞活性的恢复情况。 |
| 动物实验 |
在同源小鼠肿瘤模型（包括结直肠癌和黑色素瘤）中进行体内动物研究。CA-170 采用口服给药。测量肿瘤生长抑制情况，并评估肿瘤微环境中免疫细胞的浸润和激活情况，以评价其免疫调节作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CA-170的分子式为C₁₂H₂₀N₆O₇，分子量为360.32。它是一种口服药物。现有文献中未披露其详细的药代动力学参数，例如半衰期、Cmax以及在临床前动物模型中的口服生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
现有参考文献中未详细列出具体的毒性数据。作为一种免疫检查点抑制剂，其潜在毒性可能包括免疫相关不良事件，例如自身免疫性疾病，这是免疫疗法的常见副作用。该化合物对其他免疫检查点的选择性可能有助于其获得良好的安全性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CA-170 是一种选择性小分子 PD-L1 抑制剂。作为 PD-L1/PD-L2/VISTA 拮抗剂，CA-170 是一种口服生物利用度高的小分子抑制剂，可抑制免疫检查点调节蛋白程序性死亡配体 1 (PD-L1；B7-H1；CD274)、PD-L2 和 V 结构域免疫球蛋白 (Ig) T 细胞活化抑制剂 (VISTA；程序性死亡-1 同源物；PD1H；PD-1H)，从而具有潜在的负向免疫检查点调节和抗肿瘤活性。口服后，PD-L1/PD-L2/VISTA 拮抗剂 CA-170 可靶向并结合 PD-L1、PD-L2 和 VISTA。该机制抑制PD-L1/PD-L2/VISTA介导的信号通路，消除PD-L1、PD-L2和VISTA诱导的T淋巴细胞免疫反应抑制，增强细胞毒性T细胞的增殖和活化，增加T细胞细胞因子的产生，并抑制肿瘤细胞生长。PD-L1、PD-L2和VISTA作为免疫激活的负性检查点分子，在抑制T细胞功能方面发挥着关键作用。
CA-170（也称为PD-1-IN-1）是一种研究化合物，已被研究作为一种口服的VISTA和PD-L1双重抑制剂用于癌症免疫治疗。其口服生物利用度使其区别于基于抗体的检查点抑制剂。它在同源小鼠肿瘤模型中显示出临床前疗效。 |
| 分子式 |
C12H20N6O7
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|---|---|---|
| 分子量 |
360.3232
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| 精确质量 |
360.139
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| 元素分析 |
C, 40.00; H, 5.59; N, 23.32; O, 31.08
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| CAS号 |
1673534-76-3
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| 相关CAS号 |
1673560-66-1; 1673534-76-3 (PD-1-IN-1)
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| PubChem CID |
126843231
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
-6.7
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| tPSA |
227
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| 氢键供体(HBD)数目 |
7
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
493
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
O1C([C@]([H])(C([H])([H])C(N([H])[H])=O)N([H])C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])O[H])=O)=NC([C@]([H])(C([H])([H])O[H])N([H])[H])=N1
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| InChi Key |
HFOBENSCBRZVSP-LKXGYXEUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H20N6O7/c1-4(20)8(11(22)23)16-12(24)15-6(2-7(14)21)10-17-9(18-25-10)5(13)3-19/h4-6,8,19-20H,2-3,13H2,1H3,(H2,14,21)(H,22,23)(H2,15,16,24)/t4-,5+,6+,8+/m1/s1
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.94 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.94 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.39 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7753 mL | 13.8766 mL | 27.7531 mL | |
| 5 mM | 0.5551 mL | 2.7753 mL | 5.5506 mL | |
| 10 mM | 0.2775 mL | 1.3877 mL | 2.7753 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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