| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PD-1/ PD-L1; VISTA
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| 体外研究 (In Vitro) |
除了表现出针对其他免疫检查点蛋白以及多种受体和酶的选择性外，CA-170 在恢复 T 细胞增殖和效应器功能方面具有强大的功能活性[1]。
根据核磁共振结合试验，CA-170不与hPD-L1结合[2]。 CA-170不能恢复hPD-1/ hpd - l1阻断效应Jurkat T细胞的激活。[2] |
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| 酶活实验 |
核磁共振结合试验[2]
对于核磁共振测量，缓冲液通过凝胶过滤交换到pH为7.4的PBS。在样品中加入10% (v/v)的D2O来提供锁定信号。所有光谱在300 K下使用Bruker Avance III 600 MHz光谱仪记录。通过滴定15N标记的hPD-L1/hPD-1，并记录化合物加入前后的1H和1H - 15N HMQC光谱，分析化合物的结合情况。 均匀时间分辨FRET[2] HTRF检测使用经认证的Cis-Bio检测试剂盒，最终体积为20µL，使用其标准方案(最终配方中5 nM h-L1和50 nM hPD-1)。为了确定被试化合物的一半最大抑制浓度(IC50)，对单个稀释系列进行了测量。将所有组分按Cis-Bio协议混合后，在室温下孵育2h，然后在Tecan Spark 20M上进行TR-FRET测量。收集到的数据在阴性对照上进行背景相减，在阳性对照上进行归一化，使用Mathematica 12进行平均并拟合归一化Hill’s方程，确定IC50值。 |
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| 细胞实验 |
hPD-1/hPD-L1免疫检查点阻断试验[2]
根据制造商的说明，使用hPD-1/hPD-L1阻断生物测定法检测hPD-1/hPD-L1免疫检查点抑制剂的活性。实验前17h，以10000个细胞/孔的密度将hPD-L1 aAPCs接种于96孔(白色)板上。首先在DMSO中制备2.5倍稀释的小分子或肽-57。在检测当天，将化合物在检测缓冲液(99% RPMI 1640, 1% FBS)中稀释1000倍，以保持DMSO(占总体积的0.1%)的恒定浓度。2.5倍稀释的nivolumab，阳性对照抗hpd -1单克隆抗体，在实验当天的实验缓冲液中制备。从孔中丢弃培养基，加入连续稀释的小分子或抗体。之后，以每孔2万个细胞的密度在实验板上接种Jurkat hPD-1细胞。在标准培养条件下孵育6h后，测定板在室温下平衡10min，然后用Bio-GloTM检测试剂孵育20min。使用Infinite M200读取器检测发光。一半最大有效浓度(EC50值)由希尔曲线拟合实验数据计算。 Western Blot分析[2] 用含有蛋白酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液制备总细胞裂解液。电泳后转移到PVDF膜上，用4% BSA在TBS-N缓冲液中阻断膜，与一抗溶液在4°C下孵育过夜。之后用TBS-N缓冲液冲洗4次，室温下二抗孵育1h，再冲洗4次。 采用兔单克隆抗hpd - l1(克隆E1L3N, 1:1 000)，兔单克隆抗α-微管蛋白(1:2000,CST, cat。2125)，山羊过氧化物酶偶联抗兔(1:3000)。 流式细胞术分析[2] 流式细胞术检测人PD-L1在aAPC细胞表面的表达情况。细胞接种于6孔板，培养至亚融合。用TrypLe Select酶将细胞从板上分离，置于冰上，用流式细胞术染色缓冲液洗涤2次，用小鼠抗人PD-L1抗体(克隆MIH1，偶联APC, cat)染色。17 - 5983)。17-4714抗体作为染色的同型对照。用FACSCantoⅱ型细胞仪对细胞进行分析。 |
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| 动物实验 |
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
CA-170 is a selective, small molecule inhibitor of PD-L1.
PD-L1/PD-L2/VISTA Antagonist CA-170 is an orally bioavailable small molecule inhibitor of the immune checkpoint regulatory proteins programmed cell death ligand-1 (PD-L1; B7-H1; CD274), PD-L2, and V-domain immunoglobulin (Ig) suppressor of T-cell activation (VISTA; programmed death 1 homolog; PD1H; PD-1H), with potential negative immune checkpoint regulatory and antineoplastic activities. Upon oral administration, PD-L1/PD-L2/VISTA antagonist CA-170 targets and binds to PD-L1, PD-L2 and VISTA. This inhibits PD-L1/PD-L2/VISTA-mediated signaling, abrogates the PD-L1-, PD-L2- and VISTA-induced suppression of T-lymphocyte immune responses, enhances cytotoxic T-cell proliferation and activation against tumor cells, increases cytokine production by T-cells, and inhibits tumor cell growth. PD-L1, PD-L2 and VISTA, negative checkpoint molecules of immune activation, play key roles in the suppression of T-cell functions. |
| 分子式 |
C12H20N6O7
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|---|---|---|
| 分子量 |
360.3232
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| 精确质量 |
360.139
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| 元素分析 |
C, 40.00; H, 5.59; N, 23.32; O, 31.08
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| CAS号 |
1673534-76-3
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| 相关CAS号 |
1673560-66-1; 1673534-76-3 (PD-1-IN-1)
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| PubChem CID |
126843231
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
-6.7
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| tPSA |
227
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| 氢键供体(HBD)数目 |
7
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
493
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
O1C([C@]([H])(C([H])([H])C(N([H])[H])=O)N([H])C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])O[H])=O)=NC([C@]([H])(C([H])([H])O[H])N([H])[H])=N1
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| InChi Key |
HFOBENSCBRZVSP-LKXGYXEUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H20N6O7/c1-4(20)8(11(22)23)16-12(24)15-6(2-7(14)21)10-17-9(18-25-10)5(13)3-19/h4-6,8,19-20H,2-3,13H2,1H3,(H2,14,21)(H,22,23)(H2,15,16,24)/t4-,5+,6+,8+/m1/s1
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.94 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.94 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.39 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7753 mL | 13.8766 mL | 27.7531 mL | |
| 5 mM | 0.5551 mL | 2.7753 mL | 5.5506 mL | |
| 10 mM | 0.2775 mL | 1.3877 mL | 2.7753 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PD-1/PD-L1-IN-29 intermediate-1
PD-1/PD-L1-IN-29 intermediate-2 (N-benzyloxycarbonyl-L-serine tert-butyl ester)
PD-1/PD-L1-IN-38
(2R,3S)-PD-1/PD-L1-IN-38
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