| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 2g |
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| 5g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Topoisomerase I ( IC50 = 679 nM ); Camptothecins
Camptothecin (Campathecin) targets DNA topoisomerase I (Topo I) with an IC50 of 0.1 μM for inhibiting enzyme-mediated DNA relaxation [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
喜树碱，一种植物生物碱，最初于 1966 年从喜树中分离出来。喜树碱可以使细胞在有丝分裂的 S 期停止。喜树碱对许多人类肿瘤细胞系（包括 HT29、LOX、SKOV3 和 SKVLB）具有纳摩尔级的细胞毒性，IC50 值范围为 37 nM 至 48 NM。与 TNF 结合，喜树碱可诱导原代小鼠肝细胞凋亡，IC50 值为 13 μM。喜树碱还消除了 TNF 诱导的 NF-κB 激活，以及 TNF 受体相关因子 2 (TRAF2)、X 连锁凋亡抑制蛋白 (X-IAP) 和 FLICE 抑制蛋白 (FLIP) 的表达。在 HCT116 细胞中，喜树碱 (5 μM) 诱导蛋白酶体介导的混合谱系白血病 5 (MLL5) 蛋白降解，从而导致 p53 Ser392 磷酸化。由于喜树碱的溶解度低和不良反应，人们开发了多种喜树碱类似物，其中拓扑替康和伊立替康两种已被FDA批准用于癌症化疗。激酶测定：拓扑异构酶 I 是从小牛胸腺中分离出来的，不含拓扑异构酶 II。所有反应均在微量滴定板中的 10 mL 反应缓冲液（50 mM Tris-HCl、pH 7.5、100 mM KCl、0.5 mM EDTA 和 30 pg/mL BSA）中进行。将喜树碱以 10 mg/mL 溶解在 DMSO 中，并在 96 孔微量滴定板中连续稀释，向其中添加 32P 末端标记的 pBR322 DNA 和拓扑异构酶。将反应混合物在室温下孵育 30 分钟，然后通过添加 2 mL 十二烷基硫酸钠和蛋白酶 K 的混合物（终浓度分别为 1.6% 和 0.14 mg/mL）来终止反应。将板在 50 °C 下加热 30 分钟，加入 10 mL 含有 0.45 N NaOH 的标准终止混合物以生成单链 DNA，并将样品在 TBE 缓冲液中的 1.5% 琼脂糖凝胶中进行电泳。将凝胶吸干在硝酸纤维素纸上，干燥，并暴露在 X 射线胶片上。裂解单位根据放射自显影图计算并针对药物浓度对数绘制。然后获得IC50值。细胞测定：将肿瘤细胞以每孔 1500 至 4000 个细胞的密度铺在 96 孔微量滴定板中的 100 μL 培养基中，并使其粘附过夜。将细胞与喜树碱一起孵育 48 小时，然后与新鲜培养基一起孵育 48 小时。各浓度的喜树碱一式四份添加。将处理过的细胞与 MTT 孵育 4 小时后，用 0.2 mL DMSO 和 50 μL Sorensens 缓冲液从细胞中提取还原的染料产物。短暂摇动板，读取 570 nm 处的吸光度并定量。使用四参数逻辑方程将曲线拟合到 MTT 测定数据。
Camptothecin (Campathecin)（0.01-5 μM）剂量依赖性抑制人结肠癌细胞（HT-29、HCT116）增殖，IC50值分别为0.3 μM和0.5 μM [3] Camptothecin (Campathecin)（0.5 μM）在HeLa细胞中稳定Topo I-DNA切割复合物，导致不可逆的DNA单链断裂（γ-H2AX灶点增加4.2倍）[3] Camptothecin (Campathecin)（1 μM）诱导人肝癌细胞（HepG2）凋亡：凋亡率提高58%（Annexin V/PI染色），caspase-3/-7活性增强3.9倍 [4] Camptothecin (Campathecin)（0.2-2 μM）抑制人乳腺癌细胞（MCF-7）的集落形成，培养14天后抑制率达65-82% [5] Camptothecin (Campathecin)（0.1-1 μM）在无细胞体系中抑制Topo I活性，使DNA松弛效率降低50-90% [1] Camptothecin (Campathecin)（0.5 μM）使人A549非小细胞肺癌细胞阻滞于S期，S期细胞比例从对照组的32%升至68% [5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
喜树碱 (8 mg/kg) 对各种肿瘤（包括结肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌和卵巢肿瘤）的小鼠异种移植物显示出完全的生长抑制和消退。在小鼠中，喜树碱（50 mg/kg）和 TNF（5 和 7 μg/kg）的组合（而不是单独的喜树碱）会引起肝损伤。
Camptothecin (Campathecin)（5 mg/kg，腹腔注射，隔天一次，持续7天）抑制裸鼠HT-29结肠癌移植瘤生长：肿瘤体积减少62%，肿瘤重量较溶媒组降低59% [3] Camptothecin (Campathecin)（8 mg/kg，静脉注射，每周一次，持续4周）将HepG2肝癌移植瘤小鼠的中位存活时间从溶媒组的25天延长至38天 [4] Camptothecin (Campathecin)（6 mg/kg，腹腔注射，每周两次，持续3周）减少C57BL/6小鼠Lewis肺癌的肺转移结节数65% [5] Camptothecin (Campathecin)（5 mg/kg，腹腔注射）使HT-29移植瘤组织的凋亡指数（TUNEL染色）提高3.5倍，Topo I活性降低68% [3] |
| 酶活实验 |
小牛胸腺是拓扑异构酶 I 的来源，拓扑异构酶 II 不存在拓扑异构酶 I。每个反应均使用 10 mL 体积的反应缓冲液（50 mM Tris-HCl、pH 7.5、100 mM KCl、0.5 mM EDTA 和 30 pg/mL BSA）在微量滴定板中进行。在 96 孔微量滴定板中，将 10 mg/mL 喜树碱溶解在 DMSO 中并连续稀释后，加入拓扑异构酶和 32P 末端标记的 pBR322 DNA。将反应混合物在室温下孵育30分钟后，加入2mL含有蛋白酶K和十二烷基硫酸钠（终浓度分别为1.6%和0.14mg/mL）的溶液以终止反应。将板加热至 50 °C 30 分钟并添加 10 mL 含有 0.45 N NaOH 的标准停止混合物后，将样品在 TBE 缓冲液中的 1.5% 琼脂糖凝胶中进行电泳。凝胶在硝化纤维纸上吸干、干燥和抛光后暴露在 X 射线胶片上。将药物浓度对数与裂解单位作图，裂解单位是根据放射自显影照片计算得出的。然后我们获得 IC50 值。
DNA拓扑异构酶I松弛实验：将纯化的人Topo I与超螺旋质粒DNA及系列浓度的Camptothecin (Campathecin)（0.01-1 μM）在反应缓冲液中于37°C孵育30分钟。SDS终止反应后，1%琼脂糖凝胶电泳分离DNA产物，密度分析法量化松弛型DNA条带，计算Topo I活性抑制率 [1] Topo I-DNA切割复合物稳定实验：将Camptothecin (Campathecin)（0.1-2 μM）与Topo I及线性化DNA底物在37°C孵育20分钟。加入SDS捕获蛋白-DNA复合物，免疫印迹法检测Topo I以量化稳定复合物的量 [3] |
| 细胞实验 |
在 96 孔微量滴定板中，肿瘤细胞以每孔 1500-4000 个细胞的密度接种在 100 μL 培养基中，并让它们粘附整个晚上。喜树碱孵育 48 小时后，细胞在新鲜培养基中再孵育 48 小时。添加每个浓度的喜树碱的四倍。用 MTT 处理细胞 4 小时后，使用 0.2 mL DMSO，然后使用 50 μL Sorensen 缓冲液从细胞中去除还原的染料产物。快速摇动板后，测量并记录 570 nm 处的吸光度。 MTT 测定数据集使用四参数逻辑方程拟合曲线。
将人结肠癌细胞（HT-29、HCT116）接种于96孔板（5×10^3个细胞/孔），用Camptothecin (Campathecin)（0.01-5 μM）处理72小时。MTT法评估细胞活力，计算IC50值 [3] 将HepG2肝癌细胞接种于6孔板（1×10^5个细胞/孔），用Camptothecin (Campathecin)（0.5-1 μM）处理24小时。Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术分析凋亡，发光检测试剂盒测定caspase-3/-7活性 [4] 将MCF-7乳腺癌细胞接种于6孔板（1×10^3个细胞/孔），用Camptothecin (Campathecin)（0.2-2 μM）处理14天。固定细胞后结晶紫染色，计数集落以评估集落形成能力 [5] 用Camptothecin (Campathecin)（0.5 μM）处理A549非小细胞肺癌细胞24小时，碘化丙啶染色后流式细胞术分析细胞周期分布 [5] 用Camptothecin (Campathecin)（0.5 μM）处理HeLa细胞12小时，γ-H2AX免疫荧光染色检测DNA单链断裂，荧光显微镜下计数每个细胞的γ-H2AX灶点数 [3] |
| 动物实验 |
裸鼠（NIH-I 高生育力品系）携带 CASE、SW48、DOY、SPA 和 CLO 细胞异种移植瘤；0–8 mg/kg；肌内或静脉注射给药。
裸鼠（NIH-I 高生育力品系）携带 CASE、SW48、DOY、SPA 和 CLO 细胞异种移植瘤。体内实验表明，CPT 处理可使小鼠对 TNF 诱导的肝损伤更加敏感。总之，拓扑异构酶抑制剂与 TNF 联合使用可阻断生存信号通路，并诱导一种类似于放线菌素 D/TNF 或半乳糖胺/TNF 的肝细胞死亡。在拓扑异构酶抑制剂抗肿瘤治疗期间，免疫功能受损通常会导致机会性感染，此时全身性TNF的存在可能对临床拓扑异构酶抑制剂研究中报道的肝毒性至关重要。[4] 将HT-29结肠癌细胞（2×10^6个细胞/只小鼠）皮下注射到6-8周龄的裸鼠体内，以建立异种移植瘤。当肿瘤体积达到100 mm³时，将小鼠随机分为载体组和喜树碱组（每组n=6）。喜树碱溶于DMSO和生理盐水中（DMSO最终浓度<1%），每隔一天腹腔注射5 mg/kg，连续7天。每隔2天测量一次肿瘤体积，并对小鼠实施安乐死，取出肿瘤进行重量测量和拓扑异构酶I（Topo I）活性测定[3]。 将Lewis肺癌细胞（1×10^5个细胞/只）静脉注射到6-8周龄的C57BL/6小鼠体内，建立肺转移模型。小鼠接受喜树碱（Campathecin）（6 mg/kg，腹腔注射，每周两次，持续3周）或载体治疗。接种4周后，对小鼠实施安乐死，并计数肺转移结节[5]。 将HepG2肝癌细胞（2×10^6个细胞/只）皮下注射到6-8周龄的裸鼠体内。当肿瘤体积达到100 mm³时，小鼠接受喜树碱（Campathecin）（8 mg/kg，静脉注射，每周一次，持续4周）或载体治疗。记录生存时间为50天，并收集肿瘤组织进行凋亡指数分析[4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
喜树碱（Campathecin）在静脉注射（10 mg/kg）后，大鼠的终末半衰期（t1/2）为 2.8 小时 [4]
喜树碱（Campathecin）由于水溶性差和首过代谢，在人和大鼠中的口服生物利用度极低（<5%）[4] 喜树碱（Campathecin）在大鼠中的分布容积（Vd）为 1.2 L/kg [4] 喜树碱（Campathecin）在肝脏中通过细胞色素 P450 (CYP1A2) 代谢，主要经粪便（60-70%）和尿液（20-25%）排泄 [4,5] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
喜树碱（Campathecin）在人血浆中的血浆蛋白结合率为95%[5]
喜树碱（Campathecin）在体外可诱导骨髓抑制：人骨髓单核细胞在0.05 μM浓度下集落形成抑制率达50%[3] 在接受喜树碱（Campathecin）（10 mg/kg，静脉注射，每周一次，持续3周）治疗的大鼠中，观察到血清ALT/AST中度升高（1.5倍）和轻度肠黏膜损伤[4] 喜树碱（Campathecin）在小鼠中的静脉注射LD50为150 mg/kg，在大鼠中的静脉注射LD50为100 mg/kg[3] 喜树碱（Campathecin）（体外浓度>2 μM）对正常人肠道上皮细胞（NCM460）造成显著的细胞毒性，细胞活力降低55%[5] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
喜树碱是一种吡喃并吲哚喹啉类化合物，其结构为吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉，在3位和14位被羰基取代，在4位被乙基和羟基取代（S对映体）。它具有多种功能，包括作为EC 5.99.1.2（DNA拓扑异构酶）抑制剂、抗肿瘤药、基因毒素和植物代谢产物。它是一种吡喃并吲哚喹啉类化合物、叔醇、δ-内酯和喹啉生物碱。
喜树碱是从中国树木喜树（Camptotheca acuminata）的茎木中分离得到的生物碱。该化合物选择性抑制核酶DNA拓扑异构酶I型。喜树碱的几种半合成类似物已显示出抗肿瘤活性。 据报道，喜树碱存在于柳叶蛇根草（Ophiorrhiza liukiuensis）、尼蒙氏诺氏草（Nothapodytes nimmoniana）和其他有相关数据的生物体中。 喜树碱是从中国树木喜树（Camptotheca acuminata）中分离得到的一种生物碱，具有抗肿瘤活性。在细胞周期的S期，喜树碱选择性地稳定拓扑异构酶I-DNA共价复合物，从而抑制拓扑异构酶I介导的单链DNA断裂的重连接，并在DNA复制机制遇到时产生潜在的致命性双链DNA断裂。(NCI) 喜树碱是从中国树木喜树（Camptotheca acuminata）的茎木中分离得到的一种生物碱。该化合物选择性抑制核酶DNA拓扑异构酶I型。喜树碱的几种半合成类似物已显示出抗肿瘤活性。 药物适应症 已在研究用于癌症治疗。 作用机制 喜树碱与拓扑异构酶I和DNA复合物结合，形成三元复合物，稳定该复合物并阻止DNA重新连接，从而造成DNA损伤，最终导致细胞凋亡。 喜树碱（Campathecin） 是从喜树（Camptotheca acuminata）的树皮和叶子中分离得到的天然细胞毒性生物碱[1]。 喜树碱（Campathecin） 通过特异性结合拓扑异构酶I-DNA切割复合物发挥抗肿瘤作用，阻止DNA重新连接，导致DNA单链断裂，使细胞进入S期。细胞周期阻滞和细胞凋亡[3,5] 喜树碱（Campathecin）是FDA批准的类似物（伊立替康、拓扑替康）的母体化合物，用于治疗结肠癌、肺癌和卵巢癌[2,4] 喜树碱（Campathecin）由于溶解度低、毒性高和代谢迅速，临床应用价值有限，因此人们开发了更稳定、耐受性更好的衍生物[2,4] 喜树碱（Campathecin）耐药性可能通过拓扑异构酶I（Topo I）表达下调或ABC转运蛋白（例如ABCG2）介导的药物外排增加而产生[5] |
| 分子式 |
C20H16N2O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
348.35
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| 精确质量 |
348.11
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| 元素分析 |
C, 68.96; H, 4.63; N, 8.04; O, 18.37
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| CAS号 |
7689-03-4
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| 相关CAS号 |
7689-03-4; 25387-67-1 (sodium)
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| PubChem CID |
24360
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| 外观&性状 |
Light yellow solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
757.0±60.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
260 °C (dec.)(lit.)
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| 闪点 |
411.6±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.746
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| LogP |
1.6
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| tPSA |
81.42
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
742
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O1C([C@](C([H])([H])C([H])([H])[H])(C2C([H])=C3C4C(=C([H])C5=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C5N=4)C([H])([H])N3C(C=2C1([H])[H])=O)O[H])=O
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| InChi Key |
VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H16N2O4/c1-2-20(25)14-8-16-17-12(7-11-5-3-4-6-15(11)21-17)9-22(16)18(23)13(14)10-26-19(20)24/h3-8,25H,2,9-10H2,1H3/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
(19S)-19-ethyl-19-hydroxy-17-oxa-3,13-diazapentacyclo[11.8.0.02,11.04,9.015,20]henicosa-1(21),2,4,6,8,10,15(20)-heptaene-14,18-dione
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 10 mg/mL (28.71 mM) in 15% Cremophor EL + 85% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol : 30 mg/mL 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8707 mL | 14.3534 mL | 28.7068 mL | |
| 5 mM | 0.5741 mL | 2.8707 mL | 5.7414 mL | |
| 10 mM | 0.2871 mL | 1.4353 mL | 2.8707 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02769962 | Recruiting | Drug: EP0057 Drug: olaparib |
Urothelial Carcinoma Urothelial Cancer |
National Cancer Institute (NCI) |
May 9, 2016 | Phase 1 Phase 2 |
| NCT00277082 | Completed | Drug: 9-NC in aerosol reservoir |
Corpus Uteri Lung Cancer |
University of New Mexico | August 2003 | N/A |
| NCT00249990 | Completed | Drug: 9-NC in aerosol reservoir |
Corpus Uteri Endometrial Cancer |
University of New Mexico | April 2003 | Phase 2 |
| NCT00250068 | Completed | Drug: Liposomal 9- Nitrocamptothecin |
Lung Diseases Cancer |
University of New Mexico | April 2003 | Phase 2 |
SDOX
Topoisomerase I/II inhibitor 2
Camptothecin-20(S)-O-propionate hydrate (Camptothecin-20-O-propionate hydrate)
Topoisomerase I inhibitor 9
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