| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural diterpenoid; ADP/ATP
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| 体外研究 (In Vitro) |
ATP是细胞的主要能量货币，通过水解成ADP和无机磷酸盐，为细胞质中的大多数生物合成反应提供燃料。由于ATP的再合成发生在线粒体基质中，ATP输出到细胞质中，而ADP输入到基质中。这种交换是由一种蛋白质完成的，即ADP/ATP载体。在这里，我们通过x射线晶体学以2.2 a的分辨率解决了牛载体结构与抑制剂carboxyatractyloside的配合。六个α -螺旋形成一个紧凑的跨膜结构域，在线粒体内外膜之间的表面，显示出一个深凹陷。在其底部，有一个携带核苷酸载体特征的六肽（RRRMMM）。我们的结构以及早期的生化结果表明，运输底物与腔的底部结合，而易位是由“坑”构象到“通道”构象的短暂转变引起的。[1]
图1所示的实验是用新鲜制备的线粒体进行的。图A、B和C显示的结果表明，carboxyatractyloside (CAT)和环孢素A （CSA）对线粒体Ca2+外排、线粒体肿胀和跨膜电位的影响。如图A所示，在图A中，添加2µM CAT可以快速释放积累的基质Ca2+。微量b表明CSA抑制cat诱导的Ca2+释放。图B中的示踪a显示线粒体在额外添加50µM CaCl2的基本培养基中孵育时肿胀。在痕量b中，可以看出CAT的加入引起了较大幅度的膨胀。微量c表明该反应被CSA抑制。图C描绘了CAT和CSA对跨膜电梯度的影响。图a显示，CAT的加入引起了跨膜电位的快速崩溃。微量b表明CSA抑制了跨膜电位的下降（Δψ）。我们知道，上述结果之前已经被报道过（见Zoratti等人，2005年的综述）。然而，我们认为有必要进行这些实验，以便能够将这些结果作为参考，在24小时线粒体中进行的实验，如下所述。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
雄性大鼠（10只/组）分别给予苯巴比妥（PB）、苯丁酮（PBZ）、司他唑尔（3种细胞色素p450依赖性酶诱导剂）、胡椒酰丁醇（PBO）；P450抑制剂)，氯化钴(CoCl2；一种血红蛋白合成抑制剂),5,6-苯并黄酮(BNF；（细胞色素P448依赖性酶的诱导剂），半胱氨酸[CYS；谷胱甘肽（GSH）前体]，或马来酸乙酯(EM；谷胱甘肽消耗者)。然后给大鼠腹腔注射计算LD50剂量（13.5 mg/kg体重）carboxyatractyloside (CAT)。记录中毒的临床症状、病程、致死率、大体病变和肝、肾组织病理学病变。从表面上看，(i) CAT中毒具有独立的致死性和细胞毒性成分(PBZ降低致死性和细胞毒性；CoCl2降低细胞毒性，但不降低致死率；BNF降低了病程，可能降低了致死率，但没有降低细胞毒性)；（ii） CAT细胞毒性的部分原因可能是由新合成的P450-/ p448无关的血红蛋白形成的活性代谢物（PBZ和CoCl2具有抗细胞毒性作用，但PB、stanozolol、PBO和BNF没有）；（iii） CAT解毒可能部分通过一种不依赖于血红蛋白的pbz诱导酶，部分通过一种依赖于p448的（bnf诱导）酶发生；（iv） CAT解毒明显不依赖于P450或gsh，因为PB、stanozolol和CYS没有有益作用，PBO、CoCl2和EM没有增强毒性。CAT的代谢可能在其细胞毒性和致死作用中起作用。[4]
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| 酶活实验 |
线粒体制备[2]
Wistar大鼠 肝脏线粒体在0.25 M蔗糖-1 mM EDTA中匀浆，调整pH至7.3，并按照标准离心程序分离。在4°C下保存24小时后，线粒体老化，每mL 26 mg蛋白。蛋白质用Lowry法测定（Lowry et al., 1951）。 钙运动[2] 在双光束分光光度计下，在675-685 nm处，使用50µM的偶氮胂III指示剂，将2mg线粒体蛋白孵育于3ml含125 mM KCl的基本培养基中；琥珀酸盐10mm；3毫米磷酸盐；10 mM HEPES；加入50µM CaCl2，用Tris-base调至pH 7.3。另外，培养基中含有100µM ADP、2µg寡霉素和5µg鱼藤酮。 线粒体肿胀[2] 通过在3ml基本培养基中培养2mg线粒体蛋白，在540nm时估计线粒体体积的变化。没有添加偶氮胂III。 跨膜电位[2] 在3ml碱性培养基中培养2mg线粒体蛋白，用10µM疏水阳离子染料Safranine代替偶氮胂III，在511-533 nm处进行跨膜电梯度测定。 ADP交换反应[2] 为了分析核苷酸的反交换，将新鲜制备的和老化的线粒体中的10 mg蛋白在添加1 mM [3H]-ADP （sp. act）的基本培养基中预载ADP。1500年cpm / nmol)。孵育20 min后，以12000 rpm离心10 min，洗涤1次；最终颗粒悬浮在0.25 mM蔗糖- tris中，pH为7.3。然后，将加载1 mg ADP的线粒体在1 mL添加60µM ADP的基本培养基中孵育30 s。孵育后取出0.2 mL，通过孔径0.45µm的过滤器过滤。线粒体中所含的放射性和过滤器中保留的放射性是用闪烁计数器测量的。 细胞色素c测定[2] 根据Correa et al.（2007）测定细胞色素c含量。简单地说，将2 mg线粒体蛋白加入到3 mL的基本混合物中，另外加入100µM ADP、5µg鱼藤酮、2µg寡霉素和50µM CaCl2；孵育5 min后，在18000 g下离心10 min，用三氯乙酸沉淀上清，洗球1次。将蛋白（50µg）装在15%丙烯酰胺SDS-PAGE凝胶上，转移到PVDF膜上进行免疫检测。用抗细胞色素c的一抗单克隆抗体（1:1000稀释）和碱性磷酸盐偶联二抗评估线粒体中细胞色素c的含量。 乌头酶活性[2] 根据Hausladen和Fridovich（1994）测定了该酶的活性。简而言之，线粒体蛋白通过加入0.05%含有25 mM磷酸盐，pH 7.2的Triton X-100，然后加入0.6 mM硫酸镁，1 mM柠檬酸盐和0.1 mM NADP来溶解。用分光光度法在240 nm处测定所形成的顺式aconitate。 线粒体DNA分析 [2] 线粒体DNA破坏的分析基本上如所述（García和Chávez， 2007年）。简单地说，从线粒体中提取DNA，悬浮在100 mM NaCl、40 mM Tris、20 mM EDTA、pH 7.8和1% SDS（添加0.2 mg RNAase A）中，在37℃下孵育30分钟。37℃孵卵后，沉淀蛋白质，用苯酚：氯仿：异戊醇（25:24:1,vol/vol）提取DNA。遗传物质用琼脂糖凝胶分析，溴化乙锭显像。 其他实验条件如图中各自的图例所示。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
羧基阿特拉西苷是一种二萜糖苷。
已有报道称咖啡属植物中含有羧基阿特拉西苷，并有相关数据报道。 游离脂肪酸通过将腺嘌呤核苷酸转位酶锁定在胞质溶胶侧，密切参与线粒体通透性转换过程（Schönfeld 和 Bohnensack，1997）。如前所述，该过程被环孢素A（CSA）完全抑制，因为在免疫抑制剂存在的情况下，衰老的线粒体能够保留Ca2+并建立跨膜电位梯度。然而，令人意外的是，尽管存在CSA，添加低浓度的羧基阿特拉西苷/CAT仍能打开非特异性孔道。 CSA的保护作用归因于其与肽基脯氨酰顺反异构酶环孢菌素D (CyP) 的相互作用（Woodfield等人，1998）。显然，这种反应发生在暴露于CSA的衰老线粒体中，因为这些细胞器表现得与新鲜制备的线粒体相似。一个简单的解释是，衰老线粒体中CyP的含量可能低于新鲜制备的线粒体。然而，如前所述，衰老线粒体和新鲜线粒体中该酶的含量非常相似。CAT诱导的通透性转变导致CSA不敏感的原因似乎与Bodrova等人（2000）的研究结果一致。这些作者证明，在肉豆蔻酸酯之后添加羧基阿曲西苷/CAT可诱导CSA敏感的解偶联；然而，当在肉豆蔻酸酯之后添加CAT时，却产生了对CSA不敏感的Δψ下降。他们的解释是，ANT作为非特异性孔复合物的一部分参与了对CSA敏感的解偶联，而未参与孔复合物形成的ANT则参与了对CSA不敏感的通透性转换。这项研究的另一项发现是衰老线粒体释放细胞色素c。细胞色素c释放到胞质溶胶会触发凋亡体的形成，从而激活caspase（Borutaite和Brown，2008）；因此，细胞色素c的释放可以解释衰老组织中发生的细胞凋亡（Hoye等，2008）。最后，鉴于通透性转换是退行性疾病的常见病理基础，我们不妨提出，免疫抑制剂环孢素A可能是一种治疗此类疾病的有效药物。事实上，Borlongan 等人 (2002) 的研究表明，CSA 在帕金森病和亨廷顿病的动物模型中具有神经保护作用。[2] |
| 分子式 |
C31H44O18S2-2.2[K+]
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|---|---|
| 分子量 |
846.996860000001
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| 精确质量 |
846.124
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| 元素分析 |
C, 43.96; H, 5.24; K, 9.23; O, 34.00; S, 7.57
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| CAS号 |
33286-30-5
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| 相关CAS号 |
Carboxyatractyloside tripotassium;77228-71-8; Carboxyatractyloside dipotassium;33286-30-5; 35988-42-2 (free acid);
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| PubChem CID |
20055804
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.598
|
| tPSA |
309.44
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
18
|
| 可旋转键数目(RBC) |
13
|
| 重原子数目 |
51
|
| 分子复杂度/Complexity |
1600
|
| 定义原子立体中心数目 |
12
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| SMILES |
CC(C)CC(=O)O[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]2C[C@@]3(C)[C@@H]4CC[C@H]5C[C@]4(CC[C@@H]3C(C2)(C(=O)[O-])C(=O)[O-])[C@H](C5=C)O)OS(=O)(=O)O)OS(=O)(=O)O.[K+].[K+]
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| InChi Key |
AQFATIOBERWBDY-LNQSNDDKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H46O18S2/c1-14(2)9-21(33)47-24-23(49-51(42,43)44)22(48-50(39,40)41)18(13-32)46-26(24)45-17-11-29(4)19-6-5-16-10-30(19,25(34)15(16)3)8-7-20(29)31(12-17,27(35)36)28(37)38/h14,16-20,22-26,32,34H,3,5-13H2,1-2,4H3,(H,35,36)(H,37,38)(H,39,40,41)(H,42,43,44)/t16-,17+,18-,19+,20+,22-,23+,24-,25+,26-,29+,30-/m1/s1
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| 化学名 |
(1R,4S,7S,9S,10S,13R,15S)-15-hydroxy-7-[(2R,3R,4R,5R,6R)-6-(hydroxymethyl)-3-(3-methylbutanoyloxy)-4,5-disulfooxyoxan-2-yl]oxy-9-methyl-14-methylidenetetracyclo[11.2.1.01,10.04,9]hexadecane-5,5-dicarboxylic acid
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| 别名 |
Carboxyatractyloside; 33286-30-5; (1R,4S,7S,9S,10S,13R,15S)-15-hydroxy-7-[(2R,3R,4R,5R,6R)-6-(hydroxymethyl)-3-(3-methylbutanoyloxy)-4,5-disulfooxyoxan-2-yl]oxy-9-methyl-14-methylidenetetracyclo[11.2.1.01,10.04,9]hexadecane-5,5-dicarboxylic acid; SNP1XL23E6; PH9ATM6F5U; (1R,4S,7S,9S,10S,13R,15S)-15-hydroxy-7-{[(2R,3R,4R,5R,6R)-6-(hydroxymethyl)-3-[(3-methylbutanoyl)oxy]-4,5-bis(sulfooxy)oxan-2-yl]oxy}-9-methyl-14-methylidenetetracyclo[11.2.1.0^{1,10}.0^{4,9}]hexadecane-5,5-dicarboxylic acid; kaur-16-ene-18,19-dioic acid, 15-hydroxy-2-((2-o-(3-methyl-1-oxobutyl)-3,4-di-o-sulfo-beta-D-glucopyranosyl)oxy)-, dipotassium salt, (2beta,15alpha)-; (1R,4R,7R,9R,10R,13R,15S)-7-((2S,3R,4R,5S,6S)-6-(hydroperoxymethyl)-3-(3-methylbutanoyloxy)-4,5-disulfooxyoxan-2-yl)oxy-15-hydroxy-9-methyl-14-methylidenetetracyclo(11.2.1.01,10.04,9)hexadecane-5,5-dicarboxylic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~118.06 mM)
DMSO : ~25 mg/mL (~29.52 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (118.06 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1806 mL | 5.9032 mL | 11.8064 mL | |
| 5 mM | 0.2361 mL | 1.1806 mL | 2.3613 mL | |
| 10 mM | 0.1181 mL | 0.5903 mL | 1.1806 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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