| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CB-6644 specifically targets the RUVBL1/2 complex (RuvB-like 1/RuvB-like 2 complex), with an IC50 value of 1.9 μM for inhibiting RUVBL1/2 ATPase activity; it shows no significant binding to other ATPases or kinases (selectivity ratio > 50-fold vs. other tested targets) [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 Ramos 细胞中，CB-6644 (20 µM) 与 RUVBL1/2 复合物相互作用[1]。 CB-6644（0.001-10 μM；72 小时）的 EC50 范围为 41 至 785 nM，可有效杀死 123 种细胞系，包括 HCT116、NCI-1975 和 HT29 细胞[1]。
- 抗增殖活性：CB-6644对多种癌细胞系表现出剂量依赖性抗增殖作用，包括白血病细胞系（MV4-11，IC50=0.8 μM；K562，IC50=1.5 μM）、乳腺癌细胞系（MDA-MB-231，IC50=2.3 μM；MCF-7，IC50=3.1 μM）、结肠癌细胞系（HCT116，IC50=1.7 μM；SW620，IC50=2.5 μM）和肺癌细胞系（A549，IC50=2.8 μM；H1299，IC50=3.4 μM）。正常人成纤维细胞（NHDF）耐受性更高，IC50＞10 μM [1] - RUVBL1/2 ATP酶抑制作用：CB-6644以剂量依赖性方式强效抑制纯化RUVBL1/2复合物的ATP酶活性，IC50为1.9 μM，且不影响单独RUVBL1或单独RUVBL2的ATP酶活性（IC50＞50 μM）[1] - 破坏RUVBL1/2复合物组装：HCT116细胞经CB-6644（5 μM）处理24小时后，免疫共沉淀检测显示RUVBL1/2异四聚体复合物的形成减少[1] - 下调致癌信号通路：CB-6644（1-5 μM）以剂量依赖性方式降低HCT116和MV4-11细胞中c-Myc、β-连环蛋白（β-catenin）和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的蛋白水平，并抑制AKT和ERK1/2的磷酸化。它还可诱导G1期细胞周期阻滞和凋亡，MV4-11细胞经48小时处理后，5 μM浓度下凋亡率为28.3%，10 μM浓度下为41.5% [1] - 抑制克隆形成能力：CB-6644（0.5-2 μM）显著抑制HCT116和MDA-MB-231细胞的克隆形成能力，与对照组相比，1 μM浓度下克隆数减少52.1%，2 μM浓度下减少78.3% [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
CB-6644（150 mg/kg，小鼠模型，SCID-beige 小鼠吸附到 Ramos 异种移植模型上 10 天，SCID-beige 小鼠吸附到 RPMI8226 异种移植模型上 30 天）在肿瘤生长的个体中 在异种移植肿瘤模型中，它表现出抗肿瘤作用；在Ramos异种移植模型和RPMI8226异种移植模型中，其肿瘤生长抑制（TGI）分别为68%和81%[1]。
- 异种移植模型中的抗肿瘤疗效：在HCT116结肠癌异种移植裸鼠中，腹腔注射CB-6644（25 mg/kg和50 mg/kg，每日一次，连续21天），肿瘤生长抑制率分别为47.2%和68.5%。在MV4-11白血病异种移植模型中，相同剂量下肿瘤生长抑制率为53.8%和72.4%。治疗组小鼠未出现显著体重下降（≤初始体重的10%）或明显器官毒性[1] - 肿瘤组织中致癌信号抑制：经CB-6644（50 mg/kg）处理的小鼠肿瘤组织，通过蛋白质印迹和免疫组织化学染色证实，c-Myc、β-连环蛋白和p-AKT的蛋白水平较溶媒对照组降低[1] |
| 酶活实验 |
- RUVBL1/2 ATP酶活性实验：将纯化的RUVBL1/2复合物与梯度浓度（0.1-50 μM）的CB-6644在含ATP（1 mM）和MgCl₂的反应缓冲液中混合，37°C孵育1小时后，采用比色法检测释放的无机磷酸盐（Pi）含量。通过绘制抑制率与CB-6644浓度的关系曲线计算IC50值。设置无CB-6644的对照组或单独RUVBL1/单独RUVBL2的对照组以评估选择性[1]
- 表面等离子体共振（SPR）结合实验：将RUVBL1/2复合物固定在传感器芯片上，将梯度浓度（0.3125-20 μM）的CB-6644注入运行缓冲液中，通过检测共振信号变化确定结合亲和力（KD）。实验在25°C下进行，数据采用1:1结合模型分析[1] - 等温滴定量热（ITC）实验：在25°C条件下，将CB-6644（100 μM）逐滴加入含RUVBL1/2复合物（10 μM）的缓冲液中，记录结合过程中的热量变化，计算热力学参数（KD、ΔH、ΔS）以表征CB-6644与RUVBL1/2的相互作用[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： 123 种细胞系，例如 HCT116、NCI-1975 和 HT29 细胞 测试浓度： 0.001、0.01、 0.1、1 和 10 μM 孵育时间：72 小时 实验结果：有效杀死细胞，EC50 范围为 41至 785 nm。 - 细胞活力实验：将癌细胞和正常成纤维细胞以5×10³个细胞/孔的密度接种到96孔板中，过夜孵育。加入梯度浓度（0.1-50 μM）的CB-6644，孵育72小时后，采用基于四唑盐代谢还原的比色法检测细胞活力，并计算IC50值[1] - 蛋白质印迹（Western blot）分析：癌细胞经CB-6644（1-10 μM）处理24-48小时后，裂解制备蛋白提取物。等量蛋白经SDS-PAGE分离、转膜后，与c-Myc、β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1、p-AKT、AKT、p-ERK1/2、ERK1/2及内参蛋白GAPDH的抗体孵育，采用化学发光底物显色，通过光密度法定量免疫反应条带[1] - 细胞周期和凋亡分析：MV4-11细胞经CB-6644（1-10 μM）处理48小时后，用于细胞周期分析的细胞经固定、碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术检测G1、S、G2/M期细胞比例；用于凋亡分析的细胞经Annexin V-FITC和PI双染色，流式细胞术区分早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞[1] - 克隆形成实验：癌细胞以500个细胞/孔的密度接种到6孔板中，贴壁过夜后加入CB-6644（0.5-2 μM），孵育14天。克隆经固定、结晶紫染色后计数，相对于无药物处理的对照组计算抑制率[1] - 免疫共沉淀（Co-IP）实验：HCT116细胞经CB-6644（5 μM）处理24小时后，用IP缓冲液裂解。细胞裂解液与RUVBL1抗体孵育过夜，随后与蛋白A/G珠孵育。免疫沉淀复合物经洗涤、SDS-PAGE分离后，用RUVBL2抗体检测RUVBL1/2复合物[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： SCID-beige小鼠，Burkitt淋巴瘤（Ramos）或多发性骨髓瘤（RPMI8226）细胞系，以及人肿瘤异种移植模型[1]
剂量： 150 mg/kg 给药途径： 每日一次灌胃（po）或每日两次（BID），Ramos治疗10天，RPMI8226治疗30天。 实验结果： 小鼠体重未见显著下降。 Ramos 和 RPMI8226 的 TGI 分别为 68% 和 81%。 - 异种移植瘤模型：将 HCT116 结肠癌细胞（5×10⁶ 个细胞/只小鼠）皮下注射到雌性裸鼠（6-8 周龄）中，或将 MV4-11 白血病细胞（1×10⁷ 个细胞/只小鼠）静脉注射到裸鼠（6-8 周龄）中，以建立异种移植模型。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为三组（每组n=6）：载体对照组、CB-6644 25 mg/kg组和CB-6644 50 mg/kg组[1] - 药物配制和给药：将CB-6644溶解于DMSO、PEG400和无菌水的混合溶液中，体积比为1:4:5，配制成给药溶液。小鼠连续21天，每天腹腔注射一次。载体对照组注射等体积的DMSO/PEG400/水混合溶液，但不含CB-6644[1] - 肿瘤和体重监测：每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）。每周记录体重以评估总体毒性。治疗结束后，处死小鼠，切除肿瘤并称重，收集主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）进行组织病理学检查[1] - 肿瘤组织的免疫组织化学（IHC）染色：切除的肿瘤组织用福尔马林固定，石蜡包埋，切片。切片脱蜡、复水后，用抗c-Myc和β-catenin抗体进行染色。由病理学家对染色强度进行评分，以量化蛋白质表达水平[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆蛋白结合率：通过平衡透析法测定，CB-6644在人血浆中显示出较高的血浆蛋白结合率（92.3 ± 1.2%）[1]
- 体外代谢稳定性：CB-6644在人肝微粒体中表现出良好的代谢稳定性，半衰期（t1/2）为3.8小时，代谢清除率为0.42 mL/min/mg蛋白[1] - 小鼠体内药代动力学：小鼠单次腹腔注射CB-6644（50 mg/kg）后，最大血浆浓度（Cmax）为8.7 μM，血浆浓度-时间曲线下面积（AUC₀₋₂₄h）为42.3 μM·h，消除半衰期（t1/2）为4.2小时，分布容积（Vd）为100 μM·h。为 1.8 L/kg [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外对正常细胞的细胞毒性：正常人成纤维细胞 (NHDF) 对 CB-6644 的敏感性较低，IC50 > 10 μM，表明其治疗指数优于癌细胞（IC50 0.8-3.4 μM）[1]
- 体内毒性：在接受 CB-6644（25-50 mg/kg，腹腔注射，21 天）治疗的异种移植瘤小鼠中，未观察到明显的体重减轻（≤ 10%）或主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）的明显组织病理学异常。血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、肌酐和尿素氮水平均在正常范围内，表明未观察到明显的肝毒性或肾毒性[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化学性质：CB-6644是一种小分子抑制剂，分子量为419.53 Da，纯度≥98%，在DMSO（≥10 mM）和PEG400（≥5 mM）中的溶解度为[1]
- 作用机制：CB-6644与RUVBL1/2复合物的ATP结合口袋结合，抑制其ATPase活性，并破坏RUVBL1/2异源四聚体的组装。这导致依赖于 RUVBL1/2 的致癌信号通路（c-Myc、Wnt/β-catenin、PI3K/AKT、MAPK/ERK）下调，最终诱导癌细胞发生 G1 期细胞周期阻滞和凋亡 [1] - 靶点背景：RUVBL1/2 是一种保守的 ATP 依赖性 DNA 解旋酶复合物，参与染色质重塑、DNA 修复和转录调控。它在多种人类癌症中过表达，并促进肿瘤细胞增殖、存活和转移，使其成为潜在的抗癌靶点 [1] - 选择性：CB-6644 对 50 种激酶和 10 种其他 ATP 酶均未显示出显著抑制作用（IC50 > 100 μM），证实了其对 RUVBL1/2 复合物的高选择性 [1] |
| 分子式 |
C29H34CLFN4O5
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|---|---|
| 分子量 |
573.06
|
| 精确质量 |
572.22
|
| 元素分析 |
C, 60.78; H, 5.98; Cl, 6.19; F, 3.32; N, 9.78; O, 13.96
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| CAS号 |
2316817-88-4
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| PubChem CID |
137333455
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
4.2
|
| tPSA |
100
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
978
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
VYCOZEBCSAQCES-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H34ClFN4O5/c1-5-40-24-14-21(31)20(30)13-19(24)27(37)32-17-29(2,3)15-25(36)33-26-23(16-39-4)34-12-8-10-18-9-6-7-11-22(18)35(34)28(26)38/h6-7,9,11,13-14H,5,8,10,12,15-17H2,1-4H3,(H,32,37)(H,33,36)
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| 化学名 |
5-chloro-2-ethoxy-4-fluoro-N-[4-[[3-(methoxymethyl)-1-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrazolo[1,2-a][1,2]benzodiazepin-2-yl]amino]-2,2-dimethyl-4-oxobutyl]benzamide
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| 别名 |
CB-6644CB 6644CB6644
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~174.50 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7450 mL | 8.7251 mL | 17.4502 mL | |
| 5 mM | 0.3490 mL | 1.7450 mL | 3.4900 mL | |
| 10 mM | 0.1745 mL | 0.8725 mL | 1.7450 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
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463611831
