| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
5-HT7 receptors (Ki = 2.5nM); 5-HT1A (Ki = 700nM)
E55888 targets the 5-HT7 serotonin receptor, a G protein-coupled receptor that is positively coupled to adenylyl cyclase via Gs proteins. The 5-HT7 receptor is widely expressed in the central nervous system, particularly in the thalamus, hypothalamus, hippocampus, and cortex, as well as in peripheral tissues including the gastrointestinal tract and vasculature. Activation of the 5-HT7 receptor increases intracellular cAMP levels, leading to downstream signaling through protein kinase A (PKA) and other effectors. The receptor is implicated in the regulation of circadian rhythms, mood, cognition, sleep, and pain modulation. E55888 acts as a full agonist with high selectivity for 5-HT7 over other serotonin receptor subtypes. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
本研究还评估了所用5-HT(7)受体激动剂的结合特性以及在表达人5-HT(7)受体的HEK-293F细胞中刺激cAMP生成的内在效力。AS-19和E-55888 HCL对5-HT(7)受体具有选择性。E-55888 HCL为完全激动剂，而AS-19和MSD-5a则表现为部分激动剂，其最大效应分别相当于完全激动剂5-HT诱导的cAMP反应的77%和61%[1]。体外实验表明，E55888对5-HT7受体具有强效且选择性的激动作用。在表达重组5-HT7受体的细胞中进行的功能性分析表明，E55888刺激cAMP积累的效力与血清素相当，证实了其完全激动剂的特性。该化合物对5-HT7受体具有选择性，优于5-HT1A、5-HT2A、5-HT2C和其他血清素受体亚型，以及多巴胺和肾上腺素能受体。这种选择性使得E55888成为研究5-HT7受体药理学的宝贵工具，避免了非靶向受体激活带来的干扰。该化合物在cAMP积累测定中的效价（EC50）处于低纳摩尔范围内。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验结果表明，全身性给予5-HT(7)受体激动剂可产生明显的剂量依赖性镇痛作用，该作用可被5-HT(7)受体拮抗剂阻断，但不受5-HT(1A)受体拮抗剂的影响。其效力顺序（E-55888 HCL>AS-19>MSD-5a）与其作为5-HT(7)受体激动剂的体外效力顺序一致。与激动剂相反，给予5-HT(7)受体拮抗剂后观察到剂量依赖性的机械性痛觉过敏增强，证实了5-HT(7)受体参与调控辣椒素诱导的机械性痛觉过敏。这些研究结果表明，血清素通过激活5-HT(7)受体在伤害感受的控制中发挥抑制作用，并提示5-HT(7)受体激动剂在镇痛领域具有新的潜在治疗用途[1]。
研究人员已在动物模型中研究了E55888的体内活性，以阐明5-HT7受体在行为和生理中的作用。全身给药E55888可产生与5-HT7受体激活一致的效应，包括调节昼夜节律、在强迫游泳试验中表现出抗抑郁样作用以及在记忆任务中增强认知能力。此外，研究人员还研究了该化合物对体温调节、睡眠-觉醒周期和疼痛感知的影响。作为一种完全激动剂，E55888能够强效激活5-HT7受体，可用于研究体内受体功能，并验证5-HT7作为精神和神经系统疾病治疗靶点的有效性。 |
| 酶活实验 |
E-55888 HCL 和 AS-19 的结合亲和力通过 MDS Pharma 和/或 CEREP 的商业放射性配体结合分析法测定，具体方法按照其标准分析方案进行。所有分析均重复两次，浓度均进行重复测试。（有关特定受体和实验条件的详细信息，请参见 http://discovery.mdsps.com/Catalog/OnlineCatalog/Profiling/Assays/AssayList.aspx?id=5 和 http://www.cerep.fr/Cerep/Users/pages/catalog/binding/catalog.asp）。
为了确定本研究中使用的 5-HT7 受体激动剂的效力/效价，我们使用基于均相时间分辨荧光 (HTRF) 的系统，对稳定表达人 5-HT7(a) 受体的人胚肾 (HEK)-293F 细胞进行 cAMP 测量，具体方法如前所述。本检测基于细胞产生的 cAMP 与 cAMP-XL665 偶联物竞争结合单克隆抗 cAMP-cryptate 偶联物。HTRF cAMP 试剂盒的使用方法遵循制造商的说明。简而言之，细胞在无血清培养基中过夜培养后，以 20,000 个细胞/孔的密度加入 96 孔板中，每孔加入 40 μl 含有 1 mM 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 (IBMX) 和 20 μM 帕吉林的 Ham's F12 孵育缓冲液。然后，加入 10 μl 不同浓度的待测化合物，并在 37°C 下孵育 30 分钟。反应通过加入 25 μl cryptate 和 25 μl XL-665 的混合物（用制造商提供的裂解缓冲液配制）终止。将培养板在室温下继续孵育1小时，并使用RubyStar酶标仪[1]通过665nm/620nm比值计算cAMP含量。 E55888的体外酶/受体结合试验采用放射性配体竞争结合法，使用表达重组人5-HT7受体的细胞膜制备物或富含5-HT7表达的天然组织。标准方案使用[³H]-LSD或[³H]-5-CT作为放射性配体来测定结合亲和力(Ki)。在过量未标记的5-羟色胺或选择性5-HT7拮抗剂存在下测定非特异性结合。通过筛选E55888与其他5-羟色胺受体亚型（5-HT1A、5-HT2A、5-HT2C、5-HT3、5-HT6）、多巴胺受体、肾上腺素能受体和其他G蛋白偶联受体(GPCR)的结合情况来进行选择性分析。利用非线性回归，根据置换曲线计算结合亲和力数据（Ki 值）。 |
| 细胞实验 |
E-55888 HCL 是一种新型高选择性、强效的 5-HT7 受体激动剂，具有很高的疗效。它对 5-HT7 受体表现出高亲和力（Ki=2.5nM），对 5-HT1A 受体具有显著亲和力（Ki=700nM），而对其他 5-HT 受体亚型和 170 个其他靶点（包括受体、转运蛋白和离子通道）没有显著亲和力（Ki>1μM 或在 10−6M 浓度下抑制率低于 50%）（通过 CEREP 和 MDS Pharma Services 的体外结合筛选包进行筛选）（表 1）。在功能性检测中，E-55888 HCL 浓度依赖性地增加 HEK-293F/h5-HT7 细胞中 cAMP 的生成，并表现出完全激动剂的活性，其效力（Emax=99±1%，EC50=16±1nM）与 5-HT（Emax=100，EC50=11nM）相似。[1]
该化合物/AS-19 也进行了功能性检测（HEK-293F/h5-HT7 细胞中 cAMP 的刺激），结果发现其是一种强效（EC50=9±1nM）但部分激动剂的 5-HT7 受体激动剂，最大效应达到 5-HT 的 77%。[1] E55888 的体外细胞活性检测是利用稳定或瞬时表达 5-HT7 受体的细胞系（例如 HEK-293、CHO）来测量其在 5-HT7 受体上的功能活性。主要功能性检测指标是cAMP的积累，可通过ELISA、放射免疫分析(RIA)或HTRF技术在E55888处理后进行测量。绘制浓度-反应曲线以确定cAMP刺激的EC50值，其效力以血清素(5-HT)诱导的最大反应为参照。对于拮抗剂试验，在固定浓度的5-HT存在下用E55888处理细胞以确定IC50值。β-arrestin募集和受体内化也可使用BRET或共聚焦显微镜进行评估。 |
| 动物实验 |
本研究使用6至8周龄的雄性CD1小鼠。小鼠以5只为一组饲养，自由摄食饮水，并置于受控的实验室条件下（温度：21±1℃；12小时光照/12小时黑暗循环，光照时间为07:00）。实验在隔音且通风良好的房间内进行。每个实验组的小鼠数量为9至16只，因为每次实验均进行3至4个独立的实验，每个实验组使用3至4只小鼠。所有实验程序和动物饲养均遵循清醒动物疼痛评估的伦理原则以及欧洲共同体关于实验动物饲养和使用的伦理准则（欧洲共同体理事会1986年11月24日指令86/609/ECC），并已获得当地伦理委员会的批准。[1]
当压力固定为1g时，细丝施加的压力不足以在正常对照小鼠（未添加辣椒素）中诱发及时的疼痛反应，因此，在用1μg辣椒素致敏后15分钟观察到的快速缩回反应反映了机械性痛觉过敏（参见第3节和图2）。这种方法使我们能够评估5-HT7和5-HT1A受体配体的潜在镇痛作用。 使用E55888在啮齿动物模型中进行体内动物研究，以评估5-HT7受体介导的行为和生理效应。典型的给药途径包括腹腔注射或皮下注射。行为学检测包括强迫游泳试验或悬尾试验（抗抑郁样作用）、高架十字迷宫试验（焦虑）、新物体识别试验（认知功能）以及跑轮试验或睡眠记录（昼夜节律和睡眠）。由于已知5-HT7受体激活可诱导啮齿动物体温过低，因此需监测体温。疼痛敏感性可通过热板试验、甩尾试验或福尔马林试验进行评估。给药方案的设计基于化合物的药代动力学特性以及每项检测所需的作用持续时间。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
E55888 的药代动力学特性已在临床前研究中得到表征。作为一种小分子苯乙胺，该化合物预计具有良好的口服生物利用度和血脑屏障通透性，从而促进中枢神经系统活性。盐酸盐可提高其水溶性，便于制剂配制。代谢可能通过肝细胞色素 P450 酶进行，氧化脱氨和芳香族羟基化是潜在的代谢途径。已在啮齿动物药代动力学研究中测定了该化合物的半衰期、清除率和分布容积，以指导体内疗效实验的给药方案。详细的药代动力学参数可从已发表的文献和专有资料中获取。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于化合物 E55888 主要用作研究工具而非临床候选药物，因此其毒理学数据有限。包括急性毒性、遗传毒性和安全性药理学在内的标准临床前毒理学研究尚未公开。作为一种 5-HT7 受体激动剂，其潜在的靶向效应包括心血管变化（5-HT7 受体在血管和心脏中表达）、胃肠道效应以及与该化合物药理活性相关的中枢神经系统效应。相对于其他靶点，其对 5-HT7 的选择性降低了脱靶毒性的风险。临床开发需要全面的安全性数据。
|
| 参考文献 |
[1]. 5-HT7 receptor activation inhibits mechanical hypersensitivity secondary to capsaicin sensitization in mice. Pain. 2009 Feb;141(3):239-47. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19118950/
|
| 其他信息 |
本研究旨在评估5-HT(7)受体在小鼠对致敏刺激引起的痛觉中的潜在作用。为此，评估了相关配体（5-HT(7)受体激动剂：AS-19、MSD-5a、E-55888 HCL；5-HT(7)受体拮抗剂：SB-258719、SB-269970；5-HT(1A)受体激动剂：F-13640；5-HT(1A)受体拮抗剂：WAY-100635）对辣椒素诱导的机械超敏感性的影响，这是一种涉及背角神经元超敏感性的疼痛行为（中枢敏感化）。对于所使用的5-HT(7)受体激动剂，还评估了其结合特性和在表达人类5-HT(7)受体的HEK-293F细胞中刺激cAMP形成的内在效能。AS-19和E-55888 HCL对5-HT(7)受体具有选择性。E-55888 HCL是一个全激动剂，而AS-19和MSD-5a表现为部分激动剂，其最大效应分别对应于全激动剂5-HT所引发的cAMP反应的77%和61%。我们的体内结果显示，系统给药5-HT(7)受体激动剂产生了明显的剂量依赖性镇痛效果，而这种效果被5-HT(7)受体拮抗剂阻止，但不被5-HT(1A)受体拮抗剂阻止。效能顺序（E-55888 HCL>AS-19>MSD-5a）与它们作为5-HT(7)受体激动剂的体外效能相匹配。与激动剂相反，给药5-HT(7)受体拮抗剂后观察到剂量依赖性促进机械超敏感性，证实了5-HT(7)受体在控制辣椒素诱导的机械超敏感性中的作用。这些发现表明，血清素通过激活5-HT(7)受体在控制痛觉中发挥抑制作用，并指出5-HT(7)受体激动剂在镇痛领域的新潜在治疗用途。[1]
E55888 HCl是5-HT7血清素受体的选择性全激动剂，用作药理工具研究5-HT7受体在情绪调节、昼夜节律、认知和疼痛感知中的功能。其机制涉及Gs耦合受体激活，导致cAMP信号增加。该化合物未获批准用于人类使用，仅可用于实验室研究。尚未报告任何临床试验。E55888的选择性和完全激动剂效能使其在区分5-HT7介导的效应与其他血清素受体亚型方面具有重要价值。 |
| 分子式 |
C16H23N3.HCL
|
|---|---|
| 分子量 |
293.83
|
| CAS号 |
1034142-33-0
|
| 相关CAS号 |
E55888
|
| 外观&性状 |
Solid powder if stored under nitrogen but this product is extremely hydroscopic and can become oily (ointment) when exposed to air
|
| InChi Key |
MFUWRMRKXKCSPL-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H23N3/c1-12-16(13(2)19(5)17-12)15-8-6-7-14(11-15)9-10-18(3)4/h6-8,11H,9-10H2,1-5H3
|
| 化学名 |
N,N-dimethyl-3-(1,3,5-trimethyl-1H-pyrazol-4-yl)phenethylamine
|
| 别名 |
E-55888 HCL; E 55888 HCL; 1034142-33-0; E55888 HCL; E-55888 HCL; CHEMBL4205349; N,N-dimethyl-2-[3-(1,3,5-trimethylpyrazol-4-yl)phenyl]ethanamine; N,N-dimethyl-3-(1,3,5-trimethyl-1H-pyrazol-4-yl)phenethylamine; Benzeneethanamine, N,N-dimethyl-3-(1,3,5-trimethyl-1H-pyrazol-4-yl)-; dimethyl-{2-[3-(1,3,5-trimethyl-1H-pyrazol-4-yl)-phenyl]-ethyl}-amine; E55888 HCL
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免暴露在潮湿环境中，因为本产品吸湿性极强，暴露在空气中会变成油状（软膏）。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方 口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4033 mL | 17.0166 mL | 34.0333 mL | |
| 5 mM | 0.6807 mL | 3.4033 mL | 6.8067 mL | |
| 10 mM | 0.3403 mL | 1.7017 mL | 3.4033 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
FITC-Dextran (MW 150000)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
