| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPR55
G protein-coupled receptor 55 (GPR55) antagonist [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
CID 16020046对胎儿胆碱酯酶的阻断作用较弱(pIC50=4.4)，m-阿片受体的拮抗作用(pIC50=4.6)，对KCNH2的阻断作用，人胚肾(HEK)-G蛋白偶联受CID 16020046 (2.5 μM；≥25分钟)显着抑制溶血磷脂酰肌醇(LPI；2.5 μM)诱导的ERK1/2磷酸化。体55 (GPR55)细胞中的hERG通道(pIC50=4.6)[1]。 CID 16020046单独不能诱导HEK-GPR55、HEKCB1细胞中的细胞内Ca2+释放，并且没有显示ERK1/2磷酸化[1]。用CID16020046 (0.01、0.1、1、10 μM)重组会导致GPR55介导的NFAT 激活、NF-kB 激活和 SRE 诱导浓度依赖降低，以响应 HEKGPR55 中的 1 μM LPI 或 GSK319197A 和 HEK-CB1[1]。 CID16020046 (2.5 μM) 紧密抗 GPR55 介导的信号因子激活和核转裁CID16020046 (1 μM) 消除了LPI感应的HMVEC-Ls伤口创伤刺激[1]。 Western Blot分析细胞系: HEK-CB1和HEK-，但对CB1导介的CREB激活没有影响[1]。 CB2 细胞[1] 浓度：2.5 μM 孵育时间：≥25 分钟 结果：显着抑制 LPI (2.5 μM) 诱导的 ERK1/2 磷酸化。单独治疗显示没有 ERK1/2 磷酸化，并且没有改变 WIN55,212-2 (2.5 μM) 在 HEK-CB1 和 HEK-CB2 细胞中诱导的 ERK1/2 磷酸化。
在J774A.1小鼠巨噬细胞中，CID16020046 能浓度依赖性地减少C5a (5 nM)诱导的细胞迁移。与溶剂对照组相比，用1和5 μM CID16020046 孵育可显著减少迁移。 在相同的J774A.1细胞系中，MCP-1 (1 nM)诱导的活化标志物CD11b的表达可被CID16020046 (1, 5, 10 μM)浓度依赖性地降低，几乎恢复到对照水平。 CID16020046 (1 和 2.5 μM) 能强烈抑制由趋化剂fMLP (100 nM)诱导的分离的人中性粒细胞的迁移。 在这些体外实验中使用的CID16020046浓度 (1, 5, 10 μM) 不影响细胞活力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
CID16020046 减少模型生物体中的促炎细胞因子并改善肠道炎症。在健康小鼠中，CID16020046 对运动活动或焦虑水平没有影响[1]。
每天服用CID16020046（20 mg kg−1）可显著降低炎症评分和髓过氧化物酶（MPO）活性。在DSS结肠炎模型中，结肠组织中TNF-α和IL-1β的水平以及环氧化酶（Cox）-2和STAT-3的表达降低，而在TNBS诱导的结肠炎中，Cox-2、IL-1β和IL-6的水平显著降低。流式细胞术对白细胞募集的评估表明，在DSS诱导的结肠炎中，GPR55抑制后，结肠中淋巴细胞和巨噬细胞的存在减少。在J774A.1小鼠巨噬细胞中，抑制GPR55显示巨噬细胞的迁移减少，CD11b表达降低，表明CID16020046对巨噬细胞的直接作用可能有助于改善结肠炎。与DSS模型中的野生型小鼠相比，GPR55−/−敲除小鼠的炎症评分降低，表明其在肠道炎症中具有促炎作用[1]。 在C57BL/6小鼠的DSS诱导结肠炎模型中，每日皮下注射CID16020046 (20 mg/kg)，连续7天，与溶剂处理组相比，能显著降低结肠的宏观炎症评分和髓过氧化物酶(MPO)活性。结肠长度缩短也有所改善。 在TNBS诱导的结肠炎模型中，每日皮下注射CID16020046 (20 mg/kg)，连续3天，同样能显著降低宏观炎症评分和MPO活性。 对DSS和TNBS模型结肠切片的组织学检查显示，与溶剂处理组相比，CID16020046处理组的结肠隐窝结构保存更好，固有层白细胞浸润减少。 在DSS模型中，CID16020046处理降低了结肠组织中促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的水平，而IL-6水平未改变。 在TNBS模型中，CID16020046处理显著降低了结肠组织中IL-1β和IL-6的水平，TNF-α水平也有所降低但不显著。 CID16020046处理显著降低了DSS和TNBS模型中结肠组织的环氧合酶-2 (Cox-2)蛋白表达。 STAT3磷酸化(pSTAT3)受到差异性调节：在DSS模型中，CID16020046处理后pSTAT3降低；而在TNBS模型中，pSTAT3增加。 对DSS模型中白细胞募集的流式细胞术分析显示，CID16020046处理导致结肠固有层中浸润的巨噬细胞和淋巴细胞数量减少近50%，而单核细胞和嗜酸性粒细胞数量无明显变化。中性粒细胞数量增加。 对DSS模型结肠切片的CD3 (T淋巴细胞)和F4/80 (巨噬细胞)免疫组化染色证实，CID16020046处理后黏膜下层的免疫反应性降低。 经受DSS诱导结肠炎的GPR55基因敲除小鼠，与野生型同窝仔相比，表现出显著降低的炎症评分和MPO活性，这支持了GPR55的促炎作用。 在健康C57BL/6小鼠的旷场实验中，每日皮下注射CID16020046 (20 mg/kg)，连续6天，与溶剂处理组相比，未改变小鼠的运动活动（总移动距离）或焦虑样行为（在中心区域停留的时间）。体重和体温也未受影响。 |
| 酶活实验 |
化合物CID16020046（4-[4-（3-羟基苯基）-3-（4-甲基苯基）-6-氧代-1H，4H，5H，6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]苯甲酸）是一种选择性GPR55拮抗剂。在表达人GPR55的酵母细胞中，CID16020046拮抗激动剂诱导的受体激活。在稳定表达人GPR55的人胚胎肾（HEK293）细胞中，该化合物表现为LPI介导的Ca 2⁺释放和细胞外信号调节激酶激活的拮抗剂，但在表达大麻素受体1或2（CB₁或CB₂）的HEK293细胞中则不然。CID16020046浓度依赖性地抑制了LPI诱导的活化T细胞核因子（NFAT）、活化B细胞核因子κ（NF-κB）和血清反应元件的活化、NFAT和NF-κB的易位以及GPR55的内化。它减少了LPI诱导的原代人肺微血管内皮细胞的伤口愈合，并逆转了LPI抑制的血小板聚集，表明GPR55在血小板和内皮细胞功能中起着新的作用。因此，CID16020046是研究原代细胞和组织中GPR55介导机制的有价值的工具[2]。
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| 细胞实验 |
在 500 μL PBS 中复溶后，将 2 × 106 细胞与 1、5 和 10 μM CID16020046 或 DMSO 预孵育 30 分钟。然后使用 1 nM 单核细胞趋化蛋白 1 (MCP-1) 在 37°C 下再刺激细胞半小时。在潜伏期结束前 15 分钟，添加 Alexa Fluor 647 抗小鼠 CD11b。添加固定液后，在 FACSCalibur 流式细胞仪上对细胞进行计数。数据以媒介物处理的百分比变化形式报告，实验一式三份进行。
迁移实验 (J774A.1巨噬细胞): J774A.1小鼠巨噬细胞在含0.5% FBS的培养基中饥饿过夜。然后用CID16020046 (1, 5 μM)或溶剂处理细胞。将3 x 10^5个细胞的悬浮液加入Transwell小室的上室（膜孔径8 μm）。趋化剂C5a (5 nM)加入下室的培养基中。细胞在37°C、5% CO2的加湿培养箱中迁移2小时。迁移结束后，去除滤膜上室未迁移的细胞。滤膜干燥后，用甲醛固定并封片。在荧光显微镜下对迁移的细胞核进行计数。 CD11b表达实验 (J774A.1巨噬细胞): 将J774A.1细胞 (2 x 10^6)转移至PBS中，与CID16020046 (1, 5, 10 μM)或溶剂预孵育30分钟。然后用MCP-1 (1 nM)在37°C下再刺激30分钟。在孵育结束前15分钟，加入Alexa Fluor 647标记的抗小鼠CD11b抗体。加入固定液后，用流式细胞仪分析细胞的CD11b表达。 迁移实验 (人中性粒细胞): 从健康供体血液中分离人中性粒细胞。将细胞重悬于PBS中，密度为2 x 10^6个细胞/mL。将趋化剂fMLP (100 nM)加入48孔微Boyden小室的下室（聚碳酸酯膜孔径5 μm）。将中性粒细胞悬液与不同浓度的CID16020046 (1, 2.5 μM)或溶剂一起加入上室。小室在37°C孵育1小时。孵育后，去除上室中剩余的细胞。将迁移到下室的细胞转移至试管中，固定后用流式细胞仪分析。 |
| 动物实验 |
在结肠炎模型出现前 30 分钟，皮下注射 CID16020046（或载体），剂量为 20 mg kg−1，在 DSS 模型中每日一次，连续 7 天；在 TNBS 模型中每日一次，连续 3 天。[1]
结肠炎的诱导方法有两种：一是向 C57BL/6 小鼠的饮用水中添加 2.5% 葡聚糖硫酸钠 (DSS)；二是单次直肠内注射三硝基苯磺酸 (TNBS)。[1] DSS 诱导的结肠炎模型：雄性 C57BL/6N 小鼠（5-6 周龄）在饮用水中添加 2.5% 葡聚糖硫酸钠 (DSS)，连续 5 天以诱导结肠炎。 CID16020046（20 mg/kg）或溶剂（DMSO）每日皮下注射一次，从DSS暴露前30分钟开始，持续7天。小鼠于第7天安乐死，并收集结肠进行分析。 TNBS诱导结肠炎模型：雄性C57BL/6N小鼠轻度麻醉。通过灌胃针经直肠给予三硝基苯磺酸（TNBS；4 mg溶于100 μL 30%乙醇）以诱导结肠炎。CID16020046（20 mg/kg）或溶剂（DMSO）每日皮下注射一次，从TNBS给药前30分钟开始，持续3天。小鼠于第3天处死，并收集结肠进行分析。 GPR55基因敲除小鼠模型：GPR55基因敲除小鼠及其野生型同窝小鼠按照上述DSS诱导结肠炎方案进行实验。炎症程度通过肉眼观察和髓过氧化物酶（MPO）活性测定进行评估。 旷场实验（行为学研究）：健康C57BL/6N小鼠连续6天每日皮下注射CID16020046（20 mg/kg）或载体（DMSO）。第6天，末次注射后30分钟，将每只小鼠置于旷场中央。使用视频追踪系统记录其5分钟的行为，以评估其运动活性和焦虑样行为。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在健康小鼠的旷场实验中，连续6天每日皮下注射CID16020046（20 mg/kg）未引起任何疾病症状、运动活性改变或焦虑样行为改变。与载体对照组相比，小鼠的体重和体温均无变化。
体外实验中使用的CID16020046浓度（最高达10 μM）不影响细胞活力。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
背景
G蛋白偶联受体55 (GPR55) 是一种溶血磷脂受体，对某些大麻素有反应。GPR55在肠道炎症过程中的作用尚不清楚。我们使用最近鉴定的GPR55抑制剂CID16020046，确定了GPR55在实验性肠道炎症中的作用，并探索了其可能的作用机制。 结论和推论 药理学阻断GPR55可通过减少白细胞的迁移和活化（尤其是巨噬细胞的迁移和活化）来减轻实验性肠道炎症。因此，CID16020046 是一种潜在的肠道炎症治疗药物。[1] G 蛋白偶联受体 55 (GPR55) 具有促癌活性，其功能可通过一些尚不明确的信号通路被 (R,R')-4'-甲氧基-1-萘酚苯诺特罗 (MNF) 竞争性抑制。本研究以人胰腺癌细胞系 PANC-1 为模型，重点关注已知癌症生物标志物的表达以及多药耐药 (MDR) 外排蛋白（如 P-糖蛋白 (Pgp) 和乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)）的表达和功能，探讨了 MNF 的抗肿瘤作用。将PANC1细胞与MNF（1μM）孵育24小时后，EGF受体、丙酮酸激酶M2（PKM2）和β-catenin蛋白水平显著降低，同时HIF-1α以及PKM2和β-catenin磷酸化活性形式的核内积累也显著减少。使用MNF或GPR55拮抗剂CID 16020046抑制GPR55可降低细胞总提取物中MDR蛋白的含量，同时减少Pgp和BCRP的核表达。MNF处理的PANC-1细胞中阿霉素的核内积累显著增加，且MNF预孵育可增强阿霉素和吉西他滨对这些细胞的细胞毒性。在表达高水平GPR55的MDA-MB-231乳腺癌细胞和U87MG胶质母细胞瘤细胞中也观察到了MNF对阿霉素细胞毒性的增强作用。数据表明，抑制GPR55活性可通过减弱MEK/ERK和PI3K-AKT通路产生抗肿瘤作用，从而降低MDR蛋白的表达和功能。Pharmacol Res. 2016年9月111日:757-766. CID16020046是一种新型的高选择性G蛋白偶联受体55 (GPR55)拮抗剂。 GPR55是一种非典型大麻素受体，可被溶血磷脂酰肌醇(LPI)激活，并受某些大麻素的调节。 本研究表明，使用CID16020046进行GPR55的药理学抑制，可保护小鼠免受结肠炎模型（DSS和TNBS）的肠道炎症。该保护作用与结肠白细胞（尤其是巨噬细胞和淋巴细胞）募集减少、促炎细胞因子水平降低以及Cox-2表达减少有关。 GPR55基因敲除也降低了DSS诱导的结肠炎的易感性，证实了该受体在肠道炎症中的促炎作用。 CID16020046对巨噬细胞具有直接作用，在体外抑制其迁移和活化标志物（CD11b）的表达。 在测试剂量下，该拮抗剂未表现出中枢神经系统活性，也未在健康小鼠中诱发疾病行为，表明其在这些方面具有良好的安全性。 CID16020046是一种潜在的炎症性肠病治疗药物。 |
| 分子式 |
C25H19N3O4
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|---|---|
| 分子量 |
425.436065912247
|
| 精确质量 |
425.138
|
| 元素分析 |
C, 70.58; H, 4.50; N, 9.88; O, 15.04
|
| CAS号 |
834903-43-4
|
| PubChem CID |
16020046
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.603
|
| tPSA |
106.52
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
701
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(C1C=CC(N2C(C3C=C(O)C=CC=3)C3=C(NN=C3C3C=CC(C)=CC=3)C2=O)=CC=1)O
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| InChi Key |
VGUQVYZXABOXCX-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H19N3O4/c1-14-5-7-15(8-6-14)21-20-22(27-26-21)24(30)28(18-11-9-16(10-12-18)25(31)32)23(20)17-3-2-4-19(29)13-17/h2-13,23,29H,1H3,(H,26,27)(H,31,32)
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| 化学名 |
4-[4-(3-hydroxyphenyl)-3-(4-methylphenyl)-6-oxo-1,4-dihydropyrrolo[3,4-c]pyrazol-5-yl]benzoic acid
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| 别名 |
CID-16020046; CID16020046; 834903-43-4; CID-16020046; CID16020046; 4-[4-(3-hydroxyphenyl)-3-(4-methylphenyl)-6-oxo-1,4-dihydropyrrolo[3,4-d]pyrazol-5-yl]benzoic acid; 5AUY4Y2UPU; MLS000675307; SMR000314029; CID 16020046
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~235.1 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 25 mg/mL (58.76 mM) in 20%PEG300 80% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3505 mL | 11.7525 mL | 23.5051 mL | |
| 5 mM | 0.4701 mL | 2.3505 mL | 4.7010 mL | |
| 10 mM | 0.2351 mL | 1.1753 mL | 2.3505 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
LP-471756
JMS-17-2
JNJ 63533054
APD597 (JNJ38431055)
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