| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Protein arginine methyltransferase 5 (PRMT5) [1][2]
CMP-5 targets protein arginine methyltransferase 5 (PRMT5). PRMT5 is a type II arginine methyltransferase that catalyzes the symmetric dimethylation of arginine residues on histone and non-histone proteins. This methylation plays a critical role in various cellular processes, including gene regulation, cell cycle progression, DNA repair, and signal transduction. PRMT5 is often overexpressed in cancer and is involved in tumorigenesis. CMP-5 is a selective inhibitor of PRMT5, meaning it specifically binds to and inhibits the enzymatic activity of PRMT5 without affecting other closely related PRMTs, such as PRMT1, PRMT4, and PRMT7. The compound blocks the symmetric dimethylation of histone H4 arginine 3 (H4R3me2s), a histone mark associated with transcriptional repression. By inhibiting PRMT5, CMP-5 can modulate gene expression and affect cellular processes such as proliferation and differentiation. The compound also exhibits antiviral activity, possibly by interfering with viral replication or host-virus interactions. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
尽管CMP-5（0-100 μM；24-72小时）即使在长时间作用后仍能发挥作用，但其对正常静息B细胞的毒性有限[1]。与DMSO处理组相比，CMP-5（40 μM；24小时）降低了60A细胞中p-BTK和pY(416)SRC的表达[1]。当暴露于CMP-5（0-40 μM；24小时）时，PRMT5在Th1细胞中的转录优先于Th2细胞；在人Th1细胞和Th2细胞中，IC50值分别为26.9 μM和31.6 μM。CMP-5（25 μM；24小时）使小鼠Th1细胞增殖减少了91%。应用不同剂量的IL-2，发现IL-2增强增殖的程度在5 ng/mL时达到最大值[1]。
- CMP5 可阻断 EBV 驱动的 B 淋巴细胞转化和存活，而不影响正常 B 细胞。在 40 μM 浓度下，CMP5 可占据 hPRMT5 的催化位点，抑制 S2me-H4R3 和 S2me-H3R8 的对称二甲基化，但对淋巴母细胞系中 H4R3 的不对称甲基化没有影响。抑制 PRMT5 可减少 PRMT5/p65/HDAC3 抑制复合物在 miR96 启动子上的募集，从而恢复 miR96 的表达并下调 PRMT5 的表达。 RNA测序和染色质免疫沉淀实验表明，CMP5增强肿瘤抑制基因PTPRO的表达，导致调控B细胞受体信号传导的激酶去磷酸化[1] - CMP5抑制TH1细胞增殖的IC50为3.7 μM，抑制TH2细胞增殖的IC50为9.2 μM[2] - 体内实验： - 小鼠CMP5治疗可抑制记忆性T细胞反应，减轻迟发型超敏反应模型中的炎症，并缓解实验性自身免疫性脑脊髓炎的临床症状[2] 体外实验表明，CMP-5选择性抑制PRMT5甲基转移酶在组蛋白制剂上的活性，阻断组蛋白H4精氨酸3的对称二甲基化（H4R3me2s）。该化合物对PRMT1、PRMT4和PRMT7酶均无活性，表明其对PRMT5具有高度选择性。CMP-5已被证实能够阻止EB病毒（EBV）诱导的B淋巴细胞转化。EBV是一种疱疹病毒，可感染B淋巴细胞并诱导其转化为淋巴母细胞系。PRMT5是该转化过程所必需的。CMP-5通过抑制PRMT5来阻止B细胞转化，表明PRMT5是EBV相关疾病的潜在治疗靶点。重要的是，CMP-5对正常B细胞无影响，提示该化合物具有良好的选择性。该化合物的抗病毒活性也适用于SARS病毒感染，但其确切机制尚未完全阐明。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PRMT5抑制剂可抑制体内OVA诱导的迟发型超敏反应（DTH）炎症反应[2]
PRMT5抑制剂抑制炎症记忆T细胞反应的有效性提示其可能对炎症或自身免疫性疾病有益。为了验证这一假设，我们使用了OVA诱导的DTH小鼠模型和HLCL65（一种效力更强、生物利用度更高的CMP5衍生物）（图1H、2H、补充图2）。首先，我们分析了未经处理的小鼠在用CFA免疫OVA后脾脏中PRMT5的表达。我们观察到，免疫后10天，脾脏中PRMT5的表达显著上调（图6A），表明PRMT5的表达与体内DTH免疫反应相关。在迟发型超敏反应（DTH）模型（如图 6B 所示）中，用 CFA 进行 OVA 免疫可诱导 OVA 特异性 T 细胞反应，该反应在小鼠随后暴露于无佐剂 OVA 和记忆性 CD4+ T 细胞扩增时引起足垫炎症。在再次刺激期间使用 HLCL65 治疗可使足垫肿胀（炎症指标）降低 40%（p < 0.05，图 6C）。此外，与载体组相比，HLCL65 治疗可使 OVA 特异性 T 细胞增殖降低 36%（图 6D），IFN-γ 产生降低 70%（图 6E）。这些数据表明，我们新开发的 PRMT5 抑制剂 HLCL65 可在体内抑制 T 细胞介导的免疫反应和炎症。 - CMP5治疗小鼠可抑制记忆性T细胞反应，减轻迟发型超敏反应模型中的炎症，并缓解实验性自身免疫性脑脊髓炎的临床症状[2] CMP-5的体内活性已得到研究，尤其是在EBV驱动的B淋巴细胞转化方面。虽然现有文献中并未提供具体的体内研究细节，但该化合物在体外抑制EBV驱动的B淋巴细胞转化的能力表明，它可能具有治疗体内EBV相关疾病的潜力。包括CMP-5在内的PRMT5抑制剂正被探索作为癌症和病毒感染的潜在治疗药物。该化合物对PRMT5相对于其他PRMT的选择性表明其可能具有良好的安全性。然而，仍需进一步的体内研究来评估其在动物疾病模型中的疗效和安全性。CMP-5是研究PRMT5在体内作用的宝贵工具。 |
| 酶活实验 |
CMP-5的主要体外检测方法是测定其对PRMT5甲基转移酶活性的抑制作用。这通常采用放射性或发光法进行。在放射性检测中，将重组PRMT5与组蛋白底物（例如组蛋白H4或其衍生肽）和S-腺苷-L-[甲基-³H]甲硫氨酸（[³H]-SAM）作为甲基供体进行孵育。反应混合物包含50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）、0.1 mM EDTA、1 mM DTT和不同浓度的CMP-5。加入酶启动反应。在30°C孵育1小时后，加入三氯乙酸终止反应。将沉淀的组蛋白收集在滤板上，并使用闪烁计数器测量掺入的放射性。计算每种化合物浓度下的抑制百分比，并以不含抑制剂的对照组为基准。 IC₅₀值由剂量反应曲线确定。为评估选择性，使用PRMT1、PRMT4和PRMT7酶进行相同的测定。该化合物对PRMT5的选择性通过其对其他PRMT酶无活性得到证实。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析 [1]
细胞类型： 60A 细胞 测试浓度： 40 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： p-BTK 和 pY(416)SRC 蛋白水平受到抑制。 细胞活力检测[1] 细胞类型：人Th1细胞和Th2细胞 测试浓度：25 μM 孵育时间：24小时 实验结果：抑制小鼠Th1细胞增殖，但添加IL-2可剂量依赖性地增加细胞增殖。 在体外细胞实验中，CMP-5的活性通常在B淋巴细胞系中进行评估，例如EBV转化细胞系。将细胞接种于多孔板中，并用不同浓度（例如0.1-10 μM）的CMP-5处理一定时间（例如48-72小时）。使用MTT或刃天青法评估细胞活力。计算每种化合物浓度下相对于未处理对照细胞的细胞活力百分比。 IC₅₀，即使细胞活力降低50%的浓度，由剂量反应曲线确定。CMP-5对细胞内PRMT5活性的影响通过Western blot检测组蛋白H4精氨酸3的对称二甲基化（H4R3me2s）水平来评估，所用抗体为特异性抗体。PRMT5靶基因的表达通过qRT-PCR进行分析。该化合物抑制EBV诱导的B淋巴细胞转化的能力通过以下方法评估：用EBV和CMP-5处理原代B细胞，然后检测转化克隆的数量。 |
| 动物实验 |
OVA诱导的迟发型超敏反应[2]
将CFA和OVA按1:1 (v/v)比例混合，制备成终浓度为1500 μg OVA/1 ml PBS的乳剂。将100 μl乳剂注射到BALB/c小鼠背部近端颈皮和尾根部（每只小鼠150 μg OVA）。对照组包括未免疫小鼠和已免疫但未进行后续OVA攻击的小鼠。免疫一周后，将OVA悬浮于PBS中，浓度为10 mg/ml，置于15 ml离心管中，制备聚集态OVA。将溶液置于80℃水浴中加热60分钟。将30 μl聚集态OVA溶液注射到已免疫小鼠的左足垫，进行300 μg聚集态OVA的攻击。一周后，以相同方式再次攻击小鼠（未免疫小鼠也在此步骤进行攻击）。第二次攻击后24小时，小鼠采用二氧化碳窒息和颈椎脱臼法处死。使用游标卡尺测量每只小鼠足垫的肿胀程度（处死前），并称重以记录质量变化。此外，取出脾脏进行体外研究。 实验性自身免疫性脑脊髓炎[2] 诱导EAE时，使用市售的Hooke试剂或髓鞘少突胶质细胞糖蛋白和CFA乳剂。CFA/MOG乳剂按1:1 (v/v)比例配制，最终浓度为1000 μg MOG/1 ml PBS。C57/B6小鼠背部近端颈皮和尾根部皮下注射100 μl乳剂。免疫后约2小时，小鼠腹腔注射100 μl浓度为2 ng/μl的百日咳毒素。 24小时后，小鼠再次注射100 μl浓度为2 ng/μl的百日咳毒素。每日监测小鼠的病情，并给予25 mg/kg HLCL65细胞或DMSO溶剂对照治疗。在指定时间点，小鼠经注射20 mg/ml氯胺酮和4 mg/ml赛拉嗪（120 μl/20 g小鼠）安乐死，并用PBS灌注。从代表性小鼠中收集脾脏、脑和脊髓，用于体外研究。为分离脑和脊髓单核细胞，将脑和脊髓组织通过70 μm筛网过滤，并用70–30%等渗Percoll梯度离心分离。 [2] 对于自发性EAE，三只自发发展为EAE（评分=1.5-2）的MBPAc1-11 TCR-Tg小鼠采用二氧化碳窒息和颈椎脱臼法处死。分离脾细胞，并在PRMT5抑制剂或载体对照存在下，用2 μg/ml MBPAc1-11激活48小时。通过细胞内流式细胞术分析T-bet、IL-17和RORγt的表达。 CMP-5的体内疗效可能在EBV相关疾病的动物模型中进行评估，例如感染EBV的人源化小鼠模型。在此类研究中，将人造血干细胞移植到免疫缺陷小鼠体内以构建人源免疫系统。然后，用EBV感染小鼠，并通过灌胃或腹腔注射给予不同剂量（例如10-50 mg/kg）的CMP-5治疗。对照组仅接受载体注射。通过测量病毒载量、评估淋巴细胞转化和监测肿瘤形成来监测EBV驱动的淋巴增生性疾病的发展。通过比较治疗组和对照组的疾病进展来评估化合物的疗效。可通过测量组织中H4R3me2s的水平来评估化合物对体内PRMT5活性的影响。这些研究将提供关于化合物体内疗效和作用机制的关键数据。目前，尚未发表过关于CMP-5的此类详细的体内研究方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
现有文献中关于CMP-5的药代动力学性质报道较少。该化合物分子量为315.41，在DMSO中的溶解度≥100 mg/mL。其logP值未见报道，但根据其结构推测其具有中等亲脂性。该化合物可能具有良好的口服生物利用度，但具体的药代动力学参数，例如半衰期、分布容积、清除率和口服生物利用度，尚未通过实验测定。该化合物的代谢可能涉及肝细胞色素P450酶。其消除途径尚不明确。需要开展进一步的研究，包括血浆蛋白结合率和代谢稳定性测定，以全面表征该化合物的药代动力学特征。该化合物的体内活性取决于其能否以足够的浓度到达靶组织。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于CMP-5是一种研究用化学品，其毒理学数据有限。处理该化合物时应遵守标准安全预防措施。目前尚未公开任何具体的毒性研究，例如动物模型中的急性或慢性毒性研究。该化合物对PRMT5的选择性高于其他PRMT，这表明其脱靶效应的风险可能较低。然而，与所有研究用化学品一样，应谨慎处理，使用适当的个人防护装备并遵循机构安全指南。该化合物尚未获准用于临床，仅可用于临床前研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
驱动淋巴细胞转化的关键表观遗传事件仍未得到充分阐明。我们利用EB病毒（EBV）诱导的B细胞转化模型，证实了蛋白精氨酸甲基转移酶5（PRMT5）在淋巴瘤发生过程中调控表观遗传抑制标记的作用。EBV阳性淋巴瘤和转化细胞系均表现出高水平的PRMT5表达。PRMT5是一种II型PRMT酶，它通过甲基化组蛋白尾部的精氨酸残基来促进靶基因的转录沉默。PRMT5仅在EBV转化细胞中表达，而不在静息或活化的B淋巴细胞中表达，这证实了PRMT5是一个理想的治疗靶点。我们开发了一种首创的小分子PRMT5抑制剂，该抑制剂能够阻断EBV驱动的B淋巴细胞转化和存活，且不影响正常B细胞。 PRMT5抑制剂可阻止PRMT5/p65/HDAC3抑制复合物募集至miR96启动子，从而恢复miR96的表达，同时下调PRMT5的表达。RNA测序和染色质免疫沉淀实验鉴定出多个肿瘤抑制基因，包括蛋白酪氨酸磷酸酶基因PTPROt，该基因在EBV驱动的B细胞转化过程中被沉默。PRMT5抑制后PTPROt表达增强，导致调节B细胞受体信号传导的激酶去磷酸化。我们得出结论，PRMT5对于EBV驱动的B细胞转化和恶性表型的维持至关重要，PRMT5抑制剂有望成为B细胞淋巴瘤的一种新型治疗方法。[1]在自身免疫性疾病多发性硬化症及其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）中，致病性髓鞘特异性Th1细胞群的扩增驱动疾病活动；选择性靶向这一过程可能是一种新的治疗方法。既往研究表明，蛋白质精氨酸甲基化在免疫反应中发挥作用，包括T细胞介导的自身免疫和实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）。然而，催化这些反应的蛋白质精氨酸甲基转移酶（PRMTs）的作用尚不明确。PRMT5是负责组蛋白和其他蛋白质精氨酸残基对称二甲基化的主要PRMT。PRMT5驱动胚胎发育和癌症发生发展，但其在T细胞中的作用（如果有的话）尚未得到研究。本文表明，PRMT5是CD4+ T细胞增殖的重要调控因子。在小鼠和人类记忆性Th细胞增殖高峰期，PRMT5表达短暂上调。PRMT5表达受NF-κB通路上游调控，并促进IL-2的产生和细胞增殖。使用一种新型高选择性小分子PRMT5抑制剂阻断PRMT5可显著抑制记忆性Th细胞的增殖，且对Th1细胞的抑制作用强于对Th2细胞的抑制作用。体内实验表明，PRMT5阻断可有效抑制记忆性T细胞反应，并减轻迟发型超敏反应和EAE小鼠模型中的炎症反应。这些数据提示PRMT5参与调节适应性记忆性Th细胞反应，并表明PRMT5抑制剂可能成为治疗T细胞介导的炎症性疾病的新策略。[2]
- CMP5是一种小分子PRMT5抑制剂。EBV感染可诱导PRMT5过表达和表观遗传改变，这对B淋巴细胞转化至关重要。 PRMT5在EBV转化细胞中表达，但在静息/活化的B淋巴细胞中不表达，因此PRMT5是B细胞恶性肿瘤的治疗靶点[1]。 CMP-5是一种用于研究PRMT5在基因调控、癌症和病毒感染中作用的研究工具。其作用机制涉及选择性抑制PRMT5。目前尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C₂₁H₂₁N₃
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|---|---|
| 分子量 |
315.41
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| 精确质量 |
315.173
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| CAS号 |
880813-42-3
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| 相关CAS号 |
CMP-5 hydrochloride;1030021-40-9; 880813-42-3; 2309409-79-6 (2HCl)
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| PubChem CID |
4722595
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow ointment
|
| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
505.1±48.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
259.3±29.6 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.637
|
| LogP |
4.23
|
| tPSA |
29.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
399
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N1C(CNCC2C=C3C4C(N(C3=CC=2)CC)=CC=CC=4)=CC=CC=1
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| InChi Key |
YPJMOVVQKBFRNH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H21N3/c1-2-24-20-9-4-3-8-18(20)19-13-16(10-11-21(19)24)14-22-15-17-7-5-6-12-23-17/h3-13,22H,2,14-15H2,1H3
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| 化学名 |
1-(9-ethylcarbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine
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| 别名 |
CMP5; cmp-5; 880813-42-3; 1-(9-ethyl-9H-carbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine; 1-(9-ethylcarbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine; CHEMBL4245087; SCHEMBL21308321; (9-Ethyl-9H-carbazol-3-ylmethyl)-pyridin-2-ylmethyl-amine; CMP 5
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~396.31 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 6.25 mg/mL (19.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 62.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 6.25 mg/mL (19.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 62.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1705 mL | 15.8524 mL | 31.7048 mL | |
| 5 mM | 0.6341 mL | 3.1705 mL | 6.3410 mL | |
| 10 mM | 0.3170 mL | 1.5852 mL | 3.1705 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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