| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PRMT5
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| 体外研究 (In Vitro) |
即使在延长孵育后,CMP-5(0-100 μM;24-72 小时)对健康的静息 B 淋巴细胞也只有一定程度的危害,但对淋巴瘤细胞的危害尤其大 [1]。与 DMSO 处理组相比,CMP-5(40 μM;24 小时)可以降低 60A 细胞中 p-BTK 和 pY(416)SRC 的表达 [1]。人类 Th1 细胞比 Th2 细胞更容易被 CMP-5(0–40 μM;24 小时)抑制(分别抑制 43% 和 9%)。人Th1和Th2细胞的IC50值分别为26.9 μM和31.6 μM,并且Th1细胞对PRMT5抑制的敏感性低于Th2细胞[1]。 CMP-5 本身(25 μM;24 小时)可使小鼠 Th1 细胞的生长减少 91%。当给予不同剂量的 IL-2 时,它会增加增殖,达到 5 ng/ml 的峰值[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
抑制PRMT5抑制ova诱导的DTH炎症反应[2]
PRMT5抑制剂抑制炎症记忆T细胞反应的有效性表明它们可能对炎症或自身免疫性疾病有益。为了验证这一点,我们使用了OVA诱导的DTH小鼠模型和HLCL65,这是一种更有效和生物可利用的CMP5的衍生物(图1H, 2H,补充图2)。首先,我们分析了CFA免疫OVA后未治疗小鼠脾脏中PRMT5的表达。我们观察到,在免疫后10 d, PRMT5在脾脏中的表达显著上调(图6A),这表明PRMT5的表达与体内DTH免疫应答有关。在DTH模型中(如图6B所示),用CFA免疫OVA诱导OVA特异性T细胞反应,在随后暴露于无佐剂的OVA和记忆性CD4+ T细胞扩增后,引起小鼠足垫炎症。在再挑战期间,HLCL65治疗减少了40%的足底肿胀(炎症的衡量标准)(p < 0.05,图6C)。此外,与载体相比,HLCL65处理降低了36%的ova特异性T细胞增殖(图6D)和70%的IFN-γ产生(图6E)。这些数据表明,我们的新型PRMT5抑制剂HLCL65在体内抑制T细胞介导的反应和炎症。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖测定 [1]
细胞类型:人类 Th1 细胞和 Th2 细胞 测试浓度: 25 μM 孵育时间:24小时 实验结果:抑制小鼠Th1细胞增殖,但添加IL-2剂量依赖性地增加细胞增殖。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型: 60A 细胞 测试浓度: 40 μM 孵育时间:24小时 实验结果:p-BTK和pY(416)SRC蛋白水平受到抑制。 |
| 动物实验 |
OVA诱导的迟发型超敏反应[2]
将CFA和OVA按1:1 (v/v)比例混合,制备成终浓度为1500 μg OVA/1 ml PBS的乳剂。将100 μl乳剂注射到BALB/c小鼠背部近端颈皮和尾根部(每只小鼠150 μg OVA)。对照组包括未免疫小鼠和已免疫但未进行后续OVA攻击的小鼠。免疫一周后,将OVA悬浮于PBS中,浓度为10 mg/ml,置于15 ml离心管中,制备聚集态OVA。将溶液置于80℃水浴中加热60分钟。将30 μl聚集态OVA溶液注射到已免疫小鼠的左足垫,进行300 μg聚集态OVA的攻击。一周后,以相同方式再次攻击小鼠(未免疫小鼠也在此步骤进行攻击)。第二次攻击后24小时,小鼠采用二氧化碳窒息和颈椎脱臼法处死。使用游标卡尺测量每只小鼠足垫的肿胀程度(处死前),并称重以记录质量变化。此外,取出脾脏进行体外研究。 实验性自身免疫性脑脊髓炎[2] 诱导EAE时,使用市售的Hooke试剂或髓鞘少突胶质细胞糖蛋白和CFA乳剂。CFA/MOG乳剂按1:1 (v/v)比例配制,最终浓度为1000 μg MOG/1 ml PBS。C57/B6小鼠背部近端颈皮和尾根部皮下注射100 μl乳剂。免疫后约2小时,小鼠腹腔注射100 μl浓度为2 ng/μl的百日咳毒素。 24小时后,小鼠再次注射100 μl浓度为2 ng/μl的百日咳毒素。每日监测小鼠的病情,并给予25 mg/kg HLCL65细胞或DMSO溶剂对照治疗。在指定时间点,小鼠经注射20 mg/ml氯胺酮和4 mg/ml赛拉嗪(120 μl/20 g小鼠)安乐死,并用PBS灌注。从代表性小鼠中收集脾脏、脑和脊髓,用于体外研究。为分离脑和脊髓单核细胞,将脑和脊髓组织通过70 μm筛网过滤,并用70–30%等渗Percoll梯度离心分离。 [2] 对于自发性EAE,选取3只自发发展为EAE(评分=1.5-2)的MBPAc1-11 TCR-Tg小鼠,采用二氧化碳窒息和颈椎脱臼法处死。分离脾细胞,并在PRMT5抑制剂或载体对照存在下,用2 μg/ml MBPAc1-11激活48小时。采用细胞内流式细胞术分析T-bet、IL-17和RORγt的表达。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
驱动淋巴细胞转化的关键表观遗传事件尚未得到充分阐明。我们利用EB病毒(EBV)诱导的B细胞转化模型,证实了蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)在淋巴瘤发生过程中对表观遗传抑制标记调控的相关性。EBV阳性淋巴瘤和转化细胞系均表现出PRMT5的大量表达。PRMT5是一种II型PRMT酶,它通过甲基化组蛋白尾部的精氨酸残基来促进靶基因的转录沉默。PRMT5的表达仅限于EBV转化细胞,而不在静息或活化的B淋巴细胞中表达,这证实了PRMT5是一个理想的治疗靶点。我们开发了一种首创的小分子PRMT5抑制剂,该抑制剂能够阻断EBV驱动的B淋巴细胞转化和存活,同时不影响正常B细胞。 PRMT5 的抑制导致 PRMT5/p65/HDAC3 抑制复合物无法募集到 miR96 启动子上,miR96 的表达得以恢复,同时 PRMT5 的表达下调。RNA 测序和染色质免疫沉淀实验鉴定出多个肿瘤抑制基因,包括蛋白酪氨酸磷酸酶基因 PTPROt,该基因在 EBV 驱动的 B 细胞转化过程中发生沉默。PRMT5 抑制后 PTPROt 表达增强,导致调控 B 细胞受体信号传导的激酶去磷酸化。我们得出结论,PRMT5对于EBV驱动的B细胞转化和恶性表型的维持至关重要,PRMT5抑制剂有望成为B细胞淋巴瘤的一种新型治疗方法。[1]
在自身免疫性疾病多发性硬化症及其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中,致病性髓鞘特异性Th1细胞群的扩增驱动疾病活动;选择性靶向这一过程可能成为一种新的治疗方法。先前的研究暗示蛋白质精氨酸甲基化在免疫反应中发挥作用,包括T细胞介导的自身免疫和EAE。然而,催化这些反应的蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)的作用尚不明确。PRMT5是负责组蛋白和其他蛋白质精氨酸残基对称二甲基化的主要PRMT。 PRMT5 驱动胚胎发育和癌症的发生发展,但其在 T 细胞中的作用(如果有的话)尚未得到研究。本文表明,PRMT5 是 CD4+ T 细胞扩增的重要调节因子。在小鼠和人记忆性 Th 细胞增殖高峰期,PRMT5 表达短暂上调。PRMT5 的表达受 NF-κB 通路上游调控,并促进 IL-2 的产生和增殖。使用新型高选择性小分子 PRMT5 抑制剂阻断 PRMT5 可显著抑制记忆性 Th 细胞的扩增,且对 Th1 细胞的抑制作用强于 Th2 细胞。体内实验表明,PRMT5 阻断可有效抑制记忆性 T 细胞反应,并减轻迟发型超敏反应和 EAE 小鼠模型中的炎症反应。这些数据表明 PRMT5 参与调节适应性记忆性 Th 细胞反应,并提示 PRMT5 抑制剂可能成为治疗 T 细胞介导的炎症性疾病的新策略。[2] |
| 分子式 |
C21H22CLN3
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|---|---|
| 分子量 |
351.872483730316
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| 精确质量 |
351.15
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| 元素分析 |
C, 71.68; H, 6.30; Cl, 10.07; N, 11.94
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| CAS号 |
1030021-40-9
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| 相关CAS号 |
CMP-5;880813-42-3; 1030021-40-9 (HCl) ; 2309409-79-6 (2HCl)
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| PubChem CID |
6462334
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
29.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
399
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(N1C2=CC=CC=C2C2=CC(CNCC3N=CC=CC=3)=CC=C12)C.Cl
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| InChi Key |
LTMOFUKBECEABM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H21N3.ClH/c1-2-24-20-9-4-3-8-18(20)19-13-16(10-11-21(19)24)14-22-15-17-7-5-6-12-23-17;/h3-13,22H,2,14-15H2,1H3;1H
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| 化学名 |
1-(9-ethylcarbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine;hydrochloride
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| 别名 |
1030021-40-9; CMP5; CMP-5 hydrochloride; CMP-5 (hydrochloride); CMP-5 HCl; 1-(9-ethylcarbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine;hydrochloride; 1-(9-Ethyl-9H-carbazol-3-yl)-N-(pyridin-2-ylmethyl)methanamine hydrochloride; 1030021-40-9 (HCl);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8420 mL | 14.2098 mL | 28.4196 mL | |
| 5 mM | 0.5684 mL | 2.8420 mL | 5.6839 mL | |
| 10 mM | 0.2842 mL | 1.4210 mL | 2.8420 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。