| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
S1PR2 (sphingosine 1-phosphate receptor 2)
CYM-5520 is a selective allosteric agonist of the Sphingosine 1-phosphate receptor 2 (S1PR2). Its EC₅₀ for activating S1PR2 is reported as 0.48 µM in a CRE-bla reporter assay and 1.6 µM in a cAMP biosensor assay using wild-type S1PR2-expressing cells. [1] It does not activate S1PR1, S1PR3, S1PR4, or S1PR5 at concentrations up to 10 µM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CYM-5520 是野生型 S1PR2 的完全激动剂，EC50 为 1.6 μM。虽然 CYM-5520 是一种 EC50 为 1.5 μM 的激动剂，但用 S1P 刺激表达三重突变体 S1PR2 的细胞不会刺激荧光素酶活性 [1]。
CYM-5520 以浓度依赖性方式激活S1PR2，在CRE-bla报告基因检测和细胞内cAMP测量检测中均表现为完全激动剂。[1] 它对S1PR2具有高度选择性，在对29种其他受体和转运蛋白的筛选（PanLabs HitProfiling Screen）中未显示显著活性（抑制率>20%）。[1] 该化合物作为变构激动剂，证据包括其在竞争性结合实验中无法置换S1PR2上的放射性标记S1P（[³³P]-S1P），以及其对S1PR2三重突变体（R108A, E109A, K269A）受体（该受体对天然配体S1P无反应）仍保留激动剂活性。[1] 在正构拮抗剂JTE-013存在的情况下，CYM-5520 的剂量反应曲线右移且最大反应降低，表明其为非竞争性相互作用。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
骨质减少切除手术后，CYM-5520（10 mg/kg；腹腔注射；每周 5 天；持续 6 周）治疗显着增加长骨和椎骨骨量。此外，CYM-5520 还可提高碱性磷酸酶、成骨细胞计数和前胶原 IC 末端前肽（骨合成代谢标志物）的浓缩浓度 [2]。
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| 酶活实验 |
33P-S1P放射性配体竞争结合试验[1]
采用Sphingosine， D-erythro [33P] 1-phosphate。将S1PR2-CRE bla细胞接种到24孔板的孔中，20万个细胞加入1.0 mL生长培养基，在100%湿度、5% co2、37℃的培养箱中培养过夜。检测前将培养基替换为1% CDS血清培养基4小时。在4°C时，将培养基去除，并在结合缓冲液（20 mM Tris, pH 7.5, 100 mM NaCl， 15 mM NaF和新鲜添加的1 mM Na3VO4和蛋白酶抑制剂）中替换为测试化合物或载体对照。 Glo-sensor cAMP瞬时转染试验[1] 使用Fugene HD将GloSensor载体（pGLoSensor-20FcAMP, Promega）转染到S1PR2-eGFP或S1PR2-TM-eGFP Jump-In CHO细胞中。第二天，用0.05%胰蛋白酶EDTA收获细胞，在含有2%糖葡聚糖剥离血清的CO2独立培养基中重悬至500,000个细胞/mL，加入20 μL细胞悬液于384孔组织培养处理过的白板中，在37℃，5% CO2条件下孵育过夜。然后加入25 uL含有2%CDS和4% GloSensor Reagent的CO2独立培养基，室温孵育2小时。加入拮抗剂（JTE-013）或对照物孵育20分钟，然后加入激动剂化合物或S1P。15分钟后，在Perkin Elmer Envision平板阅读器上读取发光。 |
| 细胞实验 |
Jump-In CHO S1PR2野生型和头组三突变细胞系[1]
利用多位点Gateway克隆技术，从pEnter-15- S1pr2和pENTER-52-eGFP中获得帧内S1pr2- egfp表达构建体。将S1pr2-eGFP融合蛋白表达载体克隆到pDEST-CMV-JTI中。通过与S1PR1比对，确定了S1PR2头基团结合侧链。这些突变是通过重叠寡核苷酸PCR产生的。14通过重叠寡核苷酸PCR诱变产生三突变体S1PR2 （R108A、E109A和K269A）。所有构建体均经DNA测序证实。将这些载体转染到CHO JumpIn细胞中，并用10微克/毫升囊胚杀虫素进行筛选通过流式细胞仪对GFP阳性细胞进行分选，形成了一个均匀的细胞池。 S1PR2 CRE-bla 报告基因检测: 使用稳定表达S1PR2和CRE驱动β-内酰胺酶报告基因的CHO细胞。用系列稀释的 CYM-5520 或对照激动剂处理细胞。孵育一段时间（文献未详述具体时长）后，通过荧光底物读数（蓝/绿比率）测量β-内酰胺酶活性以确定受体激活程度，并根据剂量反应曲线计算EC₅₀值。[1] cAMP生物传感器检测 (GloSensor): 稳定表达野生型或三重突变体（R108A, E109A, K269A）S1PR2-eGFP的CHO细胞被瞬时转染一种cAMP敏感的荧光素酶生物传感器载体。将细胞铺板，加载荧光素酶底物，然后用 CYM-5520 或S1P处理。15分钟后测量发光强度，以量化作为受体激活（S1PR2偶联Gs）指标的细胞内cAMP水平。[1] 放射性配体竞争结合实验: 在4°C下，将表达S1PR2的细胞与固定浓度的[³³P]-S1P以及递增浓度的未标记S1P、JTE-013或 CYM-5520 在结合缓冲液中孵育。然后处理细胞测量结合的放射性。实验证明了 CYM-5520 无法置换[³³P]-S1P。[1] 拮抗剂抑制实验: 在S1PR2 CRE-bla报告基因检测中，在递增的固定浓度拮抗剂JTE-013存在下，生成 CYM-5520 的剂量反应曲线，以评估相互作用的性质（竞争性 vs. 非竞争性）。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 12周龄去卵巢C57Bl6J小鼠[2]
剂量： 10 mg/kg 给药途径： 腹腔注射；每周5天；持续6周 实验结果： 通过诱导新骨形成纠正去卵巢小鼠的骨质疏松症。 12周龄去卵巢C57Bl6J小鼠购自Charles River Laboratories。小鼠饲养于SPF级笼中，无任何病原体，并可自由摄取鼠粮和水。治疗于去卵巢后5周开始。 1E)-1-(4-((1R,2S,3R)-1,2,3,4-四羟基丁基)-1H-咪唑-2-基)乙酮肟 (LX2931) 按照已知方法合成，并以 200 mg/kg/天的剂量通过饮用水给药，持续 6 周。CYM5520 以 10 mg/kg/天的剂量腹腔注射给药，每周连续 5 天，持续 6 周。整个研究共使用了 21 只小鼠。我们尽一切努力减少动物的使用数量并减轻它们的痛苦。[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
针对鞘氨醇-1-磷酸受体2 (S1PR2) 的分子探针化合物对于研究S1PR2受体参与的多种生物学过程至关重要。这些过程包括NF-κB介导的肿瘤细胞存活和成纤维细胞对纤连蛋白的趋化作用。本文报道了我们筛选S1PR2选择性化学探针及其表征的研究工作。我们采用高通量筛选方法，鉴定出两种能够激活S1PR2受体的化合物。构效关系优化最终得到具有纳摩尔级高活性的化合物。这些化合物XAX-162和CYM-5520具有高度选择性，不会激活其他S1P受体。CYM-5520与拮抗剂JTE-013的结合不具有竞争性。受体残基的突变（这些残基负责与鞘氨醇-1-磷酸 (S1P) 的两性离子头部基团结合）会消除 S1P 对受体的激活作用，但不会消除 CYM-5520 的激活作用。与放射性标记的 S1P 进行的竞争性结合实验表明，CYM-5520 是一种变构激动剂，并且不会取代天然配体。计算模型表明，CYM-5520 结合在正构结合口袋的较低位置，并且与 S1P 的共结合在能量上是可以耐受的。总之，我们鉴定了一种 S1PR2 选择性变构激动剂化合物。[1]
鞘氨醇-1-磷酸受体 2 (S1PR2) 的分子探针工具化合物对于研究 S1PR2 受体参与的多种生物学过程至关重要。其中包括NF-κB介导的肿瘤细胞存活和成纤维细胞对纤连蛋白的趋化作用。本文报道了我们鉴定S1PR2选择性化学探针及其表征的研究工作。我们采用高通量筛选方法，鉴定出两种能够激活S1PR2受体的化合物。构效关系优化（SAR）最终得到具有纳摩尔级高活性的化合物。这些化合物XAX-162和CYM-5520具有高度选择性，不会激活其他S1P受体。CYM-5520与拮抗剂JTE-013的结合不具有竞争性。受体中负责与鞘氨醇-1-磷酸（S1P）两性离子头部基团结合的残基发生突变，会消除S1P对受体的激活作用，但不会消除CYM-5520的激活作用。与放射性标记的S1P进行的竞争性结合实验表明，CYM-5520是一种变构激动剂，不会取代天然配体。计算模型表明，CYM-5520 结合于正构结合口袋的较低位置，并且与 S1P 的共结合在能量上耐受性良好。总之，我们鉴定了一种变构 S1PR2 选择性激动剂化合物。[2] CYM-5520 是通过高通量筛选 (HTS) 和后续的构效关系 (SAR) 优化，从最初的先导化合物 (CYM-5482) 中筛选得到的。[1] 它是一种合成小分子，缺乏天然配体 S1P 的两性离子头部基团。计算模型和分子对接研究表明，它结合于 S1PR2 正构结合口袋下方的疏水区域，可能与残基 F274 相互作用，这可能有助于其亚型选择性。该模型还表明，CYM-5520 可以与受体口袋中的 S1P 共结合。 [1] |
| 分子式 |
C21H19N3O2
|
|---|---|
| 分子量 |
345.394464731216
|
| 精确质量 |
345.147
|
| 元素分析 |
C, 73.03; H, 5.54; N, 12.17; O, 9.26
|
| CAS号 |
1449747-00-5
|
| PubChem CID |
25110470
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
580.5±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
304.9±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.611
|
| LogP |
2.52
|
| tPSA |
66.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
666
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
FMYGNANMYYHBSU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H19N3O2/c1-15-10-19(16(2)24(15)13-17-6-4-3-5-7-17)20(25)14-23-12-18(11-22)8-9-21(23)26/h3-10,12H,13-14H2,1-2H3
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| 化学名 |
1-[2-[2,5-Dimethyl-1-(phenylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl]-2-oxoethyl]-1,6-dihydro-6-oxo-3-pyridinecarbonitrile
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| 别名 |
CYM-5520; CYM5520; 1449747-00-5; 1-[2-(1-Benzyl-2,5-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl)-2-oxo-ethyl]-6-oxo-1,6-dihydro-pyridine-3-carbonitrile; 1-[2-[2,5-Dimethyl-1-(phenylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl]-2-oxoethyl]-1,6-dihydro-6-oxo-3-pyridinecarbonitrile; 1-(2-(1-Benzyl-2,5-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl)-2-oxoethyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridine-3-carbonitrile; 1-[2-(1-BENZYL-2,5-DIMETHYLPYRROL-3-YL)-2-OXOETHYL]-6-OXOPYRIDINE-3-CARBONITRILE; CYM 5520.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~144.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8953 mL | 14.4764 mL | 28.9528 mL | |
| 5 mM | 0.5791 mL | 2.8953 mL | 5.7906 mL | |
| 10 mM | 0.2895 mL | 1.4476 mL | 2.8953 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Bamirastine
戊双氟酚
PROTAC-PEG3-Amino
MT-3014
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
