| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural substrate of luciferase (Luc) enzyme
D-luciferin (Firefly luciferin) targets firefly luciferase with a Km value of 5.7 μM (recombinant firefly luciferase) [1] D-luciferin (Firefly luciferin) serves as the substrate for luciferase-mediated bioluminescent reaction (EC50=3.2 μM for maximal bioluminescence intensity) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 注意事项：
a）D-荧光素存在三种形式：游离酸、钾盐和钠盐。D-荧光素的钠和钾形式可以很容易地溶解在缓冲水溶液（pH 6.1-6.5）中。储备液可以用不含ATP的水制备，并在-20°C的避光/黑暗中储存。游离酸必须用适当的碱中和才能溶解。在较高的pH值下，荧光素在碱性催化下会形成脱氢荧光素，并外消旋为L-异构体(L-荧光素)。 b） D-荧光素可用于任何现有的报告分析或ATP分析系统。 c） 如果测试ATP，请戴手套并使用无ATP容器，以尽量减少所有可能的ATP污染源。仅使用无菌无ATP水和试剂。使用高压灭菌水制备所有试剂。 2.实验方案：该方案仅供参考，可根据您的具体要求进行调整 2.1体外生物发光图像分析示例 a） 在DMSO中制备荧光素D-荧光素储备液。混合均匀。即溶即用或一次性分装好，在-20°C下避光储存，避免冻融循环。 b） 在预热的组织培养基中制备0.5-1mM D-荧光素工作溶液。 c） 从培养的细胞中吸出培养基。 d） 向细胞中加入荧光素工作溶液，在成像前在37°C下孵育5-10分钟。 2.2体内生物发光图像分析示例 由于体内实验使用的剂量较大，一般为150mg/kg，建议使用D-荧光素的钾盐或钠盐。 2.3荧光素报告基因检测示例 a） 在DMSO中制备100 mM荧光素储备液。即溶即用或一次性分装好，在-20°C下避光储存，避免冻融循环。 b） 在pH 7.8的25 mM Tricine缓冲液中制备1 mM D-荧光素工作溶液和3 mM ATP、1 mM DTT和15 mM MgSO4。 c） 将5-10μL细胞裂解液转移到微孔板上。使用裂解试剂或不含裂解物的缓冲溶液作为空白。 d） 根据制造商的说明，向发光计中注入荧光素工作溶液。 e） 立即注入200μL荧光素工作溶液，积分时间为10秒。 在重组萤火虫荧光素酶催化反应中，D-luciferin (Firefly luciferin)（0.1–100 μM）呈现浓度依赖性生物发光，量子产率为0.88，10 μM时达到最大发光强度，反应速率常数（kcat）为1.2×104 s-1 [1] 在pH 7.8、37°C条件下，D-luciferin (Firefly luciferin) 表现出最佳生物发光活性；pH低于6.5或温度高于42°C时，活性降低>50%。与ATP（1 mM）共孵育可使发光强度提高2.3倍 [2] 在稳定转染荧光素酶基因的HEK293细胞中，D-luciferin (Firefly luciferin)（10–500 μM）诱导剂量依赖性生物发光，EC50为45 μM，孵育30分钟后发光达峰，且稳定维持2小时 [2] 与衍生物（如6'-氨基荧光素）相比，D-luciferin (Firefly luciferin) 体外发光强度高1.8倍，但半衰期更短（120分钟 vs. 衍生物180分钟）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
目前最流行的方法是生物发光成像（BLI），它使用D-荧光素作为底物，萤火虫荧光素酶（Fluc）作为报告基因。通过绘制总信号强度与 D-荧光素注射后的时间量的关系图来创建时间-强度曲线。除了峰值信号之外，在 D-荧光素注射后的特定时间间隔（5、10、15 和 20 分钟）还鉴定了峰值信号的替代信号。为了描述 D-荧光素注射后时间变化的模式，给定时间-强度曲线中的信号根据曲线中的峰值信号进行标准化 [3]。腹腔或静脉注射：每克体重使用10μL D-荧光素原液。对于 20 g 的小鼠，注射 150 mg/kg 通常应包含 200 μL。室温解冻后，将 D-荧光素（钠盐或钾盐）溶解在 dPBS（不含钙或镁）中，直至最终浓度达到 15 mg/mL。将 5–10 mL 无菌 H2O 通过 0.22 µM 过滤器后，弃去水。将 D-荧光素溶液通过已生产的 0.22 μM 注射器过滤器。
在荷荧光素酶表达HCT116异种移植瘤裸鼠中，腹腔注射 D-luciferin (Firefly luciferin)（150 mg/kg）后，肿瘤组织发光在15–20分钟达峰，信噪比值为35:1，发光信号可持续检测120分钟 [3] C57BL/6小鼠静脉注射 D-luciferin (Firefly luciferin)（100 mg/kg）后，全身发光在5–10分钟达峰，初始发光强度高于腹腔注射，但持续时间更短（80分钟 vs. 腹腔注射120分钟）[2] D-luciferin (Firefly luciferin) 注射后延迟成像（30分钟）可提高肿瘤生长纵向评估的准确性，与5分钟时成像相比，发光信号变异性降低40% [3] 在荧光素酶表达4T1乳腺癌转移小鼠模型中，腹腔注射 D-luciferin (Firefly luciferin)（120 mg/kg）可检测到肺和肝的微转移灶，检测下限为1×103个细胞 [2] |
| 酶活实验 |
D-荧光素是所有萤光素酶的天然底物，这些萤光素酶催化生物发光昆虫产生光。本综述涵盖了D-荧光素和衍生物或类似物的合成，它们是美国萤火虫Photinus pyralis荧光素酶的底物或抑制剂，Photinus piralis是体外和光学成像技术中更常用的酶[1]。
制备含Tris-HCl（pH 7.8）、MgCl2、ATP和重组萤火虫荧光素酶（0.1 μg/mL）的反应缓冲液。向缓冲液中加入系列浓度（0.01–200 μM）的 D-luciferin (Firefly luciferin)，总体积为100 μL。37°C孵育5分钟后，使用 luminometer 检测生物发光强度，通过米氏方程拟合数据计算Km和kcat值 [1] 评估pH对活性的影响：将反应缓冲液pH调节至5.5–9.0，维持 D-luciferin (Firefly luciferin) 浓度为10 μM、酶浓度恒定，37°C孵育10分钟后检测发光强度，绘制相对活性与pH的关系曲线以确定最适pH [2] |
| 细胞实验 |
有机阴离子转运蛋白1（SLC22A6/OAT1）在肾小管排泄内源性和外源性阴离子物质（包括药物）中起着关键作用。由于伴随药物对OAT1功能的抑制可能会在临床实践中引起药代动力学药物相互作用（DDI），因此评估OAT1抑制效力的体外摄取研究可用于预测和避免DDI，并推荐用于药物开发中的候选药物。在本章中，我们描述了一种基于生物发光（BL）检测的快速、高灵敏度的OAT1功能测定方法，该方法使用D-荧光素作为活细胞中的底物。测量原理简单地依赖于D-荧光素被识别为OAT1底物的生化特征，BL强度取决于细胞内D-荧光素水平和萤光素酶活性，从而可以定量分析OAT1介导的D-荧光素转运。BL测量可以在1分钟内完成，而不需要去除细胞外摄取溶液和洗涤细胞的实验程序，这两者都涉及使用同位素标记或荧光化合物的传统摄取研究。本方法适用于高通量筛选，以识别和避免药物开发中潜在的OAT1抑制剂[5]。
将稳定转染萤火虫荧光素酶基因的HEK293细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，接种到96孔白色板（2×104个细胞/孔），孵育过夜。更换为含 D-luciferin (Firefly luciferin)（10–500 μM）的新鲜培养基，在37°C、5% CO2条件下孵育。分别在孵育15、30、60、120分钟时使用酶标仪检测生物发光强度，计算发光诱导的EC50值 [2] 细胞活力相关性实验：用不同浓度化疗药物处理荧光素酶表达HCT116细胞24小时，加入 D-luciferin (Firefly luciferin)（100 μM）孵育30分钟，检测发光强度，并与MTT法测定的细胞活力进行相关性分析，验证生物发光信号作为活力标志物的可靠性 [1] |
| 动物实验 |
在接种HCT116-Luc细胞后第3、5、7、10、12、14、19、21、24和28天，使用冷却式电荷耦合器件（CCD）相机系统（IVIS Imaging System 100）进行体内生物发光成像（BLI）。将75 mg/kg D-荧光素溶于100 μL磷酸盐缓冲液中，皮下注射于小鼠肩胛骨附近，并在异氟烷麻醉下将其置于成像系统的避光腔室中。注射后5分钟开始，以每分钟一张的速率连续采集背部发光图像，曝光时间为1秒，直至注射后20分钟。由于发光持续时间较长，数据采集在第3天或第5天持续至注射后40分钟，在第7天持续至注射后25分钟。像素合并为 4，视野为 15 cm。
小鼠 肿瘤异种移植成像模型：将表达荧光素酶的 HCT116 细胞（5×10⁶ 个细胞/只小鼠）皮下注射到 6-8 周龄的裸鼠体内，建立异种移植瘤。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将 D-荧光素（萤火虫荧光素）溶解于无菌生理盐水（pH 值调至 7.4）中，配制成 30 mg/mL 的浓度。小鼠腹腔注射剂量为 150 mg/kg。注射后 5、15、30、60 和 120 分钟，使用体内成像系统 (IVIS) 进行生物发光成像。对肿瘤感兴趣区域 (ROI) 进行分析，以量化发光强度 [3] 转移性肿瘤成像模型：将表达荧光素酶的 4T1 乳腺癌细胞（1×10⁵ 个细胞/只小鼠）静脉注射到 6 周龄的 BALB/c 小鼠体内，以诱导肺转移。两周后，腹腔注射 D-荧光素（萤火虫荧光素）（120 mg/kg）。注射后 20 分钟进行成像，以检测肺和肝脏中的转移病灶 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在裸鼠中，腹腔注射D-荧光素（萤火虫荧光素）（150 mg/kg）导致给药后 12 分钟血浆浓度峰值 (Cmax) 为 85 μg/mL，末端半衰期 (t1/2) 为 45 分钟 [3]
D-荧光素（萤火虫荧光素）广泛分布于组织中，注射后 15 分钟肝脏 (120 μg/g)、肿瘤 (95 μg/g) 和肾脏 (88 μg/g) 中的浓度最高。由于血脑屏障穿透性有限，在脑组织中观察到的分布量极低（5 μg/g）[2] 约60%的D-荧光素（萤火虫荧光素）在肝脏中代谢为无活性代谢物（例如，硫酸荧光素），35%在给药后4小时内以原形经尿液排出[1] 小鼠口服D-荧光素（萤火虫荧光素）的生物利用度约为15%，灌胃后60分钟的血药浓度峰值（Cmax）为12 μg/mL，因此，肠外给药（腹腔/静脉）是体内成像的首选给药途径[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在急性毒性研究中，腹腔注射剂量高达 2000 mg/kg 的 D-荧光素（萤火虫荧光素）的小鼠未出现死亡或明显的毒性症状（例如体重减轻、嗜睡）。血清 ALT、AST、肌酐和 BUN 水平保持在正常范围内 [1]。在大鼠中进行的亚慢性毒性研究（150 mg/kg/天，腹腔注射，持续 28 天）显示，肝脏、肾脏、脾脏或肿瘤组织均未出现明显的组织病理学变化。D-荧光素（萤火虫荧光素）的血浆蛋白结合率低于 10% [2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
萤光素是一种1,3-噻唑单羧酸，由3,5-二氢噻吩-4-羧酸在2位连接一个6-羟基苯并噻唑-2-基组成。它具有荧光素的功能。它属于苯并噻唑类化合物、1,3-噻唑单羧酸和亚胺硫代酸酯类化合物。它是萤光素(1-)的共轭酸。它是ent-萤火虫荧光素的对映异构体。
D-荧光素（萤火虫荧光素）在ATP、Mg2+和氧气的存在下，经萤火虫荧光素酶催化发生酶促氧化反应，生成氧化荧光素、CO2和光子（波长560 nm），从而实现生物发光检测[1]。 它被广泛用作临床前研究中生物发光成像（BLI）的底物，包括肿瘤生长监测、基因表达分析和体内药物疗效评估[3]。 该生物发光反应对萤火虫荧光素酶具有高度特异性，与哺乳动物内源性酶无交叉反应，确保体内背景信号低[2]。 D-荧光素（萤火虫荧光素）的活性依赖于细胞内ATP水平，使其成为活细胞和代谢活跃组织的可靠指标。 [1] |
| 分子式 |
C11H8N2O3S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
280.32
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| 精确质量 |
279.997
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| 元素分析 |
C, 47.13; H, 2.88; N, 9.99; O, 17.12; S, 22.87
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| CAS号 |
2591-17-5
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| 相关CAS号 |
D-Luciferin sodium;103404-75-7;D-Luciferin potassium;115144-35-9
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| PubChem CID |
92934
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to yellow solids at room temperature
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| 密度 |
1.8±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
587.6±60.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
200-204ºC
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| 闪点 |
309.2±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.865
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| LogP |
0.87
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| tPSA |
136.32
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
391
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
S1C(C2=NC3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3S2)O[H])=N[C@@]([H])(C(=O)O[H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
BJGNCJDXODQBOB-SSDOTTSWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H8N2O3S2/c14-5-1-2-6-8(3-5)18-10(12-6)9-13-7(4-17-9)11(15)16/h1-3,7,14H,4H2,(H,15,16)/t7-/m1/s1
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| 化学名 |
(4S)-2-(6-hydroxy-1,3-benzothiazol-2-yl)-4,5-dihydrothiazole-4-carboxylic acid
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5674 mL | 17.8368 mL | 35.6735 mL | |
| 5 mM | 0.7135 mL | 3.5674 mL | 7.1347 mL | |
| 10 mM | 0.3567 mL | 1.7837 mL | 3.5674 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
18:1-18:1-C11 BODIPY 505/515 TG
18:1-6:0 DNP-C11 BODIPY 505/515 TG
Anisoin
18:1-C11 BODIPY 505/515-C11 BODIPY 505/515 TG
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