| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural substrate of luciferase (Luc) enzyme
D-Luciferin Sodium is a specific natural substrate for firefly luciferase that catalyzes the production of characteristic yellow-green light in bioluminescent insects. It requires ATP for its reaction, emitting a greenish-yellow luminescence at a peak wavelength of approximately 530 nm. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 注意：
a) D-荧光素盐（钠盐或钾盐）在水性缓冲液（pH 6.1-6.5）中具有很高的溶解度，最高可达 100 mM。储备液可用无 ATP 水配制，并于 -20 °C 避光保存。为使溶液溶解，必须用适当的碱中和游离酸。在较高的 pH 值下，荧光素会在碱催化下生成脱氢荧光素，并消旋为 L-异构体（L-荧光素）。 b) D-荧光素可用于任何现有的报告分析或 ATP 分析系统。 c) 如果要进行 ATP 检测，请佩戴手套并使用无 ATP 容器，以最大程度地减少所有可能的 ATP 污染源。仅使用无菌无 ATP 水和试剂。所有试剂均使用高压灭菌水配制。 2.实验方案：本方案仅供参考，可根据您的具体需求进行调整。 以下方案是制备D-荧光素钠/钾盐的示例。适用于大多数细胞类型和体内动物实验。 2.1 体外生物发光图像分析示例。 a) 用无菌水配制100 mM（100-200倍浓度）的D-荧光素钠或钾储备液。充分混匀。立即使用或分装，储存于-20℃，避免反复冻融，并避光。 b) 在预热的组织培养基中配制0.5-1 mM D-荧光素工作液。 c) 吸出培养细胞中的培养基。 d) 将D-荧光素工作液加入细胞中，并在成像前于37℃孵育5-10分钟。 2.2 体内生物发光图像分析示例 a) 在不含Mg2+和Ca2+的DPBS中配制15 mg/mL D-荧光素储备液。充分混匀。 b) 使用0.2 μm滤膜去除溶液中的细菌。立即使用或分装后储存于-20℃，避免反复冻融和光照。 c) 成像前10-15分钟，腹腔注射D-荧光素，剂量为150 mg/kg（或10 μL/g荧光素储备液），按动物体重计算。 注意：应在每种动物模型上进行荧光素动力学研究，以确定峰值信号时间。 2.3 D-荧光素报告基因检测示例 a) 用无菌水配制100 mM D-荧光素储备液。立即使用或分装，储存于-20℃，避免反复冻融，并避光保存。 b) 配制1 mM D-荧光素工作液，并加入3 mM ATP、1 mM DTT和15 mM MgSO4，溶于25 mM Tricine缓冲液（pH 7.8）。 c) 取5-10 μL细胞裂解液转移至微孔板。以不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白对照。 d) 根据制造商说明，将D-荧光素工作液注入发光仪。 e) 立即注入200 μL D-荧光素工作液，积分时间为10秒。 在体外，D-荧光素钠是荧光素酶的天然底物，用于检测细胞活性。它被用作多种生物技术和制药应用中的报告分子。该钠盐在水性缓冲液（pH 6.1-6.5）中具有很高的溶解度，最高可达100 mM。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
目前最常用的方法是生物发光法 (BLI)，它使用 D-荧光素底物和萤火虫荧光素酶 (Fluc) 作为报告基因。通过绘制 D-荧光素注射后总信号强度随时间变化的曲线，生成时间-强度曲线。除了峰值信号外，还确定了 D-荧光素注射后预定时间间隔（5、10、15 和 20 分钟）的信号作为峰值信号的替代信号。为了描述 D-荧光素注射后信号随时间变化的模式，将给定时间-强度曲线中的信号值相对于该曲线中的峰值信号进行归一化 [3]。每克体重使用 10 μL D-荧光素储备液（腹腔注射或静脉注射）。由于常规剂量为 150 mg/kg，20 g 体重的注射液通常应包含 200 μL。将D-荧光素（钾盐或钠盐）溶液溶解至终浓度为15 mg/mL，解冻后用dPBS（澄清的钙或镁缓冲液）稀释。用5–10 mL无菌HO润湿0.22 µM滤膜，然后沥干。将D-荧光素溶液通过预先制备的0.22 µM针筒式过滤器过滤。
D-荧光素钠用于体内荧光素酶报告基因表达的生物发光成像。给药后，底物在靶组织中被荧光素酶代谢，产生可被灵敏成像系统检测到的光。该盐形式易溶于水或其他常用的体内给药缓冲液。 |
| 酶活实验 |
D-荧光素是所有荧光素酶的天然底物，这些荧光素酶催化生物发光昆虫产生光。本综述涵盖了D-荧光素及其衍生物或类似物的合成，这些衍生物或类似物是美洲萤火虫（Photinus pyralis）荧光素酶的底物或抑制剂，该酶是体外和光学成像技术中最常用的酶[1]。
D-荧光素钠的体外酶活性测定包括将底物与萤火虫荧光素酶、ATP和Mg²⁺在合适的缓冲液中孵育。使用发光仪测量发光强度。通过加入ATP启动反应，并记录发光强度。该测定方法灵敏度高，可以检测到皮克级的荧光素酶。动力学参数可以通过底物浓度曲线确定。 |
| 细胞实验 |
基于细胞的生物发光检测利用表达萤火虫荧光素酶的细胞。将D-荧光素钠（0.5-1 mM）配制成工作溶液，溶于预热的组织培养基中。去除细胞培养基，加入底物溶液。将细胞在37°C下孵育5-10分钟后进行成像。测量发光强度，并将其与荧光素酶表达和细胞活力相关联。
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| 动物实验 |
注射D-荧光素后，峰值信号或预定固定时间点的信号可用于体内生物发光成像的定量分析。我们对皮下肿瘤小鼠进行D-荧光素皮下注射后，重复进行连续生物发光成像。每次测量的峰值时间在细胞接种后早期逐渐缩短，这可能是由于肿瘤内血管逐渐建立所致，并在第10天达到约10分钟的平台期。尽管固定时间点的信号与峰值信号之间存在高度相关性，但早期5分钟或10分钟时的信号强度（以峰值信号进行归一化）较低，这导致对肿瘤生长的估计过高。 D-荧光素注射后信号的持续时间可能随细胞接种后时间而变化，在确定定量生物发光肿瘤监测的成像方案时应考虑这种变化。[2]体内生物发光成像研究包括配制浓度为15 mg/mL的D-荧光素钠储备液（溶于DPBS，不含Mg²⁺和Ca²⁺）。该溶液经0.2 μm滤膜过滤除菌。在成像前10-15分钟，将溶液腹腔注射到小鼠体内。使用IVIS或类似成像系统检测生物发光。信号强度与表达荧光素酶的细胞数量相关。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
D-荧光素钠的药代动力学特性与钾盐相似。给药后，该底物被迅速吸收和分布，通常在10-20分钟内达到生物发光峰值。它经荧光素酶代谢，并通过肾脏快速排泄清除。该化合物的快速清除特性使其可以进行重复成像。储备液应储存在-20°C并避光。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
D-荧光素钠的毒理学特性良好，在典型成像剂量下毒性较低。动物研究表明该化合物耐受性良好，未观察到明显不良反应。高剂量可能引起轻微毒性，但用于生物发光成像的剂量远低于毒性阈值。该化合物被认为可安全用于常规体内成像应用。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
生物发光这一迷人现象及其在光学成像领域广泛的生物技术应用，使得D-荧光素及其类似物的化学性质具有极高的研究价值。这超越了White等人于1971年提出的早期预期：“化学合成的激发态在生物发光中起着至关重要的作用；它们也将在生物学的其他领域发挥重要作用。”¹ 与近四十年前的原始研究相比，相关苯并噻唑体系的合成方法并没有发生太大变化。然而，其化学原理依然可靠，并被用于制备D-荧光素及其相关化合物。这些化合物可作为荧光素酶的底物，并应用于光学成像技术等领域，该技术目前已广泛应用于细胞和小动物的临床前分子成像。用于此目的的经典酶PpyLuc可发出黄绿色光，具有宽发射光谱，最大发射波长为560 nm，且背景生物发光较低。这使得利用PpyLuc进行体内生物发光成像成为一种简便且高灵敏度的小动物分子成像方法。调控发射光的波长是一项重要的研究目标，目前主要通过对荧光素酶氨基酸残基进行定点诱变来实现。虽然通过化学修饰D-荧光素的结构也能达到类似的效果，但对于D-荧光素这种相对简单的结构而言，可进行的修饰并不多。事实上，迄今为止仅合成了少数几种化合物，并且只有少数几种化合物被证实能够使PpyLuc催化的生物发光发生红移。然而，本文列举的实例表明，除了对酶进行生化修饰外，巧妙的思路和合成有机化学的创新应用也能为这一引人入胜的研究领域带来新的突破。最后，正如最近的报道所揭示的，D-荧光素的其他类似物可能满足体内光学成像新应用的预期，这些报道阐明了各种化合物（包括肽或功能化聚乙二醇）与D-6′-氨基荧光素的氨基结合的可能性。[1]
染色实例1： D-荧光素钠可用作体内荧光素酶成像的底物。 方法：用于生物发光成像。 1) 将小鼠麻醉后，注射D-荧光素钠（75 mg/kg）进行成像。 2) 使用生物发光成像系统进行成像。染色实例2：D-荧光素钠可用作体内荧光素酶成像的底物，用于监测肿瘤生长。方法：用于生物发光成像。 1) 将D-荧光素钠（150 mg/kg；腹腔注射）注射到小鼠体内。2) 使用生物发光成像系统进行成像。染色示例3：D-荧光素钠可用作荧光素酶（LUC）检测的底物。方法：用于荧光素酶（LUC）检测。1) 将植物样品（叶片）与D-荧光素钠（1 mM；10分钟）和荧光素孵育。2) 使用Photek相机采集信号和图像。染色示例4：D-荧光素钠可用作体内成像中荧光素酶的底物，以监测肿瘤生长。方法：用于生物发光成像。1) 将D-荧光素钠（150 mg/kg）腹腔注射到小鼠体内。 2) 使用 IVIS Lumina XRMS 系列进行生物发光成像。 D-荧光素钠因其高水溶性，是许多应用的首选盐形式。它广泛用于生物发光成像、报告基因检测、ATP 检测和药物筛选。该化合物是萤火虫荧光素酶的金标准底物，对于研究基因表达、细胞活力和体内成像至关重要。它有高纯度制剂可供研究使用。 |
| 分子式 |
C11H7N2NAO3S2
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|---|---|
| 分子量 |
302.29
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| 精确质量 |
301.979
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| 元素分析 |
C, 43.71; H, 2.33; N, 9.27; Na, 7.61; O, 15.88; S, 21.21
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| CAS号 |
103404-75-7
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| 相关CAS号 |
D-Luciferin;2591-17-5;D-Luciferin potassium;115144-35-9
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| PubChem CID |
2733762
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| 外观&性状 |
Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature
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| 沸点 |
473.7ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
240.3ºC
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| 蒸汽压 |
2.78E-10mmHg at 25°C
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| LogP |
0.049
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| tPSA |
139.15
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
396
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
S1C(C2=NC3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3S2)O[H])=N[C@@]([H])(C(=O)[O-])C1([H])[H].[Na+]
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| InChi Key |
BZNVUYVALNTPBG-WJCSTRGMSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H8N2O3S2.Na/c14-5-1-2-6-8(3-5)18-10(12-6)9-13-7(4-17-9)11(15)16/h1-3,7,13H,4H2,(H,15,16)/q+1/p-1/b10-9+/t7-/m1./s1
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| 化学名 |
sodium (S,E)-2-(6-oxobenzo[d]thiazol-2(6H)-ylidene)thiazolidine-4-carboxylate
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| 别名 |
D-Luciferin Sodium; D-Luciferin sodium salt; Sodium (S)-2-(6-hydroxybenzo[d]thiazol-2-yl)-4,5-dihydrothiazole-4-carboxylate; D-Luciferin Sodium; D-Luciferin, Sodium Salt; D-Luciferin (sodium); C11H7N2NaO3S2; D-Luciferin sodium salt monohydrate;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~250 mg/mL (~826.99 mM)
DMSO : ~100 mg/mL (~330.80 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 100 mg/mL (330.80 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3081 mL | 16.5404 mL | 33.0808 mL | |
| 5 mM | 0.6616 mL | 3.3081 mL | 6.6162 mL | |
| 10 mM | 0.3308 mL | 1.6540 mL | 3.3081 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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