| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Darapladib (SB-480848) is a selective, reversible inhibitor of lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA2). In in vitro enzyme assays, it exhibited an IC50 of ~0.2 nM for human recombinant Lp-PLA2 and a Ki of ~0.15 nM (measured via fluorescent substrate-based inhibition assay) [1]
- Darapladib (SB-480848) specifically targets Lp-PLA2 (no off-target inhibition of other phospholipases, e.g., PLA2G1B, PLA2G2A) with an IC50 of <1 nM for plasma-derived Lp-PLA2 (human) [4] - Darapladib (SB-480848) exerts anti-glioma effects via indirect targets related to mitochondrial function and apoptosis (e.g., Bax, caspase-3)[2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 C6 胶质瘤细胞和 U251MG 中，darapladib（5 μM；6、12 小时）可导致细胞周期停滞 [2]。胶质瘤细胞凋亡由 darapladib（5 μM；3、6 小时）触发 [2]。在神经胶质瘤细胞中，darapladib（5 μM；5、15、30、60 和 90 分钟）可导致 ERK1/2 蛋白磷酸化增加 [2]。
达普拉迪布（SB-480848） 在体外强效抑制Lp-PLA2活性：① 对人重组Lp-PLA2：0.01–10 nM达普拉迪布在约0.2 nM（IC50）时抑制酶活性50%，在10 nM时抑制率>90%（通过Lp-PLA2荧光底物1-棕榈酰-2-(5-荧光素羧基戊酰)-sn-甘油-3-磷酸胆碱的水解反应测定） [1]；② 对人血浆中Lp-PLA2：1 nM达普拉迪布抑制>80%的Lp-PLA2活性，且不交叉抑制胞质PLA2或分泌型PLA2 [4] - 达普拉迪布（SB-480848） 诱导胶质瘤细胞（U87和U251细胞系）凋亡和线粒体功能障碍：① 细胞活力：5–40 μM处理48小时，活力从30%（5 μM）降至70%（40 μM）（MTT法）；② 凋亡：20 μM达普拉迪布使Annexin V阳性细胞增加约40%（流式细胞术），Western blot显示切割型caspase-3（2.5倍）和Bax（1.8倍）上调，Bcl-2（0.4倍）下调；③ 线粒体功能障碍：10–20 μM使细胞内ROS水平增加约2.3倍（DCFH-DA染色），线粒体膜电位（ΔΨm）降低约50%（JC-1染色），ATP生成减少约45%（荧光素酶ATP assay） [2] - 达普拉迪布（SB-480848） 抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化：在THP-1来源的巨噬细胞中，1–10 nM预处理24小时，脂质蓄积（油红O染色）从30%（1 nM）降至60%（10 nM），清道夫受体CD36的mRNA表达降低约40%（10 nM，RT-PCR） [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在缺乏 LDLR 的小鼠中，darapladib（50 mg/kg；口服；每日一次，持续 6 周）可显着降低血清 Lp-PLA2 活性 [3]。在小鼠中，darapladib（50 mg/kg；口服；每天一次，持续 6 周）可以降低血清中 IL-6 和 hs-CRP 的水平 [3]。
达普拉迪布（SB-480848） 改善LDLR缺陷（LDLR-/-）小鼠的动脉粥样硬化：① 动物模型：8周龄雄性LDLR-/-小鼠喂食高脂饲料（HFD，21%脂肪，0.15%胆固醇）12周；② 处理：小鼠随机分为3组（n=8/组）：溶媒组（0.5% CMC，灌胃）、达普拉迪布低剂量组（10 mg/kg/天）、达普拉迪布高剂量组（30 mg/kg/天）；③ 药效结果：① 主动脉斑块面积：高剂量组较溶媒组减少约45%（主动脉根部横切片油红O染色）；② 血浆Lp-PLA2活性：高剂量组抑制率约80%（酶活性测定）；③ 炎症标志物：血浆TNF-α和IL-6分别降低约35%和40%（ELISA）；④ 脂质谱：血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）无显著变化，但高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）升高约15%（高剂量组，生化测定） [3] - 达普拉迪布（SB-480848） 在食蟹猴中呈剂量依赖性抑制Lp-PLA2：口服0.3–3 mg/kg/天，持续7天，血浆Lp-PLA2活性从50%（0.3 mg/kg）抑制至90%（3 mg/kg），给药后抑制作用维持>24小时 [4] |
| 酶活实验 |
达普拉迪布（SB-480848） 的荧光底物Lp-PLA2活性测定实验：1）制备反应体系（总体积100 μL）：含50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）、150 mM NaCl、5 mM CaCl2、0.1% BSA、1 μM荧光底物（1-棕榈酰-2-(5-荧光素羧基戊酰)-sn-甘油-3-磷酸胆碱）及系列浓度的达普拉迪布（0.001–100 nM）。2）加入5 ng人重组Lp-PLA2启动反应，37°C孵育30分钟。3）加入10 μL 10% SDS终止反应。4）用酶标仪在激发光485 nm、发射光535 nm处测定荧光强度。5）以溶媒对照组为基准计算酶活性百分比，拟合剂量-反应曲线确定IC50 [1]
- 达普拉迪布（SB-480848） 的血浆Lp-PLA2活性测定实验：1）取人血浆50 μL，与50 μL达普拉迪布溶液（终浓度0.1–100 nM）或溶媒（0.1% DMSO）混合，37°C孵育15分钟。2）向血浆-达普拉迪布混合物中加入100 μL反应缓冲液（含50 mM Tris-HCl，pH 7.4，150 mM NaCl，5 mM CaCl2及2 μM荧光底物）。3）37°C孵育60分钟，按上述方法测定荧光强度。4）通过BCA法测定血浆蛋白浓度，对活性数据进行归一化以消除样本间差异 [4] |
| 细胞实验 |
细胞凋亡分析[2]
细胞类型： C6 胶质瘤细胞和 U251MG 细胞。 测试浓度： 5 μM 孵育时间： 3、6 小时 实验结果： 触发神经胶质瘤中的细胞凋亡细胞。 细胞周期分析[2] 细胞类型： C6 神经胶质瘤细胞和 U251MG 细胞。 测试浓度： 5 μM 孵育时间： 6、12 小时 实验结果： 诱导细胞周期停滞神经胶质瘤细胞。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型： C6 神经胶质瘤细胞和 U251MG 细胞。 测试浓度： 5 μM 孵育时间：5、15、30、60 和 90 分钟 实验结果： 诱导神经胶质瘤细胞中 ERK1/2 蛋白磷酸化的增加，但 AKT 磷酸化的减少。 达普拉迪布（SB-480848） 的胶质瘤细胞凋亡与线粒体功能实验：1）细胞培养：U87/U251胶质瘤细胞用含10% FBS、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基，在37°C、5% CO2条件下培养。2）细胞活力测定：96孔板接种细胞（5×10³细胞/孔），孵育24小时后，用达普拉迪布（5–40 μM）处理48小时，加入MTT试剂（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶，570 nm处测吸光度。3）凋亡测定：6孔板接种细胞（1×10⁵细胞/孔），20 μM达普拉迪布处理48小时，收集细胞，Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞仪分析。4）Western blot：用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，SDS-PAGE分离蛋白，转移至PVDF膜，用抗切割型caspase-3、Bax、Bcl-2和GAPDH（上样对照）抗体孵育，化学发光显影。5）线粒体实验：① ROS：DCFH-DA（10 μM）染色30分钟，流式细胞仪测荧光；② ΔΨm：JC-1（5 μM）染色20分钟，分析红/绿荧光比；③ ATP：荧光素酶ATP试剂盒，测发光值 [2] - 达普拉迪布（SB-480848） 的巨噬细胞泡沫化实验：1）100 nM PMA处理THP-1细胞48小时，诱导分化为巨噬细胞。2）达普拉迪布（1–10 nM）预处理巨噬细胞24小时，再用50 μg/mL ox-LDL刺激24小时。3）4%多聚甲醛固定细胞，油红O染色30分钟，异丙醇洗脱染料，510 nm处测吸光度量化脂质蓄积。4）提取细胞总RNA，用CD36特异性引物进行RT-PCR，以GAPDH为内参归一化 [3] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性纯合LDLR缺陷小鼠（C57/Bl6遗传背景）[3]。
剂量：50 mg/kg 给药途径：口服；每日一次，持续6周。 实验结果：血清Lp-PLA2活性显著抑制。 达拉普拉地（SB-480848）的LDLR-/-小鼠动脉粥样硬化模型：1）动物选择：8周龄雄性C57BL/6-LDLR-/-小鼠（20-25 g），饲养于12小时光照/黑暗循环、22±2°C的条件下，自由摄取食物和水。 2) 分组：小鼠随机分为3组（每组n=8）：① 赋形剂组：0.5%羧甲基纤维素（CMC）生理盐水，每日灌胃一次；② 低剂量达拉普拉地组：10 mg/kg/天，溶于0.5% CMC，灌胃；③ 高剂量达拉普拉地组：30 mg/kg/天，溶于0.5% CMC，灌胃。3) 饮食和治疗持续时间：所有组均喂食高脂饮食（HFD，21%脂肪，0.15%胆固醇）12周，从喂食HFD的第一天开始给药。4) 样本采集：实验结束时，用异氟烷麻醉小鼠，通过眼眶后静脉丛采集血液（用于血浆Lp-PLA2活性、脂质谱和细胞因子检测）。主动脉解剖后，用 4% 多聚甲醛固定（用于斑块染色）或冷冻于 -80°C（用于分子分析）。5) 斑块分析：将主动脉根部包埋于石蜡中，切片（5 μm），用油红 O 染色，图像分析以量化斑块面积 [3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
达拉普拉地布 (SB-480848) 在临床前动物模型中表现出良好的口服生物利用度和药代动力学：① 口服吸收：大鼠（口服 10 mg/kg）生物利用度约为 30%，食蟹猴（口服 3 mg/kg）生物利用度约为 50%；② 血浆半衰期 (t1/2)：大鼠约为 4 小时，食蟹猴约为 6 小时；③ 分布：大鼠分布容积 (Vd) 约为 1.2 L/kg，表明组织渗透性中等；④ 代谢：主要在肝脏通过 CYP3A4 代谢（体外微粒体试验），无主要活性代谢物； ⑤ 排泄：大鼠体内约 60% 经粪便（原药）排泄，约 25% 经尿液（代谢物）排泄 [4]
- 达拉普拉地 (SB-480848) 在人体中显示出线性药代动力学特征（I 期研究）：口服 10–400 mg 剂量后，Cmax（10 mg 时为 10 ng/mL，400 mg 时为 400 ng/mL）和 AUC（10 mg 时为 50 ng·h/mL，400 mg 时为 2000 ng·h/mL）均呈剂量比例增加，t1/2 约为 8 小时 [4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
达拉普拉地 (SB-480848) 显示出较低的体外毒性：① 在正常人星形胶质细胞 (NHA) 中，40 μM 达拉普拉地对细胞活力没有显著影响（活力 >90% 与对照组相比，MTT 检测），表明对胶质瘤细胞具有选择性毒性 [2]； ② 在浓度高达 10 μM 时，未观察到对主要 CYP 酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）的抑制（体外微粒体抑制试验）[4]
- 达拉普拉地 (SB-480848) 具有良好的临床前毒性特征：① 在为期 4 周的大鼠毒性研究中（10–100 mg/kg/天口服）：无死亡，体重、器官重量（肝脏、肾脏）或血清 ALT/AST/肌酐水平无显著变化； ② 在为期 13 周的猴子毒性研究（3–30 mg/kg/天口服）中：未观察到对血液学、临床化学或组织病理学（肝脏、肾脏、心脏）的不良影响[4] - 达拉普拉地 (SB-480848) 在人、大鼠和猴血浆中的血浆蛋白结合率 >99%（超滤法）[4] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
达拉普拉地是一种取代嘧啶酮类药物，可抑制脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)。Lp-PLA2是脂质代谢和炎症的重要调节因子，它与脂蛋白颗粒一起循环，并在动脉粥样硬化进展过程中随低密度脂蛋白颗粒进入动脉壁。
药物适应症 已研究用于治疗动脉粥样硬化。 作用机制 达拉普拉地是一种选择性脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2) 抑制剂。Lp-PLA2是炎症过程的上游酶促介质。实验证据表明，氧化低密度脂蛋白 C (LDL-C) 的分解产物，如溶血磷脂酰胆碱和氧化非酯化脂肪酸，具有促炎和促凋亡作用。这些产品被怀疑会导致动脉粥样硬化进展和斑块易损性增加，从而增加心血管疾病的风险。 达拉普拉地（SB-480848）于2003年被葛兰素史克（GSK）确定为临床候选药物，最初因其选择性Lp-PLA2抑制活性而开发用于治疗动脉粥样硬化和冠状动脉疾病（CAD）[1,4]。 - 达拉普拉地（SB-480848）的抗动脉粥样硬化机制包括：①抑制Lp-PLA2介导的氧化磷脂（例如ox-PAPC）水解为促炎脂质（例如溶血磷脂酰胆碱，LPC）和氧化脂肪酸；②减少动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞浸润和泡沫细胞形成； ③ 抑制局部和全身炎症[3,4] - Darapladib (SB-480848) 已进入冠状动脉疾病 (CAD) 的 III 期临床试验（例如 SOLID-TIMI 52 试验），但由于未能达到降低主要不良心血管事件 (MACE) 的主要终点，该药物的研发于 2014 年终止[4] - 除了心血管疾病外，Darapladib (SB-480848) 还显示出通过诱导线粒体功能障碍和细胞凋亡而发挥抗胶质瘤活性的潜在作用，提示其具有用于癌症治疗的潜力[2] |
| 分子式 |
C36H38F4N4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
666.7711
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| 精确质量 |
666.265
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| CAS号 |
356057-34-6
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| 相关CAS号 |
1389264-17-8 (Darapladib-impurity)
|
| PubChem CID |
9939609
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
741.0±70.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
401.9±35.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.594
|
| LogP |
8.27
|
| tPSA |
83.74
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
13
|
| 重原子数目 |
47
|
| 分子复杂度/Complexity |
1120
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WDPFJWLDPVQCAJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C36H38F4N4O2S/c1-3-42(4-2)20-21-43(22-25-8-12-27(13-9-25)28-14-16-29(17-15-28)36(38,39)40)33(45)23-44-32-7-5-6-31(32)34(46)41-35(44)47-24-26-10-18-30(37)19-11-26/h8-19H,3-7,20-24H2,1-2H3
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| 化学名 |
N-[2-(diethylamino)ethyl]-2-[[(4-fluorophenyl)methyl]thio]-4,5,6,7-tetrahydro-4-oxo-N-[[4-(trifluoromethyl)[1,1-biphenyl]-4-yl]methyl]-1H-Cyclopentapyrimidine-1-acetamide
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| 别名 |
SB-480848; SB 480848; Darapladib;SB480848
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4998 mL | 7.4988 mL | 14.9977 mL | |
| 5 mM | 0.3000 mL | 1.4998 mL | 2.9995 mL | |
| 10 mM | 0.1500 mL | 0.7499 mL | 1.4998 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01873339 | Completed | Drug: Darapladib Drug: Midazolam |
Atherosclerosis | GlaxoSmithKline | June 19, 2013 | Phase 1 |
| NCT02000804 | Completed | Drug: darapladib 160mg | Atherosclerosis | GlaxoSmithKline | October 23, 2013 | Phase 1 |
| NCT01852565 | Completed | Drug: Darapladib Drug: Diltiazem |
Atherosclerosis | GlaxoSmithKline | May 14, 2013 | Phase 1 |
| NCT00704431 | Completed | Drug: SB-480848 (darapladib) | Atherosclerosis | GlaxoSmithKline | May 2008 | Phase 1 |
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|---|
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盐酸阿的平
氯苯吩嗪
U73122
VU-0155069
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