| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Diflapolin is a dual inhibitor targeting 5-Lipoxygenase-Activating Protein (FLAP) and soluble Epoxide Hydrolase (sEH). Inhibition of cellular 5-LOX product formation (via FLAP) showed IC₅₀ values of 30 nM in human monocytes and 170 nM in human neutrophils. Inhibition of the epoxide hydrolase activity of isolated human recombinant sEH showed an IC₅₀ of 20 nM. [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Diflapolin 能有效抑制钙离子载体刺激的人单核细胞（IC₅₀ = 30 nM）和中性粒细胞（IC₅₀ = 170 nM）中 5-LOX 产物（LTB₄、其异构体和 5-H(p)ETE）的形成。浓度高达 10 µM 时，它不抑制分离的人重组 5-LOX 或白细胞匀浆中的 5-LOX 活性。[2]
在完整细胞中，补充外源性花生四烯酸（AA）会减弱 diflapolin 对 5-LOX 产物形成的抑制作用，这是 FLAP 抑制剂的典型特征。[2] 在 HEK293 细胞中，diflapolin 仅在 5-LOX 与 FLAP 共表达时抑制 5-LOX 产物形成，而在仅表达 5-LOX 的细胞中无效，从而证实 FLAP 是其靶点。[2] Diflapolin 在无细胞实验中抑制人重组 sEH 的环氧化物水解酶活性，IC₅₀ 为 20 nM，但浓度高达 10 µM 时不影响 sEH 的磷酸酶活性。[2] 在使用 HepG2 细胞的基于细胞的实验中，diflapolin（1 µM）将 14,15-EET 转化为 14,15-DiHETrE 的过程抑制了约 50%。[2] Diflapolin（高达 10 µM）不抑制与 AA 代谢相关的其他酶的活性，包括 COX-1、COX-2、12-LOX、15-LOX、LTA₄ 水解酶、LTC₄ 合酶、微粒体前列腺素 E 合酶-1（mPGES-1）或胞质磷脂酶 A₂（cPLA₂），显示出较高的靶点特异性。[2] Diflapolin（1 µM）可阻止激动剂诱导的人单核细胞中核膜处 5-LOX/FLAP 复合物的组装（通过邻近连接 assay 可视化），但不阻断 5-LOX 的核转位。[2] 在 MTT 实验中，diflapolin（10 µM）处理 24 或 48 小时后不影响人单核细胞的活力。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内研究表明，diflapolin（1-10 mg/kg；腹腔注射；酵母聚糖给药前 30 分钟）显示出很强的抗炎作用 [1]。
在酵母聚糖诱导的小鼠腹膜炎模型中，腹腔注射 diflapolin（1、3 和 10 mg/kg）在注射酵母聚糖前 30 分钟给药，能剂量依赖性地显著降低腹腔中 LTC₄ 和 LTB₄ 的水平。[2] Diflapolin 处理（10 mg/kg）显著抑制中性粒细胞向腹腔的浸润，降低髓过氧化物酶（MPO）活性（降至溶剂对照的 52.8%），并减弱血管通透性（降至溶剂对照的 55.7%）。[2] |
| 酶活实验 |
人重组 sEH 的环氧化物水解酶活性通过基于荧光的无细胞实验进行评估。将酶稀释在含 BSA 的 Tris 缓冲液中，与 diflapolin 或溶剂在室温下预孵育 10 分钟。通过添加非荧光底物 PHOME（50 µM）启动反应。60 分钟后，用 ZnSO₄ 终止反应，并测量产物（6-甲氧基萘醛）的荧光（激发 330 nm，发射 465 nm）。[2]
sEH N 端结构域的磷酸酶活性在另一个基于荧光的实验中评估。将酶在醋酸缓冲液中与 diflapolin 或溶剂在室温下预孵育 30 分钟。通过添加底物 DiFMUP（300 µM）启动反应，并在 37°C 下监测去磷酸化产物（DiFMU）的荧光 45 分钟（激发 360 nm，发射 450 nm）。[2] 对于 COX 活性，将纯化的绵羊 COX-1 或重组人 COX-2 稀释在含谷胱甘肽和血红蛋白的 Tris 缓冲液中。与 diflapolin 或溶剂在室温下预孵育 5 分钟并在 37°C 下预孵育 30 秒后，加入 AA（COX-1 为 5 µM，COX-2 为 2 µM）启动反应。反应在 37°C 下进行 5 分钟后用甲醇终止，通过 HPLC 分析产物 12-HHT 的形成。[2] |
| 细胞实验 |
为评估完整人白细胞中 5-LOX 产物的形成，将新鲜分离的中性粒细胞或单核细胞重悬于缓冲液中，与 diflapolin 或溶剂在 37°C 预孵育 15 分钟，然后用钙离子载体 A23187（2.5 µM）在 37°C 刺激 10 分钟（可添加或不添加外源性 AA）。用冰甲醇终止反应。经固相萃取后，通过反相 HPLC 分析 5-LOX 产物（LTB₄ 异构体和 5-H(p)ETE）。[2]
对于基于细胞的 sEH 实验，收集 HepG2 细胞，重悬于缓冲液中，与 diflapolin 或溶剂在 37°C 预孵育 15 分钟。然后用底物 14,15-EET（1.5 µM）在 37°C 孵育 30 分钟。用甲醇终止反应，经固相萃取后，通过 UPLC-MS/MS 分析向 14,15-DiHETrE 的转化。[2] 在 [³H]-AA 预标记的人中性粒细胞中测量花生四烯酸释放。细胞与 diflapolin 或溶剂在 37°C 预孵育 10 分钟，用 A23187（2.5 µM）刺激 10 分钟，然后离心。通过液体闪烁计数测量上清液中的放射性。[2] 使用 MTT 法评估细胞活力。用人单核细胞与 diflapolin 或对照处理 24 或 48 小时。然后加入 MTT 溶液孵育 2 小时，用 SDS 裂解细胞，在 570 nm 处测量形成的甲臜的吸光度。[2] 使用免疫荧光显微镜和邻近连接 assay（PLA）研究 5-LOX 的亚细胞定位和 5-LOX/FLAP 复合物的组装。将盖玻片上的人单核细胞用 diflapolin 或溶剂预处理，用 A23187 刺激，固定，透化，并与抗 5-LOX 和抗 FLAP 的一抗孵育。对于免疫荧光，使用荧光标记的二抗和 DAPI。对于 PLA，使用带有寡核苷酸的特定二抗，然后进行连接、滚环扩增以及与荧光寡核苷酸杂交，将蛋白质-蛋白质相互作用可视化为荧光点。[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性CD-1小鼠（酵母聚糖诱导的腹膜炎小鼠模型）[1]
剂量：1、3和10 mg/kg 给药途径：腹腔注射(ip)；在注射酵母聚糖前 30 分钟， 实验结果： 1 mg/kg 剂量即可显著降低腹膜内 LTC4 和 LTB4 的水平，其效果与 MK886 相当。 在酵母聚糖诱导的腹膜炎模型中，雄性 CD-1 小鼠在腹腔注射酵母聚糖（2 mg/mL 生理盐水）前 30 分钟，分别腹腔注射 双氟泊林（1、3 或 10 mg/kg）、参考 FLAP 抑制剂 MK886 或载体（含 2% DMSO 的 0.9% 生理盐水）。在安乐死后的特定时间点进行腹腔灌洗。收集渗出液进行细胞计数（使用台盼蓝染色）和分析上清液中LTB₄和LTC₄的水平（通过ELISA法），以及细胞沉淀物中髓过氧化物酶（MPO）的活性。为了评估血管通透性，在注射酵母聚糖后立即静脉注射伊文思蓝染料，并在30分钟后通过650 nm处的吸光度测量其渗出到腹腔灌洗液中的量。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在MTT试验中，10 µM的Diflapolin处理24或48小时后，对人单核细胞的活力没有影响。[2]
在小鼠腹膜炎模型中，在测试剂量（最高达10 mg/kg，腹腔注射）下，未观察到明显的毒性反应。[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
地氟普林（Diflapolin，N-[4-(苯并噻唑-2-基甲氧基)-2-甲基苯基]-N′-(3,4-二氯苯基)脲）是首个报道的5-脂氧合酶激活蛋白（FLAP）和可溶性环氧化物水解酶（sEH）双重抑制剂。[2]
其结构结合了脲基（sEH抑制剂的常见结构）和苯并噻唑骨架（类似于FLAP抑制剂）。[2] 该双重抑制机制被认为能够同时抑制促炎性白三烯的生成（通过抑制FLAP）和稳定抗炎性环氧己三烯酸（EETs）（通过抑制sEH），从而为治疗炎症相关疾病提供潜在的治疗优势。 [2] Diflapolin在花生四烯酸级联反应和MAPEG家族蛋白中表现出高度靶向特异性。[2] |
| 分子式 |
C22H17CL2N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
458.360281705856
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| 精确质量 |
457.041
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| 元素分析 |
C, 57.65; H, 3.74; Cl, 15.47; N, 9.17; O, 6.98; S, 6.99
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| CAS号 |
724453-98-9
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| PubChem CID |
4560409
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
543.0±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
282.2±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.736
|
| LogP |
7.05
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| tPSA |
91.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
587
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1=C(C=CC(=C1)NC(NC1C=CC(=CC=1C)OCC1=NC2C=CC=CC=2S1)=O)Cl
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| InChi Key |
FGXLEECGXSDIMM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H17Cl2N3O2S/c1-13-10-15(29-12-21-26-19-4-2-3-5-20(19)30-21)7-9-18(13)27-22(28)25-14-6-8-16(23)17(24)11-14/h2-11H,12H2,1H3,(H2,25,27,28)
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| 化学名 |
1-(4-(benzo[d]thiazol-2-ylmethoxy)-2-methylphenyl)-3-(3,4-dichlorophenyl)urea
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| 别名 |
Diflapolin
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~83.33 mg/mL (~181.80 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.54 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1817 mL | 10.9085 mL | 21.8169 mL | |
| 5 mM | 0.4363 mL | 2.1817 mL | 4.3634 mL | |
| 10 mM | 0.2182 mL | 1.0908 mL | 2.1817 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Bamirastine
戊双氟酚
PROTAC-PEG3-Amino
MT-3014
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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