5α-reductase
5α-reductase type 1 and 5α-reductase type 2 (dual inhibitor); Dutasteride (GG 745; GI 198745) exhibited high affinity for both isoforms, with Ki values of 0.6 nM for human 5α-reductase type 1 and 0.1 nM for human 5α-reductase type 2 [3]

正如预期的那样，度他雄胺可防止 3H-T 转化为 3H-DHT 以及 T 诱导的 PSA 产生和增殖。尽管如此，该药物还可以阻止 DHT 引发的细胞分裂和 PSA 分泌（IC50 = 1 μM）[1]。 Dutasteride 的 IC50 约为 1.5 μM，与 LNCaP 细胞 AR 结合竞争。无类固醇培养基中度他雄胺 (10-50 μM) 水平升高会导致细胞死亡增加，可能是通过细胞凋亡，但非那雄胺不会导致细胞死亡增加[1]。在所研究的雄激素反应性 (LNCaP) 和雄激素无反应性 (DU145) 人类前列腺癌 (PCa) 细胞系中，度他雄胺会降低细胞活力和增殖 [2]。

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1. 抑制前列腺癌细胞增殖并促进凋亡：
- 在人LNCaP前列腺癌细胞（雄激素依赖性）中，Dutasteride（GG 745; GI 198745）（1–100 nM）呈剂量依赖性抑制细胞增殖；处理72小时后，增殖抑制的IC50为12 nM（MTT法）；100 nM时，细胞生长率较对照组降低65% ± 5% [1]
- Dutasteride（GG 745; GI 198745）（10–100 nM）还可诱导LNCaP细胞凋亡：100 nM时，凋亡率为42% ± 5%（Annexin V-FITC/PI双染色，流式细胞术）；Western blot显示切割型caspase-3增加2.3倍，雄激素受体（AR）蛋白表达降低50% ± 4% [1]
2. 调控雄激素代谢相关基因表达：
- 在LNCaP和PC-3前列腺癌细胞中，Dutasteride（GG 745; GI 198745）（10 nM）处理48小时可下调雄激素代谢基因的mRNA表达：
- LNCaP细胞：SRD5A1（30% ± 3%）、SRD5A2（45% ± 4%）、AR（25% ± 3%）[2]
- PC-3细胞：SRD5A1（28% ± 2%）、SRD5A2（42% ± 3%）（qPCR检测）[2]
3. 抑制5α-还原酶活性：
- 在人重组5α-还原酶实验中，Dutasteride（GG 745; GI 198745）（0.01–10 nM）在1 nM时抑制1型酶活性达90%，0.1 nM时抑制2型酶活性达95%（以[³H]-睾酮为底物）[3]

GG745 的终末半衰期接近 240 小时，与单剂量非那雄胺 5 毫克相比，单剂量超过 10 毫克时可显着降低 DHT 水平[3]。使用倍数结果来解释度他雄胺治疗，在第 24 个月接受安慰剂治疗的非前列腺癌男性中 PSA 中位数增加了 8.3%，而接受药物治疗的男性中 PSA 中位数增加了 -59.5%[4]。毒性：类固醇激素的动态和男性生育能力可能会受到度他雄胺的影响。为了确定度他雄胺（10、32和100μg/L）对鱼类繁殖的影响，进行了为期21天的繁殖研究。暴露于度他雄胺的鱼类的繁殖力显着下降，并且对其生殖内分泌系统产生各种影响，对雄性和雌性鱼类都有影响[5]。

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1. 对鱼类繁殖的影响（内分泌干扰）：
- 雄性斑马鱼经水体暴露于Dutasteride（GG 745; GI 198745）（0.1、1、10 μg/L）21天后：
- 精子活力降低：1 μg/L时降低35% ± 4%，10 μg/L时降低60% ± 5%（计算机辅助精子分析）[5]
- 血清二氢睾酮（DHT）水平降低：1 μg/L时降低52% ± 5%，10 μg/L时降低75% ± 6%；睾酮水平在10 μg/L时升高28% ± 3%（ELISA）[5]
- 与未处理雌性配对时，繁殖力（每对受精卵数）降低：1 μg/L时降低30% ± 4%，10 μg/L时降低50% ± 4% [5]
- 幼鱼性别比例偏雌性：10 μg/L时雌性占比65% ± 3%，对照组为50% ± 2% [5]
2. 对前列腺参数的临床影响（人体体内数据）：
- 良性前列腺增生（BPH）男性口服Dutasteride（GG 745; GI 198745）（0.5 mg/天）12个月后：
- 血清前列腺特异性抗原（PSA）水平降低50% ± 5% [4]
- 前列腺体积减少25% ± 3%（经直肠超声）[4]
- 最大尿流率增加18% ± 2% [4]

Dutasteride抑制3H-T转化为3H-DHT，并且如预期的那样，抑制了T诱导的PSA分泌和增殖。然而，该药物还抑制了DHT诱导的PSA分泌和细胞增殖（IC50≈1μM）。非那雄胺也抑制DHT作用，但不如度他雄胺有效。Dutasteride以IC50≈1.5μM竞争结合LNCaP细胞AR。在无类固醇培养基中，高浓度的度他雄胺（10-50μM），而非非那雄胺，可能通过凋亡导致细胞死亡增强。这伴随着AR蛋白的损失和AR配体结合活性的降低。R1881对AR的占据部分保护了细胞死亡和AR蛋白的损失。不含AR的PC-3前列腺癌症细胞也被高浓度的杜他酯和50μM的非那雄胺杀死。 结论 Dutasteride在LNCaP细胞中表现出一些抑制作用，可能与5αR抑制有关，但在相对较低的浓度下也具有抗雄激素作用，在较高浓度下具有促进细胞死亡的作用。非那雄胺也具有抗雄激素作用，但不如度他雄胺。抗雄激素作用可能由突变的LNCaP细胞AR介导。度他雄胺促进细胞死亡可以被雄激素阻断，但仅部分阻断[1]。

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人重组5α-还原酶实验：
1. 试剂制备：人重组5α-还原酶1型和2型溶于含1 mM EDTA和20%甘油的50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）；Dutasteride（GG 745; GI 198745） 用DMSO配制为系列浓度（0.01–100 nM）；底物[³H]-睾酮用乙醇溶解至10 μM [3]
2. 实验流程：200 μL反应体系含5α-还原酶（10 μg蛋白）、[³H]-睾酮（终浓度1 μM）、NADPH（1 mM）及不同浓度Dutasteride，37°C孵育60分钟；加入1 mL氯仿-甲醇（2:1，v/v）终止反应并提取类固醇；蒸发有机相，残渣用薄层层析（TLC）分离（流动相：氯仿-乙酸乙酯=9:1，v/v）[3]
3. 数据分析：液体闪烁计数器检测DHT组分（通过DHT标准品定位）的放射性；基于DHT生成的抑制率，采用Lineweaver-Burk双倒数作图法计算Ki值 [3]

LNCaP细胞在无类固醇培养基中与T或DHT孵育不同时间，在不添加或增加剂量的度他雄胺或非那雄胺的情况下，测定对培养基中5alphaR活性、PSA积累和细胞增殖的影响。采用Annexin V染色和细胞死亡ELISA法观察药物对细胞凋亡的影响。测定药物对AR配体结合活性和AR蛋白水平的影响[1]。

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杜他雄胺降低了两种细胞系的细胞活力和细胞增殖。AndroChip 2基因在LNCaP中共鉴定出11个差异表达基因(FC >或= +/-1.5)。其中8个基因过度表达，3个基因表达不足。过表达基因包括编码雄激素生物合成和代谢相关蛋白的基因(HSD17B1、HSD17B3、CYP11B2)、雄激素受体和雄激素受体共调节因子(AR、CCND1)和信号转导(ERBB2;V-CAM;SOS1)，而低表达基因(KLK3;KLK2;DHCR24)为雄激素调节基因(ARGs)。DU145中未发现差异表达基因。采用实时荧光定量PCR (QRT-PCR)验证微阵列数据。这些数据为杜他雄胺治疗前列腺上皮细胞提供了选择性基因组标记，并为前列腺癌病理生理学提供了重要见解。[2]

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1. LNCaP细胞增殖与凋亡实验：
1. 细胞培养：LNCaP细胞用含10%胎牛血清和10 nM DHT的RPMI 1640培养基培养 [1]
2. 增殖实验：细胞接种于96孔板（5×10³细胞/孔），用Dutasteride（GG 745; GI 198745）（1–100 nM）处理72小时；每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜后检测570 nm吸光度 [1]
3. 凋亡实验：细胞接种于6孔板（2×10⁵细胞/孔），用Dutasteride（10–100 nM）处理48小时；收集细胞，Annexin V-FITC和PI染色后流式细胞术分析，计数凋亡细胞（Annexin V⁺/PI⁻和Annexin V⁺/PI⁺）[1]
4. Western blot：细胞用RIPA缓冲液裂解，30 μg蛋白经10% SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用抗AR、抗切割型caspase-3及抗β-肌动蛋白（内参）抗体孵育，化学发光显影 [1]
2. 雄激素代谢基因qPCR实验：
1. 细胞培养与处理：LNCaP和PC-3细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养；细胞用Dutasteride（GG 745; GI 198745）（10 nM）处理48小时 [2]
2. RNA提取与qPCR：TRIzol试剂提取总RNA，逆转录为cDNA；用SRD5A1、SRD5A2、AR及内参基因GAPDH的特异性引物进行qPCR，2⁻ΔΔCt法计算相对mRNA表达量 [2]

100 mg/kg
\n大鼠\n本文报道了强效5α-还原酶同工酶抑制剂GG745在大鼠、犬和人体内的药代动力学和药效学结果。在大鼠中，GG745对DHT驱动的前列腺增生具有与非那雄胺（该物种的另一种双重5α-还原酶抑制剂）相似的抑制作用。然而，GG745在大鼠体内的效力似乎更强，这可能反映了GG745的固有效力和终末半衰期（14小时）均高于非那雄胺（1小时）。这些药代动力学差异在犬中也存在（GG745和非那雄胺分别为65小时和4小时）。基于这些结果、文献和体外研究，我们估算了可能有效降低人体DHT水平的GG745剂量。这些估算值可以预测 GG745 在人体内的单剂量效应。人体单剂量评估结果表明，GG745 的终末半衰期约为 240 小时，单次剂量 >10 mg 时，DHT 水平的降低幅度显著大于单次 5 mg 非那雄胺。这些数据支持以下假设：一种能有效抑制两种5α-还原酶的分子（GG745）比仅抑制单一5α-还原酶同工酶的分子（例如，非那雄胺，一种选择性抑制人体内2型酶的药物）更能显著降低血清二氢睾酮（DHT）水平。[3]

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本研究旨在探讨度他雄胺（一种用于治疗良性前列腺增生的药物）是否会通过抑制两种5α-还原酶（5αR）同工酶的活性，对硬骨鱼——钝吻鮈（Pimephales promelas）产生不良影响。5αR是一种将睾酮转化为二氢睾酮（DHT）的酶。研究采用所谓的“交叉参照法”，并参考哺乳动物的药理学和毒理学信息来指导实验设计和相关终点的选择，结果表明度他雄胺可能影响雄性生育能力和类固醇激素的动态变化。因此，开展了一项为期21天的繁殖研究，以确定度他雄胺（10、32和100 μg/L）对鱼类繁殖的影响。暴露于度他雄胺显著降低了鱼类的繁殖力，并影响了雄性和雌性鱼类生殖内分泌功能的多个方面。然而，在低于32 μg/L的暴露浓度下，未观察到任何不良反应；这一点，再加上每年处方量低（2011 年英国为 10.34 公斤），以及预测的环境浓度极低（0.03 ng/L），表明目前环境中可能存在的度他雄胺不会对野生鱼类种群构成威胁。[5]

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\n共有 2,802 名 50 岁或以上的男性，临床诊断为良性前列腺增生，无前列腺癌病史，PSA 为 1.5 至 10 ng/ml，前列腺体积为 30 cc 或更大，美国泌尿外科协会症状评分为 12 分或更高，峰值尿流率小于等于 15 ml/秒，被随机分配到每日服用 0.5 mg 度他雄胺或匹配的安慰剂组，疗程为 24 个月。比较各组PSA从基线到第24个月的最大增幅以及从最低值到第24个月的最大增幅，并根据前列腺癌状态进行分析。前列腺癌状态由PSA驱动的活检确定，并采用建议的阈值（PSA值翻倍后大于4 ng/ml）进行校正，以消除度他雄胺治疗的影响，并计算每组的敏感性和特异性。[4]

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\n斑马鱼实验：
\n1. 动物饲养：成年斑马鱼（3-4月龄）饲养于28±1°C的淡水中，光照周期为14小时光照/10小时黑暗，每天喂食两次丰年虾。[5]
\n2.分组和处理：雄性斑马鱼随机分为4组（每组n=10）：
\n - 对照组：暴露于除氯水（不含度他雄胺）21天[5]
\n- 低剂量组：通过水暴露于度他雄胺（GG 745；GI 198745）（0.1 μg/L）21天[5]
\n- 中剂量组：通过水暴露于度他雄胺（1 μg/L）21天[5]
\n- 高剂量组：通过水暴露于度他雄胺（10 μg/L）21天[5]
\n- 每日更换水以维持稳定的药物浓度[5]
\n3.样本采集和检测：
\n- 于第21天采集雄性斑马鱼的精子；使用精子分析仪分析其活力[5]
\n- 采集血清，通过ELISA法测定睾酮和二氢睾酮（DHT）水平[5]
\n- 生殖试验：将每组雄性斑马鱼分别与2条未经处理的雌性斑马鱼配对，交配72小时；每日计数受精卵[5]
\n- 处死幼年斑马鱼（孵化后14天），并通过组织学分析确定其性别[5]

吸收、分布和排泄
单次口服0.5 mg度他雄胺后，血清峰浓度在2至3小时内达到。每日口服0.5 mg度他雄胺后，预计在首次给药后6个月达到40 ng/mL的稳态浓度。在健康受试者中，绝对生物利用度为60%，范围为40%至94%。虽然食物摄入会使血清峰浓度降低10%至15%，但据报道食物摄入对药物的生物利用度影响甚微。
度他雄胺及其代谢物主要经粪便排泄。约1%至15%的剂量以原药形式排出，而2%至90%的总剂量以度他雄胺相关代谢物的形式经粪便排出。尿液中也可检测到痕量未代谢的度他雄胺，含量低于1%。因此，平均而言，未解释的剂量约为55%，范围在5%至97%之间。
度他雄胺的分布容积较大，范围为300至500升。健康受试者每日口服0.5毫克度他雄胺，持续12个月后，精液中度他雄胺的平均浓度为3.4纳克/毫升（范围：0.4至14纳克/毫升），其中11.5%的血清度他雄胺浓度分布于精液中。
在一项健康志愿者单次口服0.01至40毫克度他雄胺的研究中，度他雄胺的线性清除率较低，为0.58升/小时。估计的线性清除率个体间差异较大。

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代谢/代谢物
度他雄胺主要通过CYP3A4和CYP3A5在肝脏中代谢。代谢产物包括4′-羟基度他雄胺、6-羟基度他雄胺、6,4′-二羟基度他雄胺、1,2-二氢度他雄胺和15-羟基度他雄胺。此外，还可以检测到两种次要代谢物——6,4′-二羟基度他雄胺和15-羟基度他雄胺。体外研究表明，4′-羟基度他雄胺和1,2-二氢度他雄胺对5α-还原酶的两种同工酶均有抑制作用，但其效力低于母体药物。 6β-羟基度他雄胺的活性与度他雄胺相当。

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生物半衰期
度他雄胺的末端消除半衰期在稳态下约为5周。这种较长的半衰期解释了停药后血清浓度仍可在4至6个月内检测到的原因。

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吸收：大鼠口服度他雄胺（GG 745；GI 198745）的生物利用度约为60%；食物摄入不影响吸收。口服1 mg/kg后2小时达到血浆峰浓度（Cmax）40 ± 5 ng/mL [3]
- 分布：大鼠的分布容积（Vd）为80 ± 10 L/kg；该药物广泛分布于各种组织中，在前列腺中浓度较高（给药后4小时前列腺/血浆比值为15±2）[3]
- 代谢：度他雄胺（GG 745；GI 198745）在肝脏中代谢极少（≤10%的剂量），主要通过CYP3A4代谢为无活性代谢物；未检测到活性代谢物[3]
- 排泄：大鼠体内消除半衰期（t1/2）为35±5天（由于组织结合率高，半衰期较长）。约70%的剂量在7天内经粪便排出，30%经尿液排出，主要以原药形式排出[3]

肝毒性
度他雄胺与血清转氨酶升高发生率较低相关，在对照试验中，其升高率并不高于安慰剂组。这些升高是短暂的，很少需要调整剂量。目前尚无因度他雄胺治疗而导致临床明显肝损伤的已发表报告。
可能性评分：E（不太可能是导致临床明显肝损伤的原因）。

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蛋白结合
度他雄胺在血清中与白蛋白的结合率约为99%，与α-1酸性糖蛋白的结合率为96.6%。

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急性毒性：度他雄胺（GG 745；GI 198745）在小鼠（口服）中的半数致死量（LD50）>2000 mg/kg，在大鼠（口服）中的半数致死量（LD50）>1500 mg/kg [3]。
慢性毒性：大鼠连续6个月接受度他雄胺（1 mg/kg/天）治疗，未观察到肝功能（ALT/AST）或肾功能（肌酐/BUN）的显著变化。前列腺重量减少了 40% ± 3%（由于雄激素剥夺）[3]
- 血浆蛋白结合率：度他雄胺（GG 745；GI 198745）在人血浆中的血浆蛋白结合率为 99% ± 0.5%，在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率为 98.5% ± 0.6% [3]
- 临床不良反应：接受度他雄胺（0.5 mg/天）治疗 12 个月的男性中，常见不良反应包括性欲减退（发生率为 3%）和乳房触痛（发生率为 2%）[4]
- 鱼类内分泌毒性：度他雄胺（10 μg/L）导致幼年斑马鱼雌性比例偏高，但未造成死亡或生长迟缓[5]

[1]. Dutasteride, the dual 5alpha-reductase inhibitor, inhibits androgen action and promotes cell death in the LNCaP prostate cancer cell line. Prostate. 2004 Feb 1;58(2):130-44.

[2]. Effects of dutasteride on the expression of genes related to androgen metabolism and related pathway in human prostate cancer cell lines. Invest New Drugs. 2007 Oct;25(5):491-7.

[3]. Unique preclinical characteristics of GG745, a potent dual inhibitor of 5AR. J Pharmacol Exp Ther. 1997 Sep;282(3):1496-502.

[4]. Clinical usefulness of serum prostate specific antigen for the detection of prostate cancer is preserved in men receiving the dual 5alpha-reductase inhibitor dutasteride. J Urol. 2006 May;175(5):1657-62.

[5]. Mode of action of human pharmaceuticals in fish: the effects of the 5-alpha-reductase inhibitor, dutasteride, on reproduction as a case study. Aquat Toxicol. 2013 Mar 15;128-129:113-23.

药效学
度他雄胺是一种合成的4-氮杂甾类化合物，可选择性抑制I型和II型甾类5α-还原酶同工酶。5α-还原酶是一种细胞内酶，可将睾酮转化为5α-二氢睾酮（DHT）。度他雄胺通过降低循环DHT水平发挥作用。研究表明，度他雄胺可缩小前列腺体积，改善尿流，并缓解良性前列腺增生症的症状，无论单独使用还是与坦索罗辛联合使用。度他雄胺降低DHT水平的效果呈剂量依赖性，首次给药后1-2周内即可观察到最大疗效。每日服用0.5 mg度他雄胺1周和2周后，血清DHT浓度中位数分别降低了85%和90%。服用度他雄胺 0.5 mg/天 1 年后，85% 的患者血清中 DHT 浓度降低了 90% 以上。临床研究表明，度他雄胺在患有前列腺癌的情况下也能降低血清PSA水平。

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1. 度他雄胺（GG 745；GI 198745）是一种双重5α-还原酶抑制剂，可阻断睾酮转化为二氢睾酮（DHT）——DHT是驱动前列腺生长和前列腺癌进展的主要雄激素[1][3]。
2. 与非那雄胺（一种选择性5α-还原酶2型抑制剂）不同，度他雄胺可同时抑制1型和2型同工酶，从而更显著地降低血清DHT水平（最高可达90%，而非那雄胺为70%）[3]。
3. 治疗适应症包括良性前列腺增生（BPH）（用于缩小前列腺体积和改善泌尿系统症状）以及雄激素依赖性前列腺癌的辅助治疗。癌症[4]
4. 在临床实践中，服用度他雄胺的男性进行前列腺癌筛查时，血清PSA水平需要加倍（因为PSA会降低约50%），以避免假阴性结果[4]
5. 其消除半衰期较长（在人体内为3-5周），需要连续给药3-6个月才能达到最大疗效[3]

C27H30F6N2O2

528.53

528.221

C, 61.36; H, 5.72; F, 21.57; N, 5.30; O, 6.05

164656-23-9

Dutasteride-13C6;1217685-27-2

6918296

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

620.3±55.0 °C at 760 mmHg

242-250ºC

329.0±31.5 °C

0.0±1.8 mmHg at 25°C

1.523

5.61

58.2

2

8

2

37

964

7

C[C@]12CC[C@H]3[C@H]([C@@H]1CC[C@@H]2C(=O)NC4=C(C=CC(=C4)C(F)(F)F)C(F)(F)F)CC[C@@H]5[C@@]3(C=CC(=O)N5)C

JWJOTENAMICLJG-VYZSUTEISA-N

InChI=1S/C27H30F6N2O2/c1-24-11-9-17-15(4-8-21-25(17,2)12-10-22(36)35-21)16(24)6-7-19(24)23(37)34-20-13-14(26(28,29)30)3-5-18(20)27(31,32)33/h3,5,10,12-13,15-17,19,21H,4,6-9,11H2,1-2H3,(H,34,37)(H,35,36)/t15-,16-,17?,19+,21+,24-,25+/m0/s1

(4aR,6aS,7S,9aS,9bS,11aR)-N-(2,5-bis(trifluoromethyl)phenyl)-4a,6a-dimethyl-2-oxo-2,4a,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,9b,10,11,11a-tetradecahydro-1H-indeno[5,4-f]quinoline-7-carboxamide

GI-198745, GG-745; GI198745, GG745; GI 198745, GG 745; LS-173584; LS 173584; LS173584; trade names: Avodart; Avidart; Avolve; Duagen; Dutas; Dutagen; Duprost.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。