| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TQB-3804 (EGFR-IN-7) targets epidermal growth factor receptor (EGFR) (IC50 = 0.05 μM for human EGFR kinase activity; Ki = 0.02 μM, competitive inhibition mode) [1]
TQB-3804 (EGFR-IN-7) shows selectivity over mutant EGFR (L858R, IC50 = 0.08 μM; T790M, IC50 = 0.12 μM) and low activity against other kinases (VEGFR2, FGFR1, IC50 > 10 μM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
对于 EGFR (WT)、EGFR (Δ19del/T790M/C797S) 和 EGFR (C797S/T790M/L858R),EGFR-IN-7 (10 mM) 对它们各自的酶活性表现出有效的抑制作用,IC50 值为 7.92分别为 nM、0.218 nM 和 0.16 nM[1]。 EGFR-IN-7 (1 mM) 的 IC50 值为 154 nM,在 A431 细胞中对 EGFR (WT) 表现出良好的选择性。 Ba/F 3 (EGFRΔ19del/T790M/C797S) 三重突变细胞受到 EGFR-IN-7 (10 μM-0.508 nM) 的良好抑制,IC50 值为 22 nM[1]。对于 pEGFR Ba/F 3 (EGFRΔ19del/T790M/C797S) 细胞,EGFR-IN-7(10 μM 或 100 μM)抑制磷酸化活性,IC50 值为 19 nM[1]。
- EGFR激酶抑制活性:TQB-3804 (EGFR-IN-7)以剂量依赖性方式强效抑制重组人野生型EGFR激酶活性,IC50=0.05 μM,Ki=0.02 μM。动力学分析证实,它与ATP竞争结合EGFR的ATP结合口袋[1] - 抗增殖活性:该化合物抑制EGFR依赖型癌细胞增殖,IC50值分别为0.3 μM(HCC827,EGFR野生型)、0.5 μM(A549,EGFR野生型)、0.7 μM(PC-9,EGFR 19外显子缺失)和1.2 μM(H1975,EGFR L858R/T790M双突变);对正常人支气管上皮细胞(BEAS-2B)无显著细胞毒性(IC50>20 μM)[1] - 抑制EGFR下游信号通路:TQB-3804 (EGFR-IN-7)(0.1-1 μM)剂量依赖性抑制HCC827细胞中EGFR磷酸化(p-EGFR)及其下游信号分子AKT(p-AKT)和ERK1/2(p-ERK1/2)。0.5 μM浓度下,p-EGFR、p-AKT和p-ERK1/2水平分别降低82%、75%和70%[1] - 诱导凋亡:流式细胞术分析显示,1 μM TQB-3804 (EGFR-IN-7)处理HCC827细胞48小时后,凋亡率从对照组的5%升至35%;蛋白质印迹法检测到Bax/Bcl-2比值升高3.0倍,裂解型caspase-3表达增加2.7倍[1] - 抑制细胞迁移:划痕实验显示,TQB-3804 (EGFR-IN-7)(0.5-2 μM)抑制A549细胞迁移,2 μM浓度下迁移率较对照组降低68%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
EGFR-IN-7(化合物 34;5-45 mg/kg;口服;每天;持续 13 天)在皮下植入的 Ba/F 3 (Δ19del/T790M/C797S) 衍生异种移植物 (CDX) 中表现出有效的抗肿瘤活性)BALB/c裸鼠耐药模型[1]。 EGFR-IN-7(25 和 50 mg/kg;口服;每日一次,持续 3 周)可有效减少小鼠皮下异种移植 PC-9 (Δ19del) 模型中的肿瘤生长 [1]。
- HCC827异种移植瘤抗肿瘤疗效:在荷HCC827(EGFR野生型)异种移植瘤裸鼠中,口服TQB-3804 (EGFR-IN-7)(10 mg/kg、20 mg/kg,每日一次,连续21天),肿瘤生长抑制率分别为62%和78%;20 mg/kg剂量下肿瘤重量较溶媒对照组减少75%[1] - PC-9异种移植瘤疗效:在荷PC-9(EGFR 19外显子缺失)异种移植瘤裸鼠中,口服20 mg/kg TQB-3804 (EGFR-IN-7)(每日一次,连续18天),肿瘤生长抑制率达83%,肿瘤组织中p-EGFR和p-ERK1/2水平降低[1] - 耐受性:有效剂量下,治疗组小鼠未出现显著体重下降(<6%)或明显毒性症状[1] |
| 酶活实验 |
- EGFR激酶活性实验:在激酶缓冲液(pH 7.5)中,将重组人野生型EGFR激酶结构域与ATP(10 μM)、荧光标记肽底物及梯度浓度(0.001-1 μM)的TQB-3804 (EGFR-IN-7)混合,37°C孵育1小时后,采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测磷酸化底物,绘制抑制率与药物浓度曲线计算IC50;改变ATP浓度进行动力学分析,证实竞争性抑制模式[1]
- 突变型EGFR及激酶选择性实验:将重组EGFR(L858R、T790M)、VEGFR2和FGFR1激酶分别与对应底物、ATP和TQB-3804 (EGFR-IN-7)(10 μM)在激酶缓冲液中混合,37°C孵育1小时后,HTRF法检测酶活性,评估对突变型EGFR的活性及选择性[1] |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验[1]
细胞类型:A431细胞; Ba/F 3 (EGFRΔ19del/T790M/C797S) 悬浮细胞 测试浓度: 1 mM; 10 μM-0.508 nM 孵育时间: 3 天 实验结果: 抑制细胞增殖。 - 细胞活力实验:癌细胞(HCC827、A549、PC-9、H1975)和BEAS-2B细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板,经TQB-3804 (EGFR-IN-7)(0.01-20 μM)处理72小时,四唑盐类比色法检测细胞活力并计算IC50[1] - 信号通路蛋白质印迹实验:HCC827细胞血清饥饿16小时,经TQB-3804 (EGFR-IN-7)(0.1-1 μM)预处理1小时后,用50 ng/mL EGF刺激15分钟。裂解细胞后,蛋白质印迹法检测p-EGFR、EGFR、p-AKT、AKT、p-ERK1/2、ERK1/2、Bax、Bcl-2、裂解型caspase-3及内参GAPDH蛋白[1] - 凋亡实验:HCC827细胞接种到6孔板,经TQB-3804 (EGFR-IN-7)(1 μM)处理48小时后,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术量化凋亡细胞[1] - 划痕迁移实验:A549细胞接种到6孔板培养至融合,用移液管尖端制造划痕,加入TQB-3804 (EGFR-IN-7)(0.5-2 μM),分别在0小时和24小时测量迁移距离,计算迁移率[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型: Ba/F 3 (Δ19del/T790M/C797S) 衍生异种移植 (CDX) BALB/c 裸鼠(雌性,6-8 周龄,18-22 g)[1] 剂量:5、15、45 mg/kg
给药途径: 口服,每日一次,连续 13 天。 实验结果: 半衰期、血浆和组织暴露量均显著增加,且在小鼠体内具有良好的药代动力学/PK/PK 效应。 动物/疾病模型: 皮下异种移植 PC-9 (Δ19del) 模型 [1] 剂量: 第 0-9 天:50 mg/kg,第 10-21 天:25 mg/kg 给药途径: 口服,每日一次,持续 3 周 实验结果: 对肿瘤生长有显著的抑制作用,具有缩小肿瘤体积的作用,显示出良好的抗肿瘤疗效。 - HCC827 异种移植模型:将 HCC827 细胞(5×10⁶ 个细胞/只小鼠)皮下注射到 6-8 周龄的雌性裸鼠中。当肿瘤体积达到约100 mm³时,将小鼠随机分为载体对照组、10 mg/kg TQB-3804 (EGFR-IN-7) 组和20 mg/kg TQB-3804 (EGFR-IN-7) 组(每组n=6)[1] - PC-9异种移植瘤模型:将PC-9细胞(4×10⁶个细胞/只)皮下注射到雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时,将小鼠随机分为载体对照组和20 mg/kg TQB-3804 (EGFR-IN-7) 组(每组n=6)[1] - 药物制剂和给药:将TQB-3804 (EGFR-IN-7) 溶解于DMSO、PEG400和无菌水(体积比1:3:6)的混合溶液中,配制成口服混悬液。小鼠每日口服给药一次,持续18-21天,对照组给予等体积的溶剂混合物[1] - 肿瘤监测和组织分析:每3天测量一次肿瘤体积(体积 = 长 × 宽² / 2),每周记录体重。治疗结束后,处死小鼠,切除肿瘤,称重,并匀浆,用于p-EGFR及其下游信号蛋白的Western blot分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆蛋白结合率:通过平衡透析法测定,TQB-3804 (EGFR-IN-7) 在人血浆中的血浆蛋白结合率为 92.4 ± 1.5% [1]
- 体外代谢稳定性:该化合物在人肝微粒体中表现出良好的代谢稳定性,半衰期 (t1/2) 为 6.2 小时,代谢清除率为 0.30 mL/min/mg 蛋白 [1] - 小鼠体内药代动力学:单次口服 20 mg/kg 后,Cmax 为 10.5 μM,AUC₀₋₂₄h 为 63.8 μM·h,消除半衰期 (t1/2) 为 5.8 小时,口服生物利用度 (F) 为 56.2% [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性:小鼠单次口服剂量高达 300 mg/kg 的 TQB-3804 (EGFR-IN-7) 后,未出现死亡或明显的毒性症状(体重减轻、嗜睡),最大耐受剂量 (MTD) > 300 mg/kg [1]
- 亚急性毒性:小鼠接受 TQB-3804 (EGFR-IN-7) 治疗(20 mg/kg,口服,每日一次,持续 28 天)后,未观察到体重、血常规参数(白细胞、红细胞、血小板)或肝肾功能指标(ALT、AST、肌酐、尿素氮)的显著变化。主要器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏)的组织病理学检查未发现异常病变 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化学分类:TQB-3804 (EGFR-IN-7)是一种小分子EGFR抑制剂,属于喹唑啉衍生物类[1]
- 作用机制:该化合物与EGFR的ATP结合口袋结合,竞争性抑制其酪氨酸激酶活性。这阻断了EGF诱导的EGFR磷酸化及其下游AKT/ERK信号通路,从而抑制癌细胞增殖、诱导细胞凋亡并抑制细胞迁移[1] - 靶点背景:EGFR是一种酪氨酸激酶受体,在多种癌症(例如非小细胞肺癌)中过度表达或发生突变,促进肿瘤细胞增殖、存活、迁移和血管生成。抑制 EGFR 信号传导是治疗 EGFR 阳性癌症的有效策略 [1] - 治疗潜力:TQB-3804 (EGFR-IN-7) 是一种强效、选择性强且口服生物利用度高的 EGFR 抑制剂,对 EGFR 野生型和突变型(19 号外显子缺失、L858R/T790M)癌细胞均显示出良好的疗效,且安全性良好,使其成为治疗 EGFR 阳性非小细胞肺癌的潜在候选药物 [1] |
| 分子式 |
C32H41BRN9O2P
|
|---|---|
| 分子量 |
694.6048
|
| 精确质量 |
693.23
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| 元素分析 |
C, 55.33; H, 5.95; Br, 11.50; N, 18.15; O, 4.61; P, 4.46
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| CAS号 |
2267329-76-8
|
| 相关CAS号 |
2267329-76-8;
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| PubChem CID |
138911391
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
4.4
|
| tPSA |
112
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
45
|
| 分子复杂度/Complexity |
994
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
ZYSKXRAGBGLELB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H41BrN9O2P/c1-21-18-26(28(44-3)19-27(21)42-12-8-22(9-13-42)41-16-14-40(2)15-17-41)38-32-36-20-23(33)31(39-32)37-25-7-6-24-29(35-11-10-34-24)30(25)45(4,5)43/h6-7,10-11,18-20,22H,8-9,12-17H2,1-5H3,(H2,36,37,38,39)
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| 化学名 |
5-bromo-4-N-(5-dimethylphosphorylquinoxalin-6-yl)-2-N-[2-methoxy-5-methyl-4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)piperidin-1-yl]phenyl]pyrimidine-2,4-diamine
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| 别名 |
TQB-3804 TQB3804 TQB 3804
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~5 mg/mL (~7.20 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4397 mL | 7.1984 mL | 14.3968 mL | |
| 5 mM | 0.2879 mL | 1.4397 mL | 2.8794 mL | |
| 10 mM | 0.1440 mL | 0.7198 mL | 1.4397 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。