mGluR2R ( IC50 = 5 nM ); mGluR3R ( IC50 = 24 nM )
Eglumegad targets the group II metabotropic glutamate receptors, specifically mGlu2 and mGlu3. It exhibits IC50 values of 5 nM and 24 nM on transfected human mGlu2 and mGlu3 receptors, respectively. Activation of these receptors inhibits adenylyl cyclase activity and reduces cAMP production in neurons.

Eglumegad (LY354740) 可上调斑点 6507（collapsin 反应介质蛋白 1），并下调斑点 1014、1822（缺氧上调蛋白 1）、4513（蛋白二硫键异构酶 3 的一种亚型）、6204、6312、7306（26S 蛋白酶体非 ATPase 调节亚基 7）以及蛋白斑点 1013 和 6005（destrin）等，此外还影响小鼠皮层神经元中的其他斑点[2]。

---

LY379268 和 LY354740 处理的培养皮层神经元的蛋白质组学分析[2]
将培养的小鼠皮层神经元暴露于 LY379268 或 LY354740（均为 1 μM）24 小时。对照组细胞用等体积的生理盐水处理。二维电泳可重复地分离出916个蛋白斑点（图1），并分析其差异表达。在药物处理组中，与对照组相比，共检测到17个蛋白斑点（其中11个经质谱鉴定，见表1）的表达水平存在显著差异（倍数变化±1.5倍，p < 0.05）。表2列出了倍数变化差异，并显示了LY354740和LY379268处理组细胞之间的显著差异。与对照组相比，LY354740处理组中有9个蛋白斑点的表达存在差异，LY379268处理组中有14个蛋白斑点的表达存在差异。 LY379268 和 LY354740 均下调了蛋白点 1014、1822（缺氧上调蛋白 1）、4513（蛋白二硫键异构酶 3 的一种亚型）、6204、6312 和 7306（26S 蛋白酶体非 ATPase 调节亚基 7）的表达，并上调了蛋白点 6507（collapsin 反应介质蛋白 1）的表达。蛋白点 1013 和 6005（destrin）的表达仅由 LY354740 下调。相反，蛋白点 3503（T 复合物蛋白 1 亚基 θ）、5106（异戊烯基二磷酸 Δ-异构酶 1）、05310（Septin-2）、5321 和 7306（26S 蛋白酶体非 ATPase 调节亚基 7）仅被 LY379268 下调。蛋白点 7518（T 复合物蛋白 1 亚基 ζ）被 LY379268 上调。蛋白点 4417（Rab GDIβ）和 4418（未鉴定）被 LY379268 下调，并显示出对 LY354740 有上调趋势。

---

LY379268 或 LY354740 处理的培养皮层和海马神经元中 Rab GDIα 和 Rab GDIβ 蛋白水平的测定 [2]
我们使用 LY379268 或 LY354740 处理的培养皮层神经元验证了蛋白质组学数据。使用特异性 GDIα 抗体进行免疫印迹分析，结果显示在 50 kDa 处有一条单条带，与推导出的 Rab GDIα 分子量相符。使用 GDI2 多克隆抗体可以检测到 Rab GDIβ。该抗体标记了 46 至 50 kDa 之间的两条条带，其中较低的条带（较弱）与推导出的 Rab GDIβ 分子量相符（图 2）。用 LY379268 (1 μM) 处理培养的皮层神经元 24 小时后，Rab GDIβ 水平降低，而 Rab GDIα 水平不受影响（图 2A）。LY379268 对 Rab GDIβ 水平的降低作用可被优先 mGlu2/3 受体拮抗剂 LY341495 (1 μM) 减弱，而 LY354740 (1 μM) 则不能模拟这种作用（图 2A）。体外实验表明，Eglumegad 可下调小鼠皮层神经元中多种蛋白的表达，包括缺氧上调蛋白 1 (HOP1)、蛋白二硫键异构酶 3 (PDI) 和 26S 蛋白酶体亚基，同时上调 collapsin 反应介质蛋白 1 (CRMP1)。该化合物可有效降低表达 mGluR2/3 受体的细胞系统中福斯克林刺激的 cAMP 生成量 90% 以上。

LY-354740（15 或 30 mg/kg，腹腔注射）对空间工作记忆能力无影响。在 Gria1^−/− 和野生型小鼠中，当剂量为 30 mg/kg 时，LY-354740 对短间隔奖励交替测试也无影响。LY354740（15 或 30 mg/kg，腹腔注射）可降低野生型和 Gria1^−/− 小鼠的自发运动活性。在雄性未接受过任何处理的 GluA1-KO 小鼠和预先处理过的 GluA1-KO 小鼠中，LY354740（15 mg/kg，腹腔注射）可降低新奇刺激诱导的运动过度，但在雌性小鼠中则无此作用。LY354740（15 mg/kg，腹腔注射）可显著降低 GluA1-KO 雄性小鼠中 c-Fos 表达水平至野生型雄性小鼠的水平，但在雌性小鼠中则无此作用[3]。 LY354740（10 mg/kg，腹腔注射）可减弱大鼠内侧前额叶皮层（mPFC）中由固定应激诱导的BDNF mRNA表达升高[4]。在大鼠mPFC中，LY354740（10 mg/kg，腹腔注射）可降低由固定应激引起的BDNF mRNA表达升高[4]。

---

II型代谢型谷氨酸受体激动剂被认为是潜在的抗精神病药物，至少部分原因是基于以下观察：激动剂LY354740似乎可以挽救由非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）拮抗剂引起的认知缺陷，包括啮齿动物的空间工作记忆缺陷。本研究测试了LY354740能否挽救缺乏AMPA谷氨酸受体GluA1亚基（由Gria1基因编码）的小鼠的空间工作记忆能力。Gria1基因近期被全基因组关联研究证实与精神分裂症相关。我们发现，在T迷宫奖励交替任务中，LY354740未能挽救Gria1-/-小鼠的空间工作记忆缺陷。相反，LY354740确实将这些小鼠的运动过度活跃度降低至与对照组相似的水平。多巴胺受体拮抗剂氟哌啶醇也观察到了类似的模式，即使相同剂量的氟哌啶醇能够降低Gria1-/-小鼠的运动过度活跃度，但并未改善其空间工作记忆缺陷。LY354740的这些结果与使用非竞争性NMDAR拮抗剂在谷氨酸能功能低下模型中挽救空间工作记忆的结果形成鲜明对比。未来的研究应确定 II 型 mGluR 激动剂是否能通过其他 NMDAR 调控手段（包括基因模型和其他 NMDAR 功能药理学调控手段）来挽救空间工作记忆缺陷。[1] LY379268 和 LY354740 是两种 mGlu2/3 型代谢型谷氨酸受体激动剂，它们在精神分裂症小鼠模型中表现出不同的效力。这两种药物的这种差异性作用机制尚不清楚。我们对培养的皮层神经元进行了蛋白质组学分析，这些神经元分别用 LY379268 或 LY354740 处理。在少数几种受这两种药物差异性影响的蛋白质中，Rab GDP 解离抑制因子-β (Rab GDIβ) 被 LY379268 下调，并在 LY354740 处理后呈现上调趋势。在培养的海马神经元中，LY379268选择性地下调了Rab GDI的α亚型。Rab GDI抑制突触小泡相关蛋白Rab3A的活性，并且在精神分裂症患者脑内表达降低。我们检测了暴露于产前应激的小鼠（“PRS小鼠”）中Rab GDI的表达，PRS小鼠被认为是精神分裂症的潜在模型。在PRS小鼠出生后第1天（PND1）和第21天（PND21），海马中Rab GDIα蛋白水平升高，但在PND60未见升高。在PND21，PRS小鼠海马突触体中去极化诱导的[(3)H]d-天冬氨酸释放也减少。 PRS小鼠海马中Rab GDIα水平的升高可通过LY379268（1或10 mg/kg，腹腔注射）治疗7天逆转，但等剂量LY354740治疗则无效。这些数据强化了PRS小鼠作为精神分裂症模型的有效性，并首次揭示了LY379268和LY354740之间的药效学差异，这或许可以解释两种药物在不同小鼠模型中的不同作用[2]。体内实验表明，Eglumegad（15或30 mg/kg，腹腔注射）对小鼠的空间工作记忆能力没有影响，但可降低野生型和Gria1−/−小鼠的自发运动活性。剂量为 15 mg/kg 时，可降低雄性 GluA1-KO 小鼠因新奇刺激引起的过度活动；剂量为 10 mg/kg（腹腔注射）时，可降低大鼠前额叶皮层中因应激引起的 BDNF mRNA 表达增加。

采用MALDI-ToF质谱法进行蛋白质鉴定[2]
将目标蛋白斑点从凝胶中手工切取，用高纯水和50%乙腈/水溶液洗涤，并用100%乙腈脱水。将凝胶切片在室温下用20 μL含有25 ng/μL胰蛋白酶（Trypsin Gold，质谱级）的40 mM NH4HCO3/10%乙腈溶液进行溶胀。1小时后，加入50 μL 40 mM·NH4HCO3/10%乙腈溶液，并在37 °C下消化过夜。生成的肽段用50%乙腈/5%三氟乙酸（TFA）溶液提取（分两步，每次20分钟，室温），真空离心干燥，悬浮于0.1% TFA溶液中，通过micro ZipTip C18移液器吸头过滤，并直接用质谱仪基质溶液（10 mg/ml α-氰基-4-羟基肉桂酸溶于50%乙腈/1% TFA溶液）洗脱。胰蛋白酶解肽段的质谱图使用Voyager-DE MALDI-ToF质谱仪获得。肽段质量指纹图谱数据库检索使用MASCOT搜索引擎（http://www.matrixscience.com）在NCBInr/Swiss-Prot数据库中进行。参数设置为允许每个肽段出现一次漏切，质量容差为0.5 Da，并将半胱氨酸的氨基甲酰甲基化视为固定修饰，甲硫氨酸的氧化视为可变修饰。用于接受鉴定结果的标准包括序列覆盖率、匹配肽段的数量和概率评分，详见表1。

---

对于受体结合和功能分析，将表达重组人mGlu2或mGlu3受体的细胞膜与[³H]LY354740或其他放射性标记的激动剂孵育。对于功能表征，将细胞预先与Eglumegad孵育，然后用福斯克林刺激以提高cAMP水平。使用竞争性免疫分析或基于HTRF的检测方法测量cAMP的积累，以确定抑制cAMP产生的IC50值。

小鼠皮层神经元原代培养[2]
皮层神经元原代培养（三份制备物）取自胚胎第15天的CD1小鼠，方法如前所述（Di Menna等人，2013）。简而言之，每份制备物取14-16个胚胎的皮层，在无Ca2+/Mg2+缓冲液中解剖并进行机械分离。将皮层细胞以 2 × 10⁶/皿的密度接种于预先涂有 0.1 mg/ml 聚-D-赖氨酸（分子量 70,000–150,000，0.1 mg/ml）和 0.002 mg/ml 层粘连蛋白的 35 mm 培养皿中，培养基为 Neurobasal-A B27，并补充以下成分：牛血清白蛋白（10 mg/ml）、胰岛素（10 μg/ml）、转铁蛋白（100 μg/ml）、腐胺（100 μM）、孕酮（20 nM）、硒（30 nM）、谷氨酰胺（2 mM）、葡萄糖（6 mg/ml）、青霉素/链霉素（100 U/ml 至 100 μg/ml）。在接种18小时后，向培养物中加入阿糖胞苷（10 μM），以防止非神经元成分增殖，并维持3天后更换培养基。该方法可获得纯度>99%的神经元培养物（Di Menna等人，2013）。将体外培养10-11天（DIV）的成熟神经元培养物暴露于LY379268或LY354740（浓度均为1 μM），或LY354740与LY341495联合或单独处理24小时。对照组培养物用等体积的生理盐水处理。

---

富含海马神经元的原代培养物[2]
从出生后第1天和第2天（PND 1和PND 2）的12-13 CD1小鼠的海马中获取培养物（两种制备方法）。在无Ca2+/Mg2+缓冲液中解剖海马，进行机械分离，然后用火焰抛光的巴斯德吸管研磨，将组织分散成单细胞。离心（1500 × g，6分钟）后，将细胞沉淀重悬于添加了500 mM L-谷氨酰胺的Neurobasal-B27培养基中，并以4 × 105–7 × 105个细胞/ml的密度接种于预先包被0.1 mg/ml聚-D-赖氨酸的24孔板中。在接种海马神经元培养物24小时后，加入阿糖胞苷（10 μM）以防止非神经元成分增殖，并维持3天后更换培养基。该方法可获得神经元含量>85%、胶质细胞含量约10-12%的海马神经元培养物。海马神经元培养物在37℃、5% CO₂的湿润环境中培养。在体外培养12天（12 DIV）时，将培养物暴露于LY379268或LY354740（浓度均为1 μM），或LY354740与LY341495联合或单独处理，持续24小时；对照组培养物则用等体积的生理盐水处理。

---

凝胶图像差异分析及统计分析[2]
从每种处理条件（生理盐水、LY354740 或 LY379268 处理）的三个不同培养皿中获取皮层神经元蛋白样本。每个蛋白样本均进行三次技术重复分析，每种处理条件共获得 9 张凝胶。使用 Bio-Rad PDQuest 软件 7.1.0 版进行图像分析。将斑点数量标准化为有效斑点的总密度，有效斑点定义为每个技术重复组内变异系数 ≤5% 的斑点。然后将标准化后的斑点数量导入 NCSS 软件进行统计分析。采用单因素方差分析 (ANOVA) (p ≤ 0.05) 检验三组（生理盐水、LY354740 和 LY379268）间蛋白表达的差异，随后使用 Tukey-Kramer 多重比较检验进行组间事后比较。统计学显著性水平设定为 p < 0.05。表达量增加或减少至少 1.5 倍且 p < 0.05 的蛋白质被定义为差异表达蛋白。

---

细胞实验采用转染细胞系（例如，CHO 或 HEK-293 细胞），这些细胞系表达人 mGlu2 或 mGlu3 受体。在福斯克林存在的情况下，用不同浓度的 Eglumegad（通常为 0.1-1000 nM）处理细胞。使用发光或荧光 cAMP 检测试剂盒定量细胞内 cAMP 水平。通过测量福斯克林刺激的 cAMP 积累的减少量来确定化合物的效力。

小鼠：实验 1A 包括对野生型（雌性：n = 6；雄性：n = 5）和 Gria1^−/−（雌性：n = 7；雄性：n = 8）小鼠进行 30 次无药物测试（每天 5 次，持续 6 天）。随后，每只小鼠注射 Eglumegad (LY354740)（15 mg/kg）或载体后，进行奖励交替测试。注射后，小鼠被安置在笼中 30 分钟，之后开始行为测试。在 T 型迷宫中，每只小鼠进行 10 次奖励交替测试。小鼠完成每次测试的最长时间为 120 秒。在首次药物测试至少 24 小时后，对小鼠进行不注射任何药物的复测，以确保药物没有长期影响，并且小鼠在交替测试中仍能保持较高的表现水平。小鼠在24小时后进行复测，随后进行10次奖励交替测试，但这次会给它们服用之前未曾服用过的药物。考虑到小鼠数量，研究人员尽力平衡不同基因型和性别小鼠的药物暴露顺序。记录小鼠所有交替试验的次数，以及从起始臂跑到食物槽所需的时间（样本潜伏期）和在选择过程中做出决定所需的时间（选择潜伏期）。研究人员使用秒表测量潜伏期。在整个实验过程中，研究人员对小鼠的基因型和药物分配情况均不知情。在对不同的雄性野生型小鼠（N = 7）和Gria1^−/−小鼠（N = 7）进行与实验1A相同的操作后，分别给予更高剂量的Eglumegad（LY354740）（30 mg/kg）或载体。实验 1B 中使用的流程在实验 1C 中重复进行，以检验前摄干扰增加的可能影响。药物剂量（30 mg/kg）和小鼠均相同，但此次采用了改进的测试方案，将试验间隔缩短至 20 秒。大鼠：进行了两项实验。在第一项实验中，比较了饲养在笼中的大鼠和暴露于塑料锥体中两小时固定应激的大鼠在接受 LY354740（10 mg/kg，腹腔注射，pH 值中和至约 7.4）或载体（0.9% 生理盐水，pH 值中和至约 7.4）处理后的效果（n = 7，笼养对照/载体；n = 7，笼养对照/LY354740；n = 6，应激/载体；n = 6，应激/Eglumegad (LY354740)）。在第二个实验中，将接受2小时固定应激的大鼠与在其笼内注射赋形剂的大鼠，或注射两种较低剂量LY354740（1和3 mg/kg，腹腔注射）或赋形剂的大鼠进行比较（所有组n=4）。在将所有动物放入开口处密封的塑料锥体前15分钟，所有动物均接受Eglumegad（LY354740）或赋形剂的注射。每只固定的大鼠都被带到远离动物饲养区的安静房间，放入底部铺有垫料的有机玻璃容器中，然后直接放入塑料锥体中。两小时后，将大鼠斩首并放入塑料容器中。取出脑组织后，用干冰冷冻至-80°C保存。体内动物研究通常涉及通过腹腔注射给小鼠或大鼠服用Eglumegad。行为学测试，例如旷场实验或新奇环境诱导的活动过度实验，用于评估抗焦虑样作用。在应激相关研究中，动物需接受固定应激处理，并采集脑组织，通过qPCR或免疫组织化学方法分析BDNF和c-Fos的表达。

艾格鲁美加（分子量 185.18）是一种小分子激动剂，具有良好的口服生物利用度和脑渗透性。它表现出良好的药代动力学特性，适用于中枢神经系统药物的开发。在临床前研究中，该化合物通常以 10-30 mg/kg 的剂量进行腹腔注射给药。

临床前毒理学研究表明，Eglumegad 在治疗剂量下耐受性良好。在 15-30 mg/kg 的剂量下，该化合物不会损害空间工作记忆或产生显著的行为毒性。其安全性特征支持对其进行焦虑和应激相关疾病的研究。

[1]. The group II metabotropic glutamate receptor agonist LY354740 and the D2 receptor antagonist haloperidol reduce locomotor hyperactivity but fail to rescue spatial working memory in GluA1 knockout mice. Eur J Neurosci. 2017 Apr;45(7):912-921.

[2]. Levels of the Rab GDP dissociation inhibitor (GDI) are altered in the prenatal restrain stress mouse model of schizophrenia and are differentially regulated by the mGlu2/3 receptor agonists, LY379268 and LY354740. Neuropharmacology. 2014 Nov:86:133-44.

[3]. Reversal of novelty-induced hyperlocomotion and hippocampal c-Fos expression in GluA1 knockout male mice by the mGluR2/3 agonist LY354740. Neuroscience. 2013 Oct 10:250:189-200.

[4]. The mGlu2/3 receptor agonist LY354740 suppresses immobilization stress-induced increase in rat prefrontal cortical BDNF mRNA expression. Neurosci Lett. 2006 May 8;398(3):328-32.

伊格鲁米塔是一种L-α-氨基酸。既往研究表明，5-HT2A受体激动剂和固定应激均能差异性地改变新皮层和海马中脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达。5-HT2A受体激活和固定应激均可增加大鼠前额叶皮层中谷氨酸的释放。鉴于代谢物谷氨酸2/3受体（mGluR2/3）激动剂(1S,2S,5R,6S)-2-氨基双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸酯一水合物（LY354740）能够抑制内侧前额叶皮层（mPFC）中5-HT2A受体激活所诱导的电生理、行为和生化效应，我们评估了该mGluR2/3激动剂抑制应激诱导的BDNF mRNA表达增加的效力。 LY35740（10 mg/kg，腹腔注射）可减弱固定应激诱导的大鼠内侧前额叶皮层（mPFC）中脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA表达的增加。该结果与mGlu2/3受体激动剂可能有效治疗应激诱发的神经精神综合征的假设相符。[4]谷氨酸神经传递功能障碍与精神分裂症和情绪障碍相关。作为这些疾病的潜在模型，缺乏α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）谷氨酸受体GluA1亚基（GluA1-KO）的小鼠品系表现出显著的新奇诱导性活动过度，并伴有海马神经元的过度激活。代谢型谷氨酸受体2/3 (mGluR2/3) 激动剂可抑制多个脑区谷氨酸的释放，并已被证实能抑制海马神经元的激活。本研究旨在验证GluA1基因敲除(GluA1-KO)小鼠在新环境刺激下表现出的过度活跃是否由海马神经元过度激活介导。为此，我们分析了mGluR2/3激动剂是否能抑制这种表型特征。在GluA1-KO小鼠及其同窝野生型(WT)对照小鼠暴露于新环境前30分钟，腹腔注射(1S,2S,5R,6S)-2-氨基双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸(LY354740) (15 mg/kg)，随后分析海马中c-Fos免疫阳性细胞的数量。 LY354740 (15 mg/kg) 可降低雄性 GluA1 基因敲除 (GluA1-KO) 小鼠的过度活跃行为，而对野生型 (WT) 对照组小鼠几乎没有影响。这一结果在两组小鼠中均观察到：一组未经处理并适应注射，另一组经预处理并适应注射。LY354740 (15 mg/kg) 还可降低雄性 GluA1-KO 小鼠背侧海马 CA1 锥体细胞层中 c-Fos 的过度表达，但对 WT 小鼠的 c-Fos 水平没有影响。在雌性小鼠中，无论基因型或处理组别如何，LY354740 (15 mg/kg) 对过度活跃行为或海马 c-Fos 水平均无显著影响。更高剂量的 LY354740 (30 mg/kg) 可缓解雄性 GluA1-KO 小鼠的过度活跃行为，但对雌性 GluA1-KO 小鼠无影响。总之，mGluR2/3激动剂降低海马神经元兴奋性可以部分预防GluA1-KO小鼠的过度活跃行为，表明海马反应性与GluA1-KO小鼠的行为表型密切相关。[3]

---

Eglumegad (LY354740) 是礼来公司开发的一种II组mGlu受体激动剂，用于治疗精神疾病。其作用机制是通过激活mGlu2/3自身受体，抑制突触前谷氨酸释放，从而降低皮质边缘回路中的兴奋性神经传递。临床试验评估了Eglumegad治疗广泛性焦虑症和戒烟的疗效，但尚未获得监管机构批准用于这些适应症。

C8H11NO4

185.17724

185.069

C, 51.89; H, 5.99; N, 7.56; O, 34.56

176199-48-7

(rel)-Eglumegad; 176027-90-0; Eglumegad hydrochloride

213056

White to off-white solid powder

1.569

376.4ºC at 760 mmHg

1.06E-06mmHg at 25°C

1.619

0.209

100.62

3

5

2

13

290

4

OC([C@]1([C@]2([H])[C@@H](C(O)=O)[C@]2([H])CC1)N)=O

VTAARTQTOOYTES-RGDLXGNYSA-N

InChI=1S/C8H11NO4/c9-8(7(12)13)2-1-3-4(5(3)8)6(10)11/h3-5H,1-2,9H2,(H,10,11)(H,12,13)/t3-,4-,5-,8-/m0/s1

(1S,2S,5R,6S)-2-aminobicyclo[3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic acid

LY354740; LY-354740; 176199-48-7; Eglumetad; (1S,2S,5R,6S)-2-aminobicyclo[3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic acid; LY 354740 Hydrate; LY 354740

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~33.3 mg/mL (~180 mM)
H2O: ~6.3 mg/mL (~34.2 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (13.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

---

配方 2 中的溶解度: 2.86 mg/mL (15.44 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。