| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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描述： EMD638683 是一种强效的 SGK1 抑制剂，IC50 为 3 μM。EMD638683 处理显著增强了辐射诱导的前向散射减少、磷脂酰丝氨酸暴露增加、线粒体膜电位降低、caspase 3 活性增强、DNA 片段化增加以及晚期细胞凋亡增加。EMD638683 在体外促进辐射诱导的结肠肿瘤细胞凋亡，并在体内减少化学致癌后结肠肿瘤的数量。
| 靶点 |
Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 (SGK1) [1]
Other kinases inhibited at higher concentrations: MSK1 (IC50 ratio 37 relative to SGK1? actual IC50 not given), SGK2, SGK3, PRK2, PKA [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
EMD638683 是 SGK1 的缀合物。EMD638683 对 NDRG1（N-Myc 下游调控基因 1）的抑制作用达到半数最大效应 (IC50) 时，需要在细胞培养基中添加 3.35 μM 的 EMD638683。此外，EMD638683 抑制了对照组和 EMD638683 (50 μM) 处理组中三种 cAMP 拓扑结构：SGK 同工酶 SGK2 和 SGK3、丝裂原和酪蛋白激活蛋白激酶 1 (MSK1) 以及蛋白激酶 C 相关蛋白激酶 2 (PKR2) [1]。辐射显著提高了经 EMD638683 处理的 CaCo-2 细胞中晚期细胞的比例。单独使用 EMD638683 处理也使 CaCo-2 细胞的晚期细胞比例趋于升高。少数患者在接受放射治疗后接受了 EMD638683 治疗。鉴于此，EMD638683 治疗显著增加了放射治疗后的紫外线辐射量 [2]。在 HeLa 细胞中，EMD638683 抑制了 SGK1 依赖的 NDRG1 磷酸化，IC50 为 3.35 ± 0.32 µM（细胞培养基浓度）[1]。在 CaCo-2 结肠癌细胞中，单独使用 EMD638683（50 µM，24 小时）不会显著改变前向散射（细胞体积），但会显著增强放射（3 Gy）诱导的细胞收缩（前向散射降低）[2]。单独使用 EMD638683 会增加 CaCo-2 细胞中线粒体去极化的百分比；单独放射治疗也会增加该百分比；联合用药显著增强了去极化[2]。
EMD638683单独使用有增强caspase-3活性的趋势；单独辐射也有增强caspase-3活性的趋势；联合用药显著增强了caspase-3活性[2]。 EMD638683单独使用有增强膜联蛋白V结合的趋势；无论是否存在EMD638683，辐射均显著增强膜联蛋白V结合，且在EMD638683存在下结合显著更高[2]。 EMD638683单独使用有增强晚期细胞凋亡的趋势；辐射显著增强了晚期细胞凋亡；联合用药进一步提高了凋亡细胞的百分比[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
与夜间处理组相比，EMD638683处理组的夜间体重显著降低，夜间时长也显著延长。这一结果表明，EMD638683通过化学作用抑制肿瘤生长。此外，接受EMD治疗的组胃重也显著降低。接受EMD638683治疗的小鼠因食物加工而生长的肿瘤数量显著减少[2]。在肺癌患者中，EMD638683（20 mg/kg，灌胃）可阻止单克罗他林（MCT）引导的血管移植进展。根据血流动力学特征，与对照剂量相比，EMD638683 治疗可降低右心室肥厚指数 (RVHI) (0.27 vs. 0.41；P<0.05；n = 6) 和右心室收缩压 (15.8 vs. 28.2 mmHg；P<0.05；n = 6) [3]。
在果糖/生理盐水治疗的高胰岛素血症小鼠中，EMD638683（饲料中浓度为 4460 ppm，~600 mg/kg/天）连续给药 4 天，可显著降低收缩压，从 111±4 mmHg 降至 87±3 mmHg；用安慰剂食物替代后，血压回升至 106±11 mmHg [1]。 EMD638683治疗并未改变饮用自来水的野生型小鼠（正常胰岛素血症）或 SGK1 基因敲除小鼠的血压[1]。 长期（4 周）同时给予EMD638683和果糖/高盐可预防果糖/高盐引起的血压升高[1]。 在化学致癌模型（1,2-二甲基肼 + 葡聚糖硫酸钠）中，EMD638683治疗（饲料中添加 4460 ppm，约 600 mg/kg/天）与安慰剂相比显著减少了结肠肿瘤的数量[2]。 EMD638683治疗显著增加了果糖/生理盐水处理组小鼠的尿流率降低，体重显著下降[1]。 |
| 酶活实验 |
对 EMD638683 进行了针对 69 种蛋白激酶的筛选。在室温 (21°C) 下，使用 MgATP 作为辅因子，在 96 孔板中通过自动化方法测定激酶活性。反应通过加入磷酸终止，并将样品点样至 P81 滤膜上。对于每种激酶，在 1 µM EMD638683 存在下的活性以未添加抑制剂时的活性百分比表示。将残余活性低于 50% 的激酶（例如 MSK1、SGK2、SGK3、PRK2）进行进一步评估。使用十个不同浓度的 EMD638683 测定每种激酶的 IC50 值，每个数据点重复三次。通过将每种激酶的 IC50 值除以 SGK1 的 IC50 值来计算相对抑制效应（选择性比率）[1]。
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| 细胞实验 |
NDRG1磷酸化检测：将HeLa细胞以10-20×10³个细胞/cm²的密度接种于含10%胎牛血清的DMEM培养基中。24小时后，用不同浓度的EMD638683（DMSO稀释，最终DMSO浓度为1%）处理细胞24小时。用含有Triton X-100、蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液裂解细胞。裂解液经超声处理、变性后，通过SDS-PAGE电泳分离（磷酸化NDRG1使用4-12% Bis-Tris凝胶，NDRG1使用7%凝胶），转移至硝酸纤维素膜，并用NDRG1或磷酸化NDRG1抗血清进行免疫印迹。使用辣根过氧化物酶标记的二抗和化学发光法检测条带。磷酸化NDRG1水平以总NDRG1水平进行标准化。根据剂量反应曲线确定了EMD638683的IC50值为3.35±0.32 µM [1]。
CaCo-2细胞凋亡检测：将细胞培养于含10% FBS的DMEM培养基中。将10⁵个细胞/孔接种于6孔板中，用50 µM EMD638683或溶剂对照（0.2 µl DMSO）处理24小时，然后暴露于3 Gy辐射（3.18分钟），并继续培养72小时。用胰蛋白酶-EDTA消化细胞，洗涤后进行流式细胞术分析。细胞体积根据前向散射光估算。使用JC-9染料（10 mg/ml，37°C避光孵育10分钟）测量线粒体膜电位；去极化的细胞显示出荧光偏移。使用荧光活性 caspase-3 染色试剂盒检测活性 caspase-3（孵育 1 小时）。细胞凋亡通过 Annexin V FITC 和碘化丙啶染色进行检测，染色前细胞经 70% 乙醇固定，并在低渗缓冲液中孵育 [2]。 |
| 动物实验 |
高血压研究：小鼠饲喂对照饲料（0.2% Na⁺，0.7% K⁺）。将 EMD638683 以 4460 ppm 的浓度混入饲料中，剂量约为 600 mg/kg/天。安慰剂饲料成分相同，但不含抑制剂。通过将饮用水替换为 10% 果糖溶液，持续 3 周，然后添加等渗盐水，持续 14 天，诱导高胰岛素血症。在适当的训练后，将小鼠预热至 29°C，并在安静的半黑暗环境中，于上午 10 点至 12 点之间，采用尾套法测量收缩压。每次测量 5 次；若偏差小于 5 mmHg，则该次测量结果有效。代谢笼研究：小鼠适应环境 3 天后，收集 12 小时尿液（晚上 7 点至早上 7 点）。采用火焰光度法测定尿液中的钠离子（Na⁺）和钾离子（K⁺）浓度[1]。
致癌性研究：8周龄野生型小鼠腹腔注射20 mg/kg 1,2-二甲基肼（溶于0.9%生理盐水），随后进行三个周期的饮用水处理，每个周期含30 g/L硫酸葡聚糖钠，连续7天，之后交替给予14天普通饮用水。在致癌物处理前，将EMD638683以4460 ppm的浓度混入饲料中（约600 mg/kg/天）饲喂。20周龄时，处死小鼠，检查、测量结肠并计数肿瘤[2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在果糖/生理盐水处理的小鼠中，连续4天给予EMD638683治疗并未显著改变液体和食物摄入量；尿钠和尿钾排泄量也未发生显著变化；但体重显著下降[1]。
EMD638683对正常胰岛素血症野生型小鼠或SGK1基因敲除小鼠的血压无影响，表明其对心血管系统的脱靶效应较低[1]。 在致癌性研究中，安慰剂组11只小鼠中有3只死亡；EMD638683治疗组12只小鼠中有1只死亡。研究结束时，两组小鼠的体重相似（安慰剂组：23.73±0.53 g；EMD638683组：23.99±0.40 g）[2]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
EMD638683 是一种水溶性 SGK1 抑制剂。它能逆转高胰岛素血症/盐过量引起的高血压，但对正常胰岛素血症小鼠或无盐过量小鼠的血压无影响。它可能为治疗 II 型糖尿病和代谢综合征患者的高血压药物提供模板[1]。
EMD638683 可促进放射诱导的结肠癌细胞凋亡，并抑制体内化学致癌后结肠肿瘤的生长，提示 SGK1 是一个有吸引力的癌症治疗药理学靶点[2]。 |
| 分子式 |
C18H18F2N2O4
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|---|---|
| 分子量 |
364.3488
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| 精确质量 |
364.123
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| CAS号 |
1181770-72-8
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| 相关CAS号 |
EMD638683 R-Form;1184940-47-3;EMD638683 S-Form;1184940-46-2
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| PubChem CID |
44182398
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| 外观&性状 |
Off-white to light brown solid powder
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| LogP |
3.267
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| tPSA |
102.15
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
498
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
SSNAPUUWBPZGOY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H18F2N2O4/c1-3-13-9(2)15(23)5-4-14(13)17(25)21-22-18(26)16(24)10-6-11(19)8-12(20)7-10/h4-8,16,23-24H,3H2,1-2H3,(H,21,25)(H,22,26)
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| 化学名 |
N'-[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxyacetyl]-2-ethyl-4-hydroxy-3-methylbenzohydrazide
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| 别名 |
EMD638683 EMD 638683 EMD-638683.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~137.23 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7446 mL | 13.7231 mL | 27.4461 mL | |
| 5 mM | 0.5489 mL | 2.7446 mL | 5.4892 mL | |
| 10 mM | 0.2745 mL | 1.3723 mL | 2.7446 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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308-R-C4-PEG3-C1-Boc
PROTAC SGK3 degrader-2
SGK2 Recombinant Human Active Protein Kinase
SGK1-IN-5
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