Emivirine   中文名称: 乙米韦林

Reverse transcriptase; NNRTI; dTTP- and dGTP-dependent DNA polymerase (Ki = 0.20 μM); RNA polymerase (Ki = 0.01 μM)

埃米韦林 (EMV) 对 HIV-2 没有作用，也是 HIV-1 RT 所特有的[2]。对于人类健康细胞，环境 (EMV) 没有表现出明显的毒性[2]。

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骨髓毒性与某些核苷类似物有关。由于EMV含有取代的核碱基，我们研究了该化合物对骨髓祖细胞的影响（表3）。这些实验的结果表明，与AZT（阳性对照）相比，EMV没有引起显著的细胞毒性。EMV对红系（BFU-E）和粒细胞-巨噬细胞（CFU-GM）祖细胞的50%细胞毒性浓度分别为30和50μM。在这些实验中，AZT对BFU-E祖细胞和CFU-GM祖细胞分别提供了小于0.1μM和7μM的50%细胞毒性浓度。[2]

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线粒体毒性。[2]
在指数增长的HepG2细胞中检查了EMV对线粒体功能的影响（表4）。将HepG2细胞与浓度为0.1至10μM的EMV一起孵育后，与未处理的HepG2细胞相比，没有观察到对细胞生长、乳酸产生、线粒体DNA合成或线粒体结构的影响。

埃米韦林 (EMV) 的雄性大鼠口服致死剂量约为 3 g/kg，雌性大鼠口服致死剂量为 2.5 g/kg[2]。

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当大鼠通过强饲、直肠内输注、静脉注射和肝门静脉输注给予EMV时，口服吸收率为68%，但数据（表6）表明，首过肝代谢导致口服生物利用度较低，为18%。对大鼠给予EMV 14天的实验表明，肝微粒体药物代谢酶被诱导（表7）。在150 mg kg-1天-1时，肝脏的相对重量显著增加（4.3 g/100 g体重，而对照组为3.9 g，给予80 mg苯巴比妥kg-1天-1d-1的大鼠为5.4 g）。细胞色素P450含量随着EMV剂量的增加而增加，从0.9±0.1 nmol/mg蛋白质（对照组）开始，在1.4±0.2 nmol/mg蛋白的高剂量下达到显著性水平（相对于对照组的值，P<0.01）。与对照组相比，在所有剂量的EMV下，7-乙氧基香豆素O-脱乙基酶的活性都显著增加（表7）。正如预期的那样，苯巴比妥对测量的参数有阳性反应（表7）[2]。

体外代谢。[2]
在体外进行了三个实验，旨在确定艾米韦林（EMV）微粒体氧化代谢中与物种相关的差异，并鉴定所涉及的主要（人类）细胞色素P450酶。首先，分离来自4名人类、4只食蟹猴和4只Wistar大鼠（均为雄性）的肝微粒体，并在37°C下与3至300μM的7种浓度的EMV一起孵育25分钟。通过向混合物中加入乙腈来停止反应。然后提取样品，通过HPLC分析EMV及其脱烷基产物。Km值和最大代谢率（Vmax）通过高斯-牛顿法从Lineweaver Burk图中确定。其次，将分离自雄性大鼠、雄性食蟹猴和雄性人类的混合肝微粒体（0.2 mg蛋白质）在37°C下与100μM EMV一起孵育0至60分钟。选择的孵育时间高于和低于第一次实验中使用的25分钟。用冷的高氯酸（30%）停止反应，并通过离心沉淀蛋白质。然后通过下文所述的HPLC质谱（MS）方法分析上清液。第三，将10至14名个体人类供体的肝微粒体在37°C下与浓度为10和100μM的EMV一起孵育0或15分钟。制备样品并通过HPLC-MS进行分析。将一些人体样品与许多细胞色素P450 3A催化反应的抑制剂曲利诺霉素（20或100μM）或硝苯地平（20μM），或细胞色素P4501A2抑制剂5μM呋喃茶碱一起孵育，以获得相关分析的化学抑制数据。通过使用具有认证活性的微粒体、运行两份或三份样品、使用零蛋白空白、比较14名人类肝微粒体样品中艾米韦林（EMV）代谢率的个体间差异，以及使用皮尔逊积差相关计算EMV代谢数据与几种标准探针药物之间的回归系数，对实验进行控制。

在Hewlett-Packard 1090型HPLC 上，用Zorbax XDB-C8柱（5.0 cm乘2.1 mm，5-μm粒径）分离艾米韦林（EMV）及其主要氧化代谢物。溶剂体系为二元流动相，由0.2%乙酸水溶液（a相）和80/20（体积/体积）甲醇-0.2%乙酸水溶液组成（B相），并按以下梯度运行：50%B相0.0至6.0分钟，然后50%B相6.1至7.5分钟。流速为0.5 ml/min，样品进样体积为25μl。将峰洗脱到配备有以正离子模式操作的APCI源的API 300三重四极MS上。将加热喷雾器设置为350°C，压力为80磅/平方英寸，辅助流量为1升/分钟。使用Perkin-Elmer/Sciex软件进行数据分析和整合。使用八种特征离子（m/z 243、245、257、261、273、289、303和319）的选定离子监测（停留时间，100 ms）来确定Emivirine (EMV)和推定代谢物的相对百分比。

细胞活力测定[2]
细胞类型：从正常健康志愿者采集的人类骨髓细胞。
测试浓度：0、0.1、1、10 或 100 μM。
孵化持续时间：14天。
实验结果：与未经处理的 HepG2 细胞相比，在 0.1 至 10 μM 浓度下，对细胞生长、乳酸产生、线粒体 DNA 合成或线粒体结构没有影响。

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细胞毒性。[2]
从正常健康志愿者收集的人骨髓细胞用于评估骨髓干细胞的细胞毒性。如前所述，通过Ficoll-Hypaque梯度离心从整个肝素化骨髓中分离出单核细胞。用Hanks平衡盐溶液洗涤细胞两次，用血细胞计数器计数，并通过台盼蓝染料排除法评估存活率。然后将细胞铺在软琼脂或甲基纤维素双层（105/板）中，并用0、0.1、1、10或100μM浓度的Emivirine (EMV)或齐多夫定（AZT）处理。在37°C、5%CO2的加湿环境中孵育14天后，用倒置显微镜计数菌落（≥50个细胞）。

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线粒体毒性。[2]
如前所述，通过测量细胞生长、细胞外培养基中乳酸的产生、线粒体DNA含量和线粒体结构变化，用HepG2细胞评估对线粒体的毒性。HepG2细胞（2.5×104个细胞/ml）在含有非必需氨基酸的最低培养基中生长，并补充了10%血清、1%丙酮酸钠和1%青霉素-链霉素，被铺在12孔培养皿中，并用不同浓度（0、0.1、1和10μM）的Emivirine (EMV)处理。孵育4天后，通过计数细胞数量来评估细胞生长。收集培养基，用测定试剂盒测定乳酸。

为了确定艾米韦林（EMV）对线粒体DNA合成的影响，将HepG2细胞（5×104个细胞）用上述浓度的Emivirine (EMV)。然后收集细胞，在0.4 M NaOH–10 mM EDTA中在100°C下加热10分钟。用狭缝印迹装置 将提取的DNA固定在Zeta探针膜上。为了检测线粒体DNA，使用跨越核苷酸4212至4242的[α-32P]dATP标记的特异性人寡核苷酸线粒体探针，以2.5×106 dpm/ml的速度检测线粒体DNA。放射自显影后，通过在0.1×SSC（1×SSC为0.15 M NaCl加0.015 M柠檬酸钠）中洗涤膜两次，然后在0.1%十二烷基硫酸钠中洗涤15分钟，去除线粒体探针。用625 bp的人β-肌动蛋白cDNA质粒探针片段标准化加载在膜上的总细胞DNA，该片段用[α-32P-]dCTP（5×106 dpm/min）标记。用CS9000U型双波长飞点密度计扫描放射自显影照片。每个样本中线粒体DNA的量表示为线粒体寡核苷酸探针放射性信号和β-肌动蛋白探针放射性信号的比值，与DNA负载无关。

如前所述，通过电子显微镜评估HepG2线粒体的形态。简而言之，HepG2细胞（2.5×104个细胞/ml）在直径为35毫米的培养皿上，在0、0.1、1或10μM的Emivirine (EMV)存在下生长。在4天的潜伏期后，每隔一天更换一次培养基（含和不含化合物）。在第8天，移除培养基，用1%戊二醛固定细胞1小时，在磷酸钠缓冲液中冲洗，然后在1%四氧化锇中快速固定1小时。然后用不同浓度的乙醇（从50%到100%）逐渐脱水为环氧丙烷。然后，细胞缓慢渗透并嵌入epon中。薄切片用Reichter Jung超微切片机制备，用乙酸铀酰和柠檬酸铅染色，并用Hitachi 7000型电子显微镜检查。

动物/疾病模型：雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠[2]。
剂量：50 mg/kg。
给药途径：灌胃。
实验结果：口服吸收率为68%。\n

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\n\n吸收、分布、代谢和排泄。[2]
\n为了指导选择合适的非啮齿类动物模型进行Emivirine (EMV)毒理学实验，对雄性Sprague-Dawley大鼠、比格犬和食蟹猴进行了口服给药。将EMV悬浮于0.5%黄蓍胶溶液中，分别以50 mg/kg体重的单次剂量灌胃给予7组雄性大鼠（每组5只，体重128～200 g）和4只禁食的雄性食蟹猴（体重3.1～3.9 kg）。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时采集大鼠血样，于给药后0.5、1、4、8、24和48小时采集食蟹猴血样。对于犬，将EMV装入明胶胶囊，并单次给予4只禁食的雄性犬。分别于给药后5分钟和0.25、0.5、1、2、4、8、12和24小时采集血样。将血液样本离心分离血浆，然后采用上述高效液相色谱法（HPLC）分析血浆中EMV的浓度。在本实验中，另取几组雄性大鼠，分别通过尾静脉注射（0.88 mg/kg）、灌胃（5 mg/kg）、直肠灌注（5 mg/kg）（大鼠麻醉后）以及门静脉灌注（0.25 mg/kg）（大鼠麻醉后）给予单剂量EMV。口服和直肠给药的溶剂为0.5%黄蓍胶，静脉和门静脉给药的溶剂为血浆（取自未处理动物的滤液）。分别于静脉给药后5分钟以及0.25、0.5、1、2、4、6和8小时采集血样。分别于门静脉给药后 5 分钟、0.25 小时、0.5 小时和 1 小时，以及口服或直肠给药后 0.25 小时、0.5 小时、1 小时、2 小时、4 小时、6 小时和 8 小时进行检测。按照上述方法测定从血样中采集的血浆中 EMV 的浓度，以研究大鼠的吸收和首过代谢。\n

\n使用三菱化学株式会社制备的 [14C]EMV，研究了雄性 Sprague-Dawley 大鼠对依米韦林 (EMV) 的吸收、组织分布和排泄情况。依米韦林 (EMV) 在 C-6 位苄位上用 14C 标记。比活度为 2,029 MBq/mmol，放射化学纯度为 99.5%。一组体重250至330克的3只大鼠，单次口服[14C]EMV（溶于0.5%黄蓍胶），剂量为4430 kBq（10 mg⁻¹ kg⁻¹）。给药后5分钟至120小时，每隔19个时间点采集血样并进行放射性分析。7只按上述方法给予[14C]EMV的雄性大鼠进行全身放射自显影扫描。其中1只大鼠分别在给药后0.5、1、4、8、24、96和240小时进行放射自显影扫描。我们研究了5只口服[14C]EMV（364 kBq，10 mg⁻¹ kg⁻¹）的雄性大鼠尿液和粪便中EMV的排泄情况。给药后，将大鼠单独置于代谢笼中。分别于给药后0～8小时和8～24小时收集尿液，之后每24小时收集一次，直至给药后10天。粪便每24小时收集一次，持续10天，然后进行冻干、称重和粉碎。给药后24小时内，将呼出气体中的¹⁴CO₂收集于20%的单乙醇胺溶液中。使用液体闪烁计数器测量尿液中的放射性。使用Carbo-Sorb吸收收集的呼出气体，并在加入液体闪烁剂后进行计数。血液和粪便样本称重后放入燃烧锥中，并在Packard 360样品氧化器中进行燃烧。然后采用闪烁光谱法测定放射性。\n

\n我们研究了Emivirine (EMV)在8只体重229至244克的雄性Sprague-Dawley大鼠（已通过手术植入胆管插管）中的胆汁排泄情况。[14C]EMV（814 MBq/mmol）悬浮于0.5%黄蓍胶中，以10 mg/kg体重（6.4 MBq或173 μCi/kg）的剂量通过灌胃单次给药。分别于给药后1、2、4、8、24和48小时收集胆汁样本。分别于给药后8、24和48小时收集尿液样本，并于给药后24和48小时收集粪便样本。如上所述，采用闪烁光谱法测量这些样品以及用于清洗各个笼子的水中放射性。放射性的累积排泄量以给药剂量的百分比表示。\n

\n为了研究Emivirine (EMV)在脑内的分布，将该化合物悬浮于0.5%黄蓍胶中，并以250 mg/kg体重的剂量口服给予雄性Sprague-Dawley大鼠（每个时间点4只）。大鼠麻醉后，分别于给药后5分钟和10分钟以及0.25、0.5、1、2、4、8、12、24和48小时采集血液和脑组织样本。提取血浆和脑组织（后者在四倍体积的1.15% KCl溶液中匀浆），并用高效液相色谱法(HPLC)分析EMV的浓度。\n

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\n\n体内代谢。[2]
\n为了研究依米韦林(EMV)对肝脏药物代谢酶的影响，将五只雄性Sprague-Dawley大鼠分为四组，分别灌胃给予0（黄蓍胶溶剂）、15、50或150 mg kg⁻¹ day⁻¹的EMV，持续14天。每日剂量分两次等量给予，两次间隔约6小时，与下文所述的大鼠毒理学实验程序类似。另取四只大鼠，每日一次灌胃给予苯巴比妥，剂量为80 mg kg⁻¹ day⁻¹，持续14天，作为阳性对照。尸检后，将大鼠肝脏经门静脉灌注10 ml生理盐水，取出并称重。取左侧肝叶2.5 g，置于冰上，用0.25 M蔗糖溶液匀浆，分离微粒体。采用标准分光光度法测定蛋白质含量、细胞色素b5和P450水平，以及NADPH-细胞色素c还原酶、苯胺羟化酶、氨基比林N-去甲基酶、UDP-葡萄糖醛酸转移酶和7-乙氧基香豆素O-去乙基酶的活性。统计学差异采用单因素方差分析和Dunnett临界差异检验进行计算；苯巴比妥的统计学差异采用Student's t检验进行计算。\n

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\n\n\n安全性药理学实验。 [2]
\n为检测依米韦林 (EMV) 的潜在药理作用而进行的实验列于表 1。将 EMV 悬浮于 0.5% 黄蓍胶中，并以表 1 中所示的浓度口服给予小鼠和大鼠（每组 3 至 10 只）。用戊巴比妥麻醉的雄性和雌性比格犬（每组 5 只）经十二指肠内给予 EMV，以研究一系列心血管参数。从雄性哈特利豚鼠（每组 5 只）中分离出的回肠条在体外暴露于浓度高达 106 μM 的 EMV，以检测其对平滑肌的潜在药理作用。其他研究参数列于表 1。\n

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\n\n毒理学实验。 [2]
\n本研究评估了依米韦林 (EMV) 及其一种假定代谢物 6-苄基-5-异丙基尿嘧啶 (BIU) 在 CD 雄性和雌性大鼠中的急性毒性。简而言之，我们合成了 EMV 和 BIU，将其悬浮于 0.5% 的黄蓍胶溶液中，并以 0、2083、2500 和 3000 mg/kg 的单次剂量分别给予 5 只雄性大鼠和 5 只雌性大鼠。观察动物 14 天，并记录体重。此外，我们还对小鼠、大鼠和食蟹猴进行了临床前安全性评价实验，具体实验方法见表 2。所有实验中，EMV 均采用口服给药。在为期 1 个月的实验中，溶剂为 0.5% 的黄蓍胶溶液；在亚慢性及慢性实验中，溶剂为 0.5% 的甲基纤维素溶液。表2所示的每日剂量分两次等量给药，两次给药间隔6至12小时。动物在5至7个不同的时间间隔采血，以提供毒代动力学数据。在每个亚慢性实验中，采血在给药第1天或第2天进行，并在给药期结束时重复进行。在为期6个月的大鼠慢性研究中，采血在给药第1天以及第13周和第26周进行。在为期1年的猴子实验中，采血在给药第1天以及第4周、第13周、第26周和第52周进行。将血浆从血液中分离出来，提取后，采用高效液相色谱法（HPLC）分析EMV的浓度。

临床前药代动力学和毒代动力学。[2]药代动力学实验表明，大鼠和猴子适合进行毒理学实验（表5）。在犬中，血浆中依米韦林（EMV）的浓度迅速下降，给药后1小时即检测不到。放射自显影显示，灌胃给予10 mg/kg的[14C]EMV后，其广泛分布于大鼠的组织中，给药后0.5小时，所有组织（包括脑和脊髓）中均检测到放射性。给药后96小时，仅在胃肠道内容物中检测到放射性。EMV的总排泄量为给药剂量的99%，其中38%的放射性经尿液排出，61%经粪便排出。在大鼠胆汁排泄实验中，给药后1小时，25%的EMV经胆汁排泄；8小时后，75%经胆汁排泄。给药后48小时，分别在胆汁、尿液和粪便中检测到87%、11%和2%的标记化合物。在另一项实验中，灌胃给予大鼠250 mg/kg剂量的EMV后，其脑组织中的EMV浓度与给药后0.5至12小时内血浆中的EMV浓度相同（图2）。体外代谢。 [2]
当将大鼠、食蟹猴和人类的肝微粒体与依米韦林 (EMV) 孵育时，药物（浓度为 3 μM）对微粒体的相对亲和力，人类高于大鼠，而猴子高于人类；Km/Vmax 值，大鼠高于猴子，但人类显著高于大鼠（表 8），表明 EMV 在人体内的代谢速度要慢得多。进一步的体外实验证实了这一点：在相同条件下孵育 60 分钟后，人类肝微粒体产生的 EMV 总代谢物仅为大鼠（24 nmol）和猴子（26 nmol）微粒体所测得代谢物总量的三分之一左右（8 nmol）。这些体外实验还表明，三种物种均产生了三种推测的代谢物（质荷比分别为 319、245 和 261，通过质谱检测），但比例不同。在大鼠和猴子中，质荷比为 245 的代谢物占总代谢物的 65%，初步鉴定为 BIU。其他两种代谢物的含量大致相等。相比之下，质荷比为 319 的代谢物是人微粒体中的主要代谢物，占所测总代谢物的 54%，其次是推测的代谢物 BIU（37%）。三种物种生成质荷比为 319 和 261 的代谢物的速率相似，但在 60 分钟时，大鼠和猴子微粒体产生的 BIU 量是人样本的五倍。与标准细胞色素 P450 相关反应（例如睾酮 6β-羟基化，由细胞色素 P450 3A4 或 -5 催化）的结果进行比较，以及使用硝苯地平和曲罗霉素进行的抑制实验表明，在人体内，EMV 由细胞色素 P450 酶 3A4 和 3A5 代谢。然而，在低药理浓度 (10 μM) 的 EMV 下，人微粒体中形成的总 BIU 的 40% 不能被细胞色素 P450 3A4 和 P3A5 特异性抑制剂曲罗霉素消除。结合对各人样本中细胞色素P450 1A2活性（7-乙氧基试卤灵O-脱烷基酶）的相关性分析结果，该结果表明，在人体内，BIU的形成部分是由细胞色素P450 1A2催化的。随后我们观察到，呋喃唑酮（一种细胞色素P450 1A2特异性抑制剂）可抑制经10 μM EMV处理的人微粒体中BIU的形成约50%，而不影响其他两种主要代谢物的形成。

rattLDLotoralt2500 mg/kgt抗菌药物与化疗，44(123)，2000 [PMID:10602732]

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安全性药理学实验。[2]
在所进行的各种安全性药理学实验中，未发现依米韦林 (EMV) 具有重要或一致的药理作用。在小鼠中，口服 300 mg/kg 剂量的 EMV 可显著延长己巴比妥麻醉的持续时间，但在 100 mg/kg 剂量下则未观察到此现象。同样，EMV 在小鼠中以 300 mg/kg 的剂量口服可加速肠道转运，但在 100 mg/kg 剂量下则未观察到此现象。在麻醉犬中，以 300 mg/kg 体重给予 EMV 后，呼吸频率、血压、心率或心电图均未受到影响。

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毒理学实验。[2]
在单剂量实验中，大鼠口服 EMV 的近似致死剂量为雄性 ≥3 g/kg，雌性 ≥2.5 g/kg。BIU 是 EMV 的假定代谢物，单次口服 3 g/kg 剂量的 BIU 未导致大鼠死亡，表明其毒性不高于 EMV。为期 1 个月的大鼠实验确定 50 mg/kg/天为无效应剂量，此时血浆中 EMV 的平均峰浓度为 3,090 ng/ml，平均 AUC∞ 为 5,064 ng·h/ml（药代动力学实验测定）。在下一个剂量水平（150 mg/kg/天）下，动物出现体重下降、血尿素氮（BUN）升高、肾小管内出现空泡、血清丙氨酸氨基转移酶活性升高以及肝细胞肥大。组织病理学检查显示肝脏正常。对猴子进行的为期1个月的实验确定了40 mg/kg/天的无效应剂量，此时血浆EMV的平均峰值范围为5至67 ng/ml，AUC范围为30至412 ng·h/ml。在下一个较高剂量水平（200 mg/kg/天）下，猴子也观察到与大鼠类似的呕吐、轻度腹泻以及肝肾功能损害。在此剂量下，血浆中EMV的平均峰值范围为30至170 ng/ml，AUC0-24范围为324至1,912 ng·h/ml。
如表2所示，3个月和慢性毒性实验中的无效应剂量与大鼠和猴子1个月实验中的无效应剂量相同。同样，如上所述，较高剂量下的毒性迹象主要限于对肾脏的影响。在所有毒理学实验中，给药后4周，肾脏组织学检查结果正常，相关实验室指标也正常。在为期1年的猴子实验中，高剂量（180 mg/kg/天）组出现呕吐和腹泻，但主要限于给药的前五周。除了丙氨酸氨基转移酶活性轻微升高和红细胞计数略有下降外，血尿素氮（BUN）和肌酐值也升高。在为期1年的实验中，6只高剂量组雄性猴子中的1只在第5周濒死时进行了尸检。这只动物患有持续性腹泻，且对治疗无反应。组织病理学检查确定腹泻是由中度至重度肠炎引起的。高剂量组的几只动物和中剂量组的1只猴子出现了足以导致在第二至第四个给药月份短暂（1周）停药的毒性反应。然而，在上述毒性反应消退后，任何剂量组均未再出现毒性反应。在慢性大鼠实验中，接受EMV治疗3个月的大鼠精子数量和活力均正常。在慢性猴实验中，分别于6个月和1年时测量了神经传导速度，结果显示EMV治疗对其无影响。
毒代动力学分析结果与预期大鼠和猴体内肝脏药物代谢酶的诱导一致，因为1周时的药物暴露水平高于后续时间点的暴露水平。然而，在所有实验中，药物暴露量均与剂量成正比。在为期6个月的大鼠实验中，第13周和第26周的EMV暴露量相当，表明药物代谢酶的自身诱导已达到平台期。对于高剂量组（160 mg EMV/kg/天）的大鼠，雄性大鼠在第13周的AUC0-24平均值为2.6 μg·h/ml，而雌性大鼠的相应值为16.6 μg·h/ml。在为期三个月的猴子实验和为期一年的猴子实验中均未观察到性别差异。在这些实验中，第2天给予180 mg/kg/天的EMV剂量后，雄性猴子的AUC0-24值为1.1 μg·h/ml，雌性猴子的AUC0-24值为0.9 μg·h/ml。第13周的相应值在雄性和雌性猴子中平均均为0.2 μg·h/ml，再次表明EMV存在酶诱导和首过代谢。
在大鼠和兔子的发育毒理学实验中，未发现对胎儿发育的不良影响。然而，在高剂量（160 mg/kg/天）下，母体毒性足以导致兔子流产和死亡。在大鼠生育力实验中，所有剂量的EMV（10、40和160 mg/kg/天）均未引起生育力异常。在大鼠产前和产后实验中，10 和 40 mg/kg/天的剂量均未观察到任何效应。当剂量达到 160 mg/kg/天时，母鼠的采食量和体重显著降低，且在整个哺乳期内，子代的体重均显著低于对照组（Dunnett 检验，P < 0.01 [8]）。然而，无论给药剂量如何，子代的其他所有测量指标，例如活动能力、学习能力、记忆力和生殖功能，均未受到 EMV 处理的影响。上述所有遗传毒理学实验均未发现遗传毒性迹象。

[1]. Theoretical studies on the molecular basis of HIV-1RT/NNRTIs interactions. J Enzyme Inhib Med Chem. 2011 Feb;26(1):29-36.

[2]. Safety assessment, in vitro and in vivo, and pharmacokinetics of emivirine, a potent and selective nonnucleoside reverse transcriptase inhibitor of human immunodeficiency virus type 1. Antimicrob Agents Chemother. 2000 Jan;44(1):123-30.

依米韦林是一种嘧啶酮类化合物，其结构为尿嘧啶，分别在1、5和6位被乙氧基甲基、异丙基和苄基取代。依米韦林是一种非核苷类HIV-1逆转录酶抑制剂，曾作为治疗HIV的实验药物但未成功。它既是HIV-1逆转录酶抑制剂，也是一种抗病毒药物。其结构与尿嘧啶类似。
依米韦林曾用于HIV感染治疗的临床试验。
依米韦林是一种非核苷类逆转录酶抑制剂。依米韦林的结构与核苷类似物相似，但已被证实可直接与逆转录酶结合，并发挥非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）的作用。然而，由于它会导致其他经细胞色素P450酶代谢的药物分解速度越来越快，因此该药物已停止研发。

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Emivirine (EMV)，曾用名MKC-442，是6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-异丙基尿嘧啶，是一种新型非核苷类逆转录酶抑制剂，在体内显示出强效且选择性的抗人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 活性。EMV对人线粒体或人骨髓祖细胞几乎没有毒性。大鼠和猴子的药代动力学均呈线性，大鼠的口服吸收率为68%。全身放射自显影显示，大鼠口服10 mg/kg体重的[(14)C]EMV 30分钟后，药物广泛分布于组织中。在大鼠口服250 mg/kg剂量后，血浆和脑组织中的EMV浓度相等。体外肝微粒体实验表明，人肝微粒体对EMV的代谢率约为大鼠和猴肝微粒体的三分之一。在1个月、3个月和慢性毒理学实验（大鼠6个月，食蟹猴1年）中，毒性仅限于对肾脏的易逆性影响，表现为肾小管上皮细胞空泡化和血尿素氮轻度升高。大鼠和猴在高剂量组肝脏重量增加，这归因于药物代谢酶的诱导。EMV的遗传毒性检测结果为阴性。除高剂量（160 mg/kg/天）组导致母体和胎儿体重下降外，EMV在对大鼠和兔进行的一系列生殖毒理学实验中未产生其他不良反应。这些结果支持将 EMV 开发为治疗成人和儿童 HIV-1 感染的临床疗法。[2]

C17H22N2O3

302.374

302.163

C, 67.53; H, 7.33; N, 9.26; O, 15.87

149950-60-7

65013

White to off-white solid powder

2.244

64.09

1

3

6

22

451

0

MLILORUFDVLTSP-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C17H22N2O3/c1-4-22-11-19-14(10-13-8-6-5-7-9-13)15(12(2)3)16(20)18-17(19)21/h5-9,12H,4,10-11H2,1-3H3,(H,18,20,21)

6-benzyl-1-(ethoxymethyl)-5-propan-2-ylpyrimidine-2,4-dione

MKC 442; DRG0302; MKC442; DRG 0302; MKC-442; 149950-60-7; Coactinon; 6-Benzyl-1-(ethoxymethyl)-5-isopropyluracil; 6-benzyl-1-(ethoxymethyl)-5-isopropylpyrimidine-2,4(1H,3H)-dione; DRG-0302; I-EBU

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~330.72 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。