| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mutant isocitrate dehydrogenase 2 (mIDH2) (IC50 = 10 nM for IDH2-R140Q; IC50 = 40 nM for IDH2-R172K; IC50 > 1000 nM for wild-type IDH2) [2]
Wild-type IDH2 (no inhibitory activity, IC50 > 1000 nM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在突变干细胞/祖细胞中，enasidenib (AG-221) 抵消突变 IDH2 对 DNA 甲基化的影响。 Enasidenib 抑制 Flt3ITD，同时诱导分化并损害 IDH2 突变白血病细胞的自我更新能力。用enasidenib (AG-221) 处理时，白血病细胞会发生分化；两周后，外周血中 CD11b+ 数量上升，而 c-Kit+ 数量下降[2]。
Enasidenib mesylate (AG-221)是强效、选择性的mIDH2抑制剂，可特异性阻断IDH2-R140Q和IDH2-R172K突变体的新酶活性；在重组酶实验中，其抑制mIDH2产生致癌代谢物2-羟基戊二酸（2-HG）的IC50对IDH2-R140Q为10 nM，对IDH2-R172K为40 nM，而对野生型IDH2的活性及野生型IDH2表达细胞中的2-HG水平无显著影响[2] 在IDH2-R140Q突变的AML细胞系（如HT-1080、MOLM-14）和原代患者母细胞中，Enasidenib mesylate (AG-221)（10-100 nM）可剂量依赖性地在72小时内使细胞内2-HG水平降低>90%；同时诱导表观遗传重塑，表现为组蛋白H3K9me3和H3K27me3的整体水平下降（通过蛋白质印迹法和染色质免疫沉淀（ChIP）检测），并通过流式细胞术和定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测到分化相关基因（如CD11b、CD14）的上调[2] Enasidenib mesylate (AG-221)抑制IDH2突变AML细胞的增殖（对MOLM-14细胞的EC50=50 nM）并诱导G1期细胞周期阻滞，在浓度高达1 μM时，对野生型IDH2表达的造血细胞无显著细胞毒性[2] 癌细胞中的IDH突变（包括IDH2）通过将α-酮戊二酸（α-KG）转化为2-HG导致代谢失调，2-HG抑制α-KG依赖性双加氧酶（如组蛋白去甲基化酶、DNA去甲基化酶），进而引起抑癌基因的表观遗传沉默；Enasidenib mesylate (AG-221)通过恢复mIDH2表达细胞中的α-KG/2-HG比值，逆转这种代谢功能障碍[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 IDH2 突变急性髓系白血病 (AML) 的原代异种移植小鼠模型中，使用enasidenib (AG-221) 治疗可显着提高生存率[1]。 Enasidenib (AG-221) 是一种突变 IDH2 抑制剂，可在体内 IDH2 突变 AML 模型中引起自我更新/分化的变化，并改变 IDH2 突变细胞的表观遗传状态。与治疗前水平相比，使用 enosetinib（10 mg/kg 或 100 mg/kg bid）时，体内 2-HG 降低了 96.7%。此外，依泽替尼治疗可恢复巨核细胞-红系祖细胞 (MEP) 的发育，该细胞受到突变 IDH2 表达的抑制（平均 MEP% 平均值，39% Veh 与 50% AG-221）。 ezetinib 疗法可逆转 IDH2 突变体的影响；治疗后，DNA 甲基化显着降低，180 个基因表现出 20 个或更多低甲基化差异甲基化胞嘧啶 (DMC)。当移植了 Mx1-Cre IDH2R140QFlt3ITD AML 细胞的小鼠接受enasidenib（100 mg/kg bid）处理时，2-羟基戊二酸（2-HG）水平显着降低，这与目标抑制一致。突变体 IDH2 介导的 2-HG 合成被 enasidenib 抑制[2]。
在IDH2-R140Q突变AML的异种移植小鼠模型（MOLM-14细胞接种至NSG小鼠）中，口服Enasidenib mesylate (AG-221)（50-200 mg/kg/天）持续28天，可显著降低外周血和骨髓中的2-HG水平（100 mg/kg/天剂量组降低>80%），诱导白血病母细胞分化（骨髓中CD11b+细胞增加），并减少白血病负荷（通过人CD45+细胞比例衡量）[2] 在上述AML异种移植模型中，Enasidenib mesylate (AG-221)（100 mg/kg/天）使小鼠的生存期较溶媒处理组延长40%；骨髓和脾脏的组织病理学分析显示，白血病浸润减少，正常造血结构得以恢复[2] 在IDH2-R172K突变AML的患者来源异种移植（PDX）模型中，Enasidenib mesylate (AG-221)（150 mg/kg/天，灌胃）可重塑白血病细胞的表观遗传状态（H3K9me3和H3K27me3水平降低），下调干细胞相关基因（如HOXA9、MEIS1）并上调分化标志物，导致骨髓中白血病起始细胞（LICs）减少[2] IDH2突变通过促进造血干细胞（HSCs）的自我更新并阻断髓系分化来驱动白血病发生；Enasidenib mesylate (AG-221)在体内通过抑制2-HG产生，恢复IDH2突变AML细胞的正常表观遗传和转录程序，从而逆转该表型[1] |
| 酶活实验 |
重组mIDH2酶活性实验：制备重组人IDH2-R140Q和IDH2-R172K蛋白（全长，组氨酸标签），在含α-酮戊二酸（α-KG，100 μM）和NADPH（50 μM）的实验缓冲液中稀释至终浓度5 nM；将酶与系列浓度的Enasidenib mesylate (AG-221)（10⁻¹²-10⁻⁶ M）在37℃孵育10分钟以结合；加入异柠檬酸（200 μM）启动反应，孵育60分钟；用终止缓冲液终止反应，通过酶标仪检测340 nm处的吸光度（以检测NADPH的氧化）；对2-HG产生的抑制曲线进行非线性回归分析，计算IC50值[2]
野生型IDH2活性实验：使用重组野生型IDH2蛋白（5 nM）重复上述实验流程，给予浓度高达1 μM的Enasidenib mesylate (AG-221)以评估选择性；检测NADPH的氧化情况，并计算相对于溶媒处理组的酶活性百分比[2] |
| 细胞实验 |
IDH2突变AML细胞增殖与分化实验：在含胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养MOLM-14（IDH2-R140Q）和HT-1080（IDH2-R172K）细胞；以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔板，用系列浓度的Enasidenib mesylate (AG-221)（10⁻¹²-10⁻⁶ M）处理72小时；采用溴脱氧尿苷（BrdU）掺入实验评估细胞增殖，检测450 nm处的吸光度；分化分析时，处理5天后用荧光素标记的抗CD11b和抗CD14抗体染色细胞，通过流式细胞术分析；利用qRT-PCR定量分化标志物（CD11b、CSF1R）和干细胞基因（HOXA9、MEIS1）的mRNA表达[2]
细胞内2-HG与表观遗传修饰实验：以5×10⁵个/mL的密度将IDH2突变AML细胞接种于6孔板，用Enasidenib mesylate (AG-221)（10、50、100 nM）处理24、48、72小时；收集细胞沉淀，通过液-液萃取提取代谢物，利用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量2-HG和α-KG水平；组蛋白修饰的蛋白质印迹分析时，提取核蛋白，经SDS-PAGE分离后转膜，用抗H3K9me3、H3K27me3、总H3及GAPDH（内参）抗体进行检测[2] |
| 动物实验 |
10 mg/kg 或 100 mg/kg bid
IDH2 突变白血病小鼠模型 对于 IDH2-R140Q AML 异种移植模型：使用 6-8 周龄 NSG 小鼠（雌性，20-25 g）；通过尾静脉注射 MOLM-14 细胞（1×10⁷ 个细胞/只小鼠）以建立白血病模型；接种 7 天后，将小鼠随机分组，并通过灌胃给予 Enasidenib mesylate (AG-221)，剂量分别为 50、100、200 mg/kg/天（配制于 0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80 中），或载体，每日一次，持续 28 天；每周采集外周血样本，通过 LC-MS/MS 检测 2-HG 水平，并通过流式细胞术检测人 CD45+ 细胞百分比；在治疗期结束时，处死小鼠，收集骨髓和脾脏进行组织病理学分析（H&E染色）和白血病浸润定量；对于生存分析，监测小鼠长达60天并计算中位生存时间[2] 对于IDH2-R172K AML PDX模型：从IDH2-R172K突变的AML患者中分离原代原始细胞，通过尾静脉将5×10⁶个细胞/只注射到NSG小鼠体内；移植后（通过外周血中人CD45+细胞确认），用甲磺酸依那西地尼（AG-221）（150 mg/kg/天，口服）或载体治疗小鼠35天；收集骨髓细胞，通过有限稀释法评估白血病起始细胞频率，并进行ChIP-seq以分析全基因组组蛋白甲基化变化；通过 qRT-PCR 和 RNA-seq 检测干细胞和分化基因的 mRNA 表达[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
甲磺酸恩那西尼是恩那西尼的甲磺酸盐形式，恩那西尼是一种口服的线粒体酶异柠檬酸脱氢酶2型（IDH2）特定突变体的抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。恩那西尼给药后，可特异性抑制多种IDH2突变体，包括IDH2变体R140Q、R172S和R172K，从而抑制2-羟基戊二酸（2HG）的生成。这可能导致IDH2表达肿瘤细胞分化的诱导和增殖的抑制。IDH2是柠檬酸循环中的一种酶，在多种癌症中发生突变。它通过阻断分化和致癌代谢物 2HG 的产生来启动和驱动癌症生长。
另见：Enasidenib（具有活性部分）。 背景：异柠檬酸脱氢酶 (IDH) 突变 (IDH1/IDH2) 发生于约 20% 的急性髓系白血病 (AML) 病例中，其中 IDH2 突变（主要是 R140Q 和 R172K）约占 10%； IDH 突变导致功能获得性新生活性，将 α-酮戊二酸 (α-KG) 转化为 2-羟基戊二酸 (2-HG)，后者是一种致癌代谢物，可破坏表观遗传调控并驱动癌细胞增殖和存活 [1] 作用机制：甲磺酸恩那地尼 (AG-221) 是一种首创的选择性突变型 IDH2 (mIDH2) 抑制剂，它与 mIDH2 的变构口袋结合，阻断其新生酶活性并减少 2-HG 的产生；这可恢复 α-KG 依赖的表观遗传调控（例如，组蛋白和 DNA 去甲基化），逆转 AML 细胞的分化阻滞，并抑制白血病干细胞的自我更新 [2] 临床开发：甲磺酸恩那地尼 (AG-221) 于 2014 年被 FDA 授予治疗 IDH2 突变型 AML 的孤儿药资格；该药物已进入复发/难治性IDH2突变型急性髓系白血病（AML）的I/II期临床试验，初步数据显示患者出现临床反应（包括完全缓解）并降低血清2-HG水平[2]。 治疗潜力：除AML外，甲磺酸恩那地尼（AG-221）在其他IDH2突变型癌症（例如软骨肉瘤、肝内胆管癌）中也具有潜在疗效，在这些癌症中，2-HG介导的代谢紊乱驱动肿瘤发生[1]。 |
| 分子式 |
C20H21F6N7O4S
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|---|---|---|
| 分子量 |
569.48
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| 精确质量 |
569.127
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| CAS号 |
1650550-25-6
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| 相关CAS号 |
Enasidenib;1446502-11-9
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| PubChem CID |
90480031
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
172
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
17
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
727
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
ORZHZQZYWXEDDL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H17F6N7O.CH4O3S/c1-17(2,33)9-27-15-30-14(11-4-3-5-12(29-11)18(20,21)22)31-16(32-15)28-10-6-7-26-13(8-10)19(23,24)25;1-5(2,3)4/h3-8,33H,9H2,1-2H3,(H2,26,27,28,30,31,32);1H3,(H,2,3,4)
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| 化学名 |
methanesulfonic acid;2-methyl-1-[[4-[6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]-6-[[2-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]amino]-1,3,5-triazin-2-yl]amino]propan-2-ol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7560 mL | 8.7799 mL | 17.5599 mL | |
| 5 mM | 0.3512 mL | 1.7560 mL | 3.5120 mL | |
| 10 mM | 0.1756 mL | 0.8780 mL | 1.7560 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
mIDH1-IN-2
MRK-A
CP-17
Isocitric Dehydrogenase (NADP), Porcine
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COA
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463611831
