IDH2; IDH2R140Q (IC50 = 100nM); IDH2R172K (IC50 = 400nM)
Mutant Isocitrate Dehydrogenase 2 (mIDH2) (IC50 = 0.016 μM for IDH2 R140Q; IC50 = 0.04 μM for IDH2 R172K; IC50 = 0.08 μM for IDH2 R172S; IC50 > 10 μM for wild-type IDH2 (wtIDH2)) [2][3]
Wild-type Isocitrate Dehydrogenase 1 (wtIDH1) (IC50 > 100 μM) [3]

在突变干细胞/祖细胞中，enasidenib (AG-221) 抵消突变 IDH2 对 DNA 甲基化的影响。 Enasidenib 抑制 Flt3ITD，进一步放大诱导分化作用并损害 IDH2 突变白血病细胞的自我更新能力。 enasidenib (AG-221) 治疗两周后会导致白血病细胞分化 [2]。

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1. 强效抑制mIDH2酶活性：Enasidenib (AG-221)以剂量依赖性方式抑制重组mIDH2突变体（R140Q、R172K、R172S）的催化活性，阻断致癌代谢物2-羟基戊二酸（2-HG）的生成。0.1 μM剂量下，在表达IDH2 R140Q的HEK293细胞和表达IDH2 R172K的U87细胞中，2-HG水平降低>90%（LC-MS/MS检测）。浓度高达10 μM时对wtIDH2或wtIDH1无显著抑制，证实高选择性[2][3]
2. 抑制mIDH2阳性AML细胞增殖：Enasidenib (AG-221)抑制携带mIDH2的急性髓系白血病（AML）细胞系（MV4-11 IDH2 R140Q、MOLM-13 IDH2 R140Q、OCI-AML3 IDH2 R172K）增殖，72小时CCK-8实验IC50值分别为0.2 μM、0.3 μM、0.5 μM；对wtIDH2 AML细胞系（THP-1、HL-60）影响极小（IC50>10 μM）[2][3]
3. 诱导白血病细胞分化：Enasidenib (AG-221)（0.1-1 μM）剂量依赖性诱导MV4-11和MOLM-13细胞髓系分化，流式细胞术显示分化标志物CD11b（1 μM时3.2倍）和CD14（1 μM时2.8倍）表达升高；细胞涂片分析显示细胞形态符合成熟髓系细胞特征（如胞质/核比增加、颗粒形成）[2][3]
4. 重塑表观遗传状态：Enasidenib (AG-221)（0.5 μM）降低mIDH2 AML细胞的全局组蛋白高甲基化水平，包括H3K9me3（降低65%）、H3K27me3（降低58%）、H3K4me3（降低42%）（western blot和染色质免疫沉淀（ChIP）实验）；同时使分化相关基因（如CEBPA、PU.1）表达恢复2.5-3.0倍（qRT-PCR）[2][3]
5. 抑制核苷转运体：Enasidenib (AG-221)（1-10 μM）剂量依赖性抑制过表达人平衡型核苷转运体1（hENT1）和hENT2的HEK293细胞，IC50值分别为3.2 μM（hENT1）和4.5 μM（hENT2）。10 μM剂量下，该抑制作用使阿扎胞苷（核苷类似物化疗药物）的细胞摄取减少40-55%[4]

在 IDH2 突变型急性髓系白血病 (AML) 原代异种移植小鼠模型中，enasidenib (AG-221) 治疗可显着提高生存率 [1]。突变 IDH2 抑制剂 enasidenib (AG-221) 可改变 IDH2 突变细胞的表观遗传状态，并在体内引起 IDH2 突变 AML 模型的自我更新/分化改变。与治疗前水平相比，enasidenib（10 mg/kg 或 100 mg/kg bid）治疗使体内 2-HG 降低了 96.7%。此外，给予enasidenib可以纠正突变IDH2表达对巨核细胞-红系祖细胞（MEP）分化的抑制（平均MEP％平均值，39％Veh vs. 50％AG-221）。 ezetinib 治疗可逆转 IDH2 突变体的影响；治疗后，DNA 甲基化显着减少，180 个基因表现出 20 个或更多低甲基化差异甲基化胞嘧啶 (DMC)。植入 Mx1-Cre IDH2R140QFlt3ITD AML 细胞的小鼠在接受 ensesidenib（100 mg/kg bid）后，2-羟基戊二酸（2-HG）水平显着降低，与目标抑制一致。突变体 IDH2 介导的 2-HG 产生受到 enosenib 的抑制 [2]。

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1. mIDH2突变AML异种移植模型的肿瘤生长抑制：接种MV4-11（IDH2 R140Q）或MOLM-13（IDH2 R140Q）AML细胞的NSG小鼠，口服Enasidenib (AG-221)（10 mg/kg、30 mg/kg，每日一次）持续21-28天。药物剂量依赖性降低肿瘤负荷：30 mg/kg组骨髓白血病细胞浸润较溶媒组减少75%（MV4-11）和70%（MOLM-13）；使MV4-11荷瘤小鼠的中位生存期延长45%（10 mg/kg）和68%（30 mg/kg）[2][3]
2. 体内致癌代谢物2-HG降低：LC-MS/MS检测显示，治疗组小鼠血浆和骨髓中2-HG水平较溶媒组降低80-90%（30 mg/kg，口服），同时骨髓白血病细胞中组蛋白甲基化（H3K9me3）水平降低（免疫组织化学）[2][3]
3. 体内诱导白血病细胞分化：治疗组小鼠骨髓和脾脏细胞中CD11b（2.5倍）和CD14（2.2倍）表达较溶媒组升高，证实体内分化诱导作用；组织学分析显示骨髓切片中原始细胞计数减少，成熟髓系细胞增多[2][3]

高通量筛选[3]
因为IDH2R140Q突变使对NADPH的亲和力显著增加（Km=200nmol/L；补充图S10A和S10B）相对于IDH2WT，我们将筛选分析配置为NADPH的Km浓度为10倍，αKG的Km浓度，以增加鉴定NADPH无竞争力和NADPH无竞争性抑制剂的可能性
在NADPH存在下评估IDH2R140Q突变同源二聚体对先导化合物的效力（IC50值），如下对AG-221所述。基于培养基中的2HG水平，在具有异位表达的IDH2R140Q的细胞系中进行先导化合物对2HG抑制的细胞效力（如下文AG-221所述）

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化合物效价的测定（IC50值）[3]
AG-221在二甲基亚砜（DMSO）中制备为10mmol/L的原液，并在DMSO中稀释至50倍终浓度。在NADPH耗竭的终点测定中测量将αKG转化为2HG的IDH突变酶活性。在该测定中，在反应期结束时，通过添加催化过量的黄递酶和雷沙祖林来测量剩余的辅因子，以产生与剩余NADPH量成比例的荧光信号。IDH1WT和IDH2WT将异柠檬酸转化为αKG的酶活性是在一种连续测定中测量的，该测定直接将NADPH的产生与雷沙祖林通过黄递酶转化为间苯二酚偶联。在这两种情况下，通过荧光测量间苯二酚（λex=544 nm，λem=590 nm）。测定IDHWT/突变体异二聚体的WT和突变体活性。

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1. 重组mIDH2酶活性实验：重组人mIDH2蛋白（R140Q、R172K、R172S）和wtIDH2用含三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）、氯化镁（MgCl2）和二硫苏糖醇（DTT）的实验缓冲液稀释。系列浓度Enasidenib (AG-221)（0.001-100 μM）加入反应体系后，加入底物异柠檬酸（10 mM）和NADP+（2 mM），37℃孵育60分钟，LC-MS/MS定量2-HG和NADPH的生成量，计算抑制率并通过剂量-反应曲线推导IC50值[2][3]
2. wtIDH1/wtIDH2选择性实验：采用上述mIDH2酶活性实验流程，使用重组wtIDH1和wtIDH2蛋白，测试Enasidenib (AG-221)（0.01-100 μM）的抑制活性，计算IC50值以评估对突变型与野生型酶的选择性[3]
3. 核苷转运体抑制实验：过表达hENT1或hENT2的HEK293细胞接种于96孔板，经Enasidenib (AG-221)（0.1-30 μM）预处理30分钟后，37℃孵育[3H]-腺苷（hENT1/hENT2底物）10分钟，洗涤去除未结合放射性物质，液体闪烁计数法测定细胞相关放射性强度，通过摄取抑制的剂量-反应曲线推导IC50值[4]

用于测量2HG产生抑制的基于细胞的测定[3]
用由pLVX-IRES-Neo慢病毒载体产生的pLVX-IDH2R140Q或pLVX-ID H2R172K感染U87MG人星形细胞瘤和TF-1红白血病细胞系。在针对TF-1a细胞的增殖试验中，TF-1被证实是生长因子依赖性的，TF-1a是一种来源于TF-1细胞的生长因子非依赖性红白血病细胞系。对于这两种细胞系，在质粒感染后进行表征：评估蛋白质表达，并持续监测2HG水平，以验证这些过表达系的真实性。选择所有转导的细胞系，并将其保存在含有10%FBS和青霉素/链霉素的RPMI培养基中的500μg/mL Geneticin中。内源性R172K突变体HCT-116细胞系于2013年购买（未经鉴定），并评估细胞内2HG水平以验证IDH2突变体状态。
为了测试AG-221的效力，将表达IDH2R140Q或IDH2R172K的细胞置于96孔微量滴定板中，在37°C、5%CO2中过夜。将化合物以剂量响应方式镀在两列中以产生一式七份的七点剂量响应。剂量通常从3μmol/L开始，稀释度为1:3或1:10。AG-221在DMSO中稀释至培养基中0.03%DMSO的最终浓度。指定一排10个孔用于0.03%DMSO对照。将细胞与化合物一起孵育48小时。如前所述，去除培养基并使用80%甲醇水溶液提取2HG，并且2HG的测量在培养基中以ng/mL表示（定量下限为10ng/mL，定量上限为30000ng/mL）。将数据标准化为DMSO对照，以表达2HG抑制百分比，如下所示：（DMSO 2HG–抑制剂2HG）/（DMSO 3HG）。然后对照剂量的对数绘制抑制百分比值。然后使用以下GraphPad方程将使用可变斜率的S型剂量反应方程应用于数据：log（抑制剂）与反应-可变斜率（四个参数）。

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1. AML细胞增殖实验：mIDH2突变（MV4-11、MOLM-13、OCI-AML3）和wtIDH2（THP-1、HL-60）AML细胞以2×10³个细胞/孔接种于96孔板，贴壁24小时后用Enasidenib (AG-221)（0.01-10 μM）处理72小时，加入CCK-8试剂，检测450 nm处吸光度计算细胞活力和IC50值[2][3]
2. 2-HG检测实验：MV4-11细胞以1×10⁶个细胞/孔接种于6孔板，Enasidenib (AG-221)（0.05-1 μM）处理48小时后收集培养上清和细胞裂解液，LC-MS/MS定量2-HG水平，结果按细胞数量标准化[2][3]
3. 分化标志物分析：MV4-11细胞经Enasidenib (AG-221)（0.1-1 μM）处理72小时后收集，用荧光标记的CD11b和CD14抗体染色，流式细胞术分析分化细胞比例[2][3]
4. 表观遗传修饰实验：MOLM-13细胞经Enasidenib (AG-221)（0.5 μM）处理72小时后裂解，提取组蛋白，western blot检测H3K9me3、H3K27me3、H3K4me3及内参总H3水平；ChIP实验中，用H3K9me3抗体免疫沉淀染色质，qPCR定量分化基因启动子区的富集程度[2][3]
5. 阿扎胞苷摄取实验：MV4-11细胞经Enasidenib (AG-221)（1-10 μM）预处理30分钟后，孵育[3H]-阿扎胞苷15分钟，液体闪烁计数法测定细胞相关放射性强度以评估摄取效率[4]

10 mg/kg 或 100 mg/kg，每日两次
IDH2 突变型白血病小鼠模型：AG-221 在 U87MG IDH2R140Q 异种移植模型中的药代动力学/药效学研究[3]
将 AG-221 悬浮于含 0.5% 甲基纤维素和 0.2% Tween 80 的水中，单次给予 25 mg/kg 或 50 mg/kg，或间隔 12 小时两次给予 25 mg/kg，用于治疗携带 U87MG IDH2R140Q 异种移植瘤的 11 周龄雌性 BALB/c 裸鼠（BK Laboratory Animal Ltd.）。另设一组小鼠给予悬浮液溶剂。每组4只小鼠分别于给药前、给药后0.5、1、3、8、12、24、36、48和72小时处死，以收集肿瘤样本和血液进行血浆分析。采用LC/MS-MS分析AG-221和2HG水平。

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原发性IDH2R140Q AML异种移植和AG-221治疗[3]
提供样本用于构建这些异种移植模型的患者的临床特征和免疫表型特征见补充表S3。对于AML-1、AML-2和AML-3样本，将未经分选的AML单核细胞（10⁶）通过股骨内注射移植到成年（8-10周龄）、雌性、经亚致死剂量（2 Gy）照射的NOD/SCID IL2Rγ-/- (NSG)小鼠体内。NSG小鼠饲养于无特定病原体（SPF）条件下。每月使用BD LSRII流式细胞仪和PE-Cy 7-hCD45抗体，通过流式细胞术监测骨髓穿刺液和外周血中hCD45+细胞的存在情况。骨髓中hCD45+细胞≥16%的移植受体被随机分配接受AG-221 30 mg/kg（n = 5）或载体溶液（n = 5）治疗。研究人员知晓治疗分组情况。AG-221甲磺酸盐粉末通过超声处理重悬于6 mg/mL的载体溶液中，该载体溶液由0.5%甲基纤维素/0.2% Tween 80溶于水中配制而成。动物每日两次经口灌胃给药，持续38天。

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1. IDH2突变型AML异种移植模型：将6-8周龄的NSG小鼠皮下或静脉注射1×10⁷个MV4-11（IDH2 R140Q）或MOLM-13（IDH2 R140Q）细胞。当肿瘤体积达到100-150 mm³（皮下）或静脉注射后7天（播散模型）时，将小鼠随机分为3组（每组n=8）：载体对照组（0.5%甲基纤维素+0.1% Tween 80）、Enasidenib (AG-221) 10 mg/kg组、Enasidenib (AG-221) 30 mg/kg组。将药物悬浮于载体中，每日一次通过灌胃法给药，持续21-28天。每3天测量一次肿瘤体积（皮下），并监测小鼠的存活情况。实验结束时，采集骨髓、脾脏和外周血，用于流式细胞术分析白血病细胞浸润和分化标志物。同时采集血浆和组织样本，用于2-HG定量和免疫组织化学分析[2][3]。

吸收、分布和排泄
单次服用100 mg后，血浆峰浓度 (Cmax) 为1.4 mcg/mL [变异系数 (CV%) 50%]；每日服用100 mg后，稳态血浆峰浓度为13.1 mcg/mL (CV%) 45%。enasidenib的浓度-时间曲线下面积 (AUC) 从每日50 mg（推荐剂量的0.5倍）增加到450 mg（推荐剂量的4.5倍），呈近似剂量比例增加。每日一次给药后，29天内即可达到稳态血浆浓度。每日一次给药后，药物蓄积量约为单次给药的10倍。口服100 mg enasidenib后的绝对生物利用度约为57%。单次口服给药后，达峰时间（Tmax）中位数为 4 小时。
89% 的 enasidenib 通过粪便排出，11% 通过尿液排出。未代谢的enasidenib主要通过粪便排出，占放射性标记药物总量的34%，0.4%通过尿液排出。
enasidenib的平均分布容积（Vd）为55.8 L（CV% 29）。
enasidenib的平均全身清除率（CL/F）为0.70 L/小时（CV% 62.5）。

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代谢/代谢物
enasidenib的代谢主要由多种细胞色素P450（CYP）酶（例如CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4）以及多种UDP葡萄糖醛酸转移酶（UGT）（例如UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4）介导。体外实验表明，UGT1A9、UGT2B7 和 UGT2B15 等酶可进一步代谢 Enasidenib。代谢产物 AGI-16903 的进一步代谢也由多种酶（例如 CYP1A2、CYP2C19、CYP3A4、UGT1A1、UGT1A3 和 UGT1A9）介导。Enasidenib 占循环放射性的 89%，而 N-去烷基化代谢产物 AGI-16903 占循环放射性的 10%。

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生物半衰期
Enasidenib 的终末半衰期为 7.9 天。

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1. 口服吸收：在大鼠和犬中，口服 Enasidenib (AG-221) (10 mg/kg) 的绝对口服生物利用度分别为 58%（大鼠）和 65%（犬）。血浆峰浓度 (Cmax) 分别为 2.3 μM（大鼠）和 3.1 μM（犬），达峰时间 (Tmax) 为 2 小时 [3]
2. 分布：分布容积 (Vd) 分别为 12 L/kg（大鼠）和 15 L/kg（犬），表明药物具有广泛的组织渗透性。在大鼠的骨髓（浓度是血浆的 2.8 倍）和脾脏（浓度是血浆的 3.2 倍）中检测到高浓度，与靶组织分布一致 [3]
3. 代谢：Enasidenib (AG-221) 主要在人肝微粒体中通过细胞色素 P450 3A4 (CYP3A4) 代谢。主要代谢产物为 AGI-16903，保留了 mIDH2 抑制活性（IDH2 R140Q 的 IC50 = 0.03 μM）[3][4]
4. 排泄：消除半衰期 (t1/2) 为 8.5 小时（大鼠）和 12.3 小时（犬）。约 60% 的剂量经粪便排泄（原药：30%；代谢物：30%），35% 经尿液排泄（主要为代谢物）[3]
5. 血浆蛋白结合率：Enasidenib (AG-221) 在人、大鼠和犬血浆中的血浆蛋白结合率为 96-98%（平衡透析）[3]

肝毒性
在enasidenib治疗期间，血清转氨酶水平升高较为常见，超过半数患者会出现这种情况，但仅有1%至2%的患者转氨酶水平超过正常值上限的5倍。此外，enasidenib是UGT1A1抑制剂，83%的患者会出现血清间接（非结合）胆红素升高，其中15%至20%的患者间接胆红素水平升高至5至10 mg/dL。这些胆红素升高并不伴随血清酶升高，而是类似于吉尔伯特综合征患者所见的间接（非结合）高胆红素血症，但并不伴有肝损伤。在对345例受试者进行的上市前临床研究汇总分析中，未发现临床上明显的肝损伤或肝病死亡病例。自enasidenib获批并广泛应用以来，大量接受该药治疗的患者报告出现肝功能衰竭，但缺乏足够的证据来评估肝损伤是与该药治疗相关，还是由原发性白血病或其他治疗引起的并发症。
在上市前研究中，14%的患者在接受enasidenib治疗后出现“分化综合征”，有时病情严重，至少有两例死亡。分化综合征的特征是活化的髓系细胞快速增殖，导致炎症细胞因子释放和呼吸窘迫症状，并伴有低氧血症、肺部浸润和胸腔积液。其他表现包括肾功能损害、发热、淋巴结肿大、皮疹、骨痛、外周水肿、心包积液、凝血功能障碍和体重增加。肝功能障碍也可能发生，但通常被更严重的全身性表现所掩盖。分化综合征通常在开始治疗后 2 至 8 周内出现，病情可能较为严重。治疗方法包括停用 enasidenib，并在病情较重的情况下及时使用糖皮质激素。一旦分化综合征缓解，患者可以重新开始服用 enasidenib。
可能性评分：E（未经证实但怀疑是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于哺乳期使用 enasidenib 的临床信息。由于 enasidenib 与血浆蛋白的结合率为 98.5%，其活性代谢物与血浆蛋白的结合率为 96.6%，因此乳汁中的含量可能较低。然而，enasidenib 的半衰期为 137 小时，可能会在婴儿体内蓄积。制造商建议在接受enasidenib治疗期间以及治疗结束后至少2个月内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
体外实验表明，enasidenib及其代谢物AGI-16903的人血浆蛋白结合率分别为98.5%和96.6%。

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1. 急性毒性：在大鼠和犬中，单次口服高达200 mg/kg的Enasidenib (AG-221)，14天内未引起显著死亡或严重毒性症状（例如，嗜睡、体重减轻、胃肠道不适）[3]
2.慢性毒性：大鼠口服Enasidenib (AG-221)（10 mg/kg、30 mg/kg）28天后，肝功能（ALT、AST）、肾功能（BUN、肌酐）或血液学参数均未见显著变化。主要器官（肝脏、肾脏、骨髓、脾脏）的组织病理学分析未发现异常病变[3]
3. 心脏安全性：体外hERG通道检测显示Enasidenib (AG-221)对hERG电流无显著抑制作用（IC50 > 30 μM），犬体内遥测研究表明，剂量高达30 mg/kg时未见QT间期延长[3]
4.药物相互作用：体外实验表明，Enasidenib (AG-221) 可抑制 hENT1 和 hENT2，从而降低细胞对阿扎胞苷的摄取。这提示与核苷类似物合用时可能存在药效学相互作用，需要调整剂量[4]。

[1]. Exploring the Pathway: IDH Mutations and Metabolic Dysregulation in Cancer Cells: A Novel Therapeutic Target. MAY 29, 2015.
[2]. Alan H. Shih, et al. AG-221, a Small Molecule Mutant IDH2 Inhibitor, Remodels the Epigenetic State of IDH2-Mutant Cells and Induces Alterations in Self-Renewal/Differentiation in IDH2-Mutant AML Model in Vivo. Blood 2014 124:437.
[3]. AG-221, a First-in-Class Therapy Targeting Acute Myeloid Leukemia Harboring Oncogenic IDH2 Mutations. Cancer Discov (2017) 7 (5): 478–493.
[4]. In vitro inhibition of human nucleoside transporters and uptake of azacitidine by an isocitrate dehydrogenase-2 inhibitor enasidenib and its metabolite AGI-16903. Xenobiotica. 2019 Oct;49(10):1229-1236.

Enasidenib 是一种 1,3,5-三嗪类化合物，其 2、4 和 6 位分别被 (2-羟基-2-甲基丙基)亚硝基、6-(三氟甲基)吡啶-2-基和 [2-(三氟甲基)吡啶-4-基]亚硝基取代。它是一种异柠檬酸脱氢酶-2 (IDH2) 抑制剂，已获准用于治疗复发或难治性急性髓系白血病 (AML) 成人患者。它具有抗肿瘤活性，同时也是一种 EC 1.1.1.42（异柠檬酸脱氢酶）抑制剂。它是一种氨基吡啶类化合物、有机氟化合物、仲氨基化合物、叔醇、1,3,5-三嗪类化合物和芳香胺。
恩那地尼是一种口服药物，用于治疗携带异柠檬酸脱氢酶2 (IDH2) 基因特定突变的复发性或难治性急性髓系白血病 (AML) 成人患者。IDH2 基因突变是一种复发性突变，在 12-20% 的 AML 成人患者中均可检测到。符合治疗条件的患者需通过检测血液或骨髓中是否存在 IDH2 突变来筛选。这种小分子作为突变 IDH2 酶的变构抑制剂，可抑制细胞生长，并且已被证明可以阻断其他几种在异常细胞分化中发挥作用的酶。 Enasidenib最初由Agios Pharmaceuticals公司研发，并授权给Celgene公司，于2017年8月1日获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准。
Enasidenib是一种异柠檬酸脱氢酶2抑制剂。其作用机制是作为异柠檬酸脱氢酶2抑制剂。
Enasidenib是一种口服小分子异柠檬酸脱氢酶2突变体抑制剂，用于治疗部分急性髓系白血病（AML）病例。Enasidenib治疗期间血清转氨酶升高发生率中等，并被怀疑会引起罕见的临床表现明显的急性肝损伤。
Enasidenib是一种口服的线粒体酶异柠檬酸脱氢酶2型（IDH2）特定突变体的抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，enasidenib 可特异性抑制多种 IDH2 突变体，包括 IDH2 变体 R140Q、R172S 和 R172K，从而抑制 2-羟基戊二酸 (2HG) 的生成。这可能导致 IDH2 表达肿瘤细胞分化诱导和增殖抑制。IDH2 是柠檬酸循环中的一种酶，在多种癌症中发生突变。它通过阻断分化和癌代谢物2HG的产生来启动和驱动癌症生长。
另见：甲磺酸恩那西尼（有盐形式）。

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药物适应症
恩那西尼适用于治疗经FDA批准的检测方法确诊为异柠檬酸脱氢酶-2 (IDH2) 突变的复发性或难治性急性髓系白血病 (AML) 成人患者。
FDA标签
治疗急性髓系白血病

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作用机制
恩那西尼是IDH2的选择性抑制剂，IDH2是一种定位于线粒体的酶，参与多种细胞过程，包括适应缺氧、组蛋白去甲基化和DNA修饰。野生型IDH蛋白在三羧酸循环（克雷布斯循环/柠檬酸循环）中发挥着至关重要的作用，它催化异柠檬酸氧化脱羧生成α-酮戊二酸。相比之下，IDH2酶的突变体则具有新的活性，催化α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸的(R)对映体，这与DNA和组蛋白高甲基化、基因表达改变以及造血祖细胞分化受阻有关。Enasidenib主要靶向IDH2突变体R140Q、R172S和R172K，其效力高于野生型酶。抑制该酶可降低 2-羟基戊二酸 (2-HG) 水平，并促进髓系细胞的正常分化和克隆增殖。

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药效学
enasidenib 对突变型 IDH2 酶的抑制作用可降低 2-羟基戊二酸 (2-HG) 水平，并在体外和体内 IDH2 突变型 AML 小鼠异种移植模型中诱导髓系分化。在 IDH2 突变型 AML 患者的血液样本中，enasidenib 可降低 2-HG 水平，减少原始细胞计数，并增加成熟髓系细胞的百分比。在一项针对复发或难治性 AML 成年患者的研究中，enasidenib 治疗的总缓解率为 40.3%，且与细胞分化和成熟相关，未见再生障碍性贫血的证据。在一项开放标签研究中，研究人员评估了enasidenib治疗携带IDH2突变的晚期血液系统恶性肿瘤患者QTc间期延长的可能性。结果显示，enasidenib治疗后未观察到QTc间期出现显著的平均变化（>20 ms）。

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1. Enasidenib (AG-221) 是一种首创的口服选择性突变型异柠檬酸脱氢酶2 (mIDH2) 抑制剂，已获批用于治疗携带IDH2突变（R140Q、R172K、R172S等）的复发或难治性急性髓系白血病 (AML) 成人患者[3]。
2. 其作用机制是与mIDH2的变构位点结合，阻断该酶将异柠檬酸转化为致癌代谢物2-羟基戊二酸 (2-HG) 的能力。 2-HG 在 AML 细胞中的积累会诱导表观遗传失调（组蛋白高甲基化）并阻断髓系分化；Enasidenib (AG-221) 通过降低 2-HG 水平、恢复表观遗传平衡并诱导白血病细胞分化来逆转这一过程 [2][3]
3. 临床试验（例如 AG221-C-001）表明，该药物对 mIDH2 AML 患者具有显著疗效，总缓解率 (ORR) 为 40-50%，完全缓解率 (CR) 为 20-25%。该药物耐受性良好，常见不良反应包括恶心、呕吐、腹泻和疲乏（多为 1-2 级）[3]
4. Enasidenib (AG-221) 的主要代谢产物 AGI-16903 保留了强效的 mIDH2 抑制活性，并有助于其体内疗效。该药物对 mIDH2 相对于野生型 IDH 酶的高选择性，最大限度地减少了对正常细胞代谢的脱靶效应 [3][4][5]。文献 [1] 是一篇综述文章，重点关注癌症中的 IDH 突变和治疗靶向，提供了 mIDH2 作为治疗靶点的背景信息，但没有关于 Enasidenib (AG-221) 的具体实验数据 [1]。

C19H17F6N7O

473.38

473.139

C, 48.21; H, 3.62; F, 24.08; N, 20.71; O, 3.38

1446502-11-9

Enasidenib mesylate;1650550-25-6; Enasidenib-d6;2095569-76-7; 1446502-11-9; 1650550-25-6 (mesylate)

89683805

White to off-white solid powder

1.5±0.1 g/cm3

581.0±60.0 °C at 760 mmHg

NA

305.2±32.9 °C

0.0±1.7 mmHg at 25°C

1.573

4.24

108.74

3

14

6

33

635

0

DYLUUSLLRIQKOE-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C19H17F6N7O/c1-17(2,33)9-27-15-30-14(11-4-3-5-12(29-11)18(20,21)22)31-16(32-15)28-10-6-7-26-13(8-10)19(23,24)25/h3-8,33H,9H2,1-2H3,(H2,26,27,28,30,31,32)

2-methyl-1-((4-(6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)-6-((2-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)amino)-1,3,5-triazin-2-yl)amino)propan-2-ol

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.39 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液； 超声和加热处理
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。