| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
ETC-159 (ETC-1922159) targets PORCN (Porcupine O-Acyltransferase); [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
所有 Wnt 活性和分泌均被 ETC-159 抑制。在几种 Wnt 信号传导升高的癌症模型中观察到 ETC-159 的强活性。当 R-spondin 易位存在于分子定义的结直肠癌 (CRC) 中时，ETC-159 非常有效[1]。
1. 在STF3A细胞中，ETC-159可抑制Wnt/β-连环蛋白报告基因活性及Wnt3a的分泌；100 nM的ETC-159处理后，免疫印迹检测显示细胞培养上清中Wnt3A蛋白水平显著降低 [1] 2. 在瞬时表达Wnt3A-V5的HeLa细胞中，细胞经炔基棕榈酸（Alk-C16）代谢标记16小时（同时加入100 nM ETC-159），通过生物素-叠氮化物点击反应检测棕榈酰化水平（上样）及Wnt3a-V5免疫印迹（下样），证实100 nM ETC-159可抑制Wnt3A的棕榈酰化 [1] 3. 转染Wnt3a、PORCN表达质粒及Super 8xTOPFLASH报告基因的HT1080细胞经ETC-159处理16小时后，过表达PORCN可逆转ETC-159对β-连环蛋白报告基因活性的抑制作用（P⩽0.01，P⩽0.0001） [1] 4. 瞬时表达Wnt3A-V5的HeLa细胞经100 nM ETC-159过夜处理后，内源性Wntless的免疫沉淀实验证实ETC-159可阻止Wnt与Wntless的相互作用 [1] 5. 稳定表达Wnt3a的小鼠L细胞经100 nM ETC-159处理后，不同时间点收集细胞并进行免疫印迹检测，结果显示ETC-159可促进β-连环蛋白降解 [1] 6. 转染Super 8xTOPFLASH报告基因及不同Wnt表达质粒的HT1080细胞经100 nM ETC-159处理24小时后，多种Wnt诱导的Wnt/β-连环蛋白报告基因活性均被抑制（P⩽0.05，P⩽0.01，P⩽0.001） [1] 7. 转染小鼠（1 ng）或爪蟾porcn（0.75 ng）表达质粒及Super 8xTOPFLASH报告基因的PORCN敲除HT1080细胞中，ETC-159对哺乳动物PORCN（小鼠PORCN）的抑制作用强于爪蟾PORCN，且呈剂量依赖性降低β-连环蛋白报告基因活性（以DMSO处理组为对照计算百分比） [1] 8. 转染Super 8xTOPFLASH报告基因的人畸胎瘤PA-1细胞中，ETC-159可剂量依赖性特异性抑制自分泌Wnt信号通路（结果以相对于DMSO对照组的均值±标准差表示） [1] 9. 100 nM ETC-159处理PA-1畸胎瘤细胞24小时后，免疫印迹分析显示LRP6和Dvl2的下游激活水平降低 [1] 10. 接种于软琼脂中的PA-1细胞经不同浓度ETC-159处理后，2~3周计数克隆形成数（每个数据点为两个孔的平均计数），证实ETC-159可剂量依赖性抑制细胞锚定非依赖性生长 [1] 11. 转染RSPO融合蛋白表达质粒及STF报告基因的HEK293细胞经100 nM ETC-159处理16小时后，RSPO融合蛋白诱导的Wnt信号通路被显著抑制（P⩽0.001，P⩽0.0001） [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
ETC-159 抑制小鼠 PORCN 的 IC50 为 18.1 nM，而 Xenopus Porcn 的 IC50 大约高四倍 (70 nM)。当用于治疗源自携带 RSPO 易位的结直肠癌 (CRC) 患者的异种移植物时，ETC-159 显示出显着的疗效。 ETC-159 在小鼠中显示出良好的口服药代动力学，使得口服给药能够用于临床前评估。 ETC-159的口服生物利用度为100%，单剂量5 mg/kg后Tmax约为0.5小时，迅速吸收到血液中[1]。
1. BALB/c裸鼠第4脂肪垫接种MMTV-Wnt1肿瘤组织片段（原位模型）后，每日口服ETC-159（药效相关具体剂量未详述，但检测了5、30、100 mg/kg剂量下的血浆药物浓度）可有效抑制肿瘤生长；实验终点收集肿瘤组织，免疫组化显示β-连环蛋白在细胞核和细胞质中表达减少，且Wnt/β-连环蛋白靶基因表达下调（末次给药6小时后检测，P⩽0.01，P⩽0.001，P⩽0.0001，n=8/组） [1] 2. BALB/c裸鼠接种PA-1畸胎瘤细胞（平均肿瘤体积~150 mm³）后，每日口服30 mg/kg ETC-159可显著抑制肿瘤生长（n=10个肿瘤/组，数据以均值±标准误表示） [1] 3. BALB/c裸鼠接种NCCIT畸胎瘤细胞（平均肿瘤体积~150 mm³）后，每日口服30 mg/kg ETC-159可抑制肿瘤生长（n=9个肿瘤/组）；末次给药4小时后收集肿瘤组织，qRT-PCR检测显示Axin2 mRNA水平显著降低（P⩽0.01，P⩽0.0001，n=8个肿瘤/组） [1] 4. 携带结直肠癌（CRC）患者来源异种移植物（CR-1、CR-2，均含PTPRK-RSPO融合基因）的雌性BALB/c裸鼠，每日口服75 mg/kg ETC-159可有效抑制肿瘤生长（n=12个肿瘤/组，数据以均值±标准误表示）；肿瘤组织经苏木精-伊红（HE）和阿尔辛蓝染色显示分化程度增加 [1] 5. BALB/c裸鼠接种HPAF-II胰腺肿瘤细胞（平均肿瘤体积~150 mm³）后，每日口服ETC-159（药效相关具体剂量未详述）可抑制肿瘤生长（n=9/组，数据以均值±标准误表示）；末次给药6小时后收集肿瘤组织，AXIN2 mRNA水平显著降低（P⩽0.0001，n=6/组） [1] 6. BALB/c裸鼠接种AsPC-1胰腺肿瘤细胞后，每日两次口服15 mg/kg剂量的ETC-159可抑制肿瘤生长（n=16/组，数据以均值±标准差表示）；肿瘤组织中AXIN2 mRNA水平降低（P⩽0.0001，n=16/组），黏蛋白基因表达升高（P⩽0.001，P⩽0.0001） [1] 7. 携带AsPC-1异种移植物的BALB/c裸鼠经21天每日两次15 mg/kg ETC-159处理后停药，随访6周显示肿瘤未出现复发生长（n=20/组，数据以均值±标准差表示） [1] |
| 酶活实验 |
1. Wnt3A棕榈酰化检测实验：将HeLa细胞瞬时转染以表达Wnt3A-V5，随后在100 nM ETC-159存在下，用炔基棕榈酸（Alk-C16）对细胞进行16小时代谢标记；标记完成后，检测生物素-叠氮化物点击反应后的棕榈酸水平（上样），并通过免疫印迹检测Wnt3a-V5（下样），以此评估ETC-159对棕榈酰化的抑制作用 [1]
2. β-连环蛋白报告基因活性挽救实验：向HT1080细胞中转染Wnt3a表达质粒、PORCN表达质粒及Super 8xTOPFLASH报告基因质粒；转染后的细胞经ETC-159（该挽救实验中未明确具体浓度）处理16小时，随后收集细胞并检测荧光素酶活性，以此评估PORCN过表达是否可逆转ETC-159对β-连环蛋白活性的抑制作用 [1] 3. 不同Wnt诱导的报告基因活性抑制实验：向HT1080细胞中转染Super 8xTOPFLASH报告基因质粒及多种Wnt表达质粒；细胞经100 nM ETC-159处理24小时后，检测荧光素酶活性，量化ETC-159对Wnt诱导的报告基因活性的抑制效果 [1] 4. PORCN物种特异性抑制实验：向PORCN敲除的HT1080细胞中转染小鼠（1 ng）或爪蟾porcn（0.75 ng）表达质粒及Super 8xTOPFLASH报告基因质粒；细胞经不同浓度ETC-159处理后，以DMSO处理组为对照，检测β-连环蛋白报告基因活性（百分比），对比ETC-159对小鼠和爪蟾PORCN的抑制效力 [1] |
| 细胞实验 |
1. Wnt/β-连环蛋白报告基因活性及Wnt3a分泌实验：将STF3A细胞经不同浓度ETC-159处理24小时，检测荧光素酶活性以评估Wnt/β-连环蛋白报告基因活性（数据以均值±标准差表示）；另取STF3A细胞经100 nM ETC-159处理后，通过免疫印迹检测细胞培养上清中Wnt3A蛋白水平，评估Wnt3a分泌情况 [1]
2. Wnt3A棕榈酰化实验：将HeLa细胞瞬时转染以表达Wnt3A-V5，随后在100 nM ETC-159存在下，用炔基棕榈酸（Alk-C16）孵育细胞16小时；通过免疫印迹检测生物素-叠氮化物点击反应后的棕榈酸及Wnt3a-V5水平，评估棕榈酰化程度 [1] 3. β-连环蛋白降解实验：将稳定表达Wnt3a的小鼠L细胞胰酶消化后，经DMSO或100 nM ETC-159处理再接种；在指定时间点收集细胞，通过免疫印迹检测总β-连环蛋白水平，评估其降解情况 [1] 4. 畸胎瘤细胞自分泌Wnt信号抑制实验：将PA-1细胞转染Super 8xTOPFLASH报告基因质粒，随后经不同浓度ETC-159处理24小时；检测荧光素酶活性并以相对于DMSO对照组的均值±标准差表示，评估自分泌Wnt信号的抑制效果 [1] 5. LRP6和Dvl2激活水平检测实验：将PA-1畸胎瘤细胞经100 nM ETC-159处理24小时，制备细胞裂解液并进行免疫印迹分析，检测LRP6和Dvl2的激活水平 [1] 6. 锚定非依赖性生长实验：将PA-1细胞接种于软琼脂中，并经不同浓度ETC-159处理；2~3周后计数克隆总数（每个数据点为两个孔的平均计数），评估ETC-159对锚定非依赖性生长的抑制作用 [1] 7. RSPO融合蛋白诱导的Wnt信号抑制实验：将HEK293细胞转染指定的RSPO表达质粒及STF报告基因质粒，随后经DMSO或100 nM ETC-159处理16小时；检测荧光素酶活性，评估ETC-159对RSPO融合蛋白诱导的Wnt信号的抑制作用 [1] |
| 动物实验 |
配制于 50% PEG400 (体积/体积) 水溶液中
携带结直肠癌 (CRC) 患者来源异种移植瘤的小鼠 1. MMTV-Wnt1 原位肿瘤模型：将转基因小鼠的 MMTV-Wnt1 肿瘤碎片植入 BALB/c 裸鼠的第 4 脂肪垫；待肿瘤可触及后，将小鼠随机分为四组（肿瘤大小匹配），并每日（非盲法）给予载体或 ETC-159 指定剂量（口服）；监测肿瘤生长，并在研究结束时收集肿瘤进行 β-catenin 染色和 Wnt 靶基因表达分析 [1] 2. PA-1 畸胎瘤异种移植模型：将 PA-1 细胞接种到 BALB/c 裸鼠体内；接种后 3 周（平均肿瘤体积约 150 mm³），将小鼠分为两组（肿瘤体积匹配），并每日（非盲法）给予载体或 30 mg/kg ETC-159（口服给药）；测量肿瘤体积，数据以平均值±标准误表示（n=10 个肿瘤/组）[1] 3. NCCIT 畸胎瘤异种移植模型：将 NCCIT 细胞接种到 BALB/c 裸鼠中；接种后 3 周（平均肿瘤体积约 150 mm³），将小鼠分为治疗组（肿瘤体积匹配），并每日（非盲法）给予载体或 30 mg/kg ETC-159（口服给药）；测量肿瘤体积（每组 n=9 个肿瘤），并在末次给药后 4 小时收集肿瘤进行 Axin2 mRNA 分析 [1] 4. CRC 患者来源的异种移植 (PDX) 模型（CR-1 和 CR-2）：将已建立皮下 CR-1/CR-2 肿瘤（PTPRK-RSPO 融合基因）的雌性 BALB/c 裸鼠随机分组（肿瘤大小匹配），并每日（非盲法）给予载体或 75 mg/kg ETC-159（口服）；监测肿瘤生长（每组 n=12 个肿瘤，数据以平均值±标准误表示），并收集肿瘤进行苏木精/伊红染色和阿利新蓝染色 [1] 5. HPAF-II 胰腺肿瘤异种移植模型：将 HPAF-II 细胞接种到 BALB/c 裸鼠中；接种后 3 周（平均肿瘤体积约 150 mm³），将小鼠分为四组（肿瘤体积匹配），并每日（非盲法）给予载体或指定剂量的 ETC-159（口服给药）；测量肿瘤体积（每组 n=9，数据为平均值±标准误），并在末次给药后 6 小时收集肿瘤进行 AXIN2 mRNA 分析 [1] 6. AsPC-1 胰腺肿瘤异种移植模型：将 AsPC-1 细胞接种到 BALB/c 裸鼠中；接种后 3 周，将小鼠随机分为两组（肿瘤大小匹配），并每日两次（非盲法）给予 15 mg/kg/剂量的 ETC-159 或载体（口服给药）；测量肿瘤体积（每组 n=16，数据以均值±标准差表示），并收集肿瘤进行 AXIN2 和黏蛋白基因表达分析[1] 7. AsPC-1 异种移植瘤治疗后随访：将携带匹配 AsPC-1 肿瘤的 BALB/c 裸鼠每日两次口服 15 mg/kg/剂量的 ETC-159 或载体，持续 21 天，然后停止治疗；在治疗后最多 6 周内测量肿瘤体积（每组 n=20，数据以均值±标准差表示）[1] 8. ETC-159 口服生物利用度测定：小鼠单次口服 5、30 或 100 mg/kg 的 ETC-159；测量血浆中 ETC-159 的浓度，数据以均值±标准差表示[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ETC-159在小鼠体内具有口服生物利用度；单次口服5、30或100 mg/kg剂量可导致药物血浆浓度呈剂量比例增加[1]
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
刺猬蛋白抑制剂ETC-1922159是一种口服生物利用度高的膜结合O-酰基转移酶（MBOAT）刺猬蛋白（PORCN）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，ETC-1922159与内质网（ER）中的PORCN结合并抑制其活性，从而阻断Wnt配体的翻译后棕榈酰化修饰并抑制其分泌。这可阻止Wnt配体的激活，干扰Wnt介导的信号通路，并抑制Wnt驱动肿瘤细胞的生长。刺猬蛋白催化Wnt配体的棕榈酰化修饰，并在Wnt配体的分泌中发挥关键作用。 Wnt信号通路在多种癌症中失调。
1. ETC-159（也称为ETC-1922159）是一种新型、强效、口服的PORCN抑制剂，其通过抑制Wnt棕榈油化（Wnt分泌所必需的翻译后修饰）来阻断所有Wnt的分泌和活性[1] 2. 在RSPO3易位癌症中，ETC-159对PORCN的抑制导致转录组显著重塑，细胞周期、干细胞和增殖相关基因下调，分化标志物上调[1] 3. ETC-159是首个针对RSPO易位CRC的有效靶向治疗药物[1] 4. 在RNF43突变型胰腺肿瘤（HPAF-II、AsPC-1）中， ETC-159处理可诱导分化（粘蛋白表达增加，阿利新蓝染色）[1] |
| 分子式 |
C19H17N7O3
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
391.38
|
|
| 精确质量 |
391.139
|
|
| CAS号 |
1638250-96-0
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
86280523
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
|
| 折射率 |
1.732
|
|
| LogP |
1.2
|
|
| tPSA |
113
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
|
| 重原子数目 |
29
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
654
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| InChi Key |
QTRXIFVSTWXRJJ-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H17N7O3/c1-24-17-16(18(28)25(2)19(24)29)26(11-20-17)10-15(27)21-14-9-8-13(22-23-14)12-6-4-3-5-7-12/h3-9,11H,10H2,1-2H3,(H,21,23,27)
|
|
| 化学名 |
2-(1,3-dimethyl-2,6-dioxopurin-7-yl)-N-(6-phenylpyridazin-3-yl)acetamide
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5551 mL | 12.7753 mL | 25.5506 mL | |
| 5 mM | 0.5110 mL | 2.5551 mL | 5.1101 mL | |
| 10 mM | 0.2555 mL | 1.2775 mL | 2.5551 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Development of novel PORCN inhibitors.Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
|---|
 ETC-159 is orally bioavailable and effectively inhibits the growth of mouse mammary tumor virus (MMTV)-Wnt1 tumors.Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
 ETC-159 inhibits Wnt autocrine signaling and growth of teratocarcinomas.Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
 ETC-159 prevents growth of colorectal tumors with RSPO fusions:Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
|---|
 Global remodeling of gene expression in ETC-159 treated colon cancers with RSPO translocations.Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
 Treatment with ETC-159 prevents growth of RNF43 mutant pancreatic tumors and induces differentiation.Oncogene.2016 Apr 28;35(17):2197-207. |
WHN-88
GNF-6231
IWP-O1
Porcupine 抑制剂1
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
