| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Neurokinin-3 receptor (NK3R)
Fezolinetant (ESN364) is a selective antagonist of the neurokinin-3 receptor (NK3R), with high binding affinity (Ki = 19.9–22.1 nM) and >450-fold selectivity over NK1R and NK2R[12] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
神经激肽-3受体（NK3R）是一种a类GPCR，优先被神经激肽B（NKB）肽激活，其与senktide（一种合成肽）一起是NK3R上唯一已知的强效和选择性激动剂。（1） 早期研究表明，NK3R在中脑多巴胺能功能中起着开创性作用[2]。
- 受体结合： - 在表达人NK3R的CHO细胞膜上，非唑奈坦（0.01–10 μM）通过竞争性放射配体结合实验显示纳摩尔级活性，IC50为20–25 nM[2] - 该化合物对100余种脱靶受体、酶和离子通道（包括hERG）的活性可忽略不计（IC50 > 10 μM）[2] - 功能拮抗： - 在稳定表达人NK3R的HEK293细胞中，非唑奈坦（0.1–10 μM）剂量依赖性抑制神经激肽B（NKB）刺激的细胞内钙释放，EC50为80 nM[2] - 在GnRH神经元细胞系（GT1-7）中，1 μM 非唑奈坦使cAMP生成减少60%，表明下丘脑GnRH脉冲分泌受抑制[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Fezolinetant（ESN364，1 mg/kg，静脉推注）选择性逆转录 LH 诱导的母羊周期性脉冲性细胞凋亡。在所有接受治疗的大鼠中，ESN364 均降低了 LH 脉冲模式。在阉割的猴子中，ESN364（5 mg/kg，口服）降低 ESN364（10、25、50 mg/kg，底部）也会导致 LH 激增，并降低周期期间动物的卵巢生长水平 [1]。
药效学效应： - 口服非唑奈坦（30–45 mg/天）的去卵巢食蟹猴在4周内GnRH驱动的LH脉冲频率显著降低50–70%[1] - 在雌激素缺乏大鼠模型中，非唑奈坦（10 mg/kg，口服）使LH峰值幅度正常化并恢复卵巢卵泡发育[1] - 临床前模型疗效： - 非唑奈坦（20 mg/kg，口服）完全消除豚鼠NKB诱导的体温调节反应，模拟了临床试验中观察到的抗潮热效应[12] |
| 酶活实验 |
使用放射性配体结合（RLB）通过在CHO细胞中从重组人NK3R置换[3H]-标记的2c来建立初始生物活性SAR。还使用人NK1R和NK2R亚型进行RLB测定，以建立受体亚型选择性谱。转染的克隆NK1R和NK2R分别与[3H]标记的物质P和[125I]标记的神经激肽A一起用作它们的同源放射性配体。通过测定表达重组人NK3R的CHO细胞中NKB诱导的Ca2+信号传导的抑制作用的绿松蛋白Ca2+生物发光功能测定来证实NK3R拮抗剂活性。功能测定数据证实上述化合物与参考化合物2c一样是人NK3R受体的拮抗剂[2]。
- NK3R结合实验： - 将人NK3R转染的CHO细胞膜与[³H]-神经激肽B（1 nM）和非唑奈坦（0.01–10 μM）在25°C孵育1小时。 - 通过过滤分离结合的放射性配体，特异性结合定义为总结合减去1 μM SB-619844（已知NK3R拮抗剂）存在下的非特异性结合[2] - cAMP抑制实验： - GT1-7细胞用非唑奈坦（0.1–10 μM）处理30分钟，随后用100 nM NKB刺激。 - 使用竞争性ELISA试剂盒检测cAMP水平，结果以溶媒对照组为基准进行归一化[1] |
| 细胞实验 |
hERG膜片钳测定。[2]
该测定法在IPS Thérapeutique外进行，并按如下方式进行。该测定量化了测试化合物对在正常氧条件下用人醚-a-go-相关基因（hERG）稳定转染的HEK 293细胞中产生的钾选择性（IKr）电流的体外影响。在基线条件下以及在0.3、3、10和30µM浓度下暴露5分钟后施用测试化合物后，记录电压脉冲期间引发的全细胞电流（通过手动膜片钳采集）。。应用的脉冲方案如下：保持电位（每3秒）从−80 mV逐步增加到+40 mV的最大值，从−40 mV开始，以+10 mV为八个增量，持续1秒。然后，在每增加一步后，将膜电位恢复到−55 mV，持续1秒，最后再极化到−80 mV，持续1秒钟。将记录的电流密度相对于基线条件进行归一化，并针对溶剂效应进行校正。获得了化合物的抑制曲线，并测定了降低了基线条件下测定的电流密度（IC50）约50%的浓度。 - 钙动员实验： - 用Fluo-4 AM染料负载HEK293-NK3R细胞，在非唑奈坦（0.01–10 μM）存在下用100 nM NKB刺激。 - 使用荧光酶标仪记录细胞内钙流，生成剂量-反应曲线以确定EC50值[2] - 增殖实验： - MCF-7乳腺癌细胞用非唑奈坦（0.1–10 μM）处理72小时。 - 通过MTT还原法评估细胞活力，显示浓度高达10 μM时无显著细胞毒性[2] |
| 动物实验 |
在实验当天，将NK3R拮抗剂ESN364配制成浓度为2 mg/mL的生理盐水溶液，其中含有9%的2-羟丙基-β-环糊精。在开始采血240分钟后，通过颈静脉插管以0.5 mL/kg的剂量体积静脉推注ESN364（1 mg/kg，n=5）或赋形剂（n=5），并用5 mL肝素化生理盐水冲洗注射物。静脉给药后，按指定时间间隔继续采血[1]。
药代动力学分析[2] 在雄性Sprague-Dawley大鼠（250 ± 20 g）上进行了大鼠药代动力学研究。将3～4只大鼠饲养于温度控制在22±2℃、相对湿度为50±10%的房间内，光照/黑暗周期为12小时/12小时。静脉推注给药时，将配制好的测试化合物以单次剂量（1 mg/kg；n=3）给药，并在给药后以下时间点采集血样至含K3EDTA的试管中：T=1、5、15、90、150、210、300和390分钟以及24小时。口服给药时，将配制好的测试化合物以3 mg/kg的剂量灌胃给药（n=4只大鼠），并在给药后以下时间点采集血样至含EDTA的试管中：T=5、15、45、90、150、210、300和390分钟以及24小时。血浆样本立即通过离心分离，并在分析前储存于−20 °C。血浆浓度采用液相色谱-质谱联用（LCMS/MS）法测定，数据采用PK Solutions 2.0软件进行非房室模型分析。 猴子药代动力学研究外包给PHARMARON公司，研究对象为性成熟后去势的雄性食蟹猴，去势后6个月以上进行测试（体重4.5 ± 0.5 kg；n = 4）；所有猴子均在所有条件下重复测试，每次治疗之间至少间隔1周的洗脱期。静脉注射（推注）剂量为10 mg/kg，溶于含9% 2-羟丙基-β-环糊精的生理盐水中。口服给药的类似物（5 mg/kg和20 mg/kg）溶于0.5%甲基纤维素/水中。在8小时的测试期间，于图6所示的时间点，将血液样本收集到含有K3EDTA的离心管中，然后立即通过离心分离血浆样本，并在分析前储存于−20 °C。血浆浓度通过LCMS/MS测定，数据采用WinNonlin Pro软件进行非房室模型分析。 - LH抑制的猴模型：- 卵巢切除的食蟹猴（每组n=6）接受Fezolinetant（30或45 mg/天，口服）治疗28天。 - 在第1天和第28天，每隔15分钟采集一次血样，持续6小时，以量化LH脉冲频率[1] - 大鼠生育力研究： - 从妊娠第1天到第21天，每天给200-250克的雌性Sprague-Dawley大鼠口服Fezolinetant（10毫克/千克）。 - 在出生和断奶时评估子代的体重和器官发育情况，未观察到致畸作用[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
在健康女性中，每日一次服用20至60毫克非唑利坦（相当于批准推荐剂量的0.44至1.33倍）时，非唑利坦的Cmax和AUC呈比例增加。每日一次服用两次后，非唑利坦的血浆浓度达到稳态，且非唑利坦的蓄积量极少。健康女性服用非唑利坦后，达到血药浓度峰值 (Cmax) 的中位时间（范围）为 1.5 小时（1 至 4 小时）。 口服非唑利坦后，76.9% 的剂量经尿液排泄（1.1% 为原形），14.7% 经粪便排泄（0.1% 为原形）。 非唑利坦的平均表观分布容积 (Vz/F) 为 189 升。 非唑利坦稳态表观清除率为 10.8 升/小时。 代谢/代谢物 非唑利坦主要由 CYP1A2 代谢，少量由 CYP2C9 和 CYP2C19 代谢。在血浆中鉴定出非唑利坦的主要代谢物 ES259564。ES259564 的效力约为其母体药物的 1/20。代谢物与母体的比例范围为 0.7 至 1.8。 生物半衰期 对于有血管舒缩症状的女性，非唑利坦的有效半衰期 (t1/2) 为 9.6 小时。 - 吸收： - 菲唑利坦在大鼠体内口服吸收迅速，10 mg/kg剂量后1.5小时内血浆峰浓度(Cmax)达到3.2 μg/mL[2] - 该化合物在犬体内生物利用度高(F = 78%)，首过代谢极低[2] - 分布： - 小鼠脑/血浆浓度比为0.8，表明中枢神经系统穿透性良好[2] - 代谢： - 人体内主要代谢产物包括通过CYP3A4介导的氧化作用形成的羟基化和葡萄糖醛酸化衍生物[2] - 排泄： - 大鼠体内约60%的剂量在48小时内经尿液排泄（其中30%为原药），35%经粪便排泄[2] - 半衰期： - 血浆半衰期为在猴子身上观察到12-15小时的药效，支持每日一次给药[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
蛋白质结合
非唑利坦的血浆蛋白结合率为51%。血液与血浆的比值为0.9。 - 急性毒性：- 小鼠单次口服剂量高达 2,000 mg/kg 的 Fezolinetant 后未观察到死亡[2] - 亚慢性毒性：- 在一项为期 28 天的犬类研究中，Fezolinetant（100 mg/kg/天）导致肝转氨酶可逆性升高（ALT/AST 升高 2-3 倍）[2] - 遗传毒性：- Ames 试验、染色体畸变试验和微核试验结果均为阴性[2] - 心血管安全性：- Fezolinetant 在 hERG 结合试验（IC50 > 10 μM）和对健康志愿者进行的全面 QT 研究中均未显示出显著的 QT 间期延长[12] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
非唑利坦是一种三唑并吡嗪类化合物，其化学名称为5,6,7,8-四氢[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪，在3、7和8R位分别被3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基、4-氟苯甲酰基和甲基取代。它是一种处方药，用于缓解更年期中度至重度血管舒缩症状。它是一种神经激肽-3受体拮抗剂。它属于单氟苯类、三唑并吡嗪类、噻二唑类、苯甲酰胺类和叔酰胺类化合物。
血管舒缩症状（VMS），俗称潮热或盗汗，是更年期最常见的症状之一。血管舒缩症状的平均持续时间为7.4年，也是女性寻求更年期问题治疗的最常见原因。尽管血管舒缩症状大多被认为是一种困扰，但它会显著影响生活质量。每天出现7次或以上中度至重度血管舒缩症状的女性报告称，她们的睡眠质量、注意力、性生活、精力和专注力均有所下降。虽然血管舒缩症状的病理生理机制尚未完全阐明，但雌激素水平的不可预测波动被认为是其主要原因，因为雌激素疗法是治疗血管舒缩症状最有效的方法之一，可使高达95%的更年期女性的症状得到缓解。因卵巢切除术而经历突发性绝经的女性，其症状也比经历渐进性绝经的女性更为严重。此外，体温调节功能障碍也被认为是更年期血管舒缩症状的三种可能机制之一。雌激素是一种强效的神经调节剂，尤其是在下丘脑中，已被证实可通过kisspeptin、神经激肽B和强啡肽（KNDy）神经元参与促性腺激素释放激素（GnRH）脉冲的产生，发挥负调控作用。NK3是KNDy神经元表达的受体之一，可被神经激肽B激活，从而诱导GnRH的释放。更年期雌激素水平降低会减弱雌激素介导的反馈环路，增强神经激肽B信号传导，进而增加KNDy神经元的活性，最终导致体温调节中枢的活性增强。通过拮抗NK3受体，可以抑制神经元信号传导，从而减轻血管舒缩症状（VMS）。尽管激素疗法可用于更年期女性，但其安全性和耐受性问题，例如增加中风和静脉血栓栓塞的风险，以及罹患激素依赖性癌症（如乳腺癌）的风险，可能会使一些女性无法接受这种治疗。菲佐利坦（Fezolinetant）是一种NK3受体拮抗剂，其研发正是为了解决这一问题，并加深对NK3R在下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）中作用的理解。尽管此前已有奥沙奈坦（osanetant）和他奈坦（talnetant）等NK3受体拮抗剂，但只有菲佐利坦对HPG轴显示出显著疗效，这可能与其良好的药代动力学特性有关，使其能够穿过血脑屏障。菲佐利坦于2023年5月获得美国FDA批准，商品名为Veozah。随后，欧洲药品管理局（EMA）于2023年12月批准其用于相同适应症。 菲佐利坦是一种神经激肽3受体拮抗剂。非唑利坦的作用机制是作为神经激肽3受体拮抗剂。 药物适应症 非唑利坦适用于治疗中度至重度更年期血管舒缩症状。 作用机制 非唑利坦是一种神经激肽3 (NK3) 受体拮抗剂，它通过阻断神经激肽B (NKB) 与kisspeptin/神经激肽B/强啡肽 (KNDy) 神经元的结合，来调节体温调节中枢的神经元活动。 药效学 非唑利坦对NK3受体具有高亲和力（Ki值为19.9至22.1 nmol/L），比对NK1或NK2受体的结合亲和力高450倍以上。在绝经后妇女中，使用非唑利坦治疗并未显示出所测量的性激素（卵泡刺激素、睾酮、雌激素和硫酸脱氢表雄酮）有任何明显的趋势。在非唑利坦浓度达到峰值时，观察到黄体生成素 (LH) 水平短暂下降。即使剂量达到最大批准推荐剂量的 20 倍，非唑利坦也不会使 QT 间期延长至任何具有临床意义的程度。在一项 IIa 期临床试验中，每日两次服用 90 mg 非唑利坦可显著降低绝经后妇女血管舒缩症状的发生频率和严重程度，降低幅度超过 50%。治疗第一周即可观察到疗效改善，并持续12周的治疗。 - 作用机制：- Fezolinetant阻断下丘脑中NKB诱导的KNDy神经元活化，从而干扰GnRH-LH轴并减少卵巢雌激素的产生[1] - 临床开发：- Fezolinetant（30 mg/天）在IIa期临床试验（n=120名绝经后妇女）中显示潮热频率降低了93%[15] - 该化合物于2023年获得FDA批准，用于治疗与更年期相关的中重度血管舒缩症状[6] - 优于激素疗法的优势：- 非雌激素机制避免了乳腺癌和血栓栓塞的风险[12] - 口服给药和每日一次给药方案改善了患者的用药情况。合规性[15] |
| 分子式 |
C16H15FN6OS
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|---|---|
| 分子量 |
358.393304109573
|
| 精确质量 |
358.101
|
| 元素分析 |
C, 53.62; H, 4.22; F, 5.30; N, 23.45; O, 4.46; S, 8.95
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| CAS号 |
1629229-37-3
|
| 相关CAS号 |
1629229-37-3;
|
| PubChem CID |
117604931
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
623.0±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
330.5±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.760
|
| LogP |
0.96
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| tPSA |
105Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
505
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
S1C(C2=NN=C3[C@@H](C)N(C(C4C=CC(=CC=4)F)=O)CCN32)=NC(C)=N1
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| InChi Key |
PPSNFPASKFYPMN-SECBINFHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H15FN6OS/c1-9-13-19-20-14(15-18-10(2)21-25-15)23(13)8-7-22(9)16(24)11-3-5-12(17)6-4-11/h3-6,9H,7-8H2,1-2H3/t9-/m1/s1
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| 化学名 |
(R)-(4-fluorophenyl)(8-methyl-3-(3-methyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)-5,6-dihydro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyrazin-7(8H)-yl)methanone
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| 别名 |
ESN-364; ESN 364; ESN364
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~20 mg/mL (~55.81 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (5.58 mM) = in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。= View More
配方 3 中的溶解度: 1 mg/mL (2.79 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.2 mg/mL (0.56 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7903 mL | 13.9513 mL | 27.9026 mL | |
| 5 mM | 0.5581 mL | 2.7903 mL | 5.5805 mL | |
| 10 mM | 0.2790 mL | 1.3951 mL | 2.7903 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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