| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Spliceosome
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| 体外研究 (In Vitro) |
FR901464是一种有效的剪接体抑制剂。对多种人类癌细胞表现出显著的抗癌活性。[2]
研究人员选择FR901464作为候选化合物，并在FR901464处理的肿瘤细胞中研究了细胞周期转变、染色质状态和内源性基因表达，这些细胞的转录活性升高。在M-8肿瘤细胞中，FR901464诱导细胞周期的G1期和G2/M期阻滞以及基因组DNA的核小体间降解，其动力学与SV40启动子依赖性细胞转录的激活相同。与病毒启动子的有效激活相反，FR901464抑制了M-8细胞中一些诱导内源基因的转录，但不抑制内源基因的转录。这些结果表明FR901464可能诱导染色质结构的动态变化，从而产生较强的抗肿瘤活性，因此可能代表一种新型的癌症化疗药物[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
FR901463、FR901464和FR901465是从假单胞菌2663发酵液中分离得到的新型抗肿瘤物质。在三种小鼠肿瘤系统和一种人肿瘤系统中检测了它们的抗肿瘤活性。三种FR化合物均能延长小鼠腹水肿瘤P388白血病小鼠的寿命（FR901463、FR901464和FR901465的T/C值分别为160%、145%和127%），并在不同的有效剂量范围内抑制人实体瘤A549肺腺癌的生长。在三种FR化合物中，FR901464对这些肿瘤系统的作用最为突出。FR901464还能抑制小鼠实体瘤、结肠癌和甲氧甲胺A纤维肉瘤的生长。［1］
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| 酶活实验 |
体外剪接反应[2]
前mRNA底物来源于腺病毒主要的晚期转录物。通过T7径流转录产生32P-UTP体标记的G（5′）ppp（5′”）G封端底物，然后进行凝胶纯化。从在DMEM/F12 1:1和5%（v/v）新生小牛血清中生长的HeLa细胞制备核提取物。对于剪接反应，10 nM前mRNA底物与60 mM谷氨酸钾、2 mM乙酸镁、2 mM ATP、5 mM磷酸肌酸、0.05 mg mL–1 tRNA和50%（v/v）HeLa核提取物在30°C下孵育。 变性凝胶分析[2] 从体外剪接反应中提取RNA，并在15%（v/v）变性聚丙烯酰胺凝胶上分离。32P标记的RNA物种通过磷酸化可视化，并用ImageQuant软件定量。剪接效率是相对于总RNA的mRNA量，并归一化为DMSO对照反应。抑制剂的IC50值是导致剪接效率降低50%的抑制剂浓度，该值来自剪接效率与化合物浓度的平均图。 |
| 细胞实验 |
天然凝胶分析[2]
如上所述设置拼接反应，并在30°C下孵育4-30分钟。时间点样品保持在冰上，直到所有样品都准备好进行分析。将10μL的剪接反应与10μL天然凝胶加载缓冲液（20 mM Trizma碱、20 mM甘氨酸、25%（v/v）甘油、0.1%（w/v）蓝绿色、0.1%（w/w）溴酚蓝、1 mg mL-1硫酸肝素）混合，并在室温下孵育5分钟，然后加载到2.1%（w/v）低熔点琼脂糖凝胶上。凝胶在72V下运行3.5小时，在Whatman纸上干燥，并暴露于磷化屏幕，用Typhoon扫描仪数字化。 |
| 动物实验 |
从假单胞菌属2663号菌株的发酵液中分离得到三种新型抗肿瘤化合物FR901463、FR901464和FR901465。在三种小鼠肿瘤模型和一种人肿瘤模型中检测了它们的抗肿瘤活性。这三种FR化合物均能延长荷鼠腹水瘤P388白血病小鼠的生存期（FR901463、FR901464和FR901465的T/C值分别为160%、145%和127%），并且在不同的有效剂量范围内抑制人实体瘤A549肺腺癌的生长。在三种FR化合物中，FR901464对这些肿瘤模型的抑制效果最为显著。FR901464还能抑制小鼠实体瘤Colon 38癌和Meth A纤维肉瘤的生长。为了探究三种FR化合物的转录激活能力在抗肿瘤作用中的作用，我们选择FR901464作为候选化合物，并研究了FR901464处理后具有高转录活性的肿瘤细胞的细胞周期转换、染色质状态和内源基因表达。FR901464诱导了M-8肿瘤细胞中特征性的G1期和G2/M期阻滞以及基因组DNA的核间降解，其动力学与SV40启动子依赖性细胞转录的激活相同。与病毒启动子的强效激活相反，FR901464抑制了M-8细胞中一些诱导型内源基因的转录，但并未抑制管家基因的转录。这些结果表明，FR901464可能诱导染色质结构的动态变化，从而产生强大的抗肿瘤活性，因此可能代表一种新型的癌症化疗药物。[1]
药物制剂：** 体内研究中，FR901464溶解并稀释于10%聚氧乙烯化（60 mol）氢化蓖麻油生理盐水溶液（HCO60溶液）中。所有药物均以10 ml/kg体重的剂量给予小鼠。[1] * **小鼠腹水型P388白血病模型：** 于第0天将P388细胞（1 × 10⁶）腹腔注射（ip）至BDF₁小鼠体内。FR901464每日腹腔注射一次，连续4天（第1-4天）。抗肿瘤疗效通过治疗组（T）中位生存时间与对照组（C）中位生存时间的百分比来评估，计算公式为T/C（%）。 [1] * **小鼠实体瘤模型（Colon 38 和 Meth A）：** 对于 Colon 38 模型，于第 0 天将肿瘤碎片（2×2×2 mm）皮下植入 BDF₁ 小鼠体内。FR901464 于第 1、4、7 和 10 天每天静脉注射一次。对于 Meth A 模型，于第 0 天将细胞（1 × 10⁵）皮内接种到 BALB/c 小鼠体内。FR901464 于第 8、11 和 14 天每天静脉注射一次。使用游标卡尺测量肿瘤大小并计算肿瘤重量。疗效以生长抑制率 (1 - T/C) % 表示。 [1] * **人A549肺腺癌异种移植模型（肾包膜下移植试验）：** 于第0天将1 mm³的肿瘤组织块植入BDF₁小鼠的肾包膜下。为防止异种移植排斥反应，于第1、2、5、7、9和12天皮下注射免疫抑制剂FK-506（32 mg/kg）。FR901464于第1、5和9天腹腔注射（每4天一次）。于第14天处死小鼠，测量最终肿瘤大小。疗效以生长抑制率(1 - T/C)%计算。[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
FR901464 是一种具有强效抗癌活性的螺环氧化物，可降低癌基因和抑癌基因的 mRNA 水平。它分离自假单胞菌属 2663 号菌株。它可用作抗菌剂、抗肿瘤剂和细菌代谢产物。它是一种乙酸酯、环状半缩酮、吡喃类化合物、单羧酸酰胺和螺环氧化物。
(2S,3Z)-5-{[(2R,3R,5S,6S)-6-{(2E,4E)-5-[(3R,4R,5R,7S)-4,7-二羟基-7-甲基-1,6-二氧杂螺[2.5]辛-5-基]-3-甲基戊-2,4-二烯-1-基}-2,5-二甲基四氢-2H-吡喃-3-基]氨基}-5-氧代戊-3-烯-2-基乙酸酯已在泰国伯克霍尔德氏菌(Burkholderia thailandensis)中被报道，并有相关数据。 FR901464 (1) 和剪接抑制素A (2) 是剪接体的强效抑制剂。这些化合物对多种人类癌细胞系表现出显著的抗癌活性。本文描述了FR901464、剪接抑制素A及其六种相应非对映异构体的高效对映选择性合成，并评估了它们的剪接活性。剪接抑制素A和FR901464的合成分别采用最长线性序列，包含9步和10步反应。为了构建高度官能化的四氢吡喃A环，我们采用了CBS还原、Achmatowicz重排、Michael加成和还原胺化作为关键步骤。Michael加成反应具有显著的非对映选择性，我们针对不同的底物和反应条件进行了验证。侧链B由光学活性醇制备，随后进行乙酰化和Lindlar催化剂催化的氢化反应。另一个高官能化的四氢吡喃C环由易得的(R)-异亚丙基甘油醛衍生而来，其合成路线包括1,2-加成、环状缩酮化和区域选择性环氧化。这些片段在后期通过酰胺化和交叉复分解反应以汇聚合成的方式偶联在一起。随后合成了六种关键的非对映异构体，以探究FR901464和剪接抑制素A的特定立体化学特征对其体外剪接活性的重要性。[2] |
| 分子式 |
C27H41NO8
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|---|---|
| 分子量 |
507.624
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| 精确质量 |
507.283
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| 元素分析 |
C, 63.89; H, 8.14; N, 2.76; O, 25.21
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| CAS号 |
146478-72-0
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| PubChem CID |
10553647
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.21g/cm3
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| 沸点 |
702.7ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
378.8ºC
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| 蒸汽压 |
7.94E-23mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.553
|
| LogP |
3.152
|
| tPSA |
130.34
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
36
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| 分子复杂度/Complexity |
900
|
| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
O1C([H])([H])C21C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])(O[H])O[C@]([H])(/C(/[H])=C(\[H])/C(/C([H])([H])[H])=C(\[H])/C([H])([H])[C@@]1([H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([C@@]([H])(C([H])([H])[H])O1)N([H])C(/C(/[H])=C(\[H])/[C@]([H])(C([H])([H])[H])OC(C([H])([H])[H])=O)=O)[C@@]2([H])O[H]
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| InChi Key |
PJKVJJDQXZARCA-QHYZBLTGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H41NO8/c1-16(8-11-23-25(31)27(15-33-27)14-26(6,32)36-23)7-10-22-17(2)13-21(19(4)35-22)28-24(30)12-9-18(3)34-20(5)29/h7-9,11-12,17-19,21-23,25,31-32H,10,13-15H2,1-6H3,(H,28,30)/b11-8+,12-9-,16-7+/t17-,18-,19+,21+,22-,23+,25+,26-,27+/m0/s1
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| 化学名 |
[(Z,2S)-5-[[(2R,3R,5S,6S)-6-[(2E,4E)-5-[(3R,4R,5R,7S)-4,7-dihydroxy-7-methyl-1,6-dioxaspiro[2.5]octan-5-yl]-3-methylpenta-2,4-dienyl]-2,5-dimethyloxan-3-yl]amino]-5-oxopent-3-en-2-yl] acetate
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| 别名 |
FR 901464; FR901464; FR901464; 146478-72-0; (2S,3Z)-5-{[(2R,3R,5S,6S)-6-{(2E,4E)-5-[(3R,4R,5R,7S)-4,7-dihydroxy-7-methyl-1,6-dioxaspiro[2.5]oct-5-yl]-3-methylpenta-2,4-dien-1-yl}-2,5-dimethyltetrahydro-2H-pyran-3-yl]amino}-5-oxopent-3-en-2-yl acetate; CHEBI:65915; [(Z,2S)-5-[[(2R,3R,5S,6S)-6-[(2E,4E)-5-[(3R,4R,5R,7S)-4,7-Dihydroxy-7-methyl-1,6-dioxaspiro[2.5]octan-5-yl]-3-methylpenta-2,4-dienyl]-2,5-dimethyloxan-3-yl]amino]-5-oxopent-3-en-2-yl] acetate; FR-901464; [(E,2S)-4-[[(2R,3R,5S,6S)-6-[(2E,4E)-5-[(3R,4R,5R,7S)-4,7-dihydroxy-7-methyl-1,6-dioxaspiro[2.5]octan-5-yl]-3-methylpenta-2,4-dienyl]-2,5-dimethyloxan-3-yl]carbamoyl]but-3-en-2-yl] acetate; CHEMBL494107; FR-901464
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~197.00 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9700 mL | 9.8499 mL | 19.6998 mL | |
| 5 mM | 0.3940 mL | 1.9700 mL | 3.9400 mL | |
| 10 mM | 0.1970 mL | 0.9850 mL | 1.9700 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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