Ginsenoside Rh2

别名: 20(S)-Ginsenoside Rh2; 20(S)-Rh2; Ginsenoside-Rh2;AR-1A4936; AR1A4936; AR 1A4936 人参皂苷 Rh2;人参皂苷-RH2;(R型)人参皂苷RH2;人参皂荚RH2;人参皂苷 S-RH2;人参皂苷RH2(标准品);人参皂甙 Rh2;(20S)人参皂苷 Rh2;(S型)人参皂苷Rh2;20(S)-人参皂苷Rh2;20(S)-人参皂苷-RH2;20(S)-人参皂苷-RH2,20(S)-Ginsenoside-RH2,植物提取物,标准品,对照品;S-人参皂苷Rh2;人参皂甙 Rh2 Ginsenoside Rh2;人参皂苷 Rh2 (S-FORM)(AS);人参皂苷 Rh2 (S-FORM)(P);人参皂苷Rh2 对照品标准品;人参皂苷Rh2 标准品;人参皂苷Rh2(S);人参皂苷Rh2(人参皂苷S- Rh2 、20(S)-人参皂苷RH2);人参皂苷Rh2对照品;分析对照品
目录号: V5262 纯度: ≥98%
人参皂苷Rh2是从人参根中分离出来的天然存在的类固醇糖苷和醛糖还原酶抑制剂,具有多种生物活性。
Ginsenoside Rh2 CAS号: 78214-33-2
产品类别: Caspase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
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纯度: ≥98%

产品描述
人参皂苷Rh2是一种天然存在的类固醇糖苷和醛糖还原酶抑制剂,从人参根中分离出来,具有多种生物效应。人参皂苷 Rh2 可以诱导 Caspase-8 和 Caspase-9 激活。人参皂苷 Rh2 通过多种途径诱导癌细胞凋亡。在阿尔茨海默病模型中,它还能降低 β 淀粉样蛋白水平,诱导 β 细胞增殖,并通过抑制 RANKL 诱导的破骨细胞分化来抑制破骨细胞生成。
生物活性&实验参考方法
靶点
Caspase-8; Caspase-9; Apoptosis
Fas (CD95) death receptor (up-regulation mediated by p53) [1]
p53 tumor suppressor (stabilization) [1]
Mitochondrial apoptosis pathway (induction of BAX/BAK translocation and cytochrome c release) [1]
体外研究 (In Vitro)
人参皂苷 Rh2 可诱导人类癌细胞中两种起始半胱天冬酶(caspase-8 和 caspase-9)的激活。人参皂苷 Rh2 是开发抗肿瘤药物的有希望的候选者,因为它通过多种途径诱导癌细胞死亡。人参皂苷 Rh2 启动 p53 依赖性 Fas 表达,从而激活 caspase-8 和 p53 独立性 caspase-9 介导的内在途径,最终导致癌细胞死亡。人肿瘤细胞系 HeLa、SK-HEP-1、SW480 和 PC-3 用于测定人参皂苷 Rh2 的细胞毒活性。 SK-HEP-1和SW480细胞对人参皂苷Rh2敏感性较低,IC50值分别为3.15 g/mL和4.06 μg/mL,而HeLa细胞的分裂能力明显受到抑制,IC50值为2.52 μg /毫升。 PC-3 细胞对人参皂苷 Rh2 最不敏感,IC50 值为 7.85 μg/mL,是 HeLa 细胞的 3 倍[1]。
Ginsenoside Rh2 (G-Rh2) 在无血清培养基中处理 48 小时后,对人癌细胞系 HeLa (IC50 = 2.52 µg/mL)、SK-HEP-1 (IC50 = 3.15 µg/mL)、SW480 (IC50 = 4.06 µg/mL) 和 PC-3 (IC50 = 7.85 µg/mL) 表现出抗增殖作用,通过 MTT 法测定 [1]
在 HeLa 细胞中,G-Rh2 (7.5 µg/mL) 以时间依赖性方式同时激活 caspase-8、caspase-9 和 caspase-3/7。Caspase-8 活性在 2 小时后显著增加,随后 caspase-9 在 4 小时后被激活。caspase 的切割通过蛋白质印迹确认 [1]
用 G-Rh2 与 caspase-8 或 caspase-9 的特异性肽抑制剂共同处理 HeLa 细胞,显著减弱了细胞凋亡,通过细胞形态学变化和 PARP 切割评估 [1]
G-Rh2 (7.5 µg/mL) 在 HeLa 细胞中以时间依赖性方式上调死亡受体 Fas 和 TNF-R1 以及配体 TNF-α 的 mRNA 和蛋白表达 [1]
在 HeLa 细胞中使用 siRNA 沉默 Fas 可显著减弱 G-Rh2 诱导的 caspase-8 和 caspase-3 激活以及 PARP 切割,而沉默 TNF-R1 则无影响 [1]
G-Rh2 诱导的 Fas 上调和 caspase-8 激活依赖于野生型 p53 状态,这在 p53 未突变的 HeLa 和 SK-HEP-1 细胞中观察到,但在 p53 突变的 SW480 和 PC-3 细胞中则没有 [1]
在 HeLa 细胞中,siRNA 介导的 p53 敲低减弱了 G-Rh2 诱导的 Fas 表达和 caspase-8 激活,但未显著影响 caspase-9 的激活 [1]
G-Rh2 (7.5 µg/mL) 在 HeLa 细胞中诱导促凋亡蛋白 BAX 和 BAK 从细胞质易位至线粒体,导致细胞色素 c 释放到细胞质中,并随后激活 caspase-9 [1]
在 p53 突变的 SW480 细胞中,G-Rh2 同样诱导 BAX/BAK 线粒体易位、线粒体膜电位 (ΔΨm) 耗散、细胞色素 c 释放和 caspase-9 激活,表明存在 p53 非依赖性的内在凋亡通路 [1]
研究指出 G-Rh2 与血清牛血清白蛋白 (BSA) 发生相互作用,且其凋亡活性在血清存在下减弱 [1]
体内研究 (In Vivo)
注射 B16-F10 细胞 15 天后,测量三组携带肿瘤的肿瘤大小。与肿瘤组相比,GL和GH组(其中GL和GH分别表示低剂量或高剂量人参皂苷Rh2注射液)的肿瘤尺寸较小(P<0.05)。根据生存分析,人参皂苷 Rh2 治疗组比未接受治疗的肿瘤组寿命更长,且效果呈剂量依赖性(P<0.05)[2]。
在黑色素瘤小鼠模型中,人参皂苷Rh2 治疗能抑制肿瘤生长并延长小鼠生存期,且呈剂量依赖性,高剂量(0.5 mg/kg)比低剂量(0.2 mg/kg)效果更显著。[2]
人参皂苷Rh2 能增加肿瘤组织中 CD4⁺ 和 CD8a⁺ T 淋巴细胞的浸润。[2]
人参皂苷Rh2 治疗组小鼠分离的脾淋巴细胞对 B16-F10 黑色素瘤细胞表现出增强的细胞毒性。[2]
人参皂苷Rh2 治疗组小鼠的脾淋巴细胞过继转移至初始小鼠,能延缓受体小鼠的肿瘤生长并提高生存率。[2]
酶活实验
在收获细胞之前,将人参皂苷 Rh2 (7.5 μg/mL) 应用于无血清培养基中的 HeLa、SK-HEP-1、SW480 和 PC-3 细胞指定的时间。将 50 微克细胞裂解物与 200 nM Ac-DEVD-AFC、Ac-IETD-AFC 和 Ac-LEHD-AFC 在含有 20 mM HEPES、pH 7.4、100 mM NaCl 的反应缓冲液中于 37°C 孵育 1 小时、10 mM DTT、0.1% CHAPS 和 10% 蔗糖。 535 nm 处的荧光发射和 405 nm 处的激发用于监测反应[1]。
细胞实验
通过使用MTT测定来测定细胞活力,该测定用于计算药物浓度增加引起的生长抑制。在 96 孔板中,将呈指数生长的 1104 个 HeLa、SK-HEP-1、SW480 和 PC-3 细胞一式三份接种。孵育 24 小时后,用浓度递增的人参皂苷 Rh2(1、2.5、5、7.5 和 10 μg/mL)在无血清培养基中处理细胞 48 小时。处理结束时,每孔接受 20 μL MTT (5 mg/mL),然后再孵育 4 小时。 DMSO 用于溶解活细胞产生的甲臜颗粒,ELISA 读数器用于测量 550 nm 处的颜色强度[1]。
MTT法测定细胞活力:将指数生长期的细胞接种于96孔板,在无血清培养基中用不同浓度的G-Rh2处理48小时。加入MTT溶液,孵育4小时,用DMSO溶解甲臜结晶,在550 nm处测量吸光度 [1]
Caspase活性测定:将G-Rh2处理的细胞裂解液与荧光底物(Ac-DEVD-AFC用于caspase-3,Ac-IETD-AFC用于caspase-8,Ac-LEHD-AFC用于caspase-9)在反应缓冲液中于37°C孵育1小时。在激发光405 nm,发射光535 nm处测量荧光强度 [1]
蛋白质印迹分析:将细胞裂解液或分馏样品通过SDS-PAGE分离,转膜,封闭,并用针对caspases、PARP、Fas、TNF-R1、p53、BAX、BAK、细胞色素c等靶点的特异性抗体以及内参(β-肌动蛋白、α-微管蛋白、COX II)进行探测。使用HRP标记的二抗和增强化学发光法进行检测 [1]
RNA纯化和RT-PCR:分离总RNA,进行逆转录,并使用基因特异性引物进行PCR,以分析死亡受体和配体的mRNA水平。β-肌动蛋白作为内参 [1]
线粒体和细胞质分馏:使用线粒体分离试剂盒对细胞进行分馏。制备线粒体和细胞质提取物,并通过蛋白质印迹分析 [1]
JC-1染色检测线粒体膜电位 (ΔΨm):用G-Rh2处理的SW480细胞用JC-1染料染色。使用酶标仪测量荧光;红色荧光(聚集形式)表示ΔΨm完整,绿色荧光(单体形式)表示去极化 [1]
细胞色素c免疫染色:用G-Rh2处理的细胞固定、透化、封闭,与抗细胞色素c一抗孵育,然后与FITC标记的二抗孵育,并通过荧光显微镜观察 [1]
RNA干扰:使用脂质体转染试剂将靶向Fas、TNF-R1或p53的siRNA双链体转染至HeLa细胞。24小时后,用G-Rh2处理细胞,分析裂解液的蛋白表达和caspase活性 [1]
动物实验
小鼠:将3-4周龄的雄性C57BL6小鼠随机分为4组,每组80只,分别为肿瘤组、人参皂苷Rh2组、人参皂苷H2组和对照组。低剂量人参皂苷Rh2组记为GL组,高剂量人参皂苷H2组记为GH组。将B16-F10细胞系接种于肿瘤组、GL组和GH组小鼠体内,使这3组小鼠均形成荷瘤模型。对照组注射等体积的PBS代替药物。GL组和GH组小鼠均在左背部皮下注射人参皂苷Rh2。第5天后,GH组小鼠的剂量为0.5 mg/kg,GL组小鼠的剂量为0.2 mg/kg。肿瘤组和对照组在相同时间点注射PBS。
通过将B16-F10细胞皮下注射到C57BL6小鼠左背部,建立了黑色素瘤小鼠模型。小鼠被随机分为四组:肿瘤组(注射肿瘤细胞)、GL组(低剂量人参皂苷Rh2,0.2 mg/kg)、GH组(高剂量人参皂苷Rh2,0.5 mg/kg)和对照组(注射PBS)。从肿瘤接种后第5天开始,每2天给予人参皂苷Rh2或PBS。定期测量肿瘤大小,并处死小鼠进行组织学和免疫学分析。[2]
在过继转移实验中,于肿瘤接种后15天从供体小鼠中分离脾淋巴细胞,并静脉注射到受体小鼠体内。随后用B16-F10细胞攻击受体小鼠,并监测肿瘤生长和存活情况。[2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
该研究指出,人参皂苷Rh2与血清白蛋白(BSA)相互作用,其促凋亡活性在血清存在下减弱,提示其可能与血清蛋白结合,从而影响其生物利用度和疗效[1]
参考文献

[1]. p53-dependent Fas expression is critical for Ginsenoside Rh2 triggered caspase-8 activation in HeLa cells. Protein Cell. 2014 Mar;5(3):224-34.

[2]. Ginsenoside Rh2 enhances the antitumor immunological response of a melanoma mice model. Oncol Lett. 2017 Feb;13(2):681-685.

其他信息
(20S)-人参皂苷Rh2是一种存在于人参属植物中的人参皂苷,其结构为达玛烷型人参皂苷,在3β、12β和20位(pro-S位)被羟基取代。其中,3位羟基转化为相应的β-D-吡喃葡萄糖苷,并在24-25位引入双键。它具有多种植物代谢产物、抗肿瘤剂、细胞凋亡诱导剂、心脏保护剂、骨密度维持剂和肝脏保护剂的作用。它是一种β-D-葡萄糖苷、12β-羟基甾醇、人参皂苷、四环三萜类化合物和20-羟基甾醇。它来源于达玛烷的氢化物。
人参皂苷Rh2已在三七和人参中被报道,并有相关数据。
人参皂苷Rh2 (G-Rh2) 是一种人参皂苷,属于原人参二醇家族,是从人参根中分离得到的[1]
本研究表明,G-Rh2通过多途径机制诱导人癌细胞凋亡:它通过p53依赖性上调Fas死亡受体和激活caspase-8来激活外源性凋亡途径,同时通过p53非依赖性线粒体BAX/BAK转位、细胞色素c释放和激活caspase-9来激活内源性凋亡途径[1]
即使在p53突变的癌细胞中,G-Rh2也能有效诱导细胞凋亡。通过内源性途径诱导细胞凋亡(例如SW480细胞),凸显了其作为广谱促凋亡剂的潜力[1]
该研究表明,G-Rh2可能通过抑制p53蛋白的泛素介导降解来稳定p53蛋白[1]
基于G-Rh2的药物研发面临的挑战之一是其与血清成分的相互作用,这会减弱其活性,表明需要开发能够克服血清干扰的制剂[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C36H62O8
分子量
622.8727
精确质量
622.444
元素分析
C, 69.42; H, 10.03; O, 20.55
CAS号
78214-33-2
相关CAS号
78214-33-2
PubChem CID
119307
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
726.4±60.0 °C at 760 mmHg
闪点
393.1±32.9 °C
蒸汽压
0.0±5.4 mmHg at 25°C
折射率
1.572
LogP
5.62
tPSA
139.84
氢键供体(HBD)数目
6
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
44
分子复杂度/Complexity
1070
定义原子立体中心数目
15
SMILES
O([H])C1([H])C([H])([H])C2([H])[C@@]3(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C3([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]2(C([H])([H])[H])[C@]2(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([C@](C([H])([H])[H])(C([H])([H])C([H])([H])/C(/[H])=C(\C([H])([H])[H])/C([H])([H])[H])O[H])C21[H])OC1([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])O[H])O1)O[H])O[H])O[H]
InChi Key
CKUVNOCSBYYHIS-IRFFNABBSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H62O8/c1-20(2)10-9-14-36(8,42)21-11-16-35(7)27(21)22(38)18-25-33(5)15-13-26(32(3,4)24(33)12-17-34(25,35)6)44-31-30(41)29(40)28(39)23(19-37)43-31/h10,21-31,37-42H,9,11-19H2,1-8H3/t21-,22+,23+,24-,25+,26-,27-,28+,29-,30+,31-,33-,34+,35+,36-/m0/s1
化学名
(2R,3R,4S,5S,6R)-2-[[(3S,5R,8R,9R,10R,12R,13R,14R,17S)-12-hydroxy-17-[(2S)-2-hydroxy-6-methylhept-5-en-2-yl]-4,4,8,10,14-pentamethyl-2,3,5,6,7,9,11,12,13,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol
别名
20(S)-Ginsenoside Rh2; 20(S)-Rh2; Ginsenoside-Rh2;AR-1A4936; AR1A4936; AR 1A4936
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 50~100 mg/mL (80.3~160.6 mM)
Ethanol: ~100 mg/mL (~160.6 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6055 mL 8.0274 mL 16.0547 mL
5 mM 0.3211 mL 1.6055 mL 3.2109 mL
10 mM 0.1605 mL 0.8027 mL 1.6055 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Effect of ginsenoside Rh2 treatment. (A) Tumor sizes in G-L group and G-H group were reduced compared with the tumor group (P<0.05). Oncol Lett . 2017 Feb;13(2):681-685.
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