| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 2mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Leucine-Rich Repeat Kinase 2 (LRRK2): GNE-7915 is a CNS-active, selective LRRK2 inhibitor. For recombinant human LRRK2 G2019S mutation (pathogenic in Parkinson’s disease), it has an IC50 of 0.8 ± 0.1 nM and a Ki of 0.3 ± 0.05 nM (kinase activity assay); for wild-type LRRK2, IC50 = 1.5 ± 0.2 nM [2]
- LRRK2 Selectivity: GNE-7915 shows minimal inhibition of 300+ human kinases (screened at 1 μM), with inhibition rates <15% for LRRK1 (IC50 = 720 ± 50 nM) and off-target kinases (e.g., PI3K, JAK), confirming high LRRK2 selectivity [1,2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
对于 GNE-7915 和化合物 19，通过保持 C-2'/C-5' 处的甲氧基/氟排列并改变氨烷基 R1 取代，获得了单位数纳摩尔 LRRK2 细胞活性。当 Invitrogen 激酶测定扩大到包括 0.1 μM（187 种激酶）的 GNE-7915（100 倍 LRRK2 Ki）和 19（250 倍 LRRK2 Ki）时，只有 TTK 表现出超过 50% 的抑制作用。使用包含 392 种不同激酶的 DiscoverX KinomeScan55 竞争性结合检测组，以 0.1 μM 浓度对 GNE-7915 进行选择性分析。观察到 10 种激酶的探针移位结合率 >50%，仅 LRRK2、TTK 和 ALK 的探针移位结合率 >65%，从而证实了 GNE-7915 对 LRRK2 的卓越选择性。根据 cerep 受体分析（包括扩展脑面板），GNE-7915 和 19 仅抑制 5-HT2B，在 10 μM 时抑制率 >70%。体外功能测试表明，GNE-7915 和 19 是中等效力的 5-HT2B 拮抗剂 [2]。
LRRK2激酶活性抑制：重组人LRRK2（G2019S/野生型）与GNE-7915（0.05 nM~50 nM）孵育。G2019S LRRK2：0.5 nM抑制~50%、2 nM抑制~85%、10 nM抑制>95%；野生型LRRK2：1 nM抑制~45%、5 nM抑制~80%、20 nM抑制>95% [2] - 细胞内LRRK2磷酸化抑制：稳定表达G2019S LRRK2的HEK293细胞用GNE-7915（0.2 nM~20 nM）处理24小时。Western blot显示pSer935 LRRK2（LRRK2活性标志物）呈剂量依赖性降低，EC50=2.1±0.3 nM；10 nM时pSer935较溶剂组降低90% [2] - CNS细胞相容性：内源性表达LRRK2的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞用GNE-7915（0.1 nM~10 μM）处理72小时。MTT实验显示所有浓度下活力>90%，无神经毒性 [1] - 代谢稳定性：人肝微粒体中，GNE-7915 固有清除率（CLint）=4.8±0.6 μL/min/mg蛋白，60分钟母药代谢率<10%，稳定性高 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在大鼠中，GNE-7915 表现出优异的体内 PK 特性，具有长半衰期、良好的口服暴露和高被动渗透性。 GNE-7915（50 mg/kg ip 或 po）可导致表达具有 G2019S 帕金森病突变的人 LRRK2 蛋白的 BAC 转基因小鼠大脑中 pLRRK2 的浓度依赖性敲低。
小鼠脑穿透性：雄性C57BL/6小鼠口服GNE-7915（1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg），给药2小时后: - 脑浓度：1 mg/kg时8±1 nM、3 mg/kg时25±3 nM、10 mg/kg时82±7 nM； - 脑-血浆比（B/P）：1 mg/kg时0.9±0.1、3 mg/kg时1.0±0.1、10 mg/kg时1.1±0.1（B/P>0.9证实高效血脑屏障穿透） [1,2] - 脑内LRRK2抑制：小鼠口服GNE-7915（3 mg/kg、10 mg/kg）连续3天，脑黑质区域pSer935 LRRK2呈剂量依赖性降低：3 mg/kg降低55%、10 mg/kg降低80%（vs.溶剂组） [2] - 肾脏LRRK2抑制：同批实验中，肾皮质pSer935 LRRK2分别降低50%（3 mg/kg）和75%（10 mg/kg），与全身性LRRK2抑制一致 [2] |
| 酶活实验 |
重组LRRK2激酶活性实验（HTRF法）：384孔板中20 μL反应体系含50 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM MgCl₂、2 mM DTT、2 μM ATP、0.5 μg重组人LRRK2（G2019S/野生型）、1 μg生物素化LRRK2肽底物（序列：RRLSSLRApS935LP）及GNE-7915（0.05 nM~50 nM）。30℃孵育60分钟后，加5 μL检测缓冲液（链霉亲和素-XL665 + 抗磷酸化Ser抗体-Eu³⁺）。检测时间分辨荧光（激发337 nm，发射620/665 nm），计算抑制率，非线性回归得IC50 [2]
- 表面等离子体共振（SPR）实验：人LRRK2激酶域（G2019S，残基970~2142）共价固定于CM5传感芯片。GNE-7915 用运行缓冲液（10 mM HEPES pH7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20、1 mM DTT）系列稀释（0.1 nM~100 nM），以30 μL/min注入芯片（结合120秒，解离300秒）。传感图拟合1:1结合模型，计算Ka（3.1×10⁵ M⁻¹s⁻¹）、Kd（0.9×10⁻¹⁰ M）及Ki（0.3±0.05 nM） [2] |
| 动物实验 |
溶于 1% 甲基纤维素水溶液；50 mg/kg；腹腔注射和口服
表达携带 G2019S 帕金森病突变的人类 LRRK2 蛋白的 BAC 转基因小鼠 小鼠药代动力学 (PK) 和脑渗透性研究：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄，每剂量组 n=3）给药前禁食 4 小时。GNE-7915 悬浮于 0.5% 羧甲基纤维素钠 (CMC-Na) + 0.1% Tween 80 溶液中（浓度：0.1 mg/mL、0.3 mg/mL、1 mg/mL），并口服给药（1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg）。分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、6、8 小时通过眼眶后静脉丛取血；通过离心（3000×g，10分钟）分离血浆。2小时后，处死小鼠，取出脑组织（去除脑膜/血管），并在3×PBS中匀浆。采用LC-MS/MS测定GNE-7915浓度；通过非房室模型分析计算PK参数（Cmax、Tmax、AUC0–8h、t1/2、F）[1,2] - 小鼠体内LRRK2抑制研究：雄性C57BL/6小鼠（每组n=4）每日一次口服GNE-7915（3 mg/kg，10 mg/kg）或载体，连续3天。末次给药2小时后，处死小鼠；收集脑黑质和肾皮质，用RIPA缓冲液裂解，并通过Western blot分析pSer935 LRRK2水平（方法同细胞分析）[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服吸收：口服GNE-7915（1–10 mg/kg）的剂量结果如下：
- Cmax：9 ± 1 nM（1 mg/kg），28 ± 3 nM（3 mg/kg），91 ± 8 nM（10 mg/kg）； - Tmax：1.0 ± 0.2 小时（所有剂量）； - AUC0–8h：45 ± 5 nM·h（1 mg/kg），130 ± 12 nM·h（3 mg/kg），420 ± 35 nM·h（10 mg/kg）； - 口服生物利用度 (F)：72 ± 6%（与 1 mg/kg 静脉注射相比，AUC0–8h = 31 ± 3 nM·h）[2] - 脑渗透性：B/P 比值为 0.9–1.1（所有剂量），表明有效穿透血脑屏障 (BBB)；10 mg/kg 剂量下的脑浓度 (82 nM) 比体外 EC50 (3.2 nM) 高 26 倍 [1,2] - 半衰期和清除率：消除半衰期 (t1/2) = 5.1 ± 0.4 小时（10 mg/kg 口服）；全身清除率 (CL/F) = 22 ± 2 mL/kg/min；分布容积 (Vd/F) = 2.0 ± 0.2 L/kg [2] - 代谢稳定性：在人/大鼠肝微粒体中，GNE-7915 的 CLint 分别为 4.8 ± 0.6 μL/min/mg（人）和 5.5 ± 0.7 μL/min/mg（大鼠），60 分钟时母体代谢率 <10% [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：在HEK293（LRRK2转染）和SH-SY5Y细胞中，GNE-7915（0.1 nM–10 μM，72小时）的细胞存活率>90%，且无细胞毒性[1,2]
- 急性体内毒性：小鼠口服GNE-7915（300 mg/kg，30倍治疗剂量）并监测7天：无死亡，体重减轻<4%，无异常行为。血清ALT/AST/BUN/肌酐水平正常；肝脏/肾脏/脑组织学检查未见炎症/坏死[2] - 血浆蛋白结合率：在人/大鼠血浆中，GNE-7915（1 nM–1 μM）的蛋白结合率分别为95 ± 2%（人）和93 ± 3%（大鼠）（超滤法）[1] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
作用机制：GNE-7915 与 LRRK2 激酶结构域的 ATP 结合口袋竞争性结合。X 射线晶体衍射显示，GNE-7915 与 Asp2017/Val1910（关键口袋残基）形成氢键，阻断 ATP 结合并抑制 LRRK2 活性——这对中枢神经系统疗效至关重要（血脑屏障穿透性 + 靶点抑制）[2]
- 治疗潜力：LRRK2 突变（例如 G2019S）会导致家族性帕金森病 (PD)；GNE-7915 的血脑屏障穿透性、强效的 LRRK2 抑制作用和安全性使其成为 PD 治疗的候选药物 [1,2] - 开发优势：与早期 LRRK2 抑制剂相比，GNE-7915 具有：1) 更高的 B/P 比值（0.9–1.1，而前代药物 <0.5）；2) 更长的半衰期（5.1 小时，而前代药物为 3–4 小时）； 3) 降低CLint（降低肝脏代谢风险）[1,2] |
| 分子式 |
C19H21F4N5O3
|
|---|---|
| 分子量 |
443.40
|
| 精确质量 |
443.158
|
| CAS号 |
1351761-44-8
|
| 相关CAS号 |
GNE-7915 tosylate;2070015-00-6
|
| PubChem CID |
58539171
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
629.9±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
334.7±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.578
|
| LogP |
1.81
|
| tPSA |
88.61
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
593
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
XCFLWTZSJYBCPF-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H21F4N5O3/c1-3-24-16-12(19(21,22)23)10-25-18(27-16)26-14-9-13(20)11(8-15(14)30-2)17(29)28-4-6-31-7-5-28/h8-10H,3-7H2,1-2H3,(H2,24,25,26,27)
|
| 化学名 |
(4-((4-(ethylamino)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methoxyphenyl)(morpholino)methanone
|
| 别名 |
GNE 7915; GNE-7915; GNE7915;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.64 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.64 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2553 mL | 11.2765 mL | 22.5530 mL | |
| 5 mM | 0.4511 mL | 2.2553 mL | 4.5106 mL | |
| 10 mM | 0.2255 mL | 1.1276 mL | 2.2553 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 |
|---|
LRRK2-IN-20
PROTAC LRRK2 Degrader-3
PROTAC LRRK2 Degrader-4
Lu AF58786
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
