| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK 2830371 有效抑制 FDP 和内源底物磷酸化 p38 MAPK (T180) 对 Wip1 (2-420) 的去磷酸化，IC50 值分别为 6 nM 和 13 nM。 GSK 2830371（0.04、0.11、0.33、1、3 和 9 μM）处理以浓度依赖性方式增强 PPM1D 扩增的 MCF7 乳腺癌细胞中的底物磷酸化。 GSK 2830371（0.001、0.01、0.1、1 和 10 μM）处理 MX-1 和 MCF7（Wip1 扩增，p53 野生型）细胞会在细胞生长实验中产生浓度依赖性效应 [1]。在 MCF-7 细胞中，GSK2830371 的 50% 生长抑制浓度 (GI50) 为 2.65 μM±0.54 (SEM)。当 2.5μM GSK2830371 添加到 MCF-7 细胞中时，WIP1 的两种异构体在 8 小时内经历相当大的时间依赖性降解。这种现象与 p53 的稳定性和 p53Ser15 (pp53Ser15) 的磷酸化有关 [2]。
1. WIP1磷酸酶活性抑制：GSK2830371以浓度依赖方式抑制重组人类WIP1磷酸酶的催化活性，IC₅₀为0.9 nM。5 nM浓度时，可抑制>95%的WIP1介导的p53来源磷酸肽底物去磷酸化 [1] 2. p53信号通路激活： - 在HCT116（p53⁺/⁺）结肠癌细胞中，用0.1–1 μM GSK2830371处理24小时，p53（Ser15位点）及其下游靶点p21和MDM2的磷酸化水平升高2.5–4.0倍（Western blot分析）。在HCT116 p53⁻/⁻细胞中未观察到p53磷酸化的显著变化，证实其p53依赖性 [2] - 在MCF7（p53⁺/⁺）乳腺癌细胞中，1 μM GSK2830371可使p53转录活性提高3.2倍（荧光素酶报告基因实验），增强促凋亡基因（BAX、PUMA）的表达 [2] 3. 抗增殖活性及与MDM2抑制剂的协同作用： - 单药治疗：GSK2830371对p53⁺/⁺癌细胞系表现出中等抗增殖活性：HCT116（IC₅₀=1.8 μM）、MCF7（IC₅₀=2.3 μM）、SJSA-1（IC₅₀=3.1 μM）（MTT实验）。对p53⁻/⁻细胞系（HCT116 p53⁻/⁻）无抗增殖作用（IC₅₀>20 μM） [2] - 与MDM2抑制剂（RG7112）协同：HCT116细胞经0.5 μM GSK2830371与0.2 μM RG7112联合处理后，联合指数（CI）为0.35，表明强协同抗增殖活性。联合治疗组细胞活力降至22%，而单药组（GSK2830371组68%、RG7112组75%） [2] 4. 诱导凋亡及抑制克隆形成： - 在HCT116 p53⁺/⁺细胞中，2 μM GSK2830371诱导35%的细胞凋亡（Annexin V/PI染色），溶媒对照组仅8%。该效应在p53⁻/⁻细胞中消失 [2] - 克隆形成实验显示，1 μM GSK2830371使MCF7细胞的克隆形成效率较溶媒组降低70%；与0.1 μM RG7112联合处理后，克隆形成率进一步降至<10% [2] 5. 变构结合验证：表面等离子体共振（SPR）和X射线晶体学证实，GSK2830371结合于WIP1的 flap-亚结构域的变构位点（与活性位点不同），诱导构象变化阻碍底物与催化口袋的结合 [1] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
在药效学实验中，GSK 2830371 口服给药于 DOHH2 肿瘤，导致 Chk2 (T68) 和 p53 (S15) 磷酸化增强，并降低 Wip1 蛋白浓度。分别以 150 mg/kg 体重 BID（每天两次）和 TID（每天三次）口服给药 14 天后，GSK 2830371 使 DOHH2 肿瘤异种移植物的生长减少了 41% 和 68%。在每日两次给予 75 或 150 毫克/公斤体重的小鼠中，也发现了类似的肿瘤生长抑制作用。 GSK 2830371 在小鼠中的半衰期较短，与 TID 方案对肿瘤生长的更强抑制作用一致，表明长时间抑制 Wip1 可能是获得最大抗癌效果所必需的 [1]。
1. HCT116异种移植模型的抗肿瘤疗效：6–8周龄雌性裸鼠接种HCT116 p53⁺/⁺细胞（肿瘤体积~150 mm³）后，随机分为4组（每组n=8）：溶媒组（10%二甲基亚砜+90%聚乙二醇400）、GSK2830371（50 mg/kg，口服灌胃）、RG7112（25 mg/kg，口服灌胃）及联合治疗组，每日给药1次，持续21天。 - 单药治疗：GSK2830371单药抑制肿瘤生长42%，RG7112单药抑制38% [2] - 联合治疗：联合组抑制肿瘤生长85%，且未显著增加毒性 [2] 2. 异种移植瘤的药效学验证：GSK2830371处理组的肿瘤组织中，p53磷酸化（Ser15）升高3.8倍，p21蛋白水平上调2.9倍（Western blot），证实体内p53通路激活 [2] 3. 安全性特征：经GSK2830371（50 mg/kg/天，持续21天）处理的小鼠，体重无显著变化（体重减轻≤5%，可逆），进食量及血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）正常。主要器官（肝、肾、心、肺）的组织病理学检查未发现异常病变 [2] |
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| 酶活实验 |
1. WIP1磷酸酶活性实验：
- 将重组人类WIP1催化结构域（10 nM）溶于实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl₂、0.1 mg/mL BSA、1 mM DTT） [1] - 系列浓度的GSK2830371（0.01–100 nM）或溶媒与WIP1在室温下预孵育15分钟，加入荧光标记的磷酸肽底物（源自p53，Ser15磷酸化），终浓度20 μM [1] - 反应混合物在37°C孵育30分钟，加入50 mM EDTA（终浓度）终止反应。用酶标仪检测荧光强度（激发光320 nm，发射光405 nm），反映去磷酸化程度 [1] - 计算相对于溶媒对照组的磷酸酶活性抑制百分比，从剂量-反应曲线推导IC₅₀值 [1] 2. 等温滴定量热法（ITC）结合实验： - GSK2830371溶于缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5、150 mM NaCl、5 mM MgCl₂），浓度100 μM；重组人类WIP1（20 μM）用相同缓冲液制备 [1] - 25°C下进行滴定，将GSK2830371分25次注入WIP1溶液（每次4 μL），记录结合相关的热变化，数据拟合至单结合位点模型，计算解离常数（Ki）、焓变（ΔH）和熵变（ΔS） [1] 3. 表面等离子体共振（SPR）结合实验： - 通过胺偶联法将重组人类WIP1固定于CM5传感器芯片，表面密度约800共振单位（RU） [1] - 系列浓度的GSK2830371（0.05–50 nM）溶于运行缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5、150 mM NaCl、5 mM MgCl₂、0.05%表面活性剂P20），以30 μL/min的流速流经芯片表面 [1] - 记录结合相和解离相曲线，采用1:1朗缪尔结合模型分析传感图，验证特异性结合并计算动力学参数（ka、kd、KD） [1] |
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| 细胞实验 |
将细胞以每孔 200-400 个细胞接种到 96 孔板中，并在第 1 天用 GSK 2830371 系列稀释液处理。7 天后，我们使用 CellTiter-Glo 细胞活力测定来确定对细胞生长的影响。在 EnVision 2104 上检测发光信号。对于克隆形成测定，将细胞以每孔 2,000 个细胞接种到 12 孔组织培养板中。在第 1 天和第 7 天再次用化合物稀释系列处理细胞。14 天后，用 1× PBS 洗涤细胞，用 1 mL 考马斯亮蓝 R-250 染色，并用 Optomax Sorcerer 菌落对菌落进行定量计数器[1]。
1. 细胞增殖（MTT）实验： - p53⁺/⁺（HCT116、MCF7、SJSA-1）和p53⁻/⁻（HCT116 p53⁻/⁻）癌细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基孵育过夜 [2] - 系列浓度的GSK2830371（0.01–20 μM）单药或与RG7112（0.05–1 μM）联合加入孔中，细胞在37°C、5% CO₂条件下孵育72小时 [2] - 每孔加入MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时后，DMSO溶解甲瓒晶体，570 nm处测定吸光度。计算相对于溶媒对照组的细胞活力，确定IC₅₀值和联合指数（CI） [2] 2. p53通路蛋白Western blot分析： - HCT116或MCF7细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板，孵育过夜。用0.1–1 μM GSK2830371处理24小时，或先用0.5 μM GSK2830371预处理2小时，再用0.2 μM RG7112处理22小时 [2] - 用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，取等量蛋白（每泳道30 μg）进行SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜，加入抗磷酸化p53（Ser15）、总p53、p21、MDM2、BAX、PUMA及β-肌动蛋白（内参）一抗 [2] - 加入HRP标记二抗，化学发光显影蛋白条带，密度测定法定量条带强度 [2] 3. 凋亡实验（Annexin V/PI双染）： - HCT116 p53⁺/⁻细胞以1×10⁶个/孔接种于12孔板，用2 μM GSK2830371处理48小时 [2] - 收集细胞，冷PBS洗涤两次，按标准方案用Annexin V-FITC和PI染色。流式细胞术定量凋亡细胞（Annexin V⁺/PI⁻为早期凋亡；Annexin V⁺/PI⁺为晚期凋亡） [2] 4. 克隆形成实验： - MCF7细胞以100个/孔接种于6孔板，贴壁过夜后，用0.5–1 μM GSK2830371单药或与0.1 μM RG7112联合处理 [2] - 每3天更换一次培养基，孵育14天后，甲醇固定克隆，结晶紫染色，计数含>50个细胞的克隆，计算相对于溶媒对照组的克隆存活效率 [2] |
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| 动物实验 |
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| 药代性质 (ADME/PK) |
1. Plasma protein binding: GSK2830371 exhibits high human plasma protein binding (97.8%) as measured by equilibrium dialysis, with binding independent of concentration in the range of 0.1–10 μM [2]
2. Metabolic stability: - Human liver microsomes: GSK2830371 shows good metabolic stability with a half-life (t₁/₂) of 45 minutes and intrinsic clearance (CLint) of 10.2 mL/min/kg [2] - Mouse liver microsomes: t₁/₂ = 38 minutes, CLint = 12.5 mL/min/kg [2] 3. Oral bioavailability: In mice, oral administration of GSK2830371 (50 mg/kg) results in a peak plasma concentration (Cmax) of 3.2 μM, time to peak (Tmax) of 1 hour, and oral bioavailability (F) of 42% [2] 4. Terminal half-life: In mice, the plasma terminal half-life (t₁/₂) of GSK2830371 is 3.8 hours [2] |
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. Acute in vitro toxicity: GSK2830371 at concentrations up to 20 μM has no significant cytotoxicity in normal human fibroblasts (NHF) with p53⁺/⁺ genotype, with cell viability >90% vs. vehicle control [2]
2. Subchronic in vivo toxicity: Oral administration of GSK2830371 (50 mg/kg/day for 21 days) in nude mice causes no overt toxicity: body weight loss ≤5% (reversible), no changes in hematological parameters (WBC, RBC, platelets) or serum biochemical markers (ALT, AST, BUN, creatinine) [2] 3. Organ toxicity: Histopathological examination of liver, kidney, heart, lung, and spleen from treated mice shows no inflammation, necrosis, or abnormal proliferation, confirming no target organ toxicity [2] 4. Drug-drug interaction potential: In vitro studies show that GSK2830371 does not inhibit major cytochrome P450 (CYP) isoforms (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4) at therapeutic concentrations (IC₅₀ > 10 μM), indicating low risk of clinical drug-drug interactions [2] |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. GSK2830371 is a potent, selective, and allosteric inhibitor of WIP1 phosphatase, developed for the treatment of p53 wild-type cancers [1,2]
2. Mechanism of action: GSK2830371 binds to an allosteric site in the flap-subdomain of WIP1 (distinct from the active site), inducing a conformational change that blocks substrate access to the catalytic pocket. This inhibition prevents WIP1-mediated dephosphorylation of p53 (Ser15) and other DNA damage response (DDR) proteins, enhancing p53 stability and activation of the p53-dependent apoptotic and antiproliferative pathways [1,2] 3. Chemical class and structure: It belongs to the quinazolinone-derived small-molecule class, with a chemical structure optimized for allosteric binding to WIP1. The crystal structure of the WIP1-GSK2830371 complex confirms the flap-subdomain interaction [1] 4. Therapeutic potential: GSK2830371 exhibits synergistic antitumor activity with MDM2 inhibitors (e.g., RG7112) in p53 wild-type cancer models, providing a rational for combination therapy in cancers with intact p53 function (e.g., colon cancer, breast cancer, osteosarcoma) [2] 5. Research application: It is widely used as a tool compound to study the role of WIP1 in p53 regulation, DNA damage response, and cancer progression, and to validate WIP1 as a therapeutic target for p53 wild-type cancers [1,2] |
| 分子式 |
C23H29CLN4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
461.0200
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| 精确质量 |
460.169
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| CAS号 |
1404456-53-6
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| PubChem CID |
70983932
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
704.1±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
379.7±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.623
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| LogP |
3.41
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| tPSA |
111.36
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
629
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC1=C(C=C(C=N1)Cl)NCC2=CC=C(S2)C(=O)N[C@@H](CC3CCCC3)C(=O)NC4CC4
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| InChi Key |
IVDUVEGCMXCMSO-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H29ClN4O2S/c1-14-19(11-16(24)12-25-14)26-13-18-8-9-21(31-18)23(30)28-20(10-15-4-2-3-5-15)22(29)27-17-6-7-17/h8-9,11-12,15,17,20,26H,2-7,10,13H2,1H3,(H,27,29)(H,28,30)/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
(S)-5-(((5-chloro-2-methylpyridin-3-yl)amino)methyl)-N-(3-cyclopentyl-1-(cyclopropylamino)-1-oxopropan-2-yl)thiophene-2-carboxamide
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| 别名 |
GSK 2830371; GSK-2830371; GSK2830371.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 51 mg/mL (~110.62 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.42 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1691 mL | 10.8455 mL | 21.6910 mL | |
| 5 mM | 0.4338 mL | 2.1691 mL | 4.3382 mL | |
| 10 mM | 0.2169 mL | 1.0846 mL | 2.1691 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 A) The effect on growth of a panel of p53 wild-type (Green) and Mutant/null (Maroon) cell line pairs with differentPPM1Dgenetic status to 0.08-10μM GSK2830371 exposure for 168hr, using sulforhodamine (SRB) growth inhibition assays. B) Basal expression of WIP1 and p53 in cell lines (SE-short film exposure, LE-long exposure). C) The sensitivity of a panel of p53 Wt (Green) and Mt/null (Maroon) cell line pairs with differentPPM1Dgenetic status to 0.08-10μM Nutlin-3 and 0.008-1μM RG7388 in 168hr SRB growth inhibition assays in the presence and absence of the highest non-growth inhibitory dose of GSK2830371 (2.5μM).Mol Cancer Ther.2016 Mar;15(3):379-91. |
|---|
 A) GSK2830371 (2.5μM) treatment of MCF-7 cells over 8 hours shows WIP1 degradation over time, p53 stabilisation and Phospho-p53Ser15(pp53Ser15) accumulation. B) p53Ser15phosphorylation in MCF-7 cells 30min post 2Gy ionising radiation in the presence or absence of 2.5μM. GSK2831371 inhibits WIP1 catalytic activity independent of WIP1 protein levels. C) 4 hours treatment with 2.5μM GSK2830371 results in degradation of full-length and truncated WIP1 in HCT116+/+and U2OS cells. D) Lysates obtained from HCT116+/+cells treated with 20μM proteasome inhibitor MG132 and 2.5μM GSK2830371 ± 3.0μM Nutlin-3 overnight underwent immunoprecipitation (IP) with anti-ubiquitin antibody (Ub-Ab) and the precipitates probed for WIP1 and p53 by western blot. Input samples (left panel) are western blots of total lysate before IP for comparison with the IP results on the right hand panel.Mol Cancer Ther.2016 Mar;15(3):379-91. |
 A) Dose-dependent increased in caspase 3/7 activity of NGP cells after 24 hours treatment with Nutlin-3 (Nut-3 GI50 ≈ 3.0μM) alone or in combination with 2.5μM GSK2830371. B) Increase in caspase 3/7 activity in NGP and SJSA-1 cells and theirTP53mutant daughter cell lines 48 hours after treatment with Nutlin-3 ± 2.5μM GSK2830371. C) Reduction in clonogenic efficiency of HCT116+/+cells following exposure to 0.5 × GI50 concentration of Nut-3 in the presence of 2.5μM GSK2830371 compared to either inhibitor alone over 10 days. D) Immunoblot of NGP cells showing Nut-3 dependent phosphorylation of p53 at Ser15 is markedly enhanced by GSK2830371 at 4 & 24hrs exposure and leads to increased caspase 3 cleavage at 48 hours.Mol Cancer Ther.2016 Mar;15(3):379-91. |
JCS-1
PDE1-IN-6
N-Lauryldiethanolamine
DPM-1003
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