| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
In GSK180 primary human hepatocytes, endogenous KMO activity (IC50=2.6 μM). In GSK180 primary human hepatocytes, endogenous KMO activity (IC50=2.6 μM). In GSK180 primary human hepatocytes, endogenous KMO has an IC50 value of 7 μM, which is marginally less potent than the human enzyme [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 GSK180 原代人肝细胞中，内源 KMO 活性 (IC50=2.6 μM)。在 GSK180 原代人肝细胞中，内源 KMO 活性 (IC50=2.6 μM)。在 GSK180 原代人肝细胞中，内源性 KMO 的 IC50 值为 7 μM，其效力略低于人酶 [1]。
GSK180 在生化实验中能有效抑制人KMO，IC50约为6 nM (平均pIC50 8.2 ± 0.17，n=103)。[1] 在稳定表达人KMO的HEK293细胞实验中，GSK180 抑制酶的IC50为2.0 µM (平均pIC50 5.7 ± 0.15，n=4)。[1] 在表达内源性KMO活性的人原代肝细胞中，GSK180 抑制活性的IC50为2.6 µM。[1] GSK180 抑制在HEK293细胞中表达的大鼠Kmo，IC50为7 µM (平均pIC50 5.2 ± 0.09，n=5)。[1] GSK180 的抑制作用与犬尿氨酸底物竞争。[1] GSK180 对色氨酸途径中的其他酶（犬尿氨酸酶、犬尿氨酸氨基转移酶1型和2型）、超过50种不相关蛋白以及一系列酸性蛋白的活性可忽略不计。[1] GSK180 对荧光假单胞菌KMO的效力（IC50 = 500 nM）显著低于对人KMO的效力（IC50 = 6 nM）。[1] 3.2 Å分辨率的X射线共晶结构显示，GSK180 结合在荧光假单胞菌KMO的催化位点内。其羧酸盐与Arg84形成盐桥，并与Tyr98和Asn369形成氢键。其恶唑烷酮羰基与Tyr404形成氢键，5-氯原子与Phe238形成π-相互作用。[1] 给野生型小鼠施用GSK180会导致血浆犬尿氨酸升高，证实该效应源于KMO抑制。它还会导致野生型和Kmo缺失小鼠的循环色氨酸水平显著降低，并增加Kmo缺失小鼠的犬尿喹啉酸，这表明存在与直接KMO抑制无关的额外效应。[1] GSK180 以浓度依赖性方式置换血浆蛋白结合的色氨酸。[1] GSK180 穿过人工膜的被动渗透性极低（< 3 x 10^-6 cm/s，n=3），细胞内药物浓度比细胞外浓度低30倍以上。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GSK180适合静脉注射[1]。
在Kmo缺失小鼠中，与野生型对照相比，实验性急性胰腺炎（AP）引起的胰外器官（肺、肾、肝）损伤较轻，表现为肺组织学损伤减轻、肺和肾凋亡细胞减少、血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高幅度显著减小。胰腺本身的损伤在两种品系间无差异。[1] 在大鼠AP模型中，治疗性施用GSK180（AP诱导后1小时开始静脉推注+输注）产生了与KMO抑制一致的生化变化（血浆犬尿氨酸和犬尿喹啉酸升高，血浆色氨酸和3-羟基犬尿氨酸降低）。[1] 在同一大鼠AP模型中，GSK180 治疗基本上阻止了急性肺损伤特征：减轻了肺组织病理学变化、中性粒细胞浸润、支气管肺泡灌洗液蛋白渗漏、血清KL-6水平和细胞凋亡。[1] 在大鼠AP模型中，GSK180 治疗还能防止急性肾损伤，显著减少肾小管细胞凋亡，并阻止血清肌酐和尿素升高。[1] GSK180 治疗不影响大鼠AP模型中胰腺组织学损伤的严重程度或血清淀粉酶的升高。[1] 在大鼠中，单次静脉推注GSK180（27 mg/kg）导致循环犬尿氨酸和犬尿喹啉酸迅速增加，随着药物水平下降而恢复至基线。[1] |
| 酶活实验 |
人KMO活性抑制实验使用在SP9昆虫细胞中表达为GST融合蛋白的全长人KMO作为膜悬液进行。反应在饱和NADPH（200 µM）和接近犬尿氨酸Km（10 µM）的浓度下，于50 mM HEPES (pH 7.5)、2 mM DTT、1 mM EDTA、100 µM Chaps的缓冲液中进行。反应2小时后加入三氟乙酸（TFA）终止。使用与三重四极杆质谱仪联用的RapidFire质谱系统定量产物形成，质谱仪在正离子模式下运行，通过多反应监测检测犬尿氨酸和3-羟基犬尿氨酸。[1]
为评估选择性，进行了人犬尿氨酸酶（KYNU）和人犬尿氨酸氨基转移酶1型及2型（KATI和KATII）的活性实验。这些酶在大肠杆菌中表达为C端六组氨酸标签蛋白并进行亲和纯化。对于KATI和KATII，使用终点荧光法，并使用特定底物（KATI用丙酮酸钠和L-犬尿氨酸；KATII用α-酮戊二酸、磷酸吡哆醛和L-犬尿氨酸）。实验在37°C孵育，用乙酸锌/乙酸钠溶液终止，然后测量荧光强度。[1] |
| 细胞实验 |
对于细胞KMO抑制实验，建立了稳定过表达人KMO的HEK293细胞系。细胞在96孔板中培养。将GSK180在DMSO中连续稀释，以复孔形式加入细胞。将培养基更换为含有1%谷氨酰胺、1%青霉素/链霉素和200 µM L-犬尿氨酸的Opti-MEM培养基，细胞孵育20小时。孵育后，将培养基转移到含有乙腈和内标（d5-色氨酸）的深孔板中，离心、干燥并复溶，用于LC-MS/MS分析以定量3-羟基犬尿氨酸。使用3-羟基犬尿氨酸/d5-色氨酸的峰面积比来计算抑制百分比。[1]
对于人原代肝细胞实验，将新鲜制备的细胞与含有化合物、胎牛血清、地塞米松和L-色氨酸的培养液共同孵育过夜。孵育后，通过LC-MS/MS分析细胞上清液以检测和定量代谢物。根据观察到的犬尿氨酸增加计算抑制百分比。[1] 为了测定细胞Km值，将稳定转染人或大鼠KMO的HEK293细胞铺于96孔板。细胞与不同浓度的L-犬尿氨酸（0–2000 µM）孵育8-20小时，确保底物转化率低于15%。上清液通过LC-MS/MS分析以测定生成的3-羟基犬尿氨酸量，数据拟合至米氏方程。[1] |
| 动物实验 |
为了在急性胰腺炎 (AP) 大鼠模型中进行疗效测试，我们使用了雄性 Sprague-Dawley 大鼠。通过剖腹手术，采用压力控制的逆行胆胰管灌注甘氨酸脱氧胆酸诱导 AP，随后持续 6 小时灌注胰泌素。在 AP 诱导 1 小时后，以 24 mg/kg 的剂量静脉推注 GSK180，随后以 5.5 mg/kg/小时的剂量持续静脉输注，直至实验结束。该给药方案可使血浆药物浓度稳定在约 600 µM。对照组动物接受溶剂。实验结束时采集组织和血液样本进行分析。[1] 在大鼠药代动力学/药效学研究中，以 27 mg/kg 的剂量单次静脉推注 GSK180。在不同时间点采集血样，以测量血浆药物浓度和代谢物（犬尿氨酸、犬尿酸）浓度。[1]
在基因修饰小鼠的研究中，使用了Kmo基因敲除小鼠和野生型同窝对照小鼠。实验性急性胰腺炎（AP）通过逆行导管内注射牛磺胆酸钠，随后腹腔注射胰泌素诱导。假手术对照组接受相同的手术操作，但不进行毒素灌注。在指定时间点处死小鼠，以采集组织和血液样本。[1] 为了评估该化合物对代谢物的急性影响，以30 mg/kg的剂量单次静脉注射GSK180。给药后1小时采集血液样本，用于分析药物和代谢物水平。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
大鼠静脉推注GSK180（27 mg/kg）后，该药物的分布容积（Vss）和清除率（Clp）均较低（0.45 ml/min/kg），半衰期（t1/2）为3小时。[1]
大鼠静脉推注27 mg/kgGSK180后，血浆初始浓度接近600 µM。[1] GSK180不与大鼠红细胞结合（血血浆比为0.46）。[1] GSK180与大鼠血浆蛋白的结合率为中等（1 mM时游离分数为7.7%，n=2）。 [1] GSK180具有很高的水溶性（以Tris盐形式在生理盐水中的溶解度为24 mg/mL）。[1] GSK180在不同物种中均表现出很高的微粒体代谢稳定性（在大鼠、犬和人组织中的清除率均<0.5 ml/min/g）。[1] 使用GSK180治疗可导致体内犬尿氨酸代谢途径产物水平的快速变化。在大鼠中，静脉推注可导致循环中犬尿氨酸和犬尿酸水平迅速升高，随着药物浓度的下降，其水平恢复至基线水平。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在Kmo基因敲除小鼠中，繁殖力、生育力和寿命（直至2岁）均不受影响，这表明小鼠对长期KMO阻断（伴有犬尿酸和犬尿氨酸水平升高）具有良好的耐受性。[1]
GSK180可显著降低野生型和Kmo基因敲除小鼠的循环色氨酸水平，表明存在与KMO抑制无关的脱靶效应。在大鼠中也观察到了这种色氨酸水平的下降，并且这种下降可持续数小时，随着血浆药物浓度的降低而恢复。这种效应归因于GSK180以浓度依赖的方式将色氨酸从血浆蛋白中置换出来。[1] KMO阻断期间犬尿酸水平的升高可能具有镇静作用，因为它是一种NMDA受体拮抗剂。[1] |
| 参考文献 |
[1]. Mole DJ, et al. Kynurenine-3-monooxygenase inhibition prevents multiple organ failure in rodent models of acute pancreatitis. Nat Med. 2016 Feb;22(2):202-9.
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| 其他信息 |
GSK180 是一种强效且特异性的犬尿氨酸-3-单加氧酶 (KMO) 抑制剂，KMO 是色氨酸代谢中犬尿氨酸途径的关键酶。[1] KMO 抑制被认为是一种治疗急性胰腺炎相关多器官功能障碍综合征 (AP-MODS) 以及其他潜在严重急性全身炎症性疾病的新型治疗策略。[1] 该化合物是通过基于犬尿氨酸底物修饰的药物化学策略发现的，最终得到一种噁唑烷酮衍生物。[1] GSK180 分子量低 (276 Da)，且具有适合静脉给药的特性。 [1]
尽管GSK180在疾病模型中能有效抑制KMO并保护器官免受损伤，但其细胞内渗透性差（被动渗透性低），导致细胞效力降低，并且在发挥药效所需的高浓度下，会对色氨酸和犬尿酸代谢产生脱靶效应。提高细胞效力被认为是未来临床候选药物开发的关键组成部分。[1] |
| 分子式 |
C10H7CL2NO4
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|---|---|
| 分子量 |
276.0729
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| 精确质量 |
274.975
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| CAS号 |
1799725-26-0
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| PubChem CID |
105539874
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.1
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| tPSA |
66.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
17
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| 分子复杂度/Complexity |
338
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
MIGAKMWKMLYGJX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H7Cl2NO4/c11-5-3-7-8(4-6(5)12)17-10(16)13(7)2-1-9(14)15/h3-4H,1-2H2,(H,14,15)
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| 化学名 |
3-(5,6-dichloro-2-oxo-1,3-benzoxazol-3-yl)propanoic acid
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| 别名 |
GSK180GSK-180GSK-180
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~905.57 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6223 mL | 18.1113 mL | 36.2227 mL | |
| 5 mM | 0.7245 mL | 3.6223 mL | 7.2445 mL | |
| 10 mM | 0.3622 mL | 1.8111 mL | 3.6223 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
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