| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Excitatory amino acid transporter 2 (EAAT2) (positive allosteric modulator; EC50 = 0.26 ± 0.03 nM for the racemic mixture in COS-7 cells expressing EAAT2) [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- GT949（外消旋混合物）在表达EAAT2的COS-7细胞中刺激EAAT2介导的谷氨酸转运，EC50为0.26 ± 0.03 nM，转运速率提高约70%。[1]
- GT949 的对映异构体（GT949A和GT949B）显示出不同的效力：GT949A的EC50为0.041 ± 0.01 nM，GT949B的EC50为0.89 ± 0.42 nM，GT949A的效力约比GT949B高22倍。[1] - GT949 对EAAT2具有选择性，在COS-7细胞中对EAAT1或EAAT3介导的谷氨酸转运无明显影响。[1] - 动力学分析显示，GT949（1 nM）使EAAT2介导的谷氨酸转运的Vmax从270.3 ± 15增加至399.3 ± 28 pmol/mg/min，而KM值无显著变化（43.3 ± 7.6 μM对比61.6 ± 13 μM），表明其作用机制为非竞争性的正别构调节。[1] - 在培养的星形胶质细胞中，GT949（外消旋混合物）刺激谷氨酸摄取的EC50为1 ± 0.07 nM，转运增加约58%。其对映异构体的EC50分别为0.5 ± 0.04 nM（GT949A）和15 ± 1.3 nM（GT949B）。[1] - GT949 在高达1 mM的浓度下不影响人血清素（hSERT）、去甲肾上腺素（hNET）或多巴胺（hDAT）转运蛋白的活性（IC50 > 1 mM）。[1] - GT949 不调节NMDA受体活性，对培养的皮层神经元中NMDA诱导的钙内流无影响。[1] - 免疫印迹分析显示，GT949（1 μM，24小时）不改变胶质细胞中GLT-1（EAAT2）蛋白的表达，证实其作为直接正别构调节剂而非转录上调剂的作用。[1] GT 949 (GT949) 改善了谷氨酸转运，其 EC50 为 0.26 ± 0.03 nM。此外，GT 949 对 EAAT2 具有选择性，并且不影响 EAAT1 或 EAAT3 介导的谷氨酸活性 [1]。还研究了 GT 949 如何影响 EAAT2 转染细胞的谷氨酸摄取率。通过以非竞争性方式改善谷氨酸转运，GT 949 将 Vmax 提高约 47% [1]。 |
| 酶活实验 |
- 计算机对接研究： 进行了分子对接研究以预测GT949在EAAT2别构位点的结合模式。使用GOLD对接程序，每个配体进行20次独立运行。采用两级评分方案对蛋白-配体复合物进行评分：首先使用默认的Goldscore方法，然后使用定制的基于知识的评分方法，该方法对正向相互作用（如芳香堆积、氢键、疏水相互作用）赋予权重，并对与别构口袋内残基的负向相互作用进行惩罚。对接研究表明，残基M86、L295、S465和W472直接参与GT949的结合。[1]
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| 细胞实验 |
- COS-7细胞中的谷氨酸摄取试验： COS-7细胞瞬时转染EAAT2 cDNA。转染两天后，洗涤细胞，并与不同浓度的GT949（0.01–100 nM）在37°C下预孵育10分钟。加入50 nM ³H-L-谷氨酸启动摄取反应，持续10分钟。通过移除溶液并洗涤终止反应。裂解细胞，通过闪烁计数定量放射性。结果归一化至溶媒对照。[1]
- COS-7细胞中的动力学试验： 表达EAAT2的细胞与溶媒或1 nM GT949预孵育。用一系列浓度的L-谷氨酸（1–1000 μM，99%非标记，1%标记）启动摄取反应，持续10分钟。假设符合Michaelis-Menten动力学，计算KM和Vmax值。[1] - 培养星形胶质细胞中的谷氨酸摄取试验： 培养14天的星形胶质细胞洗涤后，与溶媒或不同浓度的GT949（0.01 nM至1 μM）在37°C下预孵育10分钟。加入50 nM ³H-L-谷氨酸，在室温下进行10分钟摄取反应。在10 μM DL-TBOA存在下测定非特异性摄取。通过闪烁计数测量放射性。[1] - 单胺转运蛋白试验： 瞬时转染hSERT、hNET或hDAT的COS-7细胞与不同浓度的GT949（高达1 mM）孵育10分钟。加入相应的放射性标记底物（³H-血清素、³H-去甲肾上腺素或³H-多巴胺）启动摄取反应，持续10分钟。定量放射性以评估化合物效应。[1] - 皮层神经元中的钙成像： 培养的皮层神经元负载Fura-2钙染料。细胞用含河豚毒素的Tyrode溶液持续灌流。在3 μM甘氨酸存在和无Mg²⁺条件下，应用100 μM NMDA诱导钙反应。NMDA受体拮抗剂AP-V（40 μM）用作对照。应用GT949，通过荧光比率（340/380 nm激发）记录钙变化。[1] - 免疫印迹： 将用1 μM GT949处理24小时的胶质细胞样品裂解，进行SDS-PAGE和Western印迹分析，使用抗GLT-1（EAAT2）和抗β-肌动蛋白抗体评估蛋白表达水平。[1] |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C30H37N7O2
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|---|---|
| 分子量 |
527.660485982895
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| 精确质量 |
527.3
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| 元素分析 |
C, 68.29; H, 7.07; N, 18.58; O, 6.06
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| CAS号 |
460330-27-2
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| PubChem CID |
3195790
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4
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| tPSA |
88.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
835
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1C(C(N2CCN(C3CCCCC3)CC2)C2N(CCC3C=CC=CC=3)N=NN=2)=CC2C(=CC=C(C=2)OC)N1
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| InChi Key |
ZVWPOIUAPXDLMB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H37N7O2/c1-39-25-12-13-27-23(20-25)21-26(30(38)31-27)28(36-18-16-35(17-19-36)24-10-6-3-7-11-24)29-32-33-34-37(29)15-14-22-8-4-2-5-9-22/h2,4-5,8-9,12-13,20-21,24,28H,3,6-7,10-11,14-19H2,1H3,(H,31,38)
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| 化学名 |
3-[(4-cyclohexylpiperazin-1-yl)-[1-(2-phenylethyl)tetrazol-5-yl]methyl]-6-methoxy-1H-quinolin-2-one
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| 别名 |
GT 949; GT949; 460330-27-2; 3-((4-Cyclohexylpiperazin-1-yl)(1-phenethyl-1H-tetrazol-5-yl)methyl)-6-methoxyquinolin-2(1H)-one; CHEMBL5178416; GT-949
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~94.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8952 mL | 9.4758 mL | 18.9516 mL | |
| 5 mM | 0.3790 mL | 1.8952 mL | 3.7903 mL | |
| 10 mM | 0.1895 mL | 0.9476 mL | 1.8952 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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