| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dye reagent；DNA Stain
Hoechst 33342 analog targets DNA, specifically binding to the minor groove of AT-rich regions. The compound is a DNA topoisomerase inhibitor with anticancer activity. As a member of the Hoechst stain family, it is used as a fluorescent dye for visualizing cellular DNA. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. Hoechst 工作液的配制
1.1：Hoechst 储备液的配制。使用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 *注意：分装后，Hoechst 储备液应避光保存于 -4°C 或 -20°C。 1.2：工作液的配制：用 PBS 或无血清细胞培养基将储备液稀释至 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 *注意：使用前，请确保 Hoechst 工作液的浓度适合您的实验，并使用新鲜配制的工作液以获得最佳结果。 2. 染色（悬浮细胞） 2.1：离心细胞，加入 PBS，然后洗涤两次，每次 5 分钟，或直至细胞密度达到 1×10⁶/mL。 2.2：加入 1 mL Hoechst 工作液，静置 3–10 分钟。 2.3：400 g 离心 3–4 分钟，弃上清液。 2.4：用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 2.5：将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中，使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.染色（贴壁细胞） 3.1：在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2：从培养基中取出盖玻片，并去除多余的培养基。 3.3：加入100 μL染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育3-10分钟。 3.4：去除染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，然后用荧光显微镜或流式细胞仪观察。注意1. 请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度并配制使用。 2. 本产品仅限专业研究人员用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗、食品或药品用途。 为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服和一次性手套。 在体外，Hoechst 33342类似物可与DNA结合，并可用作荧光染料以可视化细胞DNA。该化合物与DNA结合后会发出蓝色荧光，可用于流式细胞术、细胞分选和荧光显微镜。它还具有DNA拓扑异构酶抑制活性，具有潜在的抗癌应用价值。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
关于Hoechst 33342类似物的体内数据有限。作为一种DNA结合染料和拓扑异构酶抑制剂，该化合物可能在癌症研究中具有应用前景。然而，它主要用作DNA染色实验室试剂，而非治疗药物。
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| 酶活实验 |
Hoechst 33342 可与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。[1]
Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需在“使用 DAPI 标记核 DNA”（Chazotte 2011a）一文中描述的方案中用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。内源性细胞分子（例如还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸）的自发荧光会降低信噪比，从而干扰成像。当探针和自发荧光分子的激发波长和/或发射波长相近时，就会发生这种情况，例如，激发波长通常小于 500 nm，尤其是在紫外波段。可以通过仔细选择激发波长和发射波长、用还原剂处理固定细胞（例如，用 1% 硼氢化钠 [NaBH4] 溶液处理 20 分钟）以及将实验图像与未标记的对照玻片进行比较来降低自发荧光。避免使用戊二醛固定，因为它会增加细胞自发荧光的干扰，尤其是在波长小于 500 nm 时。[1] 本方案假设目标细胞生长在浸入装有培养基的小型培养皿中的玻璃显微镜盖玻片上。通常，标记条件因细胞类型而异，可能需要根据具体用途修改方案。要将使用本文所述技术标记的细胞制成显微镜载玻片，请参阅“活细胞载玻片装片”（Chazotte 2011b）[3]。目前有多种荧光染料可用于标记DNA，从而便于观察间期细胞的细胞核和有丝分裂细胞的染色体。Hoechst 33342 的一个优点是它能透过细胞膜，因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342 与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。 在体外DNA结合实验中，将Hoechst 33342类似物与双链DNA孵育，并通过测量荧光强度来评估DNA结合情况。该化合物对富含AT序列的DNA亲和力可通过荧光滴定或竞争性结合实验来确定。 |
| 细胞实验 |
方法[1]
在整个实验过程中，切勿让细胞干燥。 1. 将 Hoechst 原液用水稀释 1:100，用于标记。 2. 吸出培养在盖玻片上的细胞培养基。用 PBS+ 缓冲液冲洗细胞三次。 3. 将细胞置于 Hoechst 标记液（步骤 1）中，室温孵育 10-30 分钟。 4. 吸出标记液。用 PBS+ 缓冲液冲洗细胞三次。 5. 按照“活细胞载玻片装片法”（Chazotte 2011b）所述方法装片。 在体外细胞实验中，将Hoechst 33342类似物溶解于DMSO或水性缓冲液中，然后应用于培养细胞。该化合物可进入活细胞并与细胞核内的DNA结合。使用荧光显微镜或流式细胞仪来观察和定量DNA含量、细胞周期分布和细胞核形态。 |
| 动物实验 |
由于 Hoechst 33342 类似物主要用作体外 DNA 染色研究试剂，而不是治疗剂，因此不常进行体内动物研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于Hoechst 33342类似物用作实验室试剂而非治疗药物，因此没有其药代动力学数据。该化合物的分子量为590.58，分子式为C32H3₇Cl2N₇。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Hoechst 33342类似物的毒理学数据有限。作为一种DNA结合化合物，它可能具有遗传毒性。该化合物仅供研究使用，操作时应采取适当的实验室安全防护措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
细胞染色示例 1：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色。细胞染色示例 2：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色以检测细胞凋亡。1. 用 Hoechst 33342 染色细胞（10 分钟）。2. 使用荧光显微镜观察（成像）。细胞染色示例 3：Hoechst 33342 可用于染色质的蓝色荧光标记。1. 成像前，用 Hoechst 33342 (5 µg/mL) 对染色质进行短暂复染。2. 使用共聚焦显微镜观察（成像）。
Hoechst 33342类似物（CAS号：178481-68-0）的分子式为C32H3₇Cl2N₇，分子量为590.58。其化学名称为N,N-双(2-氯乙基)-4-(3-{6-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-1,3-苯并二唑-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-2-基}丙基)苯胺。该试剂仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C32H37CL2N7
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|---|---|
| 分子量 |
590.5891
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| 精确质量 |
589.249
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| CAS号 |
178481-68-0
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33342;23491-52-3;Hoechst 33342 trihydrochloride;875756-97-1;Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
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| PubChem CID |
197366
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| 外观&性状 |
Off-white to brown solid powder
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| LogP |
6.32
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| tPSA |
67.08
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
11
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| 重原子数目 |
41
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| 分子复杂度/Complexity |
784
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
PZEAMYHHAKUANN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H37Cl2N7/c1-39-17-19-41(20-18-39)26-10-12-28-30(22-26)38-32(37-28)24-7-11-27-29(21-24)36-31(35-27)4-2-3-23-5-8-25(9-6-23)40(15-13-33)16-14-34/h5-12,21-22H,2-4,13-20H2,1H3,(H,35,36)(H,37,38)
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| 化学名 |
N,N-bis(2-chloroethyl)-4-[3-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]propyl]aniline
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| 别名 |
Hoechst-33342 analog
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~169.32 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6932 mL | 8.4661 mL | 16.9322 mL | |
| 5 mM | 0.3386 mL | 1.6932 mL | 3.3864 mL | |
| 10 mM | 0.1693 mL | 0.8466 mL | 1.6932 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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