| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dye reagent; DNA Stain
Hoechst 33342 targets DNA, specifically binding to the minor groove of the double helix. It shows a preference for A/T-rich regions of DNA. Upon binding, its fluorescence is significantly enhanced, allowing for the visualization of DNA in live and fixed cells. It is a live-cell nuclear marker dye. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. Hoechst 工作液的配制
1.1：Hoechst 储备液的配制。使用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 *注意：分装后，Hoechst 储备液应避光保存于 -4°C 或 -20°C。 1.2：工作液的配制：用 PBS 或无血清细胞培养基将储备液稀释至 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 *注意：使用前，请确保 Hoechst 工作液的浓度适合您的实验，并使用新鲜配制的工作液以获得最佳结果。 2. 染色（悬浮细胞） 2.1：离心细胞，加入 PBS，然后洗涤两次，每次 5 分钟，或直至细胞密度达到 1×10⁶/mL。 2.2：加入 1 mL Hoechst 工作液，静置 3–10 分钟。 2.3：400 g 离心 3–4 分钟，弃上清液。 2.4：用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 2.5：将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中，使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.染色（贴壁细胞） 3.1：在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2：从培养基中取出盖玻片，并去除多余的培养基。 3.3：加入100 μL染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育3-10分钟。 3.4：去除染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。注意1. 请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度并配制使用。 2. 本产品仅限专业研究人员用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗、食品或医药用途。 为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服和一次性手套。 Hoechst 33342在体外具有DNA结合和荧光特性。当暴露于紫外光下时，它会发出两种波长的明亮荧光：Hoechst Blue（405–450 nm）和Hoechst Red（630–650 nm）。其荧光可用于确定细胞周期状态、进行细胞凋亡检测，以及在显微镜下用作细胞核复染剂。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，Hoechst 33342 并非治疗剂。它仅用于研究用途，例如标记活体生物体内的细胞以便进行追踪，或用于组织学研究中的组织染色。它可用于在固定或活细胞中可视化细胞DNA，以应用于各种研究领域。
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| 酶活实验 |
Hoechst 33342 可与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。[1]
Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需在“使用 DAPI 标记核 DNA”（Chazotte 2011a）一文中描述的方案中用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。内源性细胞分子（例如还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸）的自发荧光会降低信噪比，从而干扰成像。当探针和自发荧光分子的激发波长和/或发射波长相近时，就会发生这种情况，例如，激发波长通常小于 500 nm，尤其是在紫外波段。可以通过仔细选择激发波长和发射波长、用还原剂处理固定细胞（例如，用 1% 硼氢化钠 [NaBH4] 溶液处理 20 分钟）以及将实验图像与未标记的对照玻片进行比较来降低自发荧光。避免使用戊二醛固定，因为它会增加细胞自发荧光的干扰，尤其是在波长小于 500 nm 时。[1] 本方案假设目标细胞生长在浸入装有培养基的小型培养皿中的玻璃显微镜盖玻片上。通常，标记条件因细胞类型而异，可能需要根据具体用途修改方案。要将使用此处所述技术标记的细胞制成载玻片，请参阅“活细胞载玻片装片”（Chazotte 2011b）[3]。 有多种荧光染料可用于标记DNA，从而便于观察间期细胞的细胞核和有丝分裂细胞的染色体。Hoechst 33342 的一个优点是它能透过细胞膜，因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342 与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。 Hoechst 33342 的体外结合试验并非受体试验，而是 DNA 结合试验。将染料与纯化的 DNA（例如，小牛胸腺 DNA）或细胞孵育。使用荧光计或流式细胞仪测量其荧光强度。可以通过用 DNA 滴定染料并测量荧光强度的增加来评估结合亲和力，由此可以计算出解离常数 (Kd)。 |
| 细胞实验 |
方法[1]
在整个实验过程中，切勿让细胞干燥。 1. 将 Hoechst 原液用水稀释 1:100，用于标记。 2. 从盖玻片上培养的细胞中吸出培养基。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 3. 将细胞置于 Hoechst 标记液（步骤 1）中，室温孵育 10-30 分钟。 4. 吸出标记液。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 5. 按照“活细胞载玻片装片法”（Chazotte 2011b）所述方法装片。 使用 Hoechst 33342 的体外细胞分析方法非常广泛。例如，在细胞周期分析中，用该染料对细胞进行染色，并通过流式细胞术测量 DNA 含量。 G1期细胞的DNA含量为2N，S期细胞的DNA含量介于2N和4N之间，G2/M期细胞的DNA含量为4N。细胞凋亡的检测方法是检测DNA片段化（亚G1峰）。核复染时，将细胞固定并用染料染色，以便在荧光显微镜下观察。 |
| 动物实验 |
使用Hoechst 33342进行体内动物实验并非治疗性药物测试的标准方法。它通常用作细胞标记和追踪的研究工具。例如，可以用该染料标记细胞，然后将其注射到动物体内，以研究其迁移、归巢和植入情况。之后，可以使用荧光显微镜或流式细胞仪在体外组织中检测标记的细胞。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Hoechst 33342 三盐酸盐是一种固体化合物，可溶于水和二甲基亚砜 (DMSO)。通常以粉末形式储存于 -20°C，避光保存。储备液可用水或 DMSO 配制。在推荐的储存条件下，该产品稳定。其分子量为 561.93 g/mol。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Hoechst 33342 的毒理学数据表明，它是一种 DNA 结合剂，可能具有遗传毒性。它也是已知的拓扑异构酶 I 抑制剂。因此，应谨慎操作，并尽量减少接触。它不适用于人类治疗，其用途仅限于体外和离体研究。
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| 参考文献 |
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556. [3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554. |
| 其他信息 |
细胞染色示例 1：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色。细胞染色示例 2：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色以检测细胞凋亡。1. 用 Hoechst 33342 染色细胞（10 分钟）。2. 使用荧光显微镜观察（成像）。细胞染色示例 3：Hoechst 33342 可用于染色质的蓝色荧光标记。1. 成像前，用 Hoechst 33342 (5 µg/mL) 对染色质进行短暂复染。2. 使用共聚焦显微镜观察（成像）。
Hoechst 33342 是细胞生物学中一种标准且必不可少的试剂。由于其明亮的蓝色荧光以及与其他荧光蛋白和染料的兼容性，它是荧光显微镜下首选的细胞核复染剂。它还广泛用于高内涵筛选和通过流式细胞术分离侧群细胞。 |
| 分子式 |
C₂₇H₃₁CL₃N₆O
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|---|---|
| 分子量 |
561.93
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| 精确质量 |
560.162
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| 元素分析 |
C, 57.71; H, 5.56; Cl, 18.93; N, 14.96; O, 2.85
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| CAS号 |
875756-97-1
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33342;23491-52-3;Hoechst 33342 analog;178481-68-0;Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
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| PubChem CID |
16760503
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| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
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| LogP |
7.332
|
| tPSA |
73.07
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
37
|
| 分子复杂度/Complexity |
664
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
JABNPSKWVNCGMX-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H28N6O.3ClH/c1-3-34-21-8-4-18(5-9-21)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-7-20(17-25(23)31-27)33-14-12-32(2)13-15-33;;;/h4-11,16-17H,3,12-15H2,1-2H3,(H,28,30)(H,29,31);3*1H
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| 化学名 |
2'-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5'-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride
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| 别名 |
bisBenzimide; H 33342 trihydrochloride; HOE 33342 trihydrochloride; HOE 33342 trihydrochlorde; HO342; Hoechst-33342; Hoechst33342; Hoechst 33342; NSC 334072.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 (2). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 46 mg/mL (~81.86 mM)
H2O : ≥ 5.6 mg/mL (~9.97 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 3.33 mg/mL (5.93 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7796 mL | 8.8979 mL | 17.7958 mL | |
| 5 mM | 0.3559 mL | 1.7796 mL | 3.5592 mL | |
| 10 mM | 0.1780 mL | 0.8898 mL | 1.7796 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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