| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dye reagent；DNA Stain
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. Hoechst 工作液的配制
1.1：Hoechst 储备液的配制。使用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 *注意：分装后，Hoechst 储备液应避光保存于 -4°C 或 -20°C。 1.2：工作液的配制：用 PBS 或无血清细胞培养基将储备液稀释至 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 *注意：使用前，请确保 Hoechst 工作液的浓度适合您的实验，并使用新鲜配制的工作液以获得最佳结果。 2. 染色（悬浮细胞） 2.1：离心细胞，加入 PBS，然后洗涤两次，每次 5 分钟，或直至细胞密度达到 1×10⁶/mL。 2.2：加入 1 mL Hoechst 工作液，静置 3–10 分钟。 2.3：400 g 离心 3–4 分钟，弃上清液。 2.4：用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 2.5：将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中，使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.染色（贴壁细胞） 3.1：在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2：从培养基中取出盖玻片，并去除多余的培养基。 3.3：加入100 μL染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育3-10分钟。 3.4：去除染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，然后用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 注意 1. 请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度并配制使用。 2. 本产品仅限专业研究人员用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗、食品或医药用途。 为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服和一次性手套。 |
| 酶活实验 |
Hoechst 33342 可与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。[1]
Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需在“使用 DAPI 标记核 DNA”（Chazotte 2011a）一文中描述的方案中用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。内源性细胞分子（例如还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸）的自发荧光会降低信噪比，从而干扰成像。当探针和自发荧光分子的激发波长和/或发射波长相近时，就会发生这种情况，例如，激发波长通常小于 500 nm，尤其是在紫外波段。可以通过仔细选择激发波长和发射波长、用还原剂处理固定细胞（例如，用 1% 硼氢化钠 [NaBH4] 溶液处理 20 分钟）以及将实验图像与未标记的对照玻片进行比较来降低自发荧光。避免使用戊二醛固定，因为它会增加细胞自发荧光的干扰，尤其是在波长小于 500 nm 时。[1] 本方案假设目标细胞生长在浸入装有培养基的小型培养皿中的玻璃显微镜盖玻片上。通常，标记条件因细胞类型而异，可能需要根据具体用途修改方案。要使用本文所述技术标记细胞，请参阅“活细胞在显微镜载玻片上的安装”（Chazotte 2011b）[3]。 有多种荧光染料可用于标记DNA，从而便于观察间期细胞的细胞核和有丝分裂细胞的染色体。Hoechst 33342 的一个优点是它能透过细胞膜，因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342 与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。 |
| 细胞实验 |
方法[1]
在整个实验过程中，切勿让细胞干燥。 1. 将 Hoechst 原液用水稀释 1:100，用于标记。 2. 吸出培养在盖玻片上的细胞培养基。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 3. 将细胞置于 Hoechst 标记液（步骤 1）中，室温孵育 10-30 分钟。 4. 吸出标记液。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 5. 按照“活细胞载玻片装片”（Chazotte 2011b）中的方法装片。 对于活细胞染色：将培养在盖玻片上的细胞用含有 CaCl2 和 MgCl2 的磷酸盐缓冲液 (PBS) 冲洗三次。将Hoechst 33342原液（10 mg/mL，溶于水中）以1:100的比例用水稀释，制备标记液。将细胞置于该标记液中，室温孵育10-30分钟。孵育后，吸出标记液，用PBS缓冲液冲洗细胞三次。然后将细胞封片于载玻片上。成像采用353 nm激发波长和483 nm发射波长。[1] 固定细胞染色：Hoechst 33342可用于固定细胞染色，方法是用Hoechst 33342代替DAPI进行DAPI染色（3.7%甲醛固定，0.2% Triton X-100透化，然后用Hoechst 33342染色）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Hoechst 33342可能通过吸入、摄入或皮肤吸收造成危害。操作时应佩戴合适的防护手套和护目镜，并在通风橱内进行。切勿吸入粉尘。[1]
用于激发的紫外线具有危险性，会损伤视网膜；切勿用肉眼直视未加防护的紫外线光源。只能通过滤光片或能吸收有害波长的护目镜进行观察。紫外线辐射也具有致突变性和致癌性；在紫外线照射下操作材料时，务必采取充分的防护措施并佩戴防护手套。[1] |
| 参考文献 |
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556. [3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554. |
| 其他信息 |
2'-(4-乙氧基苯基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,5'-联苯并咪唑是一种联苯并咪唑和N-甲基哌嗪的化合物。它可用作荧光染料。其功能与哌苯并咪唑类似。
另见：联苯并咪唑二乙醚三盐酸盐（注：已移至此处）。 Hoechst 33342也称为联苯并咪唑。它能与双链DNA结合，尤其偏好富含AT的DNA簇。与DNA结合后，荧光强度显著增强。它能透过细胞膜，并可用于活细胞染色。内源性分子（例如，还原型NAD、FAD）的自发荧光会干扰成像，尤其是在紫外波长下；通过仔细选择激发/发射波长、用还原剂（例如，1%硼氢化钠处理20分钟）处理固定细胞以及与未标记的对照组进行比较，可以减少这种现象。应避免使用戊二醛固定，因为它会增加自发荧光。[1] |
| 分子式 |
C27H28N6O
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|---|---|
| 分子量 |
452.5508
|
| 精确质量 |
452.232
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| 元素分析 |
C, 71.66; H, 6.24; N, 18.57; O, 3.54
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| CAS号 |
23491-52-3
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33342 trihydrochloride;875756-97-1;Hoechst 33342 analog;178481-68-0;Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
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| PubChem CID |
1464
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| 外观&性状 |
Brown to breen solid powder
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| 熔点 |
268ºC
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| LogP |
7.139
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| tPSA |
100.76
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
664
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCOC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(N2)C=C(C=C3)C4=NC5=C(N4)C=C(C=C5)N6CCN(CC6)C
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| InChi Key |
PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H28N6O/c1-3-34-21-8-4-18(5-9-21)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-7-20(17-25(23)31-27)33-14-12-32(2)13-15-33/h4-11,16-17H,3,12-15H2,1-2H3,(H,28,30)(H,29,31)
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| 化学名 |
2-(4-ethoxyphenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole
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| 别名 |
HO342; HOE33342; HO 342; HOE-33342; HO-342; Bisbenzimide; HOE 33342; Hoechst 33342
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~6.25 mg/mL (~13.81 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (11.05 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2097 mL | 11.0485 mL | 22.0970 mL | |
| 5 mM | 0.4419 mL | 2.2097 mL | 4.4194 mL | |
| 10 mM | 0.2210 mL | 1.1049 mL | 2.2097 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
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