| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dye reagent;DNA Stain
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| 体外研究 (In Vitro) |
1.Hoechst工作液的制备
1.1:Hoechst母液/储备液的制备。使用DMSO/二甲基亚砜制备1 mg/mL Hoechst储备液。 *注:分装后,Hoechst/储备液应在-4°C或-20°C避光储存。 1.2:制备工作液:用PBS或无血清细胞培养基将储备溶液稀释至10μg/mL的Hoechst工作液。 *注意:使用前,请确保Hoechst工作溶液的浓度适合您的实验,现配现用。 2.细胞染色(悬浮细胞) 2.1:离心细胞,加入PBS,然后洗涤两次,每次5分钟,或直到细胞密度达到1×106/mL。 2.2:加入1 mL Hoechst工作溶液,室温孵育/静置3–10分钟。 2.3:以400 g离心3-4分钟,然后弃上清液。 2.4:用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5:将细胞重新悬浮在1mL PBS或无血清培养基中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.细胞染色(贴壁细胞) 3.1:将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 3.2:从培养基上取下盖玻片,取出多余的培养基。 3.3:加入100μL染料工作液,轻轻摇晃至完全覆盖细胞,孵育3-10分钟。 3.4:取出染料工作液,用培养基洗涤2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 注意事项 1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度,现配现用。 2. 本产品仅限于专业科研人员的科研用,不能用于临床诊断、治疗、食品或药品。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 酶活实验 |
Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。Hoechst 33342也可用于通过用Hoechst 333 42代替DAPI对固定细胞进行染色。[1]
Hoechst 33342也可用于通过在使用DAPI标记核DNA(Chazotte 2011a)中描述的方案中用Hoechst 333 42代替DAPI来染色固定细胞。内源性细胞分子(如还原形式的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸)的自身荧光可通过降低信噪比干扰成像。当探针和自荧光分子的激发和/或发射波长相似时,例如,经常具有<500nm的激发波长,特别是在紫外波长时,就会发生这种情况。通过仔细选择所用的激发和发射波长,用还原剂(例如1%硼氢化钠[NaBH4]溶液处理固定细胞20分钟),以及将实验图像与未标记的对照载玻片进行比较,可以减少自身荧光。避免用戊二醛固定,因为它会增加细胞自发荧光的干扰,最常见的是波长<500 nm。[1] 该方案假设感兴趣的细胞在玻璃显微镜盖玻片上生长,盖玻片浸入含有培养基的小培养皿中。通常,标记条件因细胞类型而异,可能有必要针对特定用途更改方案。要安装使用此处描述的技术标记的细胞,请参见将活细胞安装到显微镜载玻片上(Chazotte 2011b)。[1] 有许多荧光染色可用于标记DNA,并允许容易地观察间期细胞中的细胞核和有丝分裂细胞中的染色体。Hoechst 33342的一个优点是它是膜渗透性的,因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。[1] |
| 细胞实验 |
方法[1]
在Protocol执行期间,任何时候都不要让细胞变干 1.将Hoechst储备溶液在H2O中以1:100稀释,用于标记 2.从盖玻片上生长的细胞中吸出细胞培养基。用PBS+冲洗细胞三次 3.在室温下将细胞在Hoechst标记溶液(来自步骤1)中孵育10-30分钟 4.抽吸标签溶液。在PBS+中冲洗细胞三次 5.如在显微镜载玻片上安装活细胞(Chazotte 2011b)[3]中所述安装盖玻片[3] 6.对细胞成像(对于Hoechst 33342,其λex~353 nm,λem~483 nm) |
| 参考文献 |
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556. [3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554. |
| 其他信息 |
2'-(4-乙氧基苯基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,5'-联苯并咪唑是一种联苯并咪唑和N-甲基哌嗪。它可用作荧光染料。其功能与哌苯并咪唑类似。
另见:双苯并咪唑乙醚三盐酸盐(注释已移至)。 |
| 分子式 |
C27H28N6O
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|---|---|
| 分子量 |
452.5508
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| 精确质量 |
452.232
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| 元素分析 |
C, 71.66; H, 6.24; N, 18.57; O, 3.54
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| CAS号 |
23491-52-3
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33342 trihydrochloride;875756-97-1;Hoechst 33342 analog;178481-68-0;Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
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| PubChem CID |
1464
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| 外观&性状 |
Brown to breen solid powder
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| 熔点 |
268ºC
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| LogP |
7.139
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| tPSA |
100.76
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
664
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCOC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(N2)C=C(C=C3)C4=NC5=C(N4)C=C(C=C5)N6CCN(CC6)C
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| InChi Key |
PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H28N6O/c1-3-34-21-8-4-18(5-9-21)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-7-20(17-25(23)31-27)33-14-12-32(2)13-15-33/h4-11,16-17H,3,12-15H2,1-2H3,(H,28,30)(H,29,31)
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| 化学名 |
2-(4-ethoxyphenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole
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| 别名 |
HO342; HOE33342; HO 342; HOE-33342; HO-342; Bisbenzimide; HOE 33342; Hoechst 33342
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~6.25 mg/mL (~13.81 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (11.05 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2097 mL | 11.0485 mL | 22.0970 mL | |
| 5 mM | 0.4419 mL | 2.2097 mL | 4.4194 mL | |
| 10 mM | 0.2210 mL | 1.1049 mL | 2.2097 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。