HOE 33342 (Hoechst 33342, HO342)

别名: HO342; HOE33342; HO 342; HOE-33342; HO-342; Bisbenzimide; HOE 33342; Hoechst 33342 赫斯特荧光染料 33342;33342 荧光染料;双(苯并咪唑) H 33342三盐酸盐; 荧光染料3334;赫斯特荧光燃料,33342;双苯并咪唑H33342三盐酸盐;双-苯甲亚胺 H-33342 三盐酸盐 三水合物;雙苯胺
目录号: V6586 纯度: =99.81%
HOE 33342,以前称为 Hoechst 33342、HO342,是一种苯并咪唑荧光染料和细胞可渗透的荧光 DNA 染色剂;结合 AT 丰富区域的小沟。
HOE 33342 (Hoechst 33342, HO342) CAS号: 23491-52-3
产品类别: Autophagy
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
Other Sizes

Other Forms of HOE 33342 (Hoechst 33342, HO342):

  • Hoechst 33342 trihydrochloride
  • Hoechst 33342 analog
  • Hoechst 33342 analog 2
  • Hoechst 33342 analog 2 trihydrochloride
  • Hoechst 33342 analog trihydrochloride
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纯度/质量控制文件

纯度: =99.81%

产品描述
HOE 33342,以前称为 Hoechst 33342、HO342,是一种苯并咪唑荧光染料和细胞可渗透的荧光 DNA 染色剂;结合 AT 丰富区域的小沟。 HOE 33342 triHClde 用于定量活细胞中的 DNA。
生物活性&实验参考方法
靶点
Dye reagent;DNA Stain
体外研究 (In Vitro)
1.Hoechst工作液的制备
1.1:Hoechst母液/储备液的制备。使用DMSO/二甲基亚砜制备1 mg/mL Hoechst储备液。
*注:分装后,Hoechst/储备液应在-4°C或-20°C避光储存。
1.2:制备工作液:用PBS或无血清细胞培养基将储备溶液稀释至10μg/mL的Hoechst工作液。
*注意:使用前,请确保Hoechst工作溶液的浓度适合您的实验,现配现用。
2.细胞染色(悬浮细胞)
2.1:离心细胞,加入PBS,然后洗涤两次,每次5分钟,或直到细胞密度达到1×106/mL。
2.2:加入1 mL Hoechst工作溶液,室温孵育/静置3–10分钟。
2.3:以400 g离心3-4分钟,然后弃上清液。
2.4:用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。
2.5:将细胞重新悬浮在1mL PBS或无血清培养基中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。
3.细胞染色(贴壁细胞)
3.1:将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2:从培养基上取下盖玻片,取出多余的培养基。
3.3:加入100μL染料工作液,轻轻摇晃至完全覆盖细胞,孵育3-10分钟。
3.4:取出染料工作液,用培养基洗涤2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪观察。
注意事项
1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度,现配现用。
2. 本产品仅限于专业科研人员的科研用,不能用于临床诊断、治疗、食品或药品。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
酶活实验
Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。Hoechst 33342也可用于通过用Hoechst 333 42代替DAPI对固定细胞进行染色。[1]
Hoechst 33342也可用于通过在使用DAPI标记核DNA(Chazotte 2011a)中描述的方案中用Hoechst 333 42代替DAPI来染色固定细胞。内源性细胞分子(如还原形式的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸)的自身荧光可通过降低信噪比干扰成像。当探针和自荧光分子的激发和/或发射波长相似时,例如,经常具有<500nm的激发波长,特别是在紫外波长时,就会发生这种情况。通过仔细选择所用的激发和发射波长,用还原剂(例如1%硼氢化钠[NaBH4]溶液处理固定细胞20分钟),以及将实验图像与未标记的对照载玻片进行比较,可以减少自身荧光。避免用戊二醛固定,因为它会增加细胞自发荧光的干扰,最常见的是波长<500 nm。[1]
该方案假设感兴趣的细胞在玻璃显微镜盖玻片上生长,盖玻片浸入含有培养基的小培养皿中。通常,标记条件因细胞类型而异,可能有必要针对特定用途更改方案。要安装使用此处描述的技术标记的细胞,请参见将活细胞安装到显微镜载玻片上(Chazotte 2011b)。[1] 有许多荧光染色可用于标记DNA,并允许容易地观察间期细胞中的细胞核和有丝分裂细胞中的染色体。Hoechst 33342的一个优点是它是膜渗透性的,因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。[1]
细胞实验
方法[1]
在Protocol执行期间,任何时候都不要让细胞变干
1.将Hoechst储备溶液在H2O中以1:100稀释,用于标记
2.从盖玻片上生长的细胞中吸出细胞培养基。用PBS+冲洗细胞三次
3.在室温下将细胞在Hoechst标记溶液(来自步骤1)中孵育10-30分钟
4.抽吸标签溶液。在PBS+中冲洗细胞三次
5.如在显微镜载玻片上安装活细胞(Chazotte 2011b)[3]中所述安装盖玻片[3]
6.对细胞成像(对于Hoechst 33342,其λex~353 nm,λem~483 nm)
参考文献
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556.
[3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554.
其他信息
2'-(4-乙氧基苯基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,5'-联苯并咪唑是一种联苯并咪唑和N-甲基哌嗪。它可用作荧光染料。其功能与哌苯并咪唑类似。
另见:双苯并咪唑乙醚三盐酸盐(注释已移至)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C27H28N6O
分子量
452.5508
精确质量
452.232
元素分析
C, 71.66; H, 6.24; N, 18.57; O, 3.54
CAS号
23491-52-3
相关CAS号
Hoechst 33342 trihydrochloride;875756-97-1;Hoechst 33342 analog;178481-68-0;Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
PubChem CID
1464
外观&性状
Brown to breen solid powder
熔点
268ºC
LogP
7.139
tPSA
100.76
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
34
分子复杂度/Complexity
664
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCOC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(N2)C=C(C=C3)C4=NC5=C(N4)C=C(C=C5)N6CCN(CC6)C
InChi Key
PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C27H28N6O/c1-3-34-21-8-4-18(5-9-21)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-7-20(17-25(23)31-27)33-14-12-32(2)13-15-33/h4-11,16-17H,3,12-15H2,1-2H3,(H,28,30)(H,29,31)
化学名
2-(4-ethoxyphenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole
别名
HO342; HOE33342; HO 342; HOE-33342; HO-342; Bisbenzimide; HOE 33342; Hoechst 33342
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~6.25 mg/mL (~13.81 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (11.05 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.2097 mL 11.0485 mL 22.0970 mL
5 mM 0.4419 mL 2.2097 mL 4.4194 mL
10 mM 0.2210 mL 1.1049 mL 2.2097 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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