complex I of oxidative phosphorylation (OXPHOS)

IACS-010759 盐酸盐（10、30、100 nM；持续 4 或 5 天）可降低原发性 AML 的活力并促进细胞凋亡 [1]。 IACS-010759 盐酸盐（0.001、0.01、0.1、1、10、100、1000 nM；72 小时）显着抑制 OCR 和半乳糖依赖性 H460 细胞存活，IC50 值几乎相同，均为 1.4 nM[1]。 IACS-010759 盐酸盐在小鼠（平均IC50=5.6 nM）、大鼠（IC50=12.2 nM）和食蟹猴（IC50=8.7 nM）细胞系中具有相似的作用[1]。

在具有 NB-1（PGD 无）皮下异种移植物的小鼠中，IACS-010759 盐酸盐（5、10、25 mg/kg/天；口服；持续 21 天）以 5 或 10 mg/kg 的剂量引起肿瘤缩小，体重可忽略不计损失，以及对 25 mg/kg 剂量的不耐受 [1]。较低频率的给药方案（Q2D 或 Q3D）可能会在一定程度上提高生存率，但 IACS-010759 盐酸盐（10mg/kg；口服；QD（每日）或 QD×5（5 d 给药/2 d 给药）；持续 35 d）中位生存期从 28 天延长至 60 天以上[1]。 IACS-010759 盐酸盐（静脉注射 0.3 mg/kg；口服 1 mg/kg）具有高分布容积和低血浆清除率，具有较长的终末半衰期（>24 小时）[1]。

分离小鼠复合物I测定[1]
使用Sharpley及其同事的方法从小鼠心脏线粒体中分离出复合物I。图1f中IACS-010759的浓度为60 nM。Sharpley等人描述了NADH：癸基泛醌测定，Birrell等人描述了APAD+和H2O2测定。

IACS-010759抗性克隆细胞系的产生[1]
将H292细胞（1×106个细胞/板）接种在半乳糖生长培养基中的15 cm培养皿中，用1 nM IACS-010759（IC65）处理3周，然后暴露于8 nM IACS-1010759（IC95），直到出现抗性克隆。从四个独立实验中分离出26个抗性克隆，并在100µl半乳糖生长培养基中以5×103个细胞/孔的速度接种在96孔板上。细胞完全附着后，加入IACS-010759或鱼藤酮至终浓度370 nM至18 pM，持续3 d。在通过Hoechst和PI分析之前，在IncuCyte活细胞分析系统中扫描平板。随后，赫斯特和PI都使用了Operetta高含量成像系统。对亲本系和12个抗性克隆进行了RNA-seq，在12个抗性无性系中的9个中发现了线粒体编码基因MT-ND1中的一个非同义、异质（35-50%）、复发性突变，导致L55F（T3469C）氨基酸变化。使用Bowtie 2（参考文献53）将成对的末端读取最初与复合物I基因的转录物序列进行比对，并使用eXpress54将比对的片段概率地分配给转录物。使用SAMtools中的“mpileup”命令调用参考基因组的变体。L55F变体的MutPred55分析将这种改变归类为潜在致病性（MutPred评分=0.8）；在Genebank的mtDNA序列中，这种改变的频率非常低（基于2015年10月28日之前保存在Genebank中的全长线粒体基因组，为1:30589），这表明它不太可能是多态性。通过克隆MT-ND1基因序列，并使用以下引物通过Sanger测序分析纯化的质粒DNA，在四个抗性克隆中证实了突变：正向：5′-GTAAAACGACGGCCAGT-3′和反向：5′-ACAGCTATGACATG-3′。

[1]. Protopopova M. IACS-10759: A novel OXPHOS inhibitor which selectively kill tumors with metabolic vulnerabilities. [abstract]. In: Proceedings of the 106th Annual Meeting of the American Association for Cancer Research; 2015 Apr 18-22; Philadelphia, PA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2015;75(15 Suppl):Abstract nr 4380. doi:10.1158/1538-7445.AM2015-4380.

[2]. An inhibitor of oxidative phosphorylation exploits cancer vulnerability. Nat Med. 2018 Jul;24(7):1036-1046.

Tumor cells normally depend on both glycolysis and oxidative phosphorylation (OXPHOS) to provide the energy and macromolecule building blocks needed to enable continued tumor cell growth. Genetic or epigenetic inactivation of one of these two redundant pathways represents a metabolic vulnerability that should be susceptible to an inhibitor of the other pathway. Through an extensive medicinal chemistry campaign, IACS-10759 was identified as a potent inhibitor of complex I of oxidative phosphorylation. In isolated mitochondria or permeabilized cells, ATP production or oxygen consumption was inhibited at single digit nM concentrations in the presence of malate/glutamate, but not succinate. More directly, IACS-10759 inhibited the conversion of NADH to NAD+ in an immunoprecipitated complex I assay at low nM concentrations. Using genetic and pharmacological approaches, the specific complex I subunit inhibited by IACS-10759 has been identified and the mechanism of complex I inhibition is being investigated. Importantly, IACS-10759 is orally bioavailable with excellent physicochemical properties in preclinical species and achieved significant in vivo efficacy with daily oral dosing of 10-25 mg/kg. Specifically, there was a >50 day extension of median survival in an orthotopic AML cell line xenograft and robust regression in DLBCL and GBM xenograft models. In light of these results, as well as its drug like profile IACS-10759 has entered IND enabling studies with first-in-human studies targeted for third quarter of 2015.

C25H26CLF3N6O4S

599.024953365326

598.137

C, 50.13; H, 4.38; Cl, 5.92; F, 9.51; N, 14.03; O, 10.68; S, 5.35

1807523-99-4

IACS-010759; 1570496-34-2; 1570496-34-2 (HCl); 1807524-00-0 (besylate); 1807524-05-5; 1807524-01-1 (mesylate)

91864637

Typically exists as white to off-white solids at room temperature

125Ų

1

12

7

40

909

0

LUSCFOVOISLXTM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C25H25F3N6O4S.ClH/c1-16-29-23(24-30-22(32-38-24)18-6-8-20(9-7-18)37-25(26,27)28)31-34(16)15-17-4-3-5-19(14-17)33-12-10-21(11-13-33)39(2,35)36;/h3-9,14,21H,10-13,15H2,1-2H3;1H

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。