| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Necrosis
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| 体外研究 (In Vitro) |
虽然 IM-54 抑制 H2O2 诱导的细胞交叉，但它无法抑制其他抗癌药物或 Fas 配体引起的交叉或细胞交叉 [1]。在 HL-60 细胞中，IC50 为 0.25 μM[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
计划进行IM-54的体内研究，但其水溶性太低。为了克服这一问题，研究人员设计并合成了更多的水溶性IM衍生物。［1］
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| 酶活实验 |
KinaseProfiler检测IM-54 [1]
由于IM-54最初是由atp竞争性PKC抑制剂双吲哚马来酰亚胺I (BM I) 5发展而来，我们之前分析了其对所有PKC亚型的激酶抑制活性，并证实IM-541没有抑制PKC。我们还评估了其对与细胞死亡信号通路相关的各种激酶的抑制活性。使用KinaseProfiler服务进行蛋白激酶抑制试验。简单地说，检测蛋白激酶在50µM IM-54和100µM或10µM ATP存在下磷酸化适当肽/蛋白底物的能力。活性以对照孵育中活性的平均百分比给出（重复测定的平均值）。IM-54没有抑制超过一半的激酶活性，表明对所有测试激酶的IC50值都在50µM以上。 KINOMEscan筛选IM-17和IM-54 [1] 为了检查激酶抑制活性的广泛模式，使用KINOMEscan筛选IM-54和IM-17在10µM。KINOMEscan评估了与激酶的结合亲和力，这是基于ATP位点依赖性竞争来确定的。活性以结合激酶与头固定激酶抑制剂的控制值的百分比给出（重复测定的平均值）。在10µM条件下，小于35%的对照表明S17有明显的激酶抑制作用。如表S2所示，未观察到IM-17或IM-54对467个激酶有明显的抑制作用，支持这些化合物不具有激酶抑制活性的观点。 肝代谢稳定性分析[1] 为了比较IM衍生物的类药物性质，研究了IM-12、IM-54和IM-17对肝脏代谢的稳定性。将DMSO中的每种化合物与1 mL含辅因子的大鼠肝脏S9馏分混合，最终浓度为5µM，加入0.1% DMSO。37℃孵育0分钟、5分钟、15分钟、30分钟。孵育后迅速移至冰上。然后加入乙酸乙酯（250µL），提取化合物。重复提取5次。有机层在真空中组合和浓缩。用MeOH（30µL）稀释，HPLC分析。根据紫外峰面积测定残留化合物（n = 3, 3个独立实验）。如图S1所示，与S9组分孵育5分钟后，IM-12和IM-54迅速下降，未检出。IM-17孵育15 min后仍可检出，残留率为40%。这些结果表明IM-17对肝脏代谢的稳定性高于IM-12和IM-54。 |
| 细胞实验 |
AlamarBlue试验[1]
将HL-60细胞（Fas配体（FasL） 3 × 104细胞/孔，其他细胞4 × 104细胞/孔）或Jurkat细胞（FasL /CHX/Z-VAD处理2 × 104细胞/孔，FasL处理3 × 104细胞/孔）悬浮在96孔板的新鲜培养基中。孵育2 h后，细胞用试验化合物（DMSO溶液，0.5µL/孔）处理1 h，然后加入细胞死亡诱导剂（培养基中，4µL/孔）（终体积100µL/孔）。在所有实验中，最终DMSO浓度相同（0.5%）。3 h后，每孔加入10µL AlamarBlue。在孵育3-4 h时，通过荧光（激发560 nm/发射590 nm）的增加来测定细胞活力。数据以均数±标准差表示（n = 4）。 LDH测定[1] 乳酸脱氢酶（LDH）泄漏到培养基中，根据制造商的方案，用细胞毒性检测试剂盒kitPLUS测量。HL-60细胞在96孔板上用试验化合物和H2O2（100µM）处理，方法与AlamarBlue实验相同（三次）。H9c2细胞（1 × 104个细胞/孔）用测试化合物和300µM的TBHP处理4小时（3次）。然后测量在490 nm处吸光度的变化来计算LDH释放的百分比。IC50值由Origin 8.0软件计算，数据以mean±S.D.表示（n = 3, 3个独立实验）。 |
| 动物实验 |
Langendorff离体大鼠心脏模型[1]
本研究中使用的离体大鼠心脏制备方法已在之前的文献中描述。简而言之，雄性Sprague-Dawley大鼠（270-320 g）用戊巴比妥钠（30 mg/kg，腹腔注射）麻醉，并静脉注射肝素（1000 IU/kg）。迅速取出心脏，并将其安装在Langendorff灌注系统中。实验过程中，使用加热玻璃水浴将环境温度维持在37 °C。通过插管的主动脉，将预热至 37 °C 并通入气体（95% O₂ 和 5% CO₂，pO₂>600 mmHg）的 Krebs-Henseleit 溶液灌注心脏。该溶液含有（单位：mM）NaCl 120、KCl 4.7、CaCl₂ 1.25、MgSO₄ 1.2、KH₂PO₄ 1.2、NaHCO₃ 25 和葡萄糖 11，灌注压力恒定为 70 ± 5 mmHg。为了连续测量冠状动脉血流量 (CF)，将连接到电磁血流量计的插管式流量探头插入连接心脏的灌注管路中。左心室压力通过一个充满水的乳胶球囊测量，该球囊经左心房插入左心室，压力传感器连接到放大器。通过调节球囊容积，将左心室舒张末期压力（LVEDP）调整至约5 mmHg，左心室收缩压减去LVEDP即可得到左心室收缩末期压力（LVDP）。使用由左心室压力脉冲触发的心率计测量心率。所有血流动力学参数和CF均由多通道记录仪连续记录。使用电刺激器以300次/分钟的频率起搏心脏，并在左心房放置带有双极电极的隔离器。经过15分钟的S14平衡后，通过连接至Langendorff系统主灌注管路的药物输注管路，以CF速率的1/100的流速，使用输液泵将载体、IM-12（0.3 µM）或IM-17（3 µM）输注10分钟。药物处理5分钟后，心脏经历30分钟的全心缺血和60分钟的再灌注。全心缺血通过完全停止血流诱导。在药物输注前和输注后10分钟、诱导全心缺血后10、20和30分钟以及再灌注后10、20和30分钟测量左心室收缩压（LVDP）、左心室舒张末期压力（LVEDP）和心肌收缩力（CF）。数据以平均值±标准差（n = 3）表示。 缺血-再灌注诱发心律失常模型[1] 雄性Sprague-Dawley大鼠用戊巴比妥钠麻醉。股静脉插管用于静脉注射试验药物。使用心率计测量心率。在左侧第五肋间隙行开胸及心包切开术，用5-0尼龙线结扎左冠状动脉，结扎点距冠状动脉起始部约2-3 mm。随后，将尼龙线的两端穿过一根细聚乙烯管，制成冠状动脉套索。使用心电图仪监测标准肢体导联II心电图。心电图、血压和心率数据由心电图处理器采集并存储在MO磁盘上，以备后续数据处理。通过收紧冠状动脉套索诱发心肌缺血，心电图ST段典型抬高证实缺血成功。缺血5分钟后，通过松开套索恢复心肌灌注。根据已报道的指南26，通过心电图分析评估再灌注后室颤（Vf）的发生情况。室颤总持续时间计算为再灌注后10分钟内所有室颤发作持续时间的总和。以0.9%生理盐水作为对照。在缺血前5分钟（缺血前治疗，1～3 mg/kg）或再灌注前1分钟（缺血后治疗，3 mg/kg）静脉注射IM-17（1 ml/kg，1分钟内注射完毕）。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
IM-54 是一种有机氮化合物和有机氧化合物，其功能与α-氨基酸相关。
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| 分子式 |
C19H23N3O2
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|---|---|
| 分子量 |
325.40482
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| 精确质量 |
325.179
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| 元素分析 |
C, 70.13; H, 7.12; N, 12.91; O, 9.83
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| CAS号 |
861891-50-1
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| PubChem CID |
16760577
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| 外观&性状 |
Light yellow to orange solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
511.5±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
263.1±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.615
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| LogP |
3.81
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| tPSA |
54.34
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
543
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
SGLOMINNEBLJFF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H23N3O2/c1-4-5-8-11-20-17-16(18(23)22(3)19(17)24)14-12-21(2)15-10-7-6-9-13(14)15/h6-7,9-10,12,20H,4-5,8,11H2,1-3H3
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| 化学名 |
1-methyl-3-(1-methylindol-3-yl)-4-(pentylamino)pyrrole-2,5-dione
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| 别名 |
IM-54; Necrosis Inhibitor, IM-54; 1-Methyl-3-(1-methyl-1H-indol-3-yl)-4-(pentylamino)-1H-pyrrole-2,5-dione; 1-methyl-3-(1-methylindol-3-yl)-4-(pentylamino)pyrrole-2,5-dione; IM 54; MFCD18382109; CHEMBL365337;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~153.66 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0731 mL | 15.3657 mL | 30.7314 mL | |
| 5 mM | 0.6146 mL | 3.0731 mL | 6.1463 mL | |
| 10 mM | 0.3073 mL | 1.5366 mL | 3.0731 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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