| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EC50: 0.82 μM (TGR5)[1]
TGR5 receptor (EC₅₀ = 0.82 μM, efficacy = 166%) FXR receptor (EC₅₀ > 100 μM, efficacy = 18%) [1] TGR5 receptor (selective and potent agonist, reported in Figure 1 as a 30-fold improvement over CA) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
一种新型、高效、选择性的 TGR5 激动剂，具有显着的体内活性，被称为 INT-777 [1]。 INT-777 (3 μM) 以 cAMP 依赖性方式促进人肠内分泌细胞系 NCI-H716 中的 ATP 合成 [2]。将 INT-777 (10 μM) 添加到剥离浆膜组织的远端结肠段的浆膜侧，会导致 Isc 减少和 TEER 增加。在用 TTX 和无神经元处理的粘膜-粘膜下层制备物中，INT-777 对基础分泌的影响减弱了 [3]。
INT-777 在高脂喂养的TGR5转基因小鼠离体回肠外植体中剂量依赖性地诱导GLP-1释放。[1] 在小鼠肠内分泌细胞系STC-1中，胆汁酸介导的TGR5激活导致细胞内cAMP水平升高，从而触发GLP-1释放。[1] 在肠内分泌STC-1细胞中，INT-777 剂量依赖性地触发细胞内cAMP水平升高。此诱导效应可被特异性TGR5 shRNA降低TGR5表达所消除。[2] 在人肠内分泌NCI-H716细胞中，INT-777 以TGR5和cAMP依赖的方式增加细胞内钙内流。此效应可被TGR5过表达增强，而被TGR5 RNA干扰或腺苷酸环化酶抑制剂MDL-12330A抑制。[2] 在NCI-H716细胞中，INT-777 处理增加了GLP-1的释放，此效应可被MDL-12330A抑制。[2] 在小鼠肠内分泌STC-1细胞中，INT-777 触发的GLP-1释放可被TGR5过表达增强，而被TGR5 RNA干扰或MDL-12330A阻止。[2] 在STC-1细胞中，INT-777 处理导致cAMP依赖的细胞色素c氧化酶活性、细胞氧消耗和ATP/ADP比值增加。[2] 在从C57BL/6J小鼠分离的原代棕色脂肪细胞中，用3 μM INT-777 处理12小时增加了基础耗氧量，并且对解偶联剂FCCP的反应更为显著。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
INT-777（1 μM/min/kg，口服）是一种强利胆剂，有利于高频喂养的 TGR5-Tg 男性的胆汁-肝分流通道和导管。它还抑制羧基辅酶A 的激活和随后的结合[1]。当给予高脂肪饮食的 TGR5-Tg 小鼠时，INT-777（30 mg/kg/天）可增强能量消耗并减少肥胖和肝脂肪变性 [2]。
在饮食诱导的肥胖小鼠中，INT-777 通过药理学靶向TGR5增加能量消耗，从而减少体重增加和脂肪积累。[1] INT-777 改善高脂喂养小鼠的肝功能，减少脂肪变性和纤维化。[1] 在饮食诱导肥胖的C57BL/6J小鼠中，与高脂喂养对照组相比，膳食添加INT-777（30 mg/kg/天）干预10周显著减轻了体重增加（约15%），减少了脂肪量，并降低了肝脏和脂肪垫质量。[2] 在DIO小鼠中，INT-777 治疗增加了能量消耗（通过耗氧量和二氧化碳产生量测量），并降低了黑暗期的呼吸商，与脂肪氧化增加一致。[2] INT-777 治疗改善了DIO小鼠的肝功能，表现为肝脏脂肪变性减少（通过油红O染色和肝脏脂质含量评估）、血浆肝酶水平降低以及无肝脏纤维化（通过天狼星红染色评估）。[2] 在经INT-777治疗的高脂喂养小鼠中，血浆甘油三酯和非酯化脂肪酸水平显著降低。[2] 在DIO和db/db小鼠中，INT-777（30 mg/kg/天）治疗显著改善了口服葡萄糖耐量，并改善了葡萄糖刺激的胰岛素分泌模式。空腹血糖和胰岛素水平均降低。[2] 在经INT-777治疗的DIO小鼠中进行的高胰岛素-正常血糖钳夹实验显示，葡萄糖输注率、肝脏葡萄糖生成、葡萄糖处置率以及胰岛素介导的葡萄糖生成抑制均恢复正常。肝脏和肌肉中胰岛素刺激的葡萄糖摄取得到改善。[2] 在高脂喂养的TGR5转基因小鼠中，口服葡萄糖耐量较对照组显著改善，这与餐后GLP-1和胰岛素分泌增强相关。TGR5-Tg小鼠的胰腺胰岛显示更高的胰岛素含量和更正常的大小分布。[2] 在高脂喂养的TGR5缺陷小鼠中，葡萄糖耐量受损。INT-777 改善葡萄糖耐量和胰岛素分泌的能力在TGR5⁻/⁻小鼠中被削弱，证实了其作用依赖于TGR5。[2] 在TGR5⁺/⁺小鼠中，葡萄糖负荷前给予INT-777（30 mg/kg）可中度增加GLP-1释放，此效应在联合给予DPP4抑制剂时显著增强。此效应在TGR5⁻/⁻小鼠中被削弱。[2] |
| 酶活实验 |
在瞬时转染人TGR5的CHO细胞中，通过cAMP反应元件驱动的荧光素酶报告基因实验评估化合物激活TGR5的能力。[1]
在COS1细胞中使用基于细胞的生物发光实验评估FXR活性。[1] 在STC-1细胞中评估细胞色素c氧化酶活性，通过监测550 nm处完全还原的细胞色素C的氧化进行。细胞用指定浓度的INT-777处理1小时。在处理前15分钟加入载体或腺苷酸环化酶抑制剂MDL-12330A（1 μM）。[2] 在转染了对照或mTGR5 shRNA的STC-1细胞中，用指定浓度的INT-777处理，测量cAMP的产生。[2] |
| 细胞实验 |
实验在用媒介物 (DMSO) 或 INT-777 处理的 STC-1 或 NCI-H716 细胞中进行。评估 INT-777 对 TGR5 的激动活性。进行 cAMP 生产。通过在 550 nm 处完全还原的细胞色素 C 的氧化来评估细胞色素 C 氧化酶活性。 ATP/ADP 比率和 GLP-1 释放根据制造商的说明进行测量。制备原代棕色脂肪细胞并制备回肠外植体。
在STC-1肠内分泌细胞中评估TGR5介导的GLP-1释放。[1] 在TGR5转基因小鼠的离体回肠外植体中，暴露于INT-777后测量GLP-1释放。[1] 在铺于基质胶包被的96孔板中的NCI-H716细胞中定量细胞内钙水平。用模拟载体、hTGR5表达载体或hTGR5 siRNA转染72小时后，洗涤细胞，并根据制造商方案使用Fluo-4 AM染料测定细胞内钙。然后用INT-777（1 μM或10 μM）处理细胞，并测量钙流。[2] 根据制造商说明书，在INT-777处理（有或无葡萄糖或抑制剂）后，测量NCI-H716和STC-1细胞培养上清液中的GLP-1释放。对于STC-1细胞，向培养基中添加DPP4抑制剂以防止GLP-1降解。[2] 使用细胞外通量分析仪测量STC-1细胞的细胞耗氧量。细胞先用载体或腺苷酸环化酶抑制剂MDL-12330A处理，然后用1 μM INT-777处理。[2] 根据制造商说明书，在INT-777处理后测量STC-1细胞裂解物中的ATP/ADP比值。[2] 测量从高脂喂养的TGR5-Tg和对照小鼠分离的离体回肠外植体中的GLP-1释放。外植体暴露于指定浓度的石胆酸中1小时。[2] |
| 动物实验 |
在胆瘘大鼠模型中，INT-777以1 μmol/min/kg体重的剂量，经股静脉输注或十二指肠内给药1小时。收集并分析胆汁分泌参数。[1]
在饮食诱导肥胖小鼠中，采用药理学方法给予INT-777，以评估其对能量消耗、体重、脂肪含量和肝脏组织学的影响。[1] 在C57BL/6J小鼠的饮食干预研究中，通过给8周龄小鼠喂食高脂饮食（60%热量来自脂肪）14周来诱导饮食诱导肥胖。然后将INT-777与高脂饮食混合，剂量足以使体内剂量达到30 mg/kg/天，持续长达10周。监测体重、食物摄入量和代谢参数。 [2] 在db/db小鼠中，14周龄的小鼠饲喂普通饲料，饲料中添加或不添加INT-777（30 mg/kg/天），持续6周。[2] 在TGR5⁺/⁺和TGR5⁻/⁻小鼠中，开始饲喂高脂饲料9周。在第一次口服葡萄糖耐量试验（OGTT）后，在高脂饲料中添加INT-777（30 mg/kg/天），持续4周，随后进行第二次OGTT。 [2] 在急性 GLP-1 分泌研究中，饲喂标准饲料的 TGR5⁺/⁺ 和 TGR5⁻/⁻ 小鼠在口服葡萄糖负荷试验前 30 分钟，分别灌胃生理盐水或 INT-777（30 mg/kg），INT-777 单独给药或与 DPP4 抑制剂（3 mg/kg）联合给药。采集血液样本用于 GLP-1 测定。[2] 在用 INT-777 进行 10 周饮食干预后，对 DIO 小鼠进行高胰岛素-正常血糖钳夹试验。小鼠禁食，并持续输注预先配制的胰岛素（10 mU/min/kg）以维持血糖正常。输注氚标记葡萄糖以评估葡萄糖动力学，并注射 ¹⁴C-2-脱氧葡萄糖以测量组织特异性葡萄糖摄取。 [2] 通过将含有TGR5基因座的细菌人工染色体（BAC）注射到卵母细胞中，构建了TGR5转基因（TGR5-Tg）小鼠。通过将携带floxed TGR5等位基因的小鼠与CMV-Cre转基因小鼠杂交，构建了TGR5缺陷（TGR5⁻/⁻）小鼠。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
INT-777在人粪便肉汤培养基中高度稳定，孵育12小时后仍有超过95%保持不变，表明其对细菌7α-脱羟基化具有抵抗力。[1]
它具有强效的利胆作用，最大胆汁分泌率高，且不易发生结合反应；静脉或十二指肠内输注后，超过90%以非结合形式分泌到胆汁中。[1] INT-777的白蛋白结合率相对较高（62%），这可能有助于其进入全身循环并靶向外周组织。[1] 高效液相色谱分析证实，在经处理的小鼠血浆中存在INT-777，其浓度与内源性胆酸和β-鼠胆酸的浓度相当。 [2] INT-777治疗并未显著改变血浆胆汁酸的总体组成或参与胆汁酸合成的酶的表达谱。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
INT-777 是一种胆酸衍生物，经 6α-乙基和 23(S)-甲基修饰，旨在增强 TGR5 的选择性和代谢稳定性。[1]
它是一种强效且选择性的 TGR5 激动剂，在糖尿病、肥胖症和非酒精性脂肪性肝炎等代谢性疾病的治疗中具有潜在的应用价值。[1] 该化合物不易被肠道细菌代谢，并具有良好的理化性质，例如与天然胆汁酸相比，其去污性更低，代谢稳定性更高。[1] INT-777 是一种胆酸的半合成衍生物，经 6α-乙基和 23(S)-甲基修饰，旨在作为一种强效且选择性的 TGR5 激动剂，对 FXR 无活性。 [2] 其作用机制涉及TGR5的激活，导致细胞内cAMP水平升高，进而增强线粒体氧化磷酸化，提高ATP/ADP比值，关闭K_ATP通道，通过钙通道动员钙离子，最终刺激肠内分泌L细胞释放GLP-1。[2] INT-777激活TGR5还能增加棕色脂肪组织和肌肉的能量消耗，从而有助于减少脂肪堆积并改善代谢状况。[2] 该研究表明，使用INT-777靶向TGR5是一种有前景的治疗糖尿病、肥胖症及相关代谢紊乱（如非酒精性脂肪性肝炎（NASH））的策略。 [2] 研究表明，INT-777 改善葡萄糖耐量、胰岛素敏感性和减少肝脂肪变性的作用依赖于 TGR5 的表达，因为在 TGR5 缺陷小鼠中，这些作用消失或减弱。[2] |
| 分子式 |
C₂₇H₄₆O₅
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|---|---|
| 分子量 |
450.6511
|
| 精确质量 |
450.335
|
| CAS号 |
1199796-29-6
|
| 相关CAS号 |
INT-777 R-enantiomer;1198786-98-9
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| PubChem CID |
45483949
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
4.33
|
| tPSA |
97.99
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
710
|
| 定义原子立体中心数目 |
13
|
| SMILES |
CC[C@@H]1[C@@H]2C[C@@H](CC[C@@]2([C@H]3C[C@@H]([C@]4([C@H]([C@@H]3[C@@H]1O)CC[C@@H]4[C@H](C)C[C@H](C)C(=O)O)C)O)C)O
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| InChi Key |
NPBCMXATLRCCLF-IRRLEISYSA-N
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| InChi Code |
InChi Code
InChI=1S/C27H46O5/c1-6-17-20-12-16(28)9-10-26(20,4)21-13-22(29)27(5)18(14(2)11-15(3)25(31)32)7-8-19(27)23(21)24(17)30/h14-24,28-30H,6-13H2,1-5H3,(H,31,32)/t14-,15+,16-,17-,18-,19+,20+,21+,22+,23+,24-,26+,27-/m1/s1
|
| 化学名 |
(2S,4R)-4-((3R,5S,6R,7R,8R,9S,10S,12S,13R,14S,17R)-6-ethyl-3,7,12-trihydroxy-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)-2-methylpentanoic
acid
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| 别名 |
INT-777 S-EMCAINT 777 6-EMCAINT777
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Ethanol :≥ 50 mg/mL (~110.95 mM)
DMSO : ≥ 31 mg/mL (~68.79 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (11.10 mM) in 0.5% CMC-Na/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2190 mL | 11.0951 mL | 22.1902 mL | |
| 5 mM | 0.4438 mL | 2.2190 mL | 4.4380 mL | |
| 10 mM | 0.2219 mL | 1.1095 mL | 2.2190 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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