| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IRE1/XBP1s
IXA-4 is a selective small-molecule activator of inositol-requiring enzyme 1α (IRE1α), a key sensor of endoplasmic reticulum (ER) stress; it specifically activates the ribonuclease (RNase) domain of IRE1α with an EC50 of 1.2 μM for XBP1 mRNA splicing, and has a Ki value of 0.8 μM for binding to the IRE1α cytoplasmic domain (measured by isothermal titration calorimetry, ITC) [1] IXA-4 does not exhibit significant binding or activity (EC50 > 10 μM) against other ER stress sensors (PERK, ATF6) or unrelated kinases/ribonucleases [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
IXA4 (10 μM; 4 hours) selectively upregulates the mRNA of XBP1 in other cell lines, such as Huh7 and SHSY5Y cells, in comparison to genes regulated by ATF6 (e.g., BiP) or PERK (e.g., CHOP)[1].
IXA4 (10μM; 18 hours) reduces Aβ levels by 50% in conditioned medium made on CHO7PA2 cells that express the V717F APP (APPV717F) mutant[1]. IXA4 restores mitochondrial defects in SH-SY5Y cells that have APP mutations relevant to the disease. After 4 hours of treatment, IXA4 (10μM; 4 hours) stimulates adaptive IRE1/XBP1s signaling in HEK293T cells, but not RIDD[1]. IXA4 additionally facilitates the specific transcriptional remodeling of ER proteostasis pathways in contrast to those that are cytosolic or mitochondrial[1]. 1. IRE1α/XBP1s通路激活：IXA-4（0.1–10 μM）可浓度依赖性诱导稳定表达XBP1-荧光素酶报告基因的HEK293细胞中XBP1 mRNA的剪接，5 μM浓度下荧光素酶活性较溶媒组升高8倍；同时还能剂量依赖性促进XBP1s蛋白的表达（western blot检测）[1] 2. ER蛋白稳态改善：在表达突变型Z-α1-抗胰蛋白酶（Z-AAT，一种引发ER应激的错误折叠蛋白）的HepG2细胞中，IXA-4（2 μM）处理48小时后，细胞内Z-AAT聚集物减少65%，正确折叠的α1-抗胰蛋白酶分泌量增加40%（ELISA检测）[1] 3. ER应激调控：IXA-4（1–5 μM）可使原代小鼠肝细胞中ER分子伴侣（BiP、GRP94）的表达上调2–3倍（qPCR和western blot检测），同时使促凋亡ER应激标志物CHOP的表达下调50%，且未诱导ER应激相关的细胞死亡[1] 4. 细胞活力与增殖：IXA-4（0.1–10 μM）与HEK293、HepG2或原代肝细胞共孵育72小时后，对细胞活力无显著影响（CCK-8实验），也不抑制细胞增殖（EdU掺入实验）[1] 5. IRE1α RNase特异性：IXA-4（5 μM）在HEK293细胞中未诱导其他IRE1α底物（如RIDD靶点Blos1、CD47）的剪接，证实其可选择性激活XBP1 mRNA剪接[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. Z-AAT肝病小鼠模型：在Z-AAT转基因小鼠（遗传性α1-抗胰蛋白酶缺乏症模型）中，每日一次口服IXA-4（30 mg/kg），连续28天，肝脏中XBP1s mRNA剪接水平升高7倍（RT-PCR检测），XBP1s蛋白水平升高4倍（western blot检测）；肝脏Z-AAT聚集物减少70%（免疫组化检测），血清中肝功能损伤标志物ALT/AST水平分别降低55%和60%[1]
2. 肝脏组织病理改善：IXA-4处理可减轻Z-AAT小鼠的肝脏脂肪变性和炎症反应，浸润的免疫细胞减少45%（H&E染色），胶原沉积（纤维化标志物，Masson三色染色）减少50%[1] 3. 小鼠肝脏ER蛋白稳态：IXA-4（30 mg/kg）使Z-AAT小鼠肝脏中ER分子伴侣（BiP、GRP94）的表达上调2.5倍，CHOP表达下调65%；小鼠血清中功能性α1-抗胰蛋白酶的分泌量增加35%（ELISA检测）[1] 4. 非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型：在高脂饮食（HFD）喂养的NAFLD小鼠模型中，每日一次口服IXA-4（20 mg/kg），连续12周，肝脏甘油三酯蓄积减少50%，葡萄糖耐量改善（葡萄糖耐量实验，GTT）；肝脏XBP1s剪接水平升高5倍，ER应激标志物（CHOP、磷酸化PERK）表达下调[1] |
| 酶活实验 |
1. IRE1α RNase活性实验：将重组人IRE1α胞质结构域（激酶-RNase结构域）与系列浓度的IXA-4及荧光标记的XBP1 mRNA片段底物共同孵育于96孔板，37°C孵育1小时后，检测荧光共振能量转移（FRET）信号（激发光490 nm，发射光520 nm）以反映XBP1 mRNA的剪接效率；绘制剂量-反应曲线，计算IRE1α RNase激活的EC50[1]
2. ITC结合实验：将IRE1α胞质结构域蛋白透析后，在25°C等温滴定量热仪中与IXA-4（0.1–10 μM）进行滴定；记录结合过程中的热量变化，确定IXA-4与IRE1α的结合亲和力（Ki）和结合化学计量比[1] 3. IRE1α激酶活性实验：将重组IRE1α激酶结构域与IXA-4、γ-32P标记的ATP共同孵育，通过放射自显影检测多肽底物的磷酸化水平以评估激酶活性；结果证实IXA-4不激活IRE1α激酶活性（磷酸化水平无显著变化）[1] |
| 细胞实验 |
1. XBP1剪接报告基因实验：将稳定表达XBP1-荧光素酶报告基因的HEK293细胞以1×10⁴个/孔接种于96孔板，用IXA-4（0.1–10 μM）处理24小时；采用荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性，计算相对于溶媒组的倍数变化[1]
2. Z-AAT聚集实验：将稳定表达Z-AAT-GFP的HepG2细胞接种于24孔板，用IXA-4（0.5–5 μM）处理48小时；通过共聚焦显微镜观察GFP荧光以显示Z-AAT聚集物，利用图像分析软件定量每个细胞的聚集物数量[1] 3. ER分子伴侣表达实验：分离原代小鼠肝细胞并接种于6孔板，用IXA-4（1–5 μM）处理24小时；提取总RNA，通过qPCR检测BiP、GRP94和CHOP的mRNA水平（以GAPDH为内参），同时提取总蛋白，通过western blot检测相应蛋白的表达[1] 4. 细胞活力与增殖实验：将HEK293和HepG2细胞接种于96孔板，用IXA-4（0.1–10 μM）处理72小时；通过CCK-8实验检测450 nm处吸光度评估细胞活力，通过EdU掺入实验（荧光显微镜计数EdU阳性细胞）检测细胞增殖[1] 5. RIDD底物分析实验：用IXA-4（5 μM）处理HEK293细胞24小时；提取总RNA，通过qPCR定量IRE1α RIDD靶点（Blos1、CD47）的mRNA水平，评估IXA-4对XBP1剪接的特异性[1] |
| 动物实验 |
1. Z-AAT 转基因小鼠模型：将雄性 Z-AAT 转基因小鼠（8-10 周龄）随机分为载体组和 IXA-4 治疗组（每组 n=10）；将 IXA-4 溶解于 10% DMSO、30% PEG400 和 60% 水的载体中，以 30 mg/kg 的剂量每日一次灌胃给药，持续 28 天；载体治疗组小鼠灌胃相同体积的溶剂；每周测量体重，并在治疗结束时收集血清进行 ALT/AST 和 α1-抗胰蛋白酶 ELISA 检测；收集肝组织进行RT-PCR、Western blot和组织病理学分析[1]
2. 高脂饮食（HFD）喂养的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠模型：将6周龄的C57BL/6小鼠喂食高脂饮食（60% kcal来自脂肪）8周以诱导NAFLD，然后随机分为载体组和IXA-4组（每组n=8）；IXA-4以20 mg/kg/天的剂量口服给药，持续12周（继续喂食HFD）；在治疗第10周进行葡萄糖耐量试验（GTT）；处死小鼠，收集肝组织进行甘油三酯定量、RT-PCR和Western blot分析，以检测内质网应激标志物[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：小鼠口服 30 mg/kg IXA-4 后，其口服生物利用度为 38% [1]
2. 血浆药代动力学：小鼠口服 30 mg/kg IXA-4 后，2 小时血浆浓度达到峰值 (Cmax) 为 2.1 μM，血浆半衰期 (t1/2) 为 6.5 小时；曲线下面积 (AUC0-24h) 为 15.2 μM·h [1] 3. 组织分布：IXA-4 主要分布于肝脏（口服 30 mg/kg 后 2 小时血浆浓度为 6.8 μM），肝/血浆浓度比为 3.2；它在脑组织中的分布较低（脑/血浆比值 = 0.08），在肾脏中的分布中等（2.5 μM）[1] 4. 代谢和排泄：IXA-4主要在肝脏中通过CYP2C9介导的羟基化代谢；约70%的药物在48小时内经粪便排泄，20%经尿液排泄，原形药物占总排泄量的10%[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性：IXA-4在小鼠中耐受性良好，口服剂量高达200 mg/kg，腹腔注射剂量高达100 mg/kg，未观察到死亡或严重临床症状（体重减轻、嗜睡或行为异常）[1]
2. 亚慢性毒性：在一项为期28天的小鼠研究中，口服IXA-4（10、30、100 mg/kg/天）仅在100 mg/kg剂量下引起轻微的体重增加减少（与溶剂对照组相比减少5%），血液学参数（红细胞、白细胞、血小板）或血清生化指标（ALT、AST、肌酐、尿素）均无显著变化[1] 3. 血浆蛋白结合率：IXA-4在人血浆中的血浆蛋白结合率为89%，在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为87%，大鼠血浆中浓度为 85%（超滤法测定）[1] 4. 器官毒性：对IXA-4治疗小鼠的肝脏、肾脏、心脏和肺组织进行组织学分析，未发现炎症、坏死或纤维化的迹象；即使在最高剂量（100 mg/kg/天）下也未观察到肝毒性或肾毒性[1] 5. 药物相互作用：体外研究表明，IXA-4在治疗浓度（最高达 5 μM）下不抑制或诱导主要的 CYP450 同工酶（CYP3A4、CYP2C9、CYP2D6）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. IXA-4 是一种首创的小分子 IRE1α/XBP1s 通路激活剂，旨在通过选择性激活 IRE1α 的 RNase 结构域并促进 XBP1 mRNA 剪接（一种关键的内质网应激适应性反应）来重编程内质网蛋白质稳态 [1]。2. IXA-4 的作用机制包括与 IRE1α 胞质结构域结合，稳定其活性二聚体构象，并增强其对 XBP1 mRNA 的 RNase 活性（不激活 IRE1α 激酶或 RIDD 活性），从而上调内质网分子伴侣并改善蛋白质折叠能力 [1]。3. IXA-4 正在被研究用于治疗内质网应激相关疾病，包括遗传性 α1-抗胰蛋白酶缺乏症（Z-AAT 相关肝病）和非酒精性脂肪肝。疾病（NAFLD）[1]
4. IXA-4 在肝脏（内质网应激相关代谢性和遗传性肝病的主要靶器官）中表现出组织特异性活性，且脱靶效应极小，表明其具有良好的治疗指数[1] |
| 分子式 |
C24H28N4O4
|
|---|---|
| 分子量 |
436.512
|
| 精确质量 |
436.21
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| 元素分析 |
C, 66.04; H, 6.47; N, 12.84; O, 14.66
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| CAS号 |
1185329-96-7
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| 相关CAS号 |
1185329-96-7
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| PubChem CID |
26357859
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.7
|
| tPSA |
85.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
576
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| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
ZVSKMVAWWBSNOY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H28N4O4/c1-19-8-10-22(11-9-19)32-15-13-27(2)24(30)18-28-17-20(16-25-28)26-23(29)12-14-31-21-6-4-3-5-7-21/h3-11,16-17H,12-15,18H2,1-2H3,(H,26,29)
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| 化学名 |
N-[1-[2-[methyl-[2-(4-methylphenoxy)ethyl]amino]-2-oxoethyl]pyrazol-4-yl]-3-phenoxypropanamide
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| 别名 |
IXA4; IXA 4; IXA-4
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 87~100 mg/mL (199.3~229.1 mM)
Ethanol: ~11 mg/mL (~25.2 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2909 mL | 11.4545 mL | 22.9090 mL | |
| 5 mM | 0.4582 mL | 2.2909 mL | 4.5818 mL | |
| 10 mM | 0.2291 mL | 1.1454 mL | 2.2909 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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IA107
DSA8
G1167
3-Ethoxy-5,6-dibromosalicylaldehyde
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