| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Padnarsertib (KPT-9274) targets nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT) and p21-activated kinase 4 (PAK4) [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Padnarsertib 抑制 PAK4/β-catenin 通路，导致 NAD 耗尽，并降低许多 RCC 细胞系侵袭、迁移和保持活力的能力。根据使用重组 NAMPT 抑制 NAMPT 的无细胞酶实验，Padnarsertib 的 IC50 约为 120 nM。在 RCC 细胞系中，padnarsertib 可引起细胞凋亡并损害 G2-M 运输 [2]。
在多种人肾细胞癌（RCC）细胞系中，Padnarsertib (KPT-9274)处理可减少细胞周期G2-M期转换（5 μM KPT-9274处理72h后经Muse Analyzer检测，p<0.05 vs DMSO对照组）、诱导细胞凋亡（72h处理后通过Muse Analyzer检测膜联蛋白V染色，p<0.05 vs DMSO对照组），并降低细胞侵袭和迁移能力。对于经1 μM或5 μM KPT-9274处理24h的786-O RCC细胞：Matrigel侵袭实验显示迁移细胞数减少（p<0.05 vs DMSO），Transwell迁移实验表明迁移至下室的细胞数降低（p<0.05 vs DMSO），划痕/伤口愈合实验发现划痕后12h和24h迁移至伤口区域的细胞数减少（p<0.05 vs DMSO）。KPT-9274可剂量依赖性降低RCC细胞系中的总NAD+NADH水平（孵育48h，p<0.05 vs DMSO），而对正常肾近端小管上皮细胞（RPTEC）的影响较小。机制上，KPT-9274抑制PAK4通路，降低核内β-连环蛋白（β-catenin）水平，并下调Wnt/β-catenin靶基因cyclin D1和c-Myc的表达（不同浓度KPT-9274处理72h后通过蛋白质印迹法检测）。RCC细胞中NAPRT1的下调使其依赖NAMPT合成NAD，KPT-9274对NAMPT的抑制作用降低了RCC细胞的存活率。此外，KPT-9274还可下调RCC细胞中sirt1的表达（处理72h后蛋白质印迹法检测）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Padnarsertib 和舒尼替尼在抑制异种移植物生长方面表现出相似的功效。 Padnarsertib 似乎在体内没有毒性，并且对正常人 RPTEC 的影响极小 [2]。 Padnarsertib（口服；100 mg/kg 或 200 mg/kg；每天两次，持续 14 天）可导致动物模型中异种移植物生长减少，但不会显着影响动物体重。 8 小时实验结束时，小鼠血浆和肿瘤中的浓度分别为 10757 ng/mL 和 10647 ng/mL [3]。
在荷皮下786-O（VHL突变）人RCC移植瘤的裸鼠模型中，每日两次口服给予Padnarsertib (KPT-9274) 100 mg/kg或200 mg/kg，可剂量依赖性抑制肿瘤生长（p<0.05 vs 溶媒对照组），且无明显毒性（实验期间小鼠体重保持稳定）。对收获肿瘤的蛋白质印迹分析证实了KPT-9274的靶点效应（PAK4/NAMPT通路相关蛋白下调）[2] |
| 酶活实验 |
开展无细胞实验评估NAMPT活性随Padnarsertib (KPT-9274)浓度变化的情况，检测不同浓度KPT-9274存在下NAMPT的酶活性，以明确药物对NAMPT的抑制作用。此外，在U-2骨肉瘤细胞中通过CRISPR-Cas9技术敲除PAK4，采用MTT实验评估细胞存活率，蛋白质印迹法验证PAK4敲除效果，结果显示细胞存活曲线右移，表明细胞对PAK4存在依赖性[2]
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| 细胞实验 |
细胞活力实验：将RCC细胞系和正常RPTEC细胞接种于96孔板（3000个细胞/孔，n=8），与DMSO或Padnarsertib (KPT-9274)共同孵育72h；采用MTT法检测细胞活力，结果显示KPT-9274可选择性降低RCC细胞活力（p<0.05 vs DMSO对照组），对RPTEC细胞影响较小。
NAD+NADH检测实验：将300个细胞/孔接种于96孔板（n=4），与DMSO或KPT-9274孵育48h；检测RCC细胞系和RPTEC细胞中的总NAD+NADH水平，发现KPT-9274可降低RCC细胞中的NAD+NADH水平（p<0.05 vs DMSO）。 细胞周期分析实验：将RCC细胞和RPTEC细胞培养至50%汇合度，与DMSO或5 μM KPT-9274孵育72h；通过Muse Analyzer分析细胞周期分布，显示RCC细胞G2-M期转换减少（p<0.05 vs DMSO）。 凋亡检测实验：KPT-9274孵育72h后，采用膜联蛋白V染色通过Muse Analyzer检测细胞凋亡，结果显示RCC细胞凋亡增加（p<0.05 vs DMSO）。 蛋白质印迹实验：将RCC细胞接种于6孔板（1000个细胞/孔），与不同浓度KPT-9274孵育72h；提取细胞裂解液进行蛋白质印迹，检测PAK4/NAMPT通路相关蛋白（如β-catenin、cyclin D1、c-Myc、sirt1）和凋亡标志物裂解型PARP的表达。 侵袭/迁移实验：786-O细胞经DMSO、1 μM或5 μM KPT-9274处理24h后，采用Matrigel包被的Transwell小室进行侵袭实验（20h后固定、染色并计数迁移细胞），Transwell小室进行迁移实验（染色、拍照并计数迁移细胞），以及划痕/伤口愈合实验（划痕后0、12、24h监测迁移至伤口区域的细胞数）。 siRNA转染实验：将RCC细胞和RPTEC细胞培养至50%汇合度，转染PAK4特异性siRNA或阴性对照siRNA；随后进行蛋白质印迹（验证PAK4敲低效果）和流式细胞术凋亡检测[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：小鼠[1]
剂量：100mg/kg 或 200 mg/kg 给药途径：口服；100mg/kg 或 200 mg/kg；每日两次；14 天 实验结果：显示 KPT-9274 治疗组小鼠的异种移植瘤生长显著减少。 将 786-O 人肾细胞癌 (RCC) 细胞皮下移植到裸鼠（每组 n=8）体内；肿瘤形成后，小鼠经口灌胃给予 Padnarsertib (KPT-9274)，剂量为 100 mg/kg 或 200 mg/kg，每日两次（载体对照组仅灌胃溶剂）。每周使用游标卡尺测量肿瘤体积，并计算平均肿瘤体积±标准误（SEM）。同时记录小鼠体重以评估毒性。实验结束时，处死小鼠，收集并混合肿瘤组织，对肿瘤裂解液进行免疫印迹分析，以检测靶蛋白（PAK4/NAMPT通路相关蛋白），并以β-肌动蛋白作为内参[2]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
帕纳塞替尼是一种口服生物利用度高的丝氨酸/苏氨酸激酶P21活化激酶4 (PAK4) 和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD) 合成酶烟酰胺磷酸核糖转移酶 (NAMPT；NAMPRTase) 的抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，帕纳塞替尼通过变构作用与PAK4结合，使其不稳定并导致其降解。这抑制了PAK4介导的信号传导，诱导PAK4过表达肿瘤细胞死亡，并抑制其增殖。此外，帕纳塞替尼还能与NAMPT结合并抑制其活性。这会消耗细胞内NAD并抑制NAD依赖性酶，而NAD和NAD依赖性酶对于细胞快速增殖至关重要；最终导致NAMPT过表达的癌细胞死亡。 PAK4 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，属于 PAK 蛋白家族，在多种癌细胞类型中表达上调，它调控细胞的运动、增殖和存活。NAMPT 是一种负责维持细胞内 NAD 池的酶，在细胞代谢调控中发挥关键作用，并具有细胞因子样活性。NAMPT 在多种癌症和代谢紊乱中经常过表达，肿瘤细胞依赖 NAMPT 的活性来获取 NAD。
Padnarsertib (KPT-9274) 是一种 NAMPT 和 PAK4 的双重特异性抑制剂。肾细胞癌 (RCC) 是美国第六大常见恶性肿瘤，其发病率不断上升，且对现有疗法普遍耐药；PAK4 和 NAD 生物合成途径对 RCC 的生长至关重要。肾细胞癌 (RCC) 细胞中 NAPRT1 的下调使肿瘤依赖于 NAMPT 进行 NAD 合成，而 KPT-9274 对 NAMPT 的抑制作用可降低 RCC 细胞的存活率。KPT-9274 正在进行一项 I 期人体临床试验，用于治疗实体瘤和淋巴瘤，并有望转化为 RCC 的治疗 [2] |
| 分子式 |
C35H29F3N4O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
610.63
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| 精确质量 |
610.219
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| CAS号 |
1643913-93-2
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| 相关CAS号 |
1643913-93-2;Padnarsertib HCl;
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| PubChem CID |
117779453
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
857.5±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
472.4±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.677
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| LogP |
4.74
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| tPSA |
102
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
45
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| 分子复杂度/Complexity |
1040
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CN(CCC1(F)F)C(=O)C2=CC=C(C=C2)C3=CC(=C4C(=C3)C=C(O4)CNC(=O)/C=C/C5=CN=C(C=C5)N)C6=CC=C(C=C6)F
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| InChi Key |
MRFOPLWJZULAQD-SWGQDTFXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C35H29F3N4O3/c36-28-9-7-24(8-10-28)30-19-26(23-3-5-25(6-4-23)34(44)42-15-13-35(37,38)14-16-42)17-27-18-29(45-33(27)30)21-41-32(43)12-2-22-1-11-31(39)40-20-22/h1-12,17-20H,13-16,21H2,(H2,39,40)(H,41,43)/b12-2+
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.41 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.41 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6377 mL | 8.1883 mL | 16.3765 mL | |
| 5 mM | 0.3275 mL | 1.6377 mL | 3.2753 mL | |
| 10 mM | 0.1638 mL | 0.8188 mL | 1.6377 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
KPT-9274 inhibits NAMPT and PAK4 and associated signaling pathways in RCC cells.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
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 KPT-9274 preferentially attenuates RCC cell viability and decreases RCC invasion and migration.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
KPT-9274 decreases G2/M transit and causes apoptosis preferentially in RCC cells.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
 KPT-9274 shows specificity for attenuation of PAK4 targets preferentially in RCC cells.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
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 KPT-9274 shows specificity for attenuation of NAD biosynthesis targets preferentially in RCC cells.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
 KPT-9274 attenuates xenograft growthin vivowith minimal toxicity and shows the expected on-target effects.Mol Cancer Ther.2016 Sep;15(9):2119-29. |
Carba1
Daporinad hydrochloride
Nampt-IN-14
Nampt-IN-15
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
