HIV Reverse transcription (IC50 = 119 nM); NNRTI
Non-nucleoside HIV reverse transcriptase inhibitor (NNRTI) (HIV-1 wild-type reverse transcriptase (RT) IC50 = 0.119 μM) [1]

与针对分离 RT 酶的有希望的结果一致，lerivirine 对多种耐药性和野生型 HIV 病毒株显示出出色的功效 [1]。
Lersivirine是第二代NNRTI，正在进行临床开发，用于治疗HIV-1。Lersivirine在结构上与依法韦仑不同，并以一种新的方式结合RT酶[2]。

---

Lersivirine (UK-453061) 对HIV-1逆转录酶（RT）显示出强效抑制活性，IC50为0.119 μM。[1]
Lersivirine (UK-453061) 在细胞培养中对SupT1细胞中感染的HIV-1 RF毒株表现出强效抗病毒活性，IC50（AVE50）为4.9 nM。[1]
Lersivirine (UK-453061) 对一系列突变RT酶显示出良好的耐药谱，与野生型RT相比，对几个关键突变如K103N（1.6倍）、Y181C（2.7倍）和F227L（5.0倍）的耐药倍数变化相对较低。[1]
Lersivirine (UK-453061) 在SupT1细胞中的细胞毒性浓度（CC50）>30 μM，表明其体外治疗指数较高。[1]

Lersivirine 会导致交配的 Crl:CD1(ICR) 小鼠骨骼变异，这与发育迟缓和胎儿骨化减少有关。 Lersivirine（口服管饲；0、150、350 和 500 mg/kg；每天一次；妊娠第 6 至 17 天，随后在妊娠第 18 天进行剖腹产）在前 2 天以 250 mg 诱导肝代谢酶/ kg，然后将剂量增加至 500 mg/kg/天。

---

产妇和剖宫产观察[2]
治疗对产妇存活、流产或早产没有影响；21、19、18和22只雌性分别以0、150、350和500mg/kg/天的剂量产仔（表1）。Lersivirine/勒西韦林治疗不影响体重和体重增加；在150、350和500mg/kg/天的剂量下，GD 18的体重分别为对照组的100%、99%和102%（表2）。饲料消耗量在350和500mg/kg/天时减少（表2）。在350和500 mg/kg/天的剂量下，整个给药期（GD 6-18）的饲料消耗量明显低于同期对照组的值（p<0.05或p<0.01）（分别为对照组的92%和90%）。

---

胎儿形态学[2]
母体接受Lersivirine/雷西韦林治疗后，未出现任何外部、内脏或骨骼畸形（表4）。在350mg/kg/天和500mg/kg/天的三个胎儿（1.3%/窝）的外部检查中观察到腭裂内侧裂；然而，鉴于该实验室的背景发病率为每窝3.2%，因此认为该发病率与雷西韦林无关。在0、150、350和500mg/kg/天的剂量下，分别有5只（2.1%/窝）、4只（1.6%/窝），5只（2.1%/窝）和2只（0.7%/窝）出现前肢和/或后肢旋转；然而，鉴于发病率没有剂量反应性增加，这一发现不能归因于雷西韦林。500 mg/kg/天组中发生的唯一骨骼畸形是两个（1.4%/窝）胎儿的腰椎弓融合，鉴于缺乏其他骨骼畸形发生的证据，单窝两个胎儿的这种情况不是由雷西韦林引起的。

逆转录酶（RT）抑制实验测定了化合物对野生型和突变型HIV-1 RT酶的IC50值。实验细节已另行报道。[1]
体外多非利特结合实验用于评估潜在的hERG通道抑制作用，作为离子通道选择性和脱靶药理学指标。[1]

抗病毒活性（IC50, AVE50）在细胞培养中使用感染了HIV-1 RF毒株的SupT1细胞进行测定。实验细节已另行报道。[1]
细胞毒性（CC50）在SupT1细胞中进行评估，以确定化合物的潜在毒性作用。[1]

动物和处理[2]
一百只疑似怀孕的雌性Crl:CD1(ICR)小鼠被随机分为四组，每组25只。另有63只疑似怀孕的小鼠用于毒代动力学样本采集；对照组每组9只，勒西韦林剂量组每组18只。小鼠到达时年龄约为72天，体重约为28克。小鼠单独饲养于不锈钢底笼中。实验动物自由摄取水和饲料，房间采用12小时光照/12小时黑暗循环。
将lersivirine悬浮于含0.1% Tween 80的0.5%甲基纤维素水溶液中，于妊娠第6至17天（妊娠第6-17天）每日一次灌胃给药，剂量分别为0、150、350和500 mg/kg/天，给药体积为10 ml/kg。在最高测试剂量（500 mg/kg/天）下，前两天以250 mg/kg/天的剂量（给药体积为5 ml/kg）给药，之后以500 mg/kg/天的剂量给药。该给药方案可在代谢酶诱导后维持最大耐受暴露量；先前研究表明，勒西韦林可诱导啮齿动物代谢（Walker等，2009）。剂量方案基于一项初步研究，该研究中，妊娠小鼠（每组10只）在妊娠第6天至第17天分别接受150、350和700 mg/kg/天的剂量给药（700 mg/kg/天组在前两天接受350 mg/kg/天的剂量）。在该研究中，700 mg/kg/天组的10只小鼠中有4只因濒死而被实施安乐死；其余所有动物均存活至预定的安乐死时间。因此，估计妊娠小鼠的最大耐受剂量为 500 mg/kg/天（前两天剂量为 250 mg/kg/天）。

---

勒西韦林暴露量评估[2]
在妊娠第 17 天，处死每组每时间点的三只小鼠后，从其下腔静脉采集血样（约 0.5 ml）。对于勒西韦林治疗组小鼠，分别在给药前以及给药后约 0.5、2、4、8 和 24 小时采集血样。将血样转移至肝素锂涂层试管中，通过离心分离血浆，并在 -20°C 下冷冻保存直至分析。采用经验证的高效液相色谱法 (HPLC) 测定血浆中勒西韦林的浓度。

---

进行了大鼠药代动力学研究。利西韦林（UK-453061）以2 mg/kg的剂量进行静脉注射（iv）。定期采集血样以测定药代动力学参数。[1]

母体毒代动力学[2]
表6列出了妊娠第6天至第17天给予勒西韦林后，妊娠第17天的勒西韦林血浆浓度。三个剂量组的母体血浆勒西韦林暴露量相似。

---

在人肝微粒体（HLM）中，勒西韦林（UK-453061）的半衰期（T1/2）大于30分钟。[1]
在人肝细胞实验中，预计游离清除率（CLb）为7 mL/min/kg。 [1]
在以2 mg/kg静脉注射剂量进行的鼠药代动力学研究中，Lersivirine (UK-453061)的清除率(CL)为25.9 mL/min/kg，分布容积(Vd)为1.6 L/kg，半衰期(T1/2)为1.6小时。与之前的先导化合物3相比，这有所改进，后者具有更高的清除率(>100 mL/min/kg)和更短的半衰期(0.1小时)。[1]
Lersivirine (UK-453061)具有良好的水溶性和制剂特性。[1]

勒西韦林是一种第二代非核苷类逆转录酶抑制剂，目前正处于治疗HIV-1的临床开发阶段。本研究开展了一项胚胎-胎儿发育毒性研究，旨在评估勒西韦林对妊娠小鼠的母体和发育毒性。将交配后的Crl:CD1(ICR)小鼠在妊娠第6至17天通过灌胃法每日一次给予0、150、350和500 mg/kg的勒西韦林，并在妊娠第18天进行剖腹产。高剂量组前两天的给药剂量为250 mg/kg，以诱导肝脏代谢酶的表达，之后剂量增加至500 mg/kg/天。这种给药方案能够维持高剂量组的药物暴露量，即使勒西韦林治疗后啮齿动物体内会发生显著的自身诱导。勒西韦林不会导致外部、内脏或骨骼畸形增加。在350和500 mg/kg/天的剂量下，观察到宫内生长迟缓，表现为胎儿体重减轻和与骨骼骨化延迟相关的变异增加。这些研究结果表明，勒西韦林对小鼠无致畸性。[2]

---

勒西韦林（UK-453061）在SupT1细胞中表现出>30 μM的细胞毒性浓度（CC50）。[1]
在多非替利结合试验中，勒西韦林（UK-453061）的IC50为6%置换率，表明在测试浓度下其对hERG通道的抑制潜力较低。 [1]
利西韦林 (UK-453061) 的微粒体游离分数为 80%，表明在微粒体稳定性测定中，有相当一部分游离药物可用于代谢。[1]

[1]. Pyrazole NNRTIs 4: selection of UK-453,061 (lersivirine) as a development candidate. Bioorg Med Chem Lett. 2009 Oct 15;19(20):5857-60.

[2]. Developmental toxicity study of lersivirine in mice. Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol. 2012 Jun;95(3):225-30.

勒西韦林是一种芳香醚。
勒西韦林已用于HIV-1治疗的临床试验。
勒西韦林是一种新一代吡唑类非核苷类逆转录酶抑制剂。勒西韦林对Y181位点发生突变的HIV病毒仍具有活性，而Y181位点突变会导致病毒对依非韦伦、依曲韦林和奈韦拉平产生耐药性。

---

本研究结果表明，勒西韦林对小鼠无致畸性。此外，勒西韦林对兔也无致畸性（Campion等，同期）。勒西韦林的研究结果，结合其他第一代非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）如地拉韦啶和奈韦拉平未见明显的致畸信号（Watts等，2004），支持以下结论：依非韦伦的致畸信号（Lewis-Hall，2005；Mofenson，2005）如果真实存在，则仅限于该化合物，并不代表NNRTI类药物的普遍效应。虽然勒西韦林治疗未导致胎儿畸形，但在接受350和500 mg/kg/天勒西韦林治疗的母亲所生的胎儿中观察到了发育毒性。发育毒性的主要表现是宫内生长迟缓，具体表现为胎儿体重减轻、骨骼变异增加和骨化部位减少。增加的骨骼变异主要与骨化延迟和肋骨发育不全有关。骨骼变异是指在实验物种和品系中常见的、代表可逆性发育延迟或加速的骨骼变化。这与胎儿畸形不同，胎儿畸形是指在该物种和品系中发生率较低的不可逆性改变。宫内生长迟缓的主要指标是胎儿体重。在350和500 mg/kg/天的剂量下，胎儿体重分别比对照组低16%和21%；而在150 mg/kg/天的剂量下，胎儿体重没有变化。除了胎儿体重降低外，在350和500 mg/kg/天的剂量下，母体接受勒西韦林治疗所导致的、提示发育迟缓的骨骼变异还包括：枕上骨、鼻骨、额骨、颈弓、耻骨或坐骨骨化不全，以及枕上骨缺失。此外，在350和500 mg/kg/天剂量组中，舌骨、尾椎、胸骨中心、前肢指骨、后肢跗骨和后肢指骨的骨化程度均有所降低。众所周知，骨化延迟与小鼠胎儿体重下降相关（Deol和Truslove，1957；McLaren和Michie，1958），而胎儿体重下降被认为与结构畸形相关的发病机制无关（Grüneberg，1955）。除宫内生长迟缓外，在500 mg/kg/天剂量组中还发现了两例死胎。未发现其他胎儿存活率受损的证据，各组存活胎儿的数量相当，且勒西韦林治疗与吸收胎儿数量的增加无关。然而，由于死胎发生率历来较低，因此不能排除其与治疗的潜在关联。从妊娠第6天开始每日重复给药，在妊娠第17天，母体血浆中勒西韦林的暴露量在剂量从150 mg/kg/天增加到500 mg/kg/天（约三倍）的过程中基本保持稳定。勒西韦林的特点是清除率和分布容积适中，因此具有良好的口服生物利用度，且全部清除均在肝脏进行（Allan等，2008）。然而，在啮齿动物中，勒西韦林给药会导致肝酶诱导，这种自身诱导会限制稳态下可达到的全身暴露量（Walker等，2009）。自身诱导的程度导致小鼠给药后第1天至第12天之间，0-24小时曲线下面积（AUC）下降8至10倍（Walker等，2009）。因此，虽然第17天（GD 17）各剂量组的暴露量基本持平，但相同剂量范围内第1天的暴露量显示Cmax和AUC(0–24 hr)分别增加了约5倍和10倍（来自一项为期1个月的毒理学研究的未发表数据）。因此，尽管本研究未测量，但在早期器官形成期，该剂量范围内的勒西韦林暴露量可能呈剂量比例增加，而这种增加并未体现在第17天的测量结果中，并且不同剂量水平之间的暴露量差异可能具有毒理学意义。总之，本研究结果表明，勒西韦林治疗不会导致小鼠胎儿畸形。母体暴露于勒西韦林的主要影响是宫内生长迟缓，表现为胎儿体重减轻和与骨化延迟相关的骨骼变异。[2]

---

我们基于近期报道的3-氰基苯氧基吡唑先导化合物3，制备了三组独立的强效非核苷类HIV逆转录酶抑制剂（NNRTI）。其中几种化合物在体外表现出非常有前景的抗HIV活性、安全性、药代动力学和药理学特性。我们描述了我们选择醇类化合物5（UK-453,061，勒西韦林）进行临床开发的分析和结论。[1]

---

勒西韦林（UK-453061）是基于其令人信服的体外整体特性而被从一系列吡唑类NNRTI中选为临床开发候选药物的，这些特性包括强效的抗HIV活性、良好的耐药性、良好的代谢稳定性和改善的药代动力学特性。 [1]
该药物旨在对具有临床意义的耐药突变的HIV毒株具有广谱活性，减少服药负担，最大限度地降低副作用和药物相互作用的风险，并提高与现有非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）相比的耐受性。[1]
已启动临床试验以评估其治疗HIV感染的潜力。[1]

C17H18N4O2

310.3504

310.142

C, 65.79; H, 5.85; N, 18.05; O, 10.31

473921-12-9

147362-57-0 (Loviride); 16837-52-8 (Oxymatrine）

16739244

Light yellow to khaki solid powder

1.2±0.1 g/cm3

455.4±45.0 °C at 760 mmHg

229.2±28.7 °C

0.0±1.2 mmHg at 25°C

1.595

3.3

94.86

1

5

6

23

456

0

MCPUZZJBAHRIPO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C17H18N4O2/c1-3-15-17(16(4-2)21(20-15)5-6-22)23-14-8-12(10-18)7-13(9-14)11-19/h7-9,22H,3-6H2,1-2H3

5-((3,5-diethyl-1-(2-hydroxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl)oxy)isophthalonitrile

UK 453061; UK-453061; UK-453,061; UK453,061; Lersivirine; 473921-12-9; 3-CYANO-5-[[3,5-DIETHYL-1-(2-HYDROXYETHYL)-1H-PYRAZOL-4-YL]OXY]BENZONITRILE; UK-453,061; 5-((3,5-diethyl-1-(2-hydroxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl)oxy)isophthalonitrile; 5-[3,5-diethyl-1-(2-hydroxyethyl)pyrazol-4-yl]oxybenzene-1,3-dicarbonitrile; R3ZGC15A9A; UK453061; UK 453,061

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~161.11 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (9.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 30.0 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。