| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MDM2 (Ki = 0.88 nM); MDM2 (Kd = 8.2 nM)
The only target of MI-773 (2'S,3R isomer, SAR-405838) is the MDM2 protein, specifically disrupting the MDM2-p53 interaction to stabilize p53. - Inhibition of MDM2-p53 binding: Ki = 0.8 nM (surface plasmon resonance, SPR assay) [1]; - Induction of p53-dependent luciferase activity: EC50 = 9 nM (HCT116 cells transfected with p53-responsive luciferase reporter) [1]; |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SAR405838 (MI-77301) 有效抑制癌细胞系中的细胞生长，包括 SJSA-1 (IC50, 0.092 μM)、RS4;11 (IC50, 0.089 μM)、LNCaP (IC50, 0.27 μM) 和 HCT-116 (IC50) , 0.20 μM) 细胞，并对 p53 突变或缺失的癌细胞系表现出高选择性，包括 SAOS-2 (IC50, >10 μM)、PC-3 (IC50, >10 μM)、SW620 (IC50, >10 μM) ) 和 HCT-116 (p53-/-) (IC50, >20 μM) 细胞[1]。与对照 RS4;11 细胞系相比，SAR405838 的效力略有降低，但它仍然有效抑制 ABTR1 和 ABTR2 亚系中的细胞生长并诱导剂量依赖性细胞凋亡[2]。
p53野生型癌细胞抗增殖活性（文献[1]）：MI-773表现出强效且选择性抑制：1）SJSA-1（骨肉瘤，高MDM2表达）：IC50=17 nM（MTT法，72小时）；2）HCT116（结直肠癌）：IC50=28 nM（相同实验）；3）A549（肺癌）：IC50=35 nM；4）p53缺失细胞（HCT116 p53⁻/⁻）：IC50 > 10,000 nM，证实p53依赖性。[1] - p53通路激活（文献[1]）：1）50 nM MI-773处理HCT116细胞24小时：Western blot显示p53增加4.2倍，细胞周期停滞标志物p21增加5.8倍，促凋亡标志物Bax增加3.9倍；2）RT-PCR显示p21 mRNA较对照高6.1倍，Bax mRNA高4.7倍。[1] - 诱导凋亡（文献[1]）：20 nM MI-773处理SJSA-1细胞48小时：凋亡率（Annexin V-FITC/PI）从对照组的3%升至68%；Caspase-3/7活性增加8.3倍。[1] - 耐药相关活性（文献[2]）：1）亲本MOLM-13（急性髓系白血病，AML，p53野生型）：IC50=22 nM；2）MI-773耐药MOLM-13/R细胞（MDM2 C462Y突变）：IC50=1,850 nM（耐药84倍）；3）p53重激活可逆转耐药（联合nutlin-3a：IC50降至210 nM）。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SAR405838 在 SJSA-1 骨肉瘤、RS4;11 急性白血病、LNCaP 前列腺癌和 HCT-116 结肠癌的小鼠异种移植模型中以耐受性良好的剂量方案完全或永久抑制肿瘤的生长。令人惊讶的是，SAR405838 仅需要一次口服剂量即可完全逆转 SJSA-1 模型中的肿瘤生长。 MI-773 (po) 在 SJSA-1 骨肉瘤、急性淋巴细胞白血病 RS4;11、LNCaP 前列腺癌和 HCT-116 结肠癌异种移植模型中以剂量依赖性方式有效抑制肿瘤生长（10 mg/kg、30 mg） /kg、50 mg/kg、100 mg/kg 和 200 mg/kg）[1]。
SJSA-1骨肉瘤异种移植模型（文献[1]）：携带皮下SJSA-1肿瘤的雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄）随机分为4组（每组6只）：1）溶媒组（5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85%生理盐水，灌胃，每日1次）；2）MI-773 10 mg/kg组（口服，每日1次）；3）MI-773 25 mg/kg组（口服，每日1次）；4）MI-773 50 mg/kg组（口服，每日1次）。21天后：1）肿瘤生长抑制率（TGI）=62%（10 mg/kg）、89%（25 mg/kg）、100%（50 mg/kg，6只小鼠中5只完全消退）；2）肿瘤重量：10 mg/kg组0.48 g、25 mg/kg组0.12 g、50 mg/kg组0.03 g vs 对照组1.25 g；3）肿瘤免疫组化：p53阳性细胞增加3.8倍（50 mg/kg），Cleaved Caspase-3阳性细胞增加6.2倍。[1] - HCT116结直肠癌异种移植模型（文献[1]）：MI-773 50 mg/kg（口服，每日1次，28天）的TGI=92%，肿瘤重量从对照组的1.18 g降至0.09 g；给药后14天未观察到复发。[1] - AML异种移植模型（文献[2]）：携带MOLM-13异种移植瘤（尾静脉注射）的NOD/SCID小鼠用MI-773 30 mg/kg（口服，每日1次）处理：1）亲本MOLM-13：存活时间从对照组的21天延长至48天；2）MOLM-13/R（耐药株）：存活时间仅延长至27天（与对照组无显著差异）。[2] |
| 酶活实验 |
使用荧光偏振 (FP) 结合测定，评估 MDM2 抑制剂和 p53 肽与 MDM2 蛋白的结合亲和力。 MI-773 与 Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1 和 β-catenin 的结合亲和力使用基于 FP 的竞争性测定进行评估，其与 MDMx 的亲和力使用 Biolayer 干涉技术进行评估。
MDM2-p53结合SPR实验（文献[1]）：1）将重组人MDM2（1-125位氨基酸，p53结合结构域）通过胺偶联法固定在CM5传感芯片上（表面密度约350 RU）；2）将MI-773在运行缓冲液（PBS + 0.05% Tween 20，pH7.4）中系列稀释（0.1 nM至10 nM），以30 μL/min流速注入芯片，持续180秒（结合相），随后注入缓冲液持续300秒（解离相）；3）MI-773后注入p53肽（15-29位氨基酸，1 μM）以检测竞争性结合；4）传感图用1:1朗缪尔模型拟合计算Ki，通过参考流通池扣除非特异性结合。[1] - MDM2-p53相互作用HTRF实验（文献[1]）：1）反应混合物含生物素化p53肽（50 nM）、铕标记抗MDM2抗体（20 nM）、链霉亲和素-别藻蓝蛋白（10 nM）和MI-773（0.1 nM至50 nM），溶于实验缓冲液；2）25°C孵育60分钟；3）测定荧光共振能量转移（FRET）信号（激发340 nm，发射665 nm/620 nm）；4）抑制MDM2-p53结合的IC50=1.2 nM。[1] |
| 细胞实验 |
在基于水溶性四唑的测定中，评估细胞生长抑制活性。台盼蓝染色用于测量细胞死亡，用膜联蛋白 V-FLUOS 染色的试剂盒可确定细胞凋亡。
MTT抗增殖实验（文献[1]）：1）癌细胞（SJSA-1、HCT116、A549）以3×10³细胞/孔接种于96孔板，过夜培养（37°C，5% CO₂）；2）MI-773稀释至0.01 nM至10,000 nM（每个浓度3复孔）加入孔中；3）72小时后，加入10 μL MTT（5 mg/mL），孵育4小时；加入DMSO溶解甲瓒；4）测定570 nm处吸光度；细胞活力=（处理组/对照组吸光度）×100%；通过GraphPad Prism计算IC50。[1] - p53通路蛋白Western blot实验（文献[1]）：1）HCT116细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，用MI-773（10 nM、50 nM、100 nM）处理24小时；2）用RIPA裂解液（含蛋白酶抑制剂）裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度；3）30 μg蛋白进行SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜；4）膜用5%脱脂牛奶封闭，一抗（p53、p21、Bax、β-actin）4°C孵育过夜；5）加入HRP标记二抗，ECL化学发光显影；ImageJ定量灰度值。[1] - 凋亡实验（文献[1]）：1）SJSA-1细胞（2×10⁵细胞/孔，6孔板）用20 nM MI-773处理48小时；2）收集细胞，冷PBS洗涤，Annexin V-FITC和PI避光染色15分钟；3）流式细胞仪分析凋亡率；用发光试剂盒测定Caspase-3/7活性。[1] - 耐药细胞系建立（文献[2]）：1）MOLM-13细胞在含递增浓度MI-773的培养基中培养（起始20 nM，每7天增加20 nM），持续3个月；2）有限稀释法分离耐药克隆（MOLM-13/R）；3）CCK-8法测定IC50；Sanger测序确认MDM2突变。[2] |
| 动物实验 |
10% PEG400：3% Cremophor：87% PBS，或 2% TPGS：98% PEG200；200 mg/kg；口服
SCID 小鼠，携带 SJSA-1 骨肉瘤（雌性）、急性淋巴细胞白血病 RS4;11（雌性）、LNCaP 前列腺癌（雄性）或 HCT-116 结肠癌（雌性）异种移植模型 SJSA-1/HCT116 皮下异种移植方案（文献[1]）：1）动物准备：雌性 BALB/c 裸鼠（6-8 周龄）适应 1 周（22±2°C，12 小时光照/黑暗）； 2) 肿瘤接种：将 5×10⁶ 个 SJSA-1/HCT116 细胞（悬浮于 Matrigel:PBS = 1:1 的混合溶液中）皮下注射到小鼠右侧腹部；3) 分组和给药：当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为以下几组（每组 n=6）：载体组（5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85% 生理盐水，灌胃，0.2 mL/只，每日一次）；MI-773 组（10/25/50 mg/kg，溶于载体，口服，每日一次）；4) 监测：每 3 天测量一次肿瘤体积（长 × 宽² / 2）和体重；21-28 天后，处死小鼠，取出肿瘤并称重，用 4% 多聚甲醛固定，用于免疫组化染色。 [1] - AML原位异种移植方案（参考文献[2]）：1）动物准备：NOD/SCID小鼠（6-8周龄，雄性）适应环境1周；2）肿瘤接种：将1×10⁶个MOLM-13/MOLM-13/R细胞（悬浮于PBS中）经尾静脉注射；3）分组和给药：接种后7天，小鼠分别接受MI-773（30 mg/kg，灌胃，0.2 mL/只，每日一次）或载体处理；4）监测：每日记录小鼠存活情况；处死小鼠后采集骨髓，通过流式细胞术检测肿瘤浸润情况。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
啮齿动物药代动力学（文献[1]）：1）小鼠口服给药（50 mg/kg）：血浆峰浓度（Cmax）= 1.8 μM，达峰时间（Tmax）= 1 h，半衰期（t1/2）= 4.2 h，口服生物利用度（F）= 48%；2）大鼠口服给药（30 mg/kg）：Cmax = 1.2 μM，Tmax = 1.5 h，t1/2 = 5.1 h，F = 52%；3）组织分布：给药后 2 小时，肝脏（3.2 μM）和肿瘤（2.9 μM）浓度最高（小鼠），血浆：肿瘤浓度比 = 1:1.6。 [1]
- 体外代谢（文献[1]）：MI-773在人肝微粒体中代谢较低（半衰期>4小时），主要由CYP3A4代谢（抑制CYP3A4可降低75%的代谢）；CYP1A2、2C9、2C19或2D6对其代谢不明显。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠亚慢性毒性（文献[1]）：MI-773 50 mg/kg（口服，每日一次，持续28天）：1）体重：无显著下降（与对照组相比，+8% vs. +10%）；2）血清生化：ALT、AST、BUN、Cr均在正常范围内；3）组织病理学：肝脏、肾脏、脾脏或心脏未见炎症/坏死；4）血液学：白细胞计数下降18%（给药后7天恢复正常），红细胞和血小板计数无变化。[1]
- 血浆蛋白结合率（文献[1]）：人血浆结合率 = 95.2 ± 2.3%（超滤法），小鼠血浆结合率 = 94.8 ± 1.9%。 [1] - 耐药性相关毒性（文献[2]）：用 30 mg/kg MI-773 治疗的 MOLM-13/R 异种移植小鼠与亲代 MOLM-13 组相比，未表现出毒性增加（体重变化和血清生化指标相似）。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
SAR405838 已用于研究恶性肿瘤治疗的临床试验。p53-HDM2 相互作用抑制剂 MI-773 是一种口服的螺环吲哚类 HDM2（人双微体 2）拮抗剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，p53-HDM2 蛋白-蛋白相互作用抑制剂 MI-773 与 HDM2 结合，阻止 HDM2 蛋白与肿瘤抑制蛋白 p53 的转录激活结构域结合。通过阻止这种 HDM2-p53 相互作用，抑制了蛋白酶体介导的 p53 酶促降解，并恢复了 p53 的转录活性，这可能导致 p53 信号传导的恢复，并最终导致 p53 介导的肿瘤细胞凋亡。HDM2 是一种锌指蛋白，也是 p53 通路的负调控因子，在癌细胞中经常过表达。它与癌细胞增殖和存活有关。
优化背景（文献[1]）：MI-773 (SAR-405838) 是一种优化的 MDM2-p53 抑制剂，源自早期类似物（例如 MI-219），具有更高的口服生物利用度（48% vs. MI-219 的 25%）和更低的代谢（t1/2 4.2 小时 vs. MI-219 的 2.1 小时），从而可以每日一次口服给药。[1] - 作用机制（文献[1]）：MI-773 与 MDM2 的 p53 结合口袋结合，阻止 MDM2 介导的 p53 泛素化和降解。稳定的p53易位至细胞核，激活细胞周期阻滞基因（p21）和凋亡基因（Bax、Caspase-3）的转录，从而抑制或消退肿瘤生长。[1] - 耐药机制（文献[2]）：急性髓系白血病（AML）对MI-773的获得性耐药主要由MDM2错义突变（例如C462Y）驱动，这些突变降低了MI-773与MDM2的结合亲和力（Ki值从0.8 nM增加到92 nM）。[2] - 临床应用潜力（文献[1]）：MI-773因其高效、良好的口服生物利用度和低毒性，是p53野生型癌症（例如骨肉瘤、结肠癌、AML）的一种有前景的候选药物；它已进入晚期实体瘤的I期临床试验（尚未报告FDA批准状态）。 [1] |
| 分子式 |
C29H34CL2FN3O3
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|---|---|
| 分子量 |
562.50
|
| 精确质量 |
561.196
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| 元素分析 |
C, 61.92; H, 6.09; Cl, 12.60; F, 3.38; N, 7.47; O, 8.53
|
| CAS号 |
1303607-60-4
|
| 相关CAS号 |
SAR405838-d10
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| PubChem CID |
53476877
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
732.1±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
396.6±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.627
|
| LogP |
5.79
|
| tPSA |
90.46
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
895
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
O=C([C@H](N[C@H]1CC(C)(C)C)[C@H](C2=CC=CC(Cl)=C2F)[C@@]31C(NC4=C3C=CC(Cl)=C4)=O)N[C@@H]5CC[C@@H](O)CC5
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| InChi Key |
IDKAKZRYYDCJDU-AEPXTFJPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H34Cl2FN3O3/c1-28(2,3)14-22-29(19-12-7-15(30)13-21(19)34-27(29)38)23(18-5-4-6-20(31)24(18)32)25(35-22)26(37)33-16-8-10-17(36)11-9-16/h4-7,12-13,16-17,22-23,25,35-36H,8-11,14H2,1-3H3,(H,33,37)(H,34,38)/t16?,17?,22-,23-,25+,29+/m0/s1
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| 化学名 |
(2'R,3R,3'S,5'S)-6-chloro-3'-(3-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,2-dimethylpropyl)-N-(4-hydroxycyclohexyl)-2-oxospiro[1H-indole-3,4'-pyrrolidine]-2'-carboxamide
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| 别名 |
MI773; MI-773; MI 773; MI 77301; MI77301; MI-77301; SAR-405838; SAR 405838; SAR405838
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (4.44 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7778 mL | 8.8889 mL | 17.7778 mL | |
| 5 mM | 0.3556 mL | 1.7778 mL | 3.5556 mL | |
| 10 mM | 0.1778 mL | 0.8889 mL | 1.7778 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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PROTAC LZK-IN-1
Seldegamadlin (KT-253)
MD-265
p53 Activator 13
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