| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Bax; Bak
MSN-125 targets Bax and Bak, two pro-apoptotic members of the Bcl-2 family that are essential for the intrinsic apoptosis pathway. Upon activation by apoptotic stimuli, Bax and Bak undergo a conformational change, oligomerize, and insert into the mitochondrial outer membrane, leading to MOMP, the release of cytochrome c, and activation of the caspase cascade. MSN-125 is a specific and potent inhibitor of Bax and Bak oligomerization. By inhibiting this oligomerization, MSN-125 prevents MOMP, thereby blocking the intrinsic apoptosis pathway. This mechanism of action underlies its neuroprotective effects and its ability to prevent cell death. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MSN-125 以协同的方式抑制 tBid/Bax 介导的线粒体外膜通透性 (MOMP)[1]。MSN-50、MSN-125 和 DAN004 均能抑制 Bax 和 Bak 介导的 MOMP。MSN-125 和 MSN-50 能抑制细胞凋亡。MSN-125 能保护原代神经元免受谷氨酸兴奋性毒性损伤。MSN-125 能抑制 Bax 在特定二聚体界面处的寡聚化[1]。体外实验表明，MSN-125 是 Bax 和 Bak 寡聚化的强效抑制剂，其 IC50 值为 4 μM，可有效抑制 MOMP。它能强效抑制 HCT-116 细胞、BMK 细胞和原代皮层神经元中 Bax/Bak 介导的细胞凋亡。其活性通常通过评估细胞活力、凋亡和 MOMP 的细胞实验进行测定。这些体外研究证实了 MSN-125 作为 Bax 和 Bak 寡聚化抑制剂的作用机制及其神经保护作用。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，MSN-125 具有神经保护作用。它通过抑制 Bax 和 Bak 的寡聚化并阻止线粒体外膜通透性 (MOMP) 的改变，阻断了内源性细胞凋亡通路，而该通路是神经退行性疾病中细胞死亡的关键机制。这提示 MSN-125 在中风、创伤性脑损伤和神经退行性疾病模型中具有潜在的体内应用价值。然而，标准产品说明书中并未详细说明具体的体内实验方案和结果。MSN-125 是一种用于研究细胞凋亡和神经保护作用的研究化合物。
|
| 酶活实验 |
小分子Bax抑制剂筛选[1]
我们筛选了一系列苯并呋喃类黄酮衍生物和几种四氢喹啉生物碱衍生物，以检测它们在模拟线粒体外膜通透性（MOMP）的脂质体通透性实验中对tBid/Bax介导的染料释放的抑制作用。在第一轮筛选中，我们将86种化合物分别加入脂质体中，然后加入纯化的Bax和tBid以诱导脂质体通透性。我们将Z评分>2的脂质体通透性抑制小分子进行人工复测。最终，我们选取了其中两种最佳化合物，用于第二轮筛选。 体外实验检测了MSN-125对Bax和Bak寡聚化的抑制作用及其对MOMP的影响。可通过交联实验、免疫共沉淀或荧光共振能量转移 (FRET) 来评估 Bax 和 Bak 的寡聚化。可通过测量线粒体释放细胞色素 c 或使用线粒体膜电位敏感染料来评估线粒体外膜通透性 (MOMP)。这些实验证实了该化合物作为 Bax 和 Bak 寡聚化抑制剂的作用机制。 |
| 细胞实验 |
重铺板后的长期存活率[1]
对于 MSN-125 和 MSN-50 实验，将未指明性别的雄性 HCT-116 细胞（Wang 和 Youle，2012）以及 BMK 细胞（Mathew 等，2008）以 3000 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中。对于 DAN004 实验，将 BMK 细胞以 750 个细胞/孔的密度接种于 384 孔板中。细胞接种于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中，贴壁后，用指定浓度的抑制剂处理细胞 3-4 小时，随后加入放线菌素 D (ActD) 或星形孢菌素 (STS) 再处理 4 小时。将含有 ActD/STS（+化合物）的培养基替换为不含药物的培养基（含抑制剂），细胞培养 4 天（DMSO 对照组培养至汇合），然后分别接种到 24 孔板或 96 孔板中，用于 MSN 和 DAN004 抑制剂组。让存活的细胞继续生长，直至同一孔板上的 DMSO 对照组细胞达到汇合，然后用结晶紫染色。使用平板扫描仪获取孔板图像。对于 96 孔板，通过 600 nm 波长处的吸光度测量来定量存活细胞，如前所述（Brahmbhatt 等，2016）。 免疫荧光[1] HCT-116 细胞用 10 μM MSN-125 预处理 3 小时，然后加入放线菌素 D（终浓度 50 ng/ml）处理 24 小时。细胞用多聚甲醛固定，并通过免疫荧光双重染色进行分析，一抗为绵羊抗细胞色素c单克隆抗体和鼠抗Bax 6A7单克隆抗体。二抗为驴抗绵羊Alexa Fluor 488和山羊抗鼠Alexa Fluor 555抗体，用于显微镜观察。HCT-116细胞核根据制造商说明用DAPI染色。细胞成像使用蔡司LSM710共聚焦显微镜和配套软件。 体外细胞实验用于研究MSN-125对细胞凋亡和细胞存活的影响。细胞（例如HCT-116细胞、BMK细胞、原代皮层神经元）在有或无MSN-125的情况下用凋亡刺激物处理。细胞活力使用MTT或CellTiter-Glo等方法进行评估。细胞凋亡可通过Annexin V染色或caspase-3/7激活试验进行检测。线粒体外膜通透性（MOMP）可通过检测线粒体释放的细胞色素c或使用线粒体膜电位敏感染料进行评估。这些检测方法证实了该化合物的抗凋亡活性。 |
| 动物实验 |
所有动物实验均按照当地动物护理标准进行，并经Sunnybrook研究所动物护理委员会批准。为建立混合性别的原代神经元培养，我们解剖了雄性和雌性小鼠胚胎（胚胎第14.5-15天）的大脑皮层，并进行长达10天的培养，以确保神经元成熟（如Mergenthaler等人，2012所述）。来自同一胚胎的神经元被视为一个独立的“n”。最多使用同一窝的3个胚胎。简而言之，神经元在添加了B-27（Life Technologies）、0.5 mM L-谷氨酰胺和25 μM谷氨酸的Neurobasal-A培养基（Life Technologies）中培养。在培养的第6天，部分更换为添加了B-27和L-谷氨酰胺的Neurobasal-A培养基。在第9天，用PBS洗涤培养物后，将神经元置于BSS0缓冲液（116 mM NaCl、5.4 mM KCl、0.8 mM MgSO4、1 mM NaH2PO4、26.2 mM NaHCO3、10 μM甘氨酸、1.8 mM CaCl2、10 mM HEPES，pH 7.4）中，分别用25 μM或100 μM谷氨酸处理30分钟（37°C，5% CO2）。孵育结束后，将培养基合并，加入到含有或不含5 μM MSN-125的培养物中。在谷氨酸处理后20-24小时，通过测量乳酸脱氢酶的释放来分析细胞死亡情况，方法如前所述（Mergenthaler等，2012）。简而言之，培养基中乳酸脱氢酶的浓度是通过在 Tecan M1000 微孔板读数仪上，于 37°C 下，通过偶联分光光度法测定 NADH 向 NAD+ 的转化率（340 nm 处的吸光度）来分析的，并经体积校正后以总乳酸脱氢酶水平进行标准化。每次测定时，将 200 μl 含有 210 μM β-NADH、pH 7.4 的 LDH 缓冲液（33 mM KH2PO4，66 mM K2HPO4）加入到 96 孔板中的 50 μl 培养基上清液中。在开始测定前，立即加入 25 μl 含有 22.7 mM 丙酮酸钠的 LDH 缓冲液。将神经元培养物与 0.5% TritonX-100 在 37°C 下孵育 30 分钟后，测定总乳酸脱氢酶的释放量。所有测量结果均以含有 500 单位/升 L-乳酸脱氢酶（Sigma）的对照反应进行标准化。统计分析使用 Prism 5.0 或 SPSS 23（IBM）进行。正态性检验后进行方差分析。[1]
现有文献中对 MSN-125 的体内动物实验描述不多。作为一种研究化合物，其体内应用取决于具体的研究问题。研究 MSN-125 这类神经保护化合物的典型方案是将其应用于中风、创伤性脑损伤或神经退行性疾病的动物模型。评估该化合物减少神经元细胞死亡和改善功能预后的能力。然而，目前尚无针对 MSN-125 的具体方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
MSN-125 的分子量为 688.61 g/mol，分子式为 C36H38BrN3O6，CAS 编号为 1592908-16-1。它是一种固体化合物，纯度为 98.64%。建议将粉末存放于阴凉干燥处。其吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 等药代动力学性质尚未得到充分研究。作为研究化合物，以干粉形式妥善储存可保持其稳定性。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
标准产品说明书中未提供MSN-125的详细毒性数据。作为一种研究化合物，其毒性特征尚未得到充分表征。MSN-125是Bax和Bak寡聚化的抑制剂，其毒性可能与其对正常组织细胞凋亡通路的影响有关。然而，目前尚未有全面的毒理学研究报道。与所有研究用化学品一样，处理MSN-125时应遵循标准的实验室安全预防措施。其用途仅限于研究应用，不得用于人类或兽医用途。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
异常细胞凋亡可导致急性或慢性退行性疾病。Bcl-2家族蛋白Bax/Bak寡聚化触发的线粒体外膜通透性（MOMP）是导致细胞凋亡的不可逆步骤。本文描述了我们发现的能够阻止MOMP发生的Bax/Bak寡聚化小分子抑制剂。我们证实，这些分子可以破坏Bax二聚体界面之间的多种（但并非全部）相互作用，从而干扰MOM中高级寡聚体的形成，而不影响Bax向MOM的募集。Bax/Bak寡聚化小分子抑制剂能够使细胞逃避凋亡刺激，并在兴奋性毒性损伤后挽救神经元，表明Bax寡聚化对MOMP至关重要。我们发现的小分子Bax/Bak抑制剂为研究线粒体外膜通透性（MOMP）的机制提供了新的工具，并最终将促进Bax/Bak抑制剂在治疗急慢性退行性疾病中的应用。[1]
Nie等人报道了五种新的化合物（分子量（MW）范围为206至689），这些化合物能够抑制Bax的成孔活性。这些化合物是从87种对Mcl-1具有结合亲和力的化合物中筛选出来的。Mcl-1是Bcl-2蛋白家族中的抗凋亡成员，与Bax共享一个Bcl-2同源（BH）结构域。这些化合物分别命名为BJ-1、BJ-1-BP、MSN-50、MSN-125和DAN004。最初，研究人员使用脂质体染料释放试验筛选这些化合物，以确定它们抑制Bax介导的膜通透性的能力。脂质体染料释放试验的IC50值分别为9、6、6、4和0.7 µM。体外线粒体分离实验表明，MSN-50、MSN-125和DAN004能有效抑制Bax诱导的线粒体外膜通透性（MOMP）。由于这些抑制剂不仅能抑制Bax功能正常细胞中的MOMP，也能抑制Bax−/−bak+/+细胞中的MOMP，因此作者认为这些抑制剂是Bax/Bak双重抑制剂。MSN-50（5 µM）和MSN-125（10 µM）能抑制BMK（小鼠肾）细胞中放线菌素D和STS诱导的细胞凋亡。然而，这些化合物在培养基中浓度达到20 µM及以上时具有细胞毒性。在培养的小鼠原代胚胎皮层神经元中，诱导谷氨酸兴奋性毒性（25或100 mM谷氨酸，持续30分钟）后立即添加MSN-125（5 µM）也能有效减少细胞死亡。作者认为这些新型小分子可能在许多应用中发挥作用，但由于其保护原代培养神经元的能力，其在预防创伤性脑损伤方面的应用尤为突出。作者还讨论了Bax和Bak的非预期脱靶效应及其未知机制的相关问题，这些问题仍未得到解决[Exp Biol Med (Maywood). 2019;244(8):621-629.]。MSN-125是一种研究化合物，尚未获准用于任何临床或治疗用途。它是内源性凋亡途径的特异性强效抑制剂。MSN-125是一种强效的Bax和Bak寡聚化抑制剂，其IC50值为4 μM，可抑制线粒体外膜通透性（MOMP）。 MSN-125能有效抑制HCT-116细胞、BMK细胞和原代皮层神经元中Bax/Bak介导的细胞凋亡。MSN-125是研究细胞凋亡和神经保护的重要工具。其作用机制在于抑制Bax和Bak寡聚化，从而阻断内在的细胞凋亡途径。 |
| 分子式 |
C36H38BRN3O6
|
|---|---|
| 分子量 |
688.607429027557
|
| 精确质量 |
687.194
|
| 元素分析 |
C, 62.79; H, 5.56; Br, 11.60; N, 6.10; O, 13.94
|
| CAS号 |
1592908-16-1
|
| 相关CAS号 |
1592908-16-1;
|
| PubChem CID |
146014431
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
5.1
|
| tPSA |
112
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
15
|
| 重原子数目 |
46
|
| 分子复杂度/Complexity |
923
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
COCCOCOC1=CC2=C(C=C1)[C@@H]([C@H](O2)CN)N(CC3=CC=C(C=C3)Br)C(=O)[C@H](CC4=CC=CC=C4)NC(=O)C5=CC=CC=C5
|
| InChi Key |
NUPXNNVRTSEHSR-IGOOQNSHSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C36H38BrN3O6/c1-43-18-19-44-24-45-29-16-17-30-32(21-29)46-33(22-38)34(30)40(23-26-12-14-28(37)15-13-26)36(42)31(20-25-8-4-2-5-9-25)39-35(41)27-10-6-3-7-11-27/h2-17,21,31,33-34H,18-20,22-24,38H2,1H3,(H,39,41)/t31-,33+,34-/m0/s1
|
| 化学名 |
N-{1(S)-[[2(R)-Aminomethyl-6-(2-methoxy-ethoxymethoxy)-2,3-dihydro-benzofuran-3(S)-yl]-(4-bromo-benzyl)-carbamoyl]-2-phenyl-ethyl}-benzamide InChi Key
|
| 别名 |
MSN-125; MSN 125; MSN-125; 1592908-16-1; CHEMBL5271207; N-((S)-1-(((2R,3S)-2-(Aminomethyl)-6-((2-methoxyethoxy)methoxy)-2,3-dihydrobenzofuran-3-yl)(4-bromobenzyl)amino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)benzamide; N-[(2S)-1-[[(2R,3S)-2-(aminomethyl)-6-(2-methoxyethoxymethoxy)-2,3-dihydro-1-benzofuran-3-yl]-[(4-bromophenyl)methyl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]benzamide; BDBM50610530; MSN125.
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~200 mg/mL (~290.44 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 4.5 mg/mL (6.53 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 45.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 4.5 mg/mL (6.53 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 45.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 4.5 mg/mL (6.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4522 mL | 7.2610 mL | 14.5220 mL | |
| 5 mM | 0.2904 mL | 1.4522 mL | 2.9044 mL | |
| 10 mM | 0.1452 mL | 0.7261 mL | 1.4522 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
