| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bax; Bak
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| 体外研究 (In Vitro) |
MSN-125 浓度以协调的方式抑制 tBid/Bax 介导的 MOMP[1]。
MSN-50、MSN-125和DAN004抑制Bax和Bak介导的MOMP。MSN-125和MSN-50抑制细胞凋亡。MSN-125保护原代神经元免受谷氨酸兴奋毒性。MSN-125在特定二聚体界面抑制Bax寡聚[1]。
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| 酶活实验 |
小分子Bax抑制剂筛选[1]
在模拟MOMP的脂质体渗透试验中，筛选了一系列苯并呋喃基黄酮类化合物和几种四氢喹啉生物碱类化合物，以抑制tBid/Bax介导的染料释放。在第一轮中，将86种化合物单独加入脂质体中，然后加入纯化的Bax和tBid以诱导脂质体的通透性。手动重新测定aZ评分>2的抑制脂质体通透性的小分子。前两种化合物用于选择第二轮筛选的其他化合物。 |
| 细胞实验 |
再植后的长期生存率[1]
对于MSN-125和MSN-50雄性HCT-116（Wang和Youle，2012）和未指定性别的BMK细胞（Mathew等人，2008）的实验，在96孔板中以3000个细胞/孔的细胞密度接种。对于DAN004实验，BMK细胞以750个细胞/孔的速度接种在384孔板上。将细胞接种在含有10%FBS的DMEM中，粘附后，用指定浓度的抑制剂处理细胞3-4小时，然后再加入放线菌素D（ActD）或星孢菌素（STS）4小时。然后将含有ActD/STS（+化合物）的培养基替换为不含药物的培养基（含有抑制剂），细胞生长4天（达到DMSO对照的融合状态），并分别重新接种到MSN和DAN004抑制剂的24孔或96孔板中。让存活的细胞生长，直到同一平板上的DMSO对照刚好达到融合，然后用结晶紫对平板进行染色。使用平板扫描仪获得板的图像。对于96孔板，如前所述，通过在600nm下的吸光度测量对存活细胞进行定量（Brahmbhatt等人，2016） 免疫荧光[1] HCT-116细胞用10μM MSN-125预处理3小时，然后加入放线菌素D（终浓度为50 ng/ml）24小时。使用多聚甲醛固定细胞，并通过用原代绵羊抗细胞色素c抗体和小鼠抗Bax 6A7单克隆抗体双重染色进行免疫荧光分析。使用二次驴抗羊Alexa Fluor 488和山羊抗小鼠Alexa Fluor 555抗体进行显微镜观察。根据制造商的说明，用DAPI对HCT-116细胞的细胞核进行染色。使用蔡司LSM710共聚焦显微镜和相关软件对细胞进行成像。 |
| 动物实验 |
所有动物实验均按照当地动物护理标准进行，并经Sunnybrook研究所动物护理委员会批准。为建立混合性别的原代神经元培养，我们解剖了雄性和雌性小鼠胚胎（胚胎第14.5-15天）的大脑皮层，并进行长达10天的培养，以确保神经元成熟（如Mergenthaler等人，2012所述）。来自同一胚胎的神经元被视为一个独立的“n”。最多使用同一窝的3个胚胎。简而言之，神经元在添加了B-27（Life Technologies）、0.5 mM L-谷氨酰胺和25 μM谷氨酸的Neurobasal-A培养基（Life Technologies）中培养。在培养的第6天，部分更换为添加了B-27和L-谷氨酰胺的Neurobasal-A培养基。在第9天，用PBS洗涤培养物后，将神经元置于BSS0缓冲液（116 mM NaCl、5.4 mM KCl、0.8 mM MgSO4、1 mM NaH2PO4、26.2 mM NaHCO3、10 μM甘氨酸、1.8 mM CaCl2、10 mM HEPES，pH 7.4）中，分别用25 μM或100 μM谷氨酸处理30分钟（37°C，5% CO2）。孵育结束后，将培养基合并，加入到含有或不含5 μM MSN-125的培养物中。在谷氨酸处理后20-24小时，通过测量乳酸脱氢酶的释放来分析细胞死亡情况，方法如前所述（Mergenthaler等，2012）。简而言之，培养基中乳酸脱氢酶的浓度是通过在 Tecan M1000 微孔板读数仪上，于 37°C 下，通过偶联分光光度法测定 NADH 向 NAD+ 的转化率（340 nm 处的吸光度）来分析的，并经体积校正后以总乳酸脱氢酶水平进行标准化。每次测定时，将 200 μl 含有 210 μM β-NADH、pH 7.4 的 LDH 缓冲液（33 mM KH2PO4，66 mM K2HPO4）加入到 96 孔板中的 50 μl 培养基上清液中。在开始测定前，立即加入 25 μl 含有 22.7 mM 丙酮酸钠的 LDH 缓冲液。将神经元培养物与 0.5% TritonX-100 在 37°C 下孵育 30 分钟后，测定总乳酸脱氢酶的释放量。所有测量结果均以含有 500 单位/升 L-乳酸脱氢酶（Sigma）的对照反应进行标准化。统计分析使用 Prism 5.0 或 SPSS 23（IBM）进行。正态性检验后进行方差分析。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
异常细胞凋亡可导致急性或慢性退行性疾病。Bcl-2家族蛋白Bax/Bak寡聚化触发的线粒体外膜通透性（MOMP）是导致细胞凋亡的不可逆步骤。本文描述了我们发现的能够阻止MOMP发生的Bax/Bak寡聚化小分子抑制剂。我们证实，这些分子能够破坏Bax二聚体界面间的多种相互作用（但并非全部），从而干扰MOM中高级寡聚体的形成，但并不影响Bax向MOM的募集。小分子抑制剂Bax/Bak寡聚化能够使细胞逃避凋亡刺激，并挽救兴奋性毒性损伤后的神经元，表明Bax寡聚化对于MOMP至关重要。我们发现的小分子Bax/Bak抑制剂为研究导致线粒体外膜通透性（MOMP）的机制提供了新的工具，并最终将促进开发用于治疗急性和慢性退行性疾病的Bax/Bak抑制剂。[1]
Nie等人报道了五种新的化合物（分子量（MW）范围为206-689），它们能够抑制Bax的成孔活性。这些化合物是从87种与Mcl-1具有结合亲和力的化合物中筛选出来的。Mcl-1是Bcl-2蛋白家族中的一种抗凋亡成员，与Bax共享Bcl-2同源（BH）结构域。这些化合物的名称分别为BJ-1、BJ-1-BP、MSN-50、MSN-125和DAN004。最初通过脂质体染料释放试验筛选这些化合物，以确定它们是否能够抑制Bax介导的膜通透性。脂质体染料释放试验的IC50值分别为9、6、6、4和0.7 µM。体外分离线粒体实验表明，MSN-50、MSN-125和DAN004能够有效抑制Bax诱导的线粒体外膜通透性（MOMP）。由于这些抑制剂不仅能抑制Bax功能正常的细胞，还能抑制bax−/−bak+/+细胞的MOMP，因此作者认为这些抑制剂是Bax/Bak双重抑制剂。MSN-50（5 µM）和MSN-125（10 µM）能够抑制放线菌素D和星形孢菌素（STS）诱导的BMK（小鼠肾）细胞凋亡。然而，这些化合物在培养基中浓度达到20 µM及以上时具有细胞毒性。在培养的原代小鼠胚胎脑皮层神经元中，如果在诱导谷氨酸兴奋性毒性（25或100 mM谷氨酸，持续30分钟）后立即添加MSN-125（5 µM），也能有效减少细胞死亡。作者认为这些新型小分子可能在许多应用中发挥作用，但由于这些化学物质能够保护原代培养神经元，因此重点强调了其在预防创伤性脑损伤方面的应用。作者还讨论了Bax和Bak的意外脱靶效应以及其未知机制的相关问题，这些问题仍然存在[Exp Biol Med (Maywood). 2019;244(8):621-629.]。 |
| 分子式 |
C36H38BRN3O6
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|---|---|
| 分子量 |
688.607429027557
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| 精确质量 |
687.194
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| 元素分析 |
C, 62.79; H, 5.56; Br, 11.60; N, 6.10; O, 13.94
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| CAS号 |
1592908-16-1
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| 相关CAS号 |
1592908-16-1;
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| PubChem CID |
146014431
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
5.1
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| tPSA |
112
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
15
|
| 重原子数目 |
46
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| 分子复杂度/Complexity |
923
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
COCCOCOC1=CC2=C(C=C1)[C@@H]([C@H](O2)CN)N(CC3=CC=C(C=C3)Br)C(=O)[C@H](CC4=CC=CC=C4)NC(=O)C5=CC=CC=C5
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| InChi Key |
NUPXNNVRTSEHSR-IGOOQNSHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C36H38BrN3O6/c1-43-18-19-44-24-45-29-16-17-30-32(21-29)46-33(22-38)34(30)40(23-26-12-14-28(37)15-13-26)36(42)31(20-25-8-4-2-5-9-25)39-35(41)27-10-6-3-7-11-27/h2-17,21,31,33-34H,18-20,22-24,38H2,1H3,(H,39,41)/t31-,33+,34-/m0/s1
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| 化学名 |
N-{1(S)-[[2(R)-Aminomethyl-6-(2-methoxy-ethoxymethoxy)-2,3-dihydro-benzofuran-3(S)-yl]-(4-bromo-benzyl)-carbamoyl]-2-phenyl-ethyl}-benzamide InChi Key
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| 别名 |
MSN-125; MSN 125; MSN-125; 1592908-16-1; CHEMBL5271207; N-((S)-1-(((2R,3S)-2-(Aminomethyl)-6-((2-methoxyethoxy)methoxy)-2,3-dihydrobenzofuran-3-yl)(4-bromobenzyl)amino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)benzamide; N-[(2S)-1-[[(2R,3S)-2-(aminomethyl)-6-(2-methoxyethoxymethoxy)-2,3-dihydro-1-benzofuran-3-yl]-[(4-bromophenyl)methyl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]benzamide; BDBM50610530; MSN125.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~200 mg/mL (~290.44 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 4.5 mg/mL (6.53 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 45.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 4.5 mg/mL (6.53 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 45.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 4.5 mg/mL (6.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4522 mL | 7.2610 mL | 14.5220 mL | |
| 5 mM | 0.2904 mL | 1.4522 mL | 2.9044 mL | |
| 10 mM | 0.1452 mL | 0.7261 mL | 1.4522 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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