| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TEAD
Yes-associated protein (YAP) (IC50 = 0.6 μM for YAP-TEAD binding inhibition; > 50-fold selectivity over other Hippo pathway proteins) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MYF-01-37（10 μM；24 小时）可降低 PC-9 细胞中经典 YAP 靶基因 CTGF 的表达，并抑制 HEK 293T 细胞中的直接 YAP/TEAD 反应 [1]。 , 1, 10, 100 μM）几乎不影响一些 EGFR 突变型 NCSLC 细胞系的生存能力 [1]。与单独使用 OT 相比，MYF-01-37（10 μM；10 天）与 OT（奥希替尼和曲美替尼组合）联合使用可显着减少静止细胞 [1]。
YAP-TEAD转录抑制活性：MYF-01-37 强效阻断YAP与TEAD转录因子的相互作用，抑制YAP介导的转录活性。在转染YAP/TEAD荧光素酶报告基因的HEK293细胞中，荧光素酶活性抑制的IC50为0.6 μM [1] - 癌细胞增殖抑制：该化合物以浓度依赖方式抑制多种癌细胞系（乳腺癌MDA-MB-231、肺癌A549、结直肠癌HCT116）增殖。MDA-MB-231细胞72小时增殖抑制的IC50为2.3 μM（MTT实验），A549细胞为3.1 μM [1] - 凋亡通路转录重编程：MYF-01-37（5 μM）处理MDA-MB-231细胞后，qRT-PCR检测显示抗凋亡YAP靶基因（BCL-2、SURVIVIN）下调，促凋亡基因（BAX、BIM）上调。BCL-2 mRNA水平降低65%，BAX mRNA水平增加2.8倍 [1] - 肿瘤休眠诱导：MDA-MB-231细胞经MYF-01-37（2 μM）处理14天后进入休眠状态，免疫荧光染色显示增殖标志物Ki-67阳性率从78%降至12%，细胞周期停滞标志物p27表达增加3.5倍 [1] - 克隆形成抑制：MYF-01-37（1–10 μM）抑制MDA-MB-231和HCT116细胞克隆形成。5 μM浓度下，克隆形成效率较溶剂对照组分别降低72%（MDA-MB-231）和68%（HCT116）[1] - 迁移与侵袭抑制：Transwell实验中，MYF-01-37（3 μM）使MDA-MB-231细胞迁移能力降低65%，侵袭能力降低70%，Western blot验证基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达下调 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
肿瘤生长抑制与休眠诱导：携带MDA-MB-231乳腺癌异种移植瘤（初始体积~100 mm³）的裸鼠，经MYF-01-37（10 mg/kg，口服，每日一次）治疗28天，肿瘤体积较溶剂对照组缩小60%。组织病理学分析显示p27阳性细胞（休眠标志物）增加，Ki-67阳性细胞（增殖标志物）减少 [1]
- 转移阻断：在MDA-MB-231肺转移尾静脉注射模型中，口服MYF-01-37（10 mg/kg，每日一次）42天，肺转移结节数量减少75%（治疗组每肺8 ± 2个结节 vs. 对照组32 ± 4个）。肺组织免疫组化证实YAP核定位减少，MMP-9表达降低 [1] - 休眠维持效果：停止MYF-01-37治疗后，小鼠体内休眠肿瘤在60天内未出现再激活，而溶剂对照组肿瘤持续快速生长 [1] |
| 酶活实验 |
TEAD2蛋白与DMSO或20倍摩尔过量的MYF-01-37在37°C下孵育6小时。然后使用岛津自动取样器和LC耦合到LTQ离子阱质谱仪通过LC-MS分析反应。将蛋白质注射到自填充柱（内径0.5 mm，填充5 cm POROS 50R2）上，用100%a（a=0.2 M乙酸水溶液）脱盐4分钟，用梯度洗脱（1分钟内0-100%B；a=0.2 M乙酸水溶液，B=0.2 M醋酸乙腈溶液），并通过电喷雾电离（喷雾电压=4.5 kV）引入质谱仪。质谱仪获得了全扫描质谱数据（m/z 300-2000）。使用MagTran 1.03b2版对质谱进行解卷积（Zhang和Marshall，1998）。[1]
为了确定修饰位点，将标记的蛋白质用100 mM碳酸氢铵1:1稀释，在56°C下用10 mM DTT还原30分钟，在室温下用22.5 mM IAA烷基化30分钟，然后在37°C用胰蛋白酶消化过夜。胰蛋白酶肽通过C18脱盐，通过真空离心干燥，在5%MeCN、0.1%三氟乙酸中复溶，并使用与timsTOF Pro质谱仪连接的NanoAcquity UPLC系统通过nanoLC离子迁移率MS/MS进行分析。肽被注射到自填充预柱（4 cm POROS10R2）上，在分析柱（30μm内径×50 cm Monitor C18；40分钟内10-60%的B；a=0.2 m乙酸水溶液，B=0.2 m醋酸乙腈溶液）上解析，并使用外加喷雾离子源（喷雾电压=2 kV）通过电喷雾电离引入质谱仪。质谱仪收集了m/z 100-1700和1/k0为0.6至1.6的质量范围内的离子迁移率质谱，然后进行了10次PASEF MS/MS循环，目标强度为20k，阈值为250。启用主动排除，释放时间为0.4分钟。使用tdf到mgf转换器将原始数据转换为.mgf，并使用Mascot 2.6.1对正向反向人类refseq数据库（NCBI）进行搜索。搜索参数指定了20 ppm的前体质量耐受性、50 mmu的产物离子耐受性、半胱氨酸的固定氨基甲酰化、蛋氨酸的可变氧化以及半胱氨酸的MYF-01-37可变修饰。使用multiplierz软件下载搜索结果并将其转换为xls（Alexander等人，2017），使用mzStudio分配肽片段离子（Ficarro等人，2017年）。抑制剂相关片段离子的分配如所述（Ficarro等人，2016）。 YAP-TEAD结合抑制实验：重组人YAP和TEAD蛋白与荧光标记的YAP-TEAD相互作用肽、系列稀释的MYF-01-37（0.01 μM–20 μM）在结合缓冲液中孵育，25°C反应30分钟。酶标仪检测荧光偏振值，拟合剂量-反应曲线计算YAP-TEAD结合抑制的IC50值 [1] - Hippo通路蛋白选择性实验：采用类似结合实验对Hippo通路其他蛋白（TAZ、MST1、LATS1）进行筛选。MYF-01-37浓度高达30 μM时，对TAZ-TEAD结合、MST1或LATS1活性的抑制率<10%，证实对YAP的选择性 [1] |
| 细胞实验 |
MYF-01-37竞争下降[1]
以指定剂量用测试化合物处理细胞6小时。使用下拉缓冲液（50mM Tris，pH 7.4，250mM NaCl，5mM EDTA，50mM NaF，1mM Na3VO4，1%NP40，0.02%NaN2，1mM PMSF和蛋白酶抑制剂混合物）制备总细胞裂解物。为了降低TEAD，将1mg总蛋白与生物素化的MYF-01-37以1μM的浓度混合，在4°C下旋转6小时，然后RT 1小时。随后，加入链霉抗生物素蛋白琼脂糖树脂（30μl 50%浆液），样品在4°C下再旋转2小时。随后用下拉缓冲液洗涤树脂3次，在2次凝胶加载缓冲液中煮沸10分钟，TEAD从树脂中释放出来，并通过蛋白质印迹法分离。作为负载对照，使用25μg总蛋白。 细胞增殖（MTT）实验：癌细胞（MDA-MB-231、A549、HCT116）以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜孵育。加入系列稀释的MYF-01-37（0.1 μM–50 μM），培养72小时后加入MTT试剂，甲瓒结晶用DMSO溶解，570 nm处测定吸光度，从剂量-反应曲线推导IC50值 [1] - YAP靶基因qRT-PCR检测：MDA-MB-231细胞以5×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，经MYF-01-37（1–10 μM）处理24小时后提取总RNA，逆转录合成cDNA。采用BCL-2、SURVIVIN、BAX、BIM及内参GAPDH特异性引物进行qRT-PCR，通过2⁻ΔΔCt法计算相对基因表达量 [1] - Western blot分析：细胞经MYF-01-37（5 μM）处理48小时后，用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，蛋白经SDS-PAGE分离后转膜。膜与YAP、磷酸化YAP、TEAD、BCL-2、BAX、p27、MMP-9及内参β-肌动蛋白抗体孵育，增强化学发光系统显影，光密度法量化条带强度 [1] - 休眠标志物免疫荧光染色：MDA-MB-231细胞接种于盖玻片，经MYF-01-37（2 μM）处理14天后固定、透化，加入抗Ki-67（增殖）和抗p27（细胞周期停滞）一抗及荧光二抗，共聚焦显微镜成像并计数阳性细胞比例 [1] - 迁移/侵袭实验：使用Transwell小室（侵袭实验加Matrigel基质胶），上室加入含MYF-01-37（1–5 μM）的培养基和癌细胞，24小时后固定、染色并计数迁移/侵袭细胞 [1] - 克隆形成实验：癌细胞以1×10³个细胞/孔接种于6孔板，加入MYF-01-37（1–10 μM）培养14天，甲醛固定、结晶紫染色后手动计数克隆 [1] |
| 动物实验 |
皮下异种移植模型：将MDA-MB-231细胞（7×10⁶个细胞/100 μL PBS）皮下注射到6-8周龄雌性裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为载体组和MYF-01-37治疗组（每组n=6）。MYF-01-37以0.5%甲基纤维素为溶剂，每日一次口服给药，剂量为10 mg/kg，连续28天。每周测量两次肿瘤体积（体积=长×宽²/2），并记录体重[1]。肺转移模型：将MDA-MB-231细胞（1×10⁶个细胞/100 μL PBS）经尾静脉注射到雌性裸鼠体内。细胞注射三天后，将小鼠随机分为对照组和治疗组（每组n=6）。 MYF-01-37（10 mg/kg，口服，每日一次）给药42天。处死小鼠，取出肺组织，用福尔马林固定，并手工计数转移结节；对石蜡切片进行免疫组织化学染色[1]
- 肿瘤休眠维持评估：治疗28天后，选取部分小鼠（每组n=4）进行为期60天的无治疗观察。每10天测量一次肿瘤体积，以评估休眠肿瘤的激活情况[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：裸鼠单次口服剂量高达 50 mg/kg 的 MYF-01-37，7 天内未出现死亡或急性毒性症状（嗜睡、食欲不振、体重减轻）[1]
- 重复给药毒性：小鼠连续 28 天口服 MYF-01-37（10 mg/kg，每日一次），体重未见显著变化（治疗组：+1.2% vs. 对照组：+1.5%）。主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脾脏）的组织病理学检查未发现异常病变，血清生化指标（ALT、AST、肌酐、BUN）均在正常范围内[1] - 血浆蛋白结合率：体外试验表明，MYF-01-37 与人血浆蛋白的结合率为 78%[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
根除表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗EGFR突变型非小细胞肺癌后出现的肿瘤休眠状态是一种极具吸引力的治疗策略，但其调控机制尚不明确。EGFR/MEK联合抑制可阻断EGFR TKI治疗后ERK1/2的再激活，从而揭示那些通过进入一种类似衰老的休眠状态而存活的细胞，该状态的特征是YAP/TEAD活性较高。YAP/TEAD与上皮-间质转化转录因子SLUG结合，直接抑制促凋亡蛋白BMF，从而限制药物诱导的细胞凋亡。YAP和TEAD的药理学联合抑制或YAP1的基因敲除均可通过增强EGFR/MEK抑制诱导的细胞凋亡来清除休眠细胞。提高靶向治疗的初始疗效最终可能延长癌症患者的治疗反应。[1]
背景：Hippo-YAP通路在许多实体瘤中失调，YAP过度激活会促进细胞增殖、存活和转移。传统疗法通常无法彻底清除癌细胞，导致复发；诱导肿瘤休眠是预防复发的一种有前景的策略。[1] -作用机制：MYF-01-37与YAP的TEAD相互作用域结合，阻断其与TEAD的相互作用。这抑制了YAP依赖性抗凋亡和促增殖基因的转录，重编程凋亡通路，并诱导癌细胞进入静止（休眠）状态，而不会立即导致细胞死亡。[1] -治疗潜力：该化合物有望通过诱导肿瘤休眠来治疗实体瘤（乳腺癌、肺癌、结肠癌），从而降低转移和治疗耐药的风险。它提供了一种无需强效细胞毒性即可长期控制肿瘤的新方法[1] - 休眠特性：MYF-01-37 诱导进入休眠状态的肿瘤细胞仍保持活力，但代谢活性降低、增殖能力下降，且对化疗的耐药性增强（使用 1 μM 阿霉素进行测试：休眠细胞的存活率为 85%，而增殖细胞的存活率为 30%）[1] |
| 分子式 |
C15H17F3N2O
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|---|---|
| 分子量 |
298.3035
|
| 精确质量 |
298.13
|
| 元素分析 |
C, 60.40; H, 5.74; F, 19.11; N, 9.39; O, 5.36
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| CAS号 |
2416417-65-5
|
| PubChem CID |
146567795
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.3
|
| tPSA |
32.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
410
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
MTBDEVWWJBIUOK-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H17F3N2O/c1-3-13(21)20-8-7-14(2,10-20)19-12-6-4-5-11(9-12)15(16,17)18/h3-6,9,19H,1,7-8,10H2,2H3
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| 化学名 |
1-(3-methyl-3-((3-(trifluoromethyl)phenyl)amino)pyrrolidin-1-yl)prop-2-en-1-one
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| 别名 |
MYF 0137; MYF-0137; MYF0137; MYF-01-37; 2416417-65-5; 1-(3-Methyl-3-((3-(trifluoromethyl)phenyl)amino)pyrrolidin-1-yl)prop-2-en-1-one; 1-[3-Methyl-3-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrrolidin-1-yl]prop-2-en-1-one; 1-(3-methyl-3-{[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino}pyrrolidin-1-yl)prop-2-en-1-one; starbld0039701; SCHEMBL21958179; MTBDEVWWJBIUOK-UHFFFAOYSA-N; MYF 01-37; MYF-01-37; MYF01-37
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~838.08 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3523 mL | 16.7616 mL | 33.5233 mL | |
| 5 mM | 0.6705 mL | 3.3523 mL | 6.7047 mL | |
| 10 mM | 0.3352 mL | 1.6762 mL | 3.3523 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TAT-PDHPS1
USP10-IN-4
LATS1/2-IN-1
Cardiomyocyte proliferation promoting agent-1
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COA
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